组织培养高中生物

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,基本要求,1.进行菊花的组织培养。,2.尝试植物激素的应用。,植物组织培养,植物组织培养常用的设备,植物组织培养常用的植物激素,植物组织培养的流程,植物组织培养的优点及应用,组织培养常用设备,1、光照培养室,a室内清洁，并可用紫外灯定期杀菌,b光照培养架,c空调等调温设施,2、高压灭菌锅,3、超净工作台,4、培养基,培养基,基础培养基,含有大量元素、微量元素、有机成分、激素和琼脂。经过长期摸索，目前常用的一些基础培养基有MS、B5培养基等,组织培养的培养基PH一般都在6左右,培养基中一般都含有蔗糖，其除了作为营养成分外，还用于维持一定的渗透压,有时培养基中还加入少量粉状活性炭，除能吸附一些有害物质外，还能黑化培养基，模拟土壤环境,基础培养基中的各种物质的量可以根据对实际培养对象的摸索和经验积累进行调整，更好的促进植物细胞的脱分化或再分化过程,“发芽培养基”“生根培养基”,是在基础培养基在加入不同剂量和配比的植物激素后的培养基。,发芽培养基：细胞分裂素较多，生长素较少,生根培养基：细胞分裂素较少，生长素较多,脱分化培养基：细胞分裂素与生长素的比值在前两者之间。,常用植物激素,生长素生长素类,天然的：吲哚乙酸（IAA），4-氯吲哚乙酸等,人工合成的生长素类似物：,吲哚丙酸（IPA），吲哚丁酸（IBA），,-萘乙酸（NAA），,天然生长素类激素1含量低获取难2植物体内含降解此类激素的酶，缩短作用时间，降低作用效果。,故一般采用人工合成的类似生长素,细胞分裂素类,天然的：玉米素等,人工合成的：,激动素（KT），苄基腺嘌呤（,BA,）,组培的流程,组培有两种形式：,愈伤组织培养,细胞悬浮培养,步骤,外植体的获取,接种到脱分化培养基,将愈伤转接到发芽培养基,将丛壮苗分割转接到生根培养基,胚状体转移至草炭土或蛭石,健壮后土植,外植体的获取,取自无菌培养的组培苗，用镊子和解剖刀切成几段,若取自自然生长的茎,1、去顶去叶，切成57cm长小段，70%酒精浸泡310min，无菌水洗12次，用饱和（5%）漂白粉溶液（次氯酸钠）浸泡510min，换一次漂白粉溶液后再浸泡510min，无菌水洗12次，置于培养皿,2、纵切去皮，取茎中髓的部分，再去2端，将中段髓分切成2mm左右圆片，切时看好形态学上下端。,接种到脱分化培养基,形态学上端朝下贴在培养基上接种。,转接到发芽培养基,25摄氏度环境，日光照15h左右，再分化出多个芽，称为丛壮苗,分割丛壮苗，转接到生根培养基,同上一步环境条件,转移到草炭土和蛭石,用玻璃罩或塑料布保持80%湿度，23后进行锻炼,土培,组培的优点和应用,快繁,脱毒,育种,存种,生产某些代谢产物,