肿瘤病理学讲义课件

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,二级,三级,四级,五级,*,肿瘤病理学讲义,*,肿瘤病理学,概论,肿瘤病理学讲义,1,肿瘤病理学概论肿瘤病理学讲义1,第一部分：肿瘤病理学总论,一。肿瘤的定义、命名和分类,二。肿瘤病理学的常用术语,三。肿瘤的组织发生及基本形态特征,四。肿瘤的良、恶性及对机体的影响,五。肿瘤病理的诊断规范及注意事项,六。影响肿瘤患者预后的形态学因素,七。现代技术在肿瘤病理诊断中的应用,肿瘤病理学讲义,2,第一部分：肿瘤病理学总论一。肿瘤的定义、命名和分类肿瘤病理学,一、肿瘤的定义、分类和命名（1）,（一） 肿瘤的定义：,是机体局部组织的细胞在各种内在和外界的致,瘤因素长期作用下，逐渐发生的过度而不协调生长,所形成的异常新生物（,neoplasm,）；,它是由正常细,胞获得了新的生物学遗传特性转化而来，并伴有分,化和调控的异常；其诱发的刺激因素消除后，仍继,续其与机体不相协调的过度生长。,*真性肿瘤（,Tumor):,肿瘤病理学讲义,3,一、肿瘤的定义、分类和命名（1）（一） 肿瘤的定义：,一、肿瘤的定义、分类和命名（2）,（二）肿瘤的分类依据：,（1）生物学特性： 良性肿瘤 交界性肿瘤 恶性肿瘤,（2）组 织 来 源： 癌 肉瘤,（3）功 能： 按淋巴细胞亚群分类：,B,细胞性、,T,细胞性（抑制/辅助）、内分泌性肿瘤,（4）分 化程 度： 分化型、未分化型,肿瘤病理学讲义,4,一、肿瘤的定义、分类和命名（2）（二）肿瘤的分类依据：肿瘤病,一、肿瘤的定义、分类和命名（3）,（三）肿瘤的命名（1）：,*良性肿瘤命名原则：,XX,部位 +,XX,组织 + 瘤,如：背部脂肪瘤，结肠腺瘤,*恶性肿瘤(,Cancer),命名原则：,癌（,Carcinoma):,来源于,上皮组织的恶性肿瘤；,肉瘤 (,Sarcoma),:,来源于间叶组织的恶性肿瘤。,*交界性肿瘤：,如：卵巢交界性乳头状粘液性囊腺瘤,肿瘤病理学讲义,5,一、肿瘤的定义、分类和命名（3）（三）肿瘤的命名（1）：*良,一、肿瘤的定义、分类和命名（4）,（三）肿瘤的命名（2）- 特殊命名：,*以人名命名：,如：,Hodgkin,病;,Kaposi,肉瘤;,Bowen,病,*以细胞形态命名：,如：燕麦细胞癌，印戒细胞癌 等,*以解剖学名称命名：,如：胸腺瘤、松果体瘤、颅咽管瘤,*以分泌激素或功能命名：,胰岛素瘤、胃泌素瘤、,APUD,瘤,*复合性命名：,如：血管脂肪瘤、纤维腺瘤、骨软骨瘤,*以细胞嗜色特性命名：,嗜银细胞癌、嗜铬细胞癌 等,肿瘤病理学讲义,6,一、肿瘤的定义、分类和命名（4）（三）肿瘤的命名（2）-,二、肿瘤病理学常用术语（1）,* 瘤样病变（,Tumor-like lesion):,是一大组与肿瘤相似的增生性病变，其本质,不是真性肿瘤，而是一种组织的畸形。如血管瘤、,错构瘤等。,*有些组织的瘤样病变可转变成真性肿瘤，如色素,性绒毛结节性滑膜炎可变为滑膜肉瘤，,应视为癌前病变处理。,肿瘤病理学讲义,7,二、肿瘤病理学常用术语（1）* 瘤样病变（Tumor-lik,二、肿瘤病理学常用术语（2）,* 错构瘤（,Hamartoma):,为先天发育障碍所致的局部组织生长过多，结构,错乱的一类瘤样病变。基本特征：1）介于畸形与真性肿瘤之间，不同程度兼有两者特征；2）瘤中各种组织虽增生过度，但细胞分化成熟，一般无异常分化表现，只是结构紊乱；3）生长缓慢，到一定程度即停止生长，与机体生长相协调。,*,先天性全身性纤维瘤病、脂肪瘤病、,血管瘤、淋巴管瘤、色素痣等。