卵母细胞的采集和培养

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,2020/11/4,*,3.2体外受精和早期胚胎培养,一、教学目标：,1.简述哺乳动物体外受精技术的主要操作步骤。,2.简述哺乳动物胚胎的早期培养方法。,3.认同体外受精在家畜快速繁殖中的重要意义。,二、教学重点：,1.体外受精在家畜快速繁殖中的重要意义。,2.哺乳动物体外受精技术的主要操作步骤。,三、教学难点：,1.,卵母细胞的采集和培养。,2.,精子的采集和获能。,2020/11/4,1,1978年7月25日世界首例试管婴儿,2020/11/4,2,1988年3月10日我国首例试管婴儿,2020/11/4,3,1992年我国首例三胞胎试管婴儿,2020/11/4,4,根据资料回答下列问题：,1.资料上用到了什么生物技术？,试管婴儿技术,（包括体外受精、胚胎体外培养）和,胚胎移植技术,。,2.试管婴儿和母亲正常怀孕，生产的过程有何异同？,相同之处：,都通过有性生殖产生，在母体子宫内发育形成胎儿,。,不同之处：,受精作用在体外，并在体外发育成早期胚胎进行胚胎移植,。,2020/11/4,5,试管动物技术：,通过,使卵子和精子在,下成熟和受精，并通过培养发育成,后，再经移植产生后代的技术。,体外条件,人工操作,早期胚胎,2020/11/4,6,国产奶牛,：年均产奶量3000公斤左右,国际良种奶牛,：年均产奶量10000公斤左右,引进一头良种成年奶牛需要3万5万元；,牛的生育率低，一头牛一胎只生一只，一生只能生育四五次。,牛的生育率虽然很低，但是牛的卵母细胞却相当的多，其卵巢中卵母细胞数目要比一生中排卵数多1000倍左右；,公牛产生的精子数目就更多了。,一、从试管牛说起,2020/11/4,7,试管动物技术过程：,第一步：体外受精,第二步：胚胎的早期培养,第三步：胚胎移植,2020/11/4,8,胚胎移植,采集良种母牛的卵母细胞,卵母细胞的体外培养,采集良种公牛精子,精子体外获能,体外受精,良种牛体外受精胚胎,受体牛,良种犊牛,成熟期牛,屠宰加工厂,市场,采集卵巢中的卵母细胞,“试管牛”工厂化生产的技术流程图,2020/11/4,9,1982年世界首例试管牛犊问世,实现良种牛快速大量繁殖首先要做的是,和,的培养。,体外受精,早期胚胎,2020/11/4,10,主要包括,、,和,等几个主要步骤 。,概念：采取雌性动物的,和雄性动物的,，使其在,中受精。,二、体外受精,卵,母,细胞,精子,试管,卵,母,细胞的采集,精子的获取,受精,2020/11/4,11,1.卵母细胞的采集和培养,对不同动物,采集卵母细胞的方法不同。,实验动物如小鼠、兔，以及家畜猪、羊等,卵细胞的采集,：,最常用的方法是,卵巢,经过,处理，,具体做法,是给供体注射,，使一头母畜一次排出比自然情况下多几倍到十几倍的卵子，之后从,中冲取卵子，直接与获能的精子在体外受精。,超数排卵,促性腺激素,输卵管,2020/11/4,12,大家畜或大型动物，如牛，,卵细胞的采集,：,从屠宰场已屠宰母畜的,中采集卵母细胞，也可以借助,、,或,等工具确定卵泡位置，直接从活体动物中吸取泡卵液（连同卵母细胞）取出，在体外进行人工培养，使其成熟。,卵巢,超声波(B超)探测仪,内窥镜,腹腔镜,2020/11/4,13,牛卵巢,2020/11/4,14,B超活采仪,2020/11/4,15,2020/11/4,16,B超引导法：,借助超声波探头和屏幕的引导，从活母畜卵巢采集卵母细胞。操作员先将带有超声波探头和采卵针的采卵器通过阴道插入子宫，同时通过将卵巢贴在探头上。根据B超屏幕所显示的卵泡位置，利用采卵针穿刺卵泡并同时抽吸卵母细胞。,2020/11/4,17,2020/11/4,18,2020/11/4,19,活体采集的牛卵母细胞,2020/11/4,20,2020/11/4,21,卵母细胞的成熟培养：CO,2,培养箱,2020/11/4,22,培养箱,2020/11/4,23,培养箱,2020/11/4,24,2.精子的收集和获能,收集精子的方法有：,假阴道法,手握法,电刺激法,2020/11/4,25,在体外受精前，要对精子进行获能处理。通常采用的体外获能方法有,和,两种。,对于,、,和,的精子，一般采用,培养法,；对于,、,等家畜的精子常用,化学法,。,培养法,：精子在,获能液,中获能。,化学诱导法,：精子,放在,一定浓度的,肝素,或,钙离子载体A23187溶液,中，用化学药物诱导获能。,培养法,化学诱导法,啮齿动物,家兔,猪,牛,羊,2020/11/4,26,3.受精,获能的精子和培养成熟的卵子，一般情况下在 或,中完成受精过程。,获能溶液,专用受精溶液,2020/11/4,27,三、胚胎的早期培养,概念：是应用人工创造条件，对获取的 进行体外培养。,培养液成分：,水,、,无机盐,、,糖类,、,维生素,、,氨基酸,、,激素,、,核苷酸,、,血清,等,早期胚胎,2020/11/4,28,不同动物胚胎移植时间不同,牛、羊：,桑椹胚或囊胚阶段,小鼠、家兔：,卵裂期或囊胚阶段,试管婴儿：,8个或16个细胞阶段,胚胎培养发育到适宜阶段时，可将其取出向受体移植或冷冻保存。,2020/11/4,29,2020/11/4,30,试管动物 与 克隆动物相比,生殖方式：,技术手段：,遗传规律：,有性生殖 无性生殖,核移植技术、,胚胎移植,遵循 无,体外受精,胚胎移植,2020/11/4,31,