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单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,【新闻链接】,今年,8,月，一则新闻一经播出，震惊全国。,甘肃白银系列杀人案告破,和静高级中学 申盼,课题,1 DNA,的粗提取与鉴定,学习目标,1),通过尝试对植物或动物组织中的DNA进行粗提取，了解DNA的物理化学性质。,2,）概述DNA的粗提取和鉴定的原理。,3）通过对DNA的粗提取实验过程的设计及操作，锻炼科学的思维方法，培养实事求是的科学态度。,学习,重点,：DNA的物理化学性质。,学习,难点,：粗提取的DNA的除杂。,导学案反馈,组别,A+,A-,B,得分,1,3,2,1,分,2,5,1,0,分,3,5,1,2,分,4,5,1,2,分,5,4,1,1,0,分,6,5,1,2,分,7,4,1,2,分,8,6,3,分,9,4,1,2,分,实验思路,1,）,DNA,应,从哪提取？,2,）,怎样将,DNA,与细胞中的其他物质分离？,3,）,怎样鉴定提取物是否为,DNA,？,DNA,的溶解性,当,NaCl,浓度为,0.14mol/L,时，,DNA,的溶解度,最小,，浓度为,2mol/L,时，,DNA,的溶解度,最大,。,利用这一原理，可以使,DNA,在盐溶液中溶解或析出。,DNA,的特性,2mol/L,DNA,不溶于酒精,细胞中某些蛋白质溶于酒精,DNA,不溶于酒精溶液,将,DNA,与蛋白质进一步分离,（提纯）,DNA,的特性,DNA,对酶、高温和洗涤剂的耐受性,蛋白酶,水解蛋白质,对,DNA,没有影响,高 温,大多数蛋白质不能忍受,60,80,的高温,而,DNA,在,80,以上才会变性,洗涤剂,瓦解细胞膜，去除脂质和蛋白质,但对,DNA,没有影响,DNA,的特性,DNA,的鉴定,沸水浴,蓝色反应,DNA,+,二苯胺,DNA,的特性,（一）实验材料的选取,讨论：,什么样的实验材料更适合提取,DNA?,实验设计,洋葱,鸡血,哺乳动物的红细胞,香蕉,DNA,含量相对较高、材料易得,（二）破碎细胞，获取含,DNA,的滤液,讨论：,1,）动物细胞如何破碎,?,其原理是？,2,）破碎植物细胞时，加入洗涤剂和食盐的作用是？,3,）,此步骤获得的滤液可能含有哪些细胞成分？,实验设计,蒸馏水涨破，渗透作用,洗涤剂：瓦解细胞膜,食盐：溶解,DNA,DNA,、蛋白质、多糖、,RNA,等,（三）,去除滤液中的杂质,讨论：,1,）滤液中的杂质主要是？,2,）为什么反复地溶解与析出,DNA,，,能够去除杂质？,3,）方案二与方案三的原理有什么不同,？,实验设计,蛋白质,方案二：蛋白酶分解蛋白质，不分解DNA；,方案三：DNA耐高温而蛋白质不耐高温。,用,高,盐浓度的溶液,溶解DNA,，能除去在高盐中不能溶解的杂质；用,低,盐浓度,使DNA析出,，能除去溶解在低盐溶液中的杂质。因此，通过反复溶解与析出DNA，就能够除去与DNA溶解度不同的多种杂质。,（四）,DNA,的析出与鉴定,思考：,1,）如何从滤液中析出,DNA,？,2,）纯的,DNA,应该是什么颜色？,3,）如何鉴定,DNA,分子？应注意什么？,实验设计,白色丝状物,用二苯胺试剂，沸水浴；做空白对照实验。,利用冷酒精,实验操作,制备鸡血细胞液,加柠檬酸钠，静置或离心,破碎细胞，释放,DNA,加蒸馏水，同方向快速,搅拌,，,过滤,破坏细胞膜、核膜等。,去除杂质,加入,2mol/L NaCl,，同方向缓慢,搅拌,，,过滤,加蒸馏水至,NaCl,浓度为,0.14mol/L,，同方向缓慢,搅,拌,，析出,DNA,，,过滤,将粘稠物溶解到,2mol/L NaCl,溶液中，同方向缓慢,搅拌，过滤,除去细胞质中的大部分杂质。,DNA,析出,与等体积,95,冷酒精混合，同方向缓慢,搅拌，,析出,白色丝状物,除去核蛋白等。,DNA,鉴定,加入,2mol/L NaCl,溶液，,搅拌,。再加入二苯胺，沸水浴,以鸡血为例,实验小结,1,）共有,“,四次过滤，,两,次析出，,六次搅拌,”,2,）加入,“,两,次蒸馏水，,三,次,NaCl,溶液，,一,次酒精,”,实验展示,加入洗涤剂和食盐，充分搅拌、研磨,以,香蕉,为实验材料，提取,DNA,实验展示,香蕉的,DNA,鉴定结果,香蕉,DNA,对照组,实验展示,以,洋葱,为实验材料，提取,DNA,DNA,断裂，,无法形成絮状沉淀,实验展示,香蕉、洋葱的,DNA,鉴定结果对比,香蕉,DNA,洋葱,DNA,对照组,课堂巩固,1.,下列哪项不宜选作,DNA,提取材料的是,(),A.,洋葱表皮细胞,B.,鲜豌豆种子,C.,人的成熟红细胞,D.,猪肝,2.,实验中,NaCl,的物质的量浓度为,2mol/L,和,0.14mol/L,，分别对,DNA,有何影响,?,前者是溶解,DNA,，过滤除去不溶的杂质,后者是使,DNA,析出，过滤除去滤液中的杂质,C,课堂巩固,3.,在,DNA,的粗提取实验过程中，两次向烧杯中加入蒸馏水的作用分别是,(),。,A.,稀释血液，冲洗样品,B.,使血细胞破裂，降低,NaCl,浓度使,DNA,析出,C.,使血细胞破裂，增大,DNA,溶解量,D.,使血细胞破裂，提取含杂质较少的,DNA,B,N,A,H,T,K,欢迎大家提出宝贵的意见和建议,和静高级中学 申盼,
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