,肿瘤病理学讲义,8,二、肿瘤病理学常用术语（2）* 错构瘤（Hamartoma),二、肿瘤病理学常用术语（3）,一般指组织细胞的增多，同时常伴有细胞的肥大，但无异形性。它是在某种刺激（如理化、生物的）因子作用下，引起组织与细胞的生理性或病理性变化。一旦刺激因子去除，可恢复到正常状态。,*被覆上皮：上皮组织增厚，细胞增多。,*间叶组织：细胞增多，排列紧密等。,* 增生(,Hyperplasia):,肿瘤病理学讲义,9,二、肿瘤病理学常用术语（3） 一般指组织细胞的,二、肿瘤病理学常用术语（4-1）,* 不典型增生(,Atypical hyperplasia;Dysplasia)：,属于癌前病变。指上皮细胞的异型增生，即增,生的细胞大小、形态、排列等方面均有异于其正常,的成熟细胞，尤以细胞核的异形性最突出。其处于,一种不稳定状态，在某种因素继续作用下可转变为,恶性肿瘤；如去除某些因素，,又可恢复至正常状态。,（一）概念：,肿瘤病理学讲义,10,二、肿瘤病理学常用术语（4-1）* 不典型增生(Atypic,二、,肿瘤病理学常用术语,（4-2）,* 不典型增生（,Atypical hyperplasia;,Dysplasia):,(二）分类：,1）炎性：一般不发生恶性转化，为,DNA,二倍体；,2）瘤性：可发生恶变，是真正的癌前病变，多为,DNA,非整倍体。应密切随访观察。,（三）分级：,I,级：轻度，病变位于上皮全层的下 1/3；,II,级：中度。病变位于上皮全层的 2/3；,III,级：重度。异形上皮细胞几乎累及全层。,肿瘤病理学讲义,11,二、肿瘤病理学常用术语（4-2）* 不典型增生（Atypic,二、肿瘤病理学常用术语（5）,* 原位癌（,Carcinoma in situ):,又称上皮内癌、浸润前癌、本位癌等。重度不,典型增生的上皮细胞已累及上皮全层，但未侵犯基,底膜。其是最早期的癌，是不可逆转的。,*癌细胞核形不规则，核膜增厚，染色质增粗，,核仁突出，核浆比例增大，有丝分裂增多。,*癌细胞,DNA,分析主要为增殖倍体及较多,非整倍体。,肿瘤病理学讲义,12,二、肿瘤病理学常用术语（5） * 原位癌（Carcinoma,二、肿瘤病理学常用术语（6）,* 分化（,Differentiation):,在肿瘤病理学中是指肿瘤细胞与其发生部位的,成熟细胞的相似程度。肿瘤细胞分化越好，与其相,应的起源组织越近似；分化越差，成熟程度越低，,则偏离正常越远；反映在形态学上与相应的起源组,织差异越大，肿瘤的恶性程度越高。,*分化与肿瘤的生长增殖潜能和,恶性程度成反比。,肿瘤病理学讲义,13,二、肿瘤病理学常用术语（6）* 分化（Differentia,二、肿瘤病理学常用术语（7）,* 间变(,Anaplasia):,在肿瘤病理学中指细胞缺乏分化，与其起源的,正常细胞差异很大，表现为显著的异形性、幼稚性,和生长活跃性。间变为一种分化未成熟且同时伴有,异常分化，即间变的肿瘤细胞不仅原始幼稚分化低,，而且在分化过程中偏离常轨，,发生了质的变化。,肿瘤病理学讲义,14,二、肿瘤病理学常用术语（7）* 间变(Anaplasia):,* 隐匿癌：,指原发癌非常小，临床上未能发现，首先发现的是转移性癌。,* 如：甲状腺隐匿性乳头状癌，直径 1,CM，,但,40%病例术前已有颈部淋巴结转移。,二、肿瘤病理学常用术语（8）,肿瘤病理学讲义,15,* 隐匿癌： 指原发癌非常小，临床上未能发现,二、肿瘤病理学常用术语（9）,* 化生（,Metaplasia):,通常指一种组织或细胞，在某些因素作用下，,由一种组织转变为另一种组织。一般认为，组织的,化生通常为器官或组织的保护性反应。,*子宫颈管柱状上皮或腺上皮的鳞状上皮化生；,*支气管假复层纤毛柱状上皮的鳞状上皮化生。