白念珠菌实验开题报告

,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,白念珠菌白-灰形态转换调控基因相关实验,20,14级硕士开题报告,报,告,人,：潘丽,专 业：皮肤性病学,2015年10月,目录,1.研究背景与意义,2.国内外研究现状,3.实验设计,4.预期结果及进展,5.参考文献,1.研究背景与意义,白色念珠菌（Candida albicans）是一种人类常见的机会致病真菌，常导致免疫系统受损的人群的粘膜表面或系统感染。白色念珠菌至少有七种不同形态，不同形态的菌落之间可以高频率的互相转换，不同形态之间的转换能力与白色念珠菌的致病能力密切相关。目前研究最多的是酵母形态-菌丝形态和白菌-灰菌形态转换。,白色念珠菌（Candida albicans）是一种,人类常见的机会致病真菌，存在于正常人的口,腔、上呼吸道、肠道、阴道中，一般情况下，,它是温和无害的，当机体免疫系统受损时可导,致人群的粘膜表面或系统感染。被视为“隐形,的杀手”,【1】。,白色念珠菌至少有七种不同形态，不同形态,的菌落之间可以高频率的互相转换，不同形态,之间的转换能力与白色念珠菌的致病能力密切,相关。目前研究最多的是白菌-灰菌形态转换,2,。,研究背景,1.研究背景与意义,welcome to use these PowerPoint templates,New Content design,10 years experience,研究背景,白念的白菌细胞转换成灰菌细胞后能够稳定,传代，相反亦然。白菌在系统感染中具有较强,的致病力，灰菌在表皮感染中具有较强的致病,力。白菌-灰菌的转换受到基因的调控，转换的,频率受到温度的影响，高温和低温都影响白-灰,菌落的互相转换。,22-27：利于白菌细胞灰菌细胞，灰菌细胞,保持稳定灰菌状态,27：灰菌细胞则迅速转换为白菌细胞，转换,率达100%。,1.研究背景与意义,研究意义,控制白色念珠菌的毒力，而不是完全杀灭,白念已经成为一种新的治疗策略。通过实验能够找到调控白-灰转换的基因，可研发作用于靶基因的药物，使药物能暂时抑制白念珠菌侵袭性生长及形态转换，而保留共生的状态。最后，使用该药物即增加治疗白色念珠菌感染的效益，又降低抗菌药物的使用和减少多药耐药菌株出现的威胁。,2、国内外研究现状,*国外相关的文献报道对白-灰有,调控作用的基因有Efg1、TUP1、WOR1、,NRG1、EAP2、CZF2等,【2】,。,*,调控的通路有RIM101和cAMP信,号通路,【3】,。,*国内仅有1篇文献提出白-灰转,换的关键基因是WOR1基因,【4】,。,3、实验设计,实验材料：,（1）购买已知基因序列的,白念珠菌白菌细胞菌株及野生型菌株；,（2）质粒DNA，引物和DNA序列测定；,（3）白色念珠菌文库；,（4）各种酶类、试剂盒和特殊进口试剂；,（5）缓冲液及其他溶液；,（6）培养液和固体培养基；,（7）其他试剂。,a,b,c,d,.,.,d,c,a,.,c,b,a,3、实验设计,.,d,b,a,.,d,c,b,a,b,c,d,.,a,b,c,d,.,敲除a基因,敲除b基因,敲除c基因,敲除d基因,不敲除基因,实验组,对照组,.,.,编号,1,2,3,4,.,3、实验设计,在这里输入可长可短标题,O,T,注意事项：,1、实验条件：实验组、对照组均在相同的培养基中，25条件下培养，并进行白菌细胞的形态观察；,2、实验材料要求购买的白念珠菌为稳定状态的白菌细胞；野生型菌株则为随机菌株；,4.1、预期结果,实验组,白菌细胞,灰菌,白菌,对照组,白菌细胞,灰菌,列出锁定稳定白菌,状态的菌株编号和,对应的基因，说明,敲除该基因可能阻,断了白-灰转换，同,时说明该基因可能,只在灰菌中表达。,4.1、预期结果,举例：敲除了x基因的白菌细胞不能转换成灰菌细胞，那么我们推论敲除了x基因可能阻断了白-灰转换，同时推测该基因可能只在灰菌中表达。,验证实验：检测x基因在野生型菌株中的表达，x基因是否只在灰菌中表达，在白菌中不表达，是否呈“全或无”的双稳态模式？,4.2、预期进展,*2015年11月2016年2月：继续查阅文献，学习实验方法,*2016年3月8月：进行实验,*2016年92017年4月：数据整理、分析、撰写论文，课题鉴定、论文答辩,5、参考文献,【1】现在真菌学,【2】Guanghua Huang,Huafeng Wang,song Chou,Xinyi Nie.Bistable expression of EAP2,a master regulator of white-opaque switching in Candida albicans.,Proc Natl Acad Sci U.S.A.,【3】Benjamin R.Pointer,Michael P.Boyer and Martin Schmidt.Boric acid destabilizes the hyphal cytoskeleton and inhibits invasive growth of Candida albicans.Yeast 2015;32:389-398.,【4】高宁，聂鑫怡，陈江野等。白念珠菌Wor1调控网络的鉴定以及在白-灰形态转换中的功能作用。,Thank you!,请各位老师批评指正！,