噬菌体侵染细菌的实验

,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,噬菌体侵染细菌的实验,（复习课）,噬菌体侵染细菌实验,你记得本实验的基本操作吗？,考纲要求：,两个经典实验的,设计思路和结论分析,考情回顾：,2010,、,2011,年,江苏卷、上海卷,赫尔希通过,T,2,噬菌体侵染细菌的实验证明,DNA,是遗传物质，实验包括,4,个步骤：,培养噬菌体,(,侵染细菌,),，,35,S,和,32,P,标记噬菌体，,放射性检测，,离心分离。,实验步骤的先后顺序为,A,B,C,D,我能行,C,深度解读噬菌体侵染大肠杆菌的实验,1,、实验者：,2,、实验方法：,放射性同位素标记法：,用放射性同位素（如,14,C,）掺入正常的分子中，使该分子带有放射性，然后用放射自显影检测分子的分布。,拓展：四本书中使用这种方法的有哪些知识？,蛋白质,外壳,DNA,3,、实验材料：,噬菌体选择是关键,解读实验材料,T,2,噬菌体,：,（,1,）结构：,有何特点？,所用同位素究竟标记的是这两种物质的,什么位置,？,请你写出氨基酸结构通式；,画出脱氧核苷酸的结构简图；,并标出同位素标记的部位。,（,2,）生活方式：,什么特点？怎样培养？,（,3,）增殖特点：,虽无细胞结构，但为生物的原因。看书,P44,T2,噬菌体中,60%,是蛋白质,40%,是,DNA.,解读大肠杆菌,1,、为什么不同的噬菌体会侵染不同的大肠杆菌？,2,、噬菌体若想向大肠杆菌中注入物质，需要先,溶解其什么结构？该结构主要成分是什么？,解读大肠杆菌,1,、为什么不同的噬菌体会侵染不同的大肠杆菌？,2,、噬菌体若想向大肠杆菌中注入物质，需要先,溶解其什么结构？该结构主要成分是什么？,细胞表面的特异性受体决定。,细胞壁；肽聚糖,4,、实验设计思路,-,不同于体外转化实验,巧妙构思：,噬菌体只有,DNA,和蛋白质两种成分，,没有其它物质的干扰 。,S,是蛋白质特有元素，,P,是,DNA,特有元素，,用不同放射性同位素分别标记蛋白质和,DNA,，,直接地、单独地来观察它们的作用,在,“,噬菌体侵染细菌,”,的实验中，如果放射性同位素主要分布在离心管的沉淀物中，则获得侵染噬菌体的方法是,(,),A,用含,35,S,的培养基直接培养噬菌体,B,用含,32,P,的培养基直接培养噬菌体,C,用含,35,S,的培养基培养细菌，再用此细菌培养噬菌体,D,用含,32,P,的培养基培养细菌，再用此细菌培养噬菌体,我能行,D,5,、实验过程,（,如何标记噬菌体？）,第一步：标记细菌,（,如何标记？）,35,S,培养基,+,细菌,35,S,标记的细菌,32,P,培养基,+,细菌,32,P,标记的细菌,第二步：标记噬菌体,（如何标记？）,噬菌体,+,35,S,标记的细菌,35,S,标记的噬菌体,噬菌体,+,32,P,标记的细菌,32,P,标记的噬菌体,第三步：标记的噬菌体侵染未标记的细菌,仔细研读课本实验有关内容,友情提示：,今年高考选修三试题基本都是课本,原话填空，所以看书必须仔细,第四步：放射性检测,-,搅拌和离心,短时间保温、搅拌、离心,目的,-,第四步：放射性检测,解读上清液：,解读沉淀物：,第四步：放射性检测,解读上清液：,上清液中含未侵染的,T,2,噬菌体和侵染后的噬菌体外壳,解读沉淀物：,沉淀物中含有被感染的细菌,该实验中时间应怎样把握？,过长过短放射性会集中于上清液还是沉淀？为什么？,时间过长因为超过噬菌体的裂解周期，放射性集中于上清液中，过短来不及侵染细菌，从而也集中于上清液中 。,思考,解读放射性检测结果：,35,S,标记后上清液放射性高，沉淀物放射性很低,（为什么沉淀物有低放射性？）,32,P,标记后上清液放射性很低（,为什么上清液有低放射性？）,，沉淀物放射性很高。,解读,32,P,标记后上清液有低放射性原因,（,1,）保温时间过短，有一部分噬菌体还没有侵染到大肠杆菌细胞内，经离心分布于上清液中，上清液中出现放射性。