,*胃粘膜上皮的肠上皮化生；,肿瘤病理学讲义,16,二、肿瘤病理学常用术语（9）* 化生（Metaplasia),二、肿瘤病理学常用术语（10）,* 早期癌：,指原位癌伴有早期浸润（微灶浸润），可伴有,或不伴有淋巴结转移。,*早期胃癌（,EGC）：,局限于粘膜层或粘膜下层的,胃癌，伴或不伴有转移。,肿瘤病理学讲义,17,二、肿瘤病理学常用术语（10）* 早期癌： 指,二、肿瘤病理学常用术语（11）,* 微小癌(,Micro-cancer)：,指体积很小的癌。各种器官的微小癌的标准不一。,*,肝微小癌：单个癌结节或相邻两个癌结节的直径,之和 &=3,cm，,小 肝 癌：直径 5,cm,两者临床上多无症状，又称亚临床肝癌。,*胃微小癌：直径 0.5,cm,小 胃 癌：直径, 3,LN（+）：5,年生存率,35。8%,肿瘤病理学讲义,60,六。影响肿瘤患者预后的形态学因素（1）（1）淋巴结转移：各种,六。影响肿瘤患者预后的形态学因素（2）,（2）脉管内瘤栓：,与患者预后有关,乳腺癌,（826例）：淋巴管瘤栓（+）： 5年：51%,10年：30%,淋巴管瘤栓（-）： 5年：64%,10年：46.6%,胃 癌,（516例）：淋巴管瘤栓（+）： 5年：10.3%,（-）： 5年：25.6%,血管瘤栓（+）：5年生存率 10%,（-）：5年生存率 20.4%,肿瘤病理学讲义,61,六。影响肿瘤患者预后的形态学因素（2）（2）脉管内瘤栓：与患,六。影响肿瘤患者预后的形态学因素（3）,（3）,肿瘤浸润范围,：,癌瘤浸润范围对患者预后,是十分重要的。,食道癌,（271例）：癌局限于食道内，5年生存率 40。4%,癌穿透肌层， 5年生存率 24。4%,胃 癌,（514例）：癌累及浅肌层，5年生存率 54。2%,癌累及深肌层，5年生存率 29。5%,癌累及浆膜层，5年生存率 17。8%,癌累及浆膜外，5年生存率 10。2%,肿瘤病理学讲义,62,六。影响肿瘤患者预后的形态学因素（3）（3）肿瘤浸润范围：癌,六。影响肿瘤患者预后的形态学因素（4）,（4）,肿瘤的生长方式：,对患者预后有意义，,与肿瘤的浸润生长能力密切相关,团快状生长：,预后好于巢状和弥漫性生长者；,巢 状 生长：,预后介于团快状和弥漫性生长者之间；,弥漫性生长：,预后最差,肿瘤病理学讲义,63,六。影响肿瘤患者预后的形态学因素（4） （4）肿瘤的生长方式,六。影响肿瘤患者预后的形态学因素（5）,（5）肿瘤大小：,对预后有一定意义,食管癌,（524例）：1 - 3,cm: 5,年生存率 27.4%,3.1-5,cm: 5,年生存率 25.8%, 5.1,cm: 5,年生存率 24.6%,胃 癌,（967例）： 2,cm:,各组间5年生存率无差异,肺 癌,（200例）： 5,cm: 5,年生存率 23.2% (,p,0.05),肿瘤病理学讲义,64,六。影响肿瘤患者预后的形态学因素（5）（5）肿瘤大小：对预后,六。影响肿瘤患者预后的形态学因素（6）,（6）肿瘤的间质反应：,反应成分：（1）瘤床的淋巴细胞（,TIL）、,浆细胞反应,（2）瘤床的结缔组织反应（纤维包裹）,意 义：（1）淋巴细胞反应程度与患者预后呈正相关,（2）肿瘤纤维包裹明显者预后好于无明显包,裹者。,肿瘤病理学讲义,65,六。影响肿瘤患者预后的形态学因素（6）（6）肿瘤的间质反应：,六。影响肿瘤患者预后的形态学因素（7）,（7）引流区淋巴结内淋巴组织增生：,窦组织细胞增生（,SH）：,增生程度与预后有一定关系；,胃癌（371例): 5年：,(-):1.7%；(+)：25.9%；(+)：26.3%；,滤泡中心细胞增生（,FH）：,增生程度与预后有一定关系；,胃癌（371例）：5年：(-):10.5%; (+):21.6%; (+):37.5%,副皮质区增生（,PH）：,与预后关系不明确。,肿瘤病理学讲义,66,六。影响肿瘤患者预后的形态学因素（7）（7）引流区淋巴结内淋,七、现代技术在肿瘤病理诊断中的应用,（一）,电镜技术,（,Electronic microscopy),（,二）,免疫组织化学,(,Immunohistochemistry),（,三）,肿瘤细胞动力学及,DNA,分析,(,Cytokinesis and DNA),（,四）,肿瘤的自动化诊断,(,Autodiagnosis),（,五）,核仁组成区技术,(,nucleolar organizer regions),（,六）,原位杂交技术,(,Insitu hybridization),肿瘤病理学讲义,67,七、现代技术在肿瘤病理诊断中的应用 （一）电镜技术 （,七、现代技术在肿瘤病理诊断中的应用（3）,FCM,提供的肿瘤细胞生物学信息：,1。显示,S,期细胞在细胞周期中所占比值，直观反映瘤细,胞的增殖活性,。（,G,0,+G,1,期、,S,期、,G,2,+M,期）,2。可将肿瘤按,DNA,倍体类型分为2倍体和异倍体肿瘤：,2倍体（,Diploid),肿瘤：,所有良性病变均为2倍体,异倍体（,Aneuploid),肿瘤：,提示异常,DNA,干系存在。,大多数实体恶性肿瘤的,DNA,倍体为非整倍,体或多倍体。,*,DNA,倍体类型可反映肿瘤的恶性程度及生物学行为。,肿瘤病理学讲义,68,七、现代技术在肿瘤病理诊断中的应用（3）FCM提供的肿瘤细胞,七、现代技术在肿瘤病理诊断中的应用（1）,（一）电镜技术：主要解决肿瘤的组织学类型及,组织发生等问题。,（1）癌与肉瘤的鉴别：,（2）鳞癌与腺癌的鉴别：,（3）小圆细胞肿瘤：,（4）黑色素瘤：,（5）神经内分泌肿瘤：,（6）软组织肿瘤：,肿瘤病理学讲义,69,七、现代技术在肿瘤病理诊断中的应用（1）（一）电镜技术：主要,七、现代技术在肿瘤病理诊断中的应用（1-1）,（1）癌与肉瘤的鉴别：,癌 肉瘤,（1）常有基底膜 有粘多糖物质称为外板,（2）有连接复合体 无连接复合体,（3）鳞癌有典型桥粒 绝不能有典型的桥粒,无张力微丝,（一）电镜技术在肿瘤病理学诊断中的应用（1-1）,肿瘤病理学讲义,70,七、现代技术在肿瘤病理诊断中的应用（1-1）（1）癌与肉瘤的,七、现代技术在肿瘤病理诊断中的应用（1-2）,（一）电镜技术在肿瘤病理诊断中的应用（1-2）：,（2）鳞癌与腺癌的鉴别：,鳞 癌 腺 癌,有角质小体 可见细胞内腔（内囊）或外腔（外囊）,张力纤维 微绒毛较发达,桥粒发育良好 有连接复合体（如紧密连接、中间连,接 、 桥粒）,胞浆内常有粘液分泌颗粒,肿瘤病理学讲义,71,七、现代技术在肿瘤病理诊断中的应用（1-2）（一）电镜技术在,七、现代技术在肿瘤病理诊断中的应用（1-3）,（一）电镜技术在肿瘤病理诊断中的应用（1-3）：,（3）小圆细胞肿瘤的鉴别：,恶性淋巴瘤：,神经母细胞瘤：,细胞器少， 无细胞间连接,尤文瘤：,未分化癌：,细胞器丰富，有连接，特别是有桥粒,及张力纤维等,肿瘤病理学讲义,72,七、现代技术在肿瘤病理诊断中的应用（1-3）（一）电镜技术在,七、现代技术在肿瘤病理诊断中的应用（1-4）,（一）电镜技术在肿瘤病理诊断中的应用（1-4）：,（4）黑色素瘤：,胞浆内可见黑色素小体或前黑色素小体。,（ 5）神经内分泌肿瘤（,APUD,瘤）：,胞浆内见丰富的轴状,神经分泌颗粒（多为圆形，也可呈珠状、,点状、哑铃状或卵原形，直径 120-180,nm;,中心为,致密的轴心，被膜所包裹）,（6）软组织肿瘤：,横纹肌肉瘤可见,Z,线；,平滑肌肉瘤可见肌原纤维和致密小体；,肿瘤病理学讲义,73,七、现代技术在肿瘤病理诊断中的应用（1-4）（一）电镜技术在,七、现代技术在肿瘤病理诊断中的应用（2-1）,（二）免疫组化在肿瘤病理诊断中的应用（2-1）：,*应用范围： 肿瘤抗原的定性与定位（诊断和鉴别诊断）。