,（,2,）噬菌体和大肠杆菌混合培养到用离心机分离，这一段保温时间过长，噬菌体在大肠杆菌内增殖后释放子代，经离心分布于上清液，也会使上清液有放射性。,35,S,标记后为什么沉淀物有低放射性？,由于搅拌不充分，有少量含,35,S,的噬菌体吸附在细菌表面，随细菌离心到沉淀物中。,实验分析：,结果分析：,细菌体内无,35,S,，体外有,35,S,细菌体内有,32,P,，体外无,32,P,35,S,标记的噬菌体外壳并没有进入细胞内部，,而,32,P,标记的噬菌体,DNA,进入了细菌内部,实验结论：,DNA,是遗传物质。,你认为该实验还能证明什么？,DNA,分子具有相对稳定性；,DNA,能自我复制，保持前后代一定连续性；,DNA,能控制蛋白质的生物合成，但不能证明,DNA,分子产生可遗传的变异。,解读子代噬菌体的组成,（课本,44,页）,噬菌体侵染细菌后，,合成子代噬菌体的外壳的原料是？,而子代噬菌体的,DNA,来自？,注意标记对象是噬菌体还是细菌，标记对象不同，结果应不同：,温馨提醒,DNA,蛋白质,DNA,和蛋白质,噬菌体,（标记对象）,32,P,35,S,14,C,3,H,18,O,15,N,细菌,31,P,32,S,12,C,1,H,16,O,14,N,子代噬菌体（结果）,注意标记对象是噬菌体还是细菌，标记对象不同，结果应不同：,温馨提醒,DNA,蛋白质,DNA,和蛋白质,噬菌体,（标记对象）,32,P,35,S,14,C,3,H,18,O,15,N,细菌,31,P,32,S,12,C,1,H,16,O,14,N,子代噬菌体（结果）,32,P(,少数,),31,P,（全部）,32,S,CHON,两种同位素都有,35,S,标记的蛋白质,32,P,标记的,DNA,1,、感染,2,、搅拌,3,、离心,蛋白质外壳,（强放射性）,细菌（强放射性）,细菌,蛋白质外壳,噬菌体（病毒）、大肠杆菌（原核生物）,1,、实验材料：,2,、实验思路：,4,、实验结果：,5,、实验分析：,总结蔡斯和赫尔希的实验,设法把,DNA,与蛋白质分开，单独地直接去观察它们的作用。,用放射性同位素,35,S,和,32,P,分别标记噬菌体的蛋白质外壳和,DNA,内核，后侵染细菌,3,、实验操作：,在新噬菌体只能检测到,32,P,，检测不到,35,S,在亲子代间具备连续性的是,DNA,6,、实验结论：,DNA,是遗传物质,试比较肺炎双球菌转化实验和噬菌体侵染细菌的实验,相同点：,1,、实验思路,-,均使,DNA,和蛋白质分开，单独处理，,观察它们各自的作用，但两类实验中分开方式不同。,2,、实验原则,-,都遵循了对照原则。,3,、都证明了,DNA,是遗传物质。,不同点：,1,、方法不同,:,艾弗里,-,分离化合物，分别与,R,型菌混合培养,同位素标记法,-,分别标记,DNA,和蛋白质的特殊元素,2,、结论不同：,艾弗里,-DNA,是遗传物质，蛋白质等不是遗传物质,同位素标记法,- DNA,是遗传物质,噬菌体侵染细菌的动态过程：,侵入别的细菌,侵入,合成,吸附,组装,释放,吸附,侵入,合成,组装,释放,(,2010,南京模拟,),有人试图通过实验来了解,H,5,N,1,禽流感病毒侵入家禽的一些过程，设计实验如图：,一段时间后，检测子代,H,5,N,1,病毒的放射性及,S,、,P,元素，下表对结果的预测中，最可能发生的是,(,),选项,放射性,S,元素,P,元素,A,全部无,全部,32,S,全部,31,P,B,全部有,全部,35,S,多数,32,P,，少数,31,P,C,少数有,全部,32,S,少数,32,P,，多数,31,P,D,全部有,全部,35,S,少数,32,P,，多数,31,P,D,总结：遗传物质的探究方法,（,1,）分离提纯法,：,肺炎双球菌转化实验,缺点：物质纯度不能保证,100%,。,（,2,）同位素标记法：,噬菌体侵染细菌实验,（,3,）病毒重组法：,典例,3,