,（1）常见肿瘤抗原标志：,上 皮 性 肿 瘤： 角蛋白、上皮细胞膜抗原（,EMA）,恶 性 淋 巴 瘤： 白细胞共同抗原（,LCA；CD,系列）,T,系统：,Leu1,（T,细胞共同抗原）,Th: Leu3 (OKT4),； Ts:,Leu2 (OKT8),神经脊来源的肿瘤：,S-100（,黑色素瘤、神经纤维瘤等）,APUD,瘤（类癌）：,S-100；NSE（,神经特异性酰醇化酶）,肿瘤病理学讲义,74,七、现代技术在肿瘤病理诊断中的应用（2-1）（二）免疫组,七、现代技术在肿瘤病理诊断中的应用（2-2）,（二）免疫组化在肿瘤病理诊断中的应用（2-2）,（2）常用的免疫组化方法：,PAP,法：,辣根过氧化物酶-抗辣根过氧化物酶,(,P,eroxidase-,a,nti,p,eroxidase),ABC,法：,生物素-卵蛋白复合物,(,A,vidin-,b,iotin-peroxidase,c,omplex),S P,法：,过氧化酶标记的链酶卵白素,(,S,treptavidin/,P,eroxidase),肿瘤病理学讲义,75,七、现代技术在肿瘤病理诊断中的应用（2-2）（二）免疫组化在,七、现代技术在肿瘤病理诊断中的应用（2-3）,（,二）免疫组化技术在肿瘤病理诊断中的应用（2-3）：,（3）,ABC,免疫组化染色的主要操作步骤：,1）脱蜡切片水化,2）0.3%,H,2,O2,甲醇封闭内源性过氧化物酶 20-30 分钟；水洗；,3）抗原修复（微波炉、高温高压、蛋白酶等），入PBS；,4）正常血清作用 10-15 分钟，弃掉血清；,5）特异性一抗孵育 60 分钟，PBS洗 3 次（3/次）；,6）生物素标记的二抗作用 30-60 分钟，PBS 洗 3次（3,/次）,7）生物素-卵白素复合物（ABC）作用 30-60 分钟，PBS 洗；,8）DAB/AEC 呈色（流水冲洗）,9）苏木素/甲基绿复染，脱水、透明、封片。,肿瘤病理学讲义,76,七、现代技术在肿瘤病理诊断中的应用（2-3）（二）免疫组化技,七、现代技术在肿瘤病理诊断中的应用（2-4）,（二）免疫组化技术在肿瘤病理诊断中的应用（2-4）,（4）免疫组化技术在肿瘤病理诊断中的实际应用：,目的,主要应用于肿瘤的鉴别诊断（组织起源）、功能分类、,病因、发病机理研究和指导临床治疗等。,1。,肿瘤组织中相关抗原和癌基因编码产物的测定：,CEA、AFP、p21,2。,肿瘤组织中受体的测定：,ER、PR、,凝集素等；,3。,肿瘤细胞中病毒抗原的检测：乙肝病毒表面抗原、,EB,病毒等；,4。,恶性淋巴瘤的分型和鉴别诊断：,B,细胞、巨噬细胞、,T,细胞亚类,5。,内分泌肿瘤的功能分类（确定激素类型）：,HCG、,促生长激素、,降钙素、*嗜铬颗粒素(,chromograinin A),肿瘤病理学讲义,77,七、现代技术在肿瘤病理诊断中的应用（2-4）（二）免疫组化技,七、现代技术在肿瘤病理诊断中的应用（2-5）,（二）免疫组化在肿瘤病理诊断中的应用（2-5）：,（5）目前免疫组化工作中存在的问题：,1）抗体的特异性较差：如：,McAb-S100,在部分腺癌和,鳞癌中也阳性；,2）技术操作不严格： 抗体浓度、孵育时间、显色时间、,阳性/阴性对照不当等；,3）缺乏免疫病理的基本知识：结果的判定、分级误差等。,肿瘤病理学讲义,78,七、现代技术在肿瘤病理诊断中的应用（2-5）（二）免疫组化在,七、现代技术在肿瘤病理诊断中的应用（3）,（三）肿瘤的细胞动力学及,DNA,分析：,（1）自显影术,(,Autoradiography),：,（2）,流式细胞术 *,(,Flow cytometry)：,（3）显微分光光度计技术,(,Microspectro-cytometry)：,肿瘤病理学讲义,79,七、现代技术在肿瘤病理诊断中的应用（3）（三）肿瘤的细胞动力,流式细胞技术（,Flow Cytometry ，FCM),通过激光照射，快速自动扫描荧光染色的细胞学标本（通常检查2000个细胞），显示被测细胞的,DSNA,分布特点与细胞周期，借以揭示瘤细胞的细胞生物学特点，对研究肿瘤的发生、肿瘤的诊断与预后的估计以及指导制定合理的治疗方案，均具有较大的实用价值。,优点：简便易行，操作简单，可快速出结果；,缺点：不能分析每个细胞的形态学特点。,七。现代技术在肿瘤病理学研究中的应用（3）,肿瘤病理学讲义,80,流式细胞技术（Flow Cytometry ，FCM),七、现代技术在肿瘤病理诊断中的应用（4）,（四）肿瘤的自动化诊断（,Autodiagnosis):,基本原理： 数学病理学或计量形态学。,以图象分析手段，采用多因素的综合分析方法，如采用计算机手段分析细胞的大小、形态直径、周径、染色质,及核分裂以及瘤组织的排列、厚度及基底膜的长度、完整程度等，综合分析瘤组织的特点，借以阐明瘤组织的良恶性及恶性程度。,优点：较单纯形态分析更为客观全面。,* 仍不能完全代替光镜诊断，只能作为辅助诊断手段之一。,肿瘤病理学讲义,81,七、现代技术在肿瘤病理诊断中的应用（4）（四）肿瘤的自动化诊,七、现代技术在肿瘤病理诊断中的应用（5-1）,（五）核仁组成区技术 (,NOR):,(,Nucleolar Organizer Regions),基本原理：,核仁组成区是细胞核中的核糖体,DNA,（rDNA),的环，具有核糖体RNA,(,rRNA),基因，,银染技术与,rRNA,相关的酸性蛋白相结合，这些,蛋白将使DNA维持在一种伸展的状态，或具有某,些控制,rRNA,基因转录的调节功能。,肿瘤病理学讲义,82,七、现代技术在肿瘤病理诊断中的应用（5-1）（五）核仁组成,七、现代技术在肿瘤病理诊断中的应用（5-2）,（五）核仁组成区技术（,NORs):,应用范围及意义：,NORs:,其数目的增加，,可能与细胞的增殖、染色体的倍体,数、转录活力的增加有关。,AgNORs,（Ag-stained NORs),:,检测结果可用来作为判断细胞良恶性的标准之一。,组织细胞坏死性淋巴结炎：,NORs: 1.42,+,0.10,非何杰金淋巴瘤：,NORs: 6.08,+,1.36 ( p0.01 ),肿瘤病理学讲义,83,七、现代技术在肿瘤病理诊断中的应用（5-2）（五）核仁组成,七、现代技术在肿瘤病理诊断中的应用（6-1）,（六）原位分子杂交（,In situ hybridization),（1）,:,基本原理：,原位分子杂交技术就是在细胞水平上的,DNA-DNA,或,DNA-RNA,杂交。将组织细胞,DNA,在切片上,或平皿中与探针,DNA,同时变性解旋变为单链,DNA，,当温度,提高达复性温度（100,C）,时，探针,DNA,与细胞内同源的,DNA,碱基配对形成新的双链,DNA，,这样含有同位素或生物,素标记的探针即可经过放射自显影或,DAB,底物显色便可显,示出杂交颗粒。,肿瘤病理学讲义,84,七、现代技术在肿瘤病理诊断中的应用（6-1）（六）原位分子杂,七、现代技术在肿瘤病理诊断中的应用（6-2）,（二）原位分子杂交(,In situ hybridization）（2）：,应用,：,（1）在细胞水平检测多种结构蛋白、功能酶、激素、受体的编码基因，,mRNA,的分布部位、复制状态及基因编码产物水平之间的相互关系等；,（2）在细胞水平