血清葡萄糖测定

Click to edit Master title style,Click to edit Master text styles,Second level,Third level,Fourth level,Fifth level,11/7/2009,#,单击此处编辑母版标题样式,1,*,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,（,GOD-POD,法,）,实验九,血清葡萄糖浓度的测定,CONTENTS,相关临床知识,1,2,实验目的,3,实验原理,4,实验器材与试剂,5,实验操作,1.,相关临床知识,血液中的葡萄糖称为,血糖,。,1.,相关临床知识,空腹血糖,3.9-6.1 mmol/L,正常餐后两小时,糖尿病,空腹,餐后两小时,mmol/L,mmol/L,1.,相关临床知识,胰岛,B,细胞,靶细胞,胰岛素,I,型糖尿病（,T1DM,）,别名,：青年发病型糖尿病,或胰岛素依赖性糖尿病。,原因,：胰腺产生胰岛素的细胞已经彻底损坏。,易发病人群,：年龄轻，大多30岁,治疗,：依赖胰岛素治疗,II,型糖尿病（,T2DM,）,别名,：非胰岛素依赖型糖尿病,原因,：自身能产生胰岛素，但细胞无法对其做出反应。,易发病人群,：中老年人，肥胖者,治疗,：需要胰岛素单独或与口服药联合应用的治疗,有些患者血糖含量并不稳定，有什么办法进一步更准确诊断？,1.,相关临床知识,口服葡萄糖耐量试验（,OGTT,）,概念：,是一种,葡萄糖负荷,试验，用以了解胰岛细胞功能和机体对血糖的调节能力，是诊断糖尿病的确诊试验,原理：,正常人进食糖类后血糖会暂时升高，0.51小时后升到最高峰，但不超过8.9mmol/L，2小时后回到空腹水平。,1.,相关临床知识,OGTT,操作步骤,1,）,.,试验前3天内，每日碳水化合物摄入量,不少于150g,。,2,）,.,空腹取血后，,5,分钟内,口服溶于250300ml水内的75g,无水葡萄糖粉的糖水，妊娠妇女用量为,100g,，儿童按体重给予，不超过,75g.,3,）,.,服糖后,半小时,、,1小时、2小时,、,3小时,分别在前臂采血测血糖,采血同时，,每隔,1,小时,取尿液作尿糖试验。试验过程中，受试者不喝茶及咖啡，不吸烟，不做剧烈运动,4,）,.,OGTT,2小时,后血糖11.1mmolL可以确诊糖尿病,OGTT,诊断,1.当静脉空腹血糖6.1mmolL，,OGTT 2小时血糖7.8mmolL,，说明人体对进食葡萄糖后的,血糖调节能力正常,。,2.当静脉空腹血糖7.0mmolL或,OGTT 2小时血糖11.1mmolL,，说明人体处理进食后葡萄糖的能力明显降低，可以确诊,糖尿病,。,3.当静脉空腹血糖7.0mmolL，并且,OGTT 2小时血糖介于7.811.1mmolL之间,，说明人体对葡萄糖的调节能力轻度下降，可以诊断,糖耐量减低,。,4.当静脉空腹血糖介于6.17.0mmolL之间，且,OGTT 2小时血糖7.8mmolL,，说明人体对进食葡萄糖后的血糖调节能力尚好，但对空腹血糖调节能力轻度减退，可以诊断,空腹血糖受损,。,1.,相关临床知识,2.,实验目的,1.,掌握酶法测定血清葡萄糖浓度的原理,2.,掌握血糖变化的临床意义,3.,实验原理,血糖测定的方法有哪些？,（一）无机化学法,：,Folin-Wu,法，基于葡萄糖醛基的还原性,（二）有机化学法,：邻甲笨胺法，联笨胺法等,（三）酶法,Cu,2+,OH-,Glu,Cu,+,磷钼酸,显色,1.,己糖激酶法（,HK,）,2.,葡萄糖氧化酶法（,GOD-POD,法）,邻甲笨胺,+ Glu,葡萄糖基胺,蓝绿色化合物,分子重排,脱水,希夫氏碱,缩合,特异性差,3.,实验原理,葡萄糖氧化酶法（,GOD-POD,法）,葡萄糖氧化酶（,GOD,）,将葡萄糖氧化为葡萄糖酸酶，同时释放过氧化氢。,过氧化氢酶（,POD,）,催化过氧化氢氧化色素原（如,4-,氨基安替比林和苯酚），并使色素原氧化成红色醌类化合物，即,Trinder,反应。,红色醌类化合物的生成量与葡萄糖含量成,正比,。,葡萄糖,+O,2,+H,2,O,葡萄糖酸,+2H,2,O,2,GOD,2H,2,O,2,+4-,氨基安替比林,+,苯酚,红色醌类化合物,POD,4.,实验器材和试剂,(,一）器材,5ml,移液管，微量可调式移液管，,721E,分光计，,37,恒温水浴,（二）试剂,1.,苯甲酸钠溶液（,12mmol/L,）,2.,酶酚混合试剂 酶试剂,+,酚溶液,1:1,3.,葡萄糖标准工作液（,5mmol/L,）,防止氧化，葡萄糖为单糖,含醛基,易氧化成羧基,5.,实验操作,取试管,3,支，按表操作,试剂,/ml,空白管（,B,）,标准管（,S,）,测定管（,T,）,血清,-,-,0.020,葡萄糖标准液,-,0.020,-,蒸馏水,0.020,-,-,酶酚混合液,3.00,3.00,3.00,混匀，置,37,水浴中，保暖,25min,在波长,510nm,处比色，以空白管调零，读取标准管及测定管的吸光度。,计算公式,血清葡萄糖浓度,=,A,测定,A,标准,5mmol/L,参考值 空腹血清葡萄糖浓度：,临床意义,1.,生理性高血糖,可见摄入高糖食物后，或情绪紧张肾上腺分泌增加时。,2.,病理性高血糖,糖尿病,：病理性高血糖常见于胰岛素绝对或相对不足的糖尿病患者。,内分泌腺功能障碍：,甲状腺功能亢进，肾上腺皮质功能及髓质功能亢进，引,起各自对抗胰岛素的激素分泌过多，或升高血糖的激素增多引起的高血糖,现已归入特异性糖尿病中。,颅内压增高,：可刺激血糖中枢，如脑膜炎，颅外伤，颅内出血等，引起血糖增高。,脱水引起的高血糖,：如呕吐，腹泻和高热等也可使血糖轻度增高。,3.,生理性低血糖,见于饥饿和剧烈运动时。,4.,病理性低血糖,特发性功能性低血糖最多见，其次是药源性，肝源性和胰岛素瘤等。,注意事项,1,.,葡萄糖氧化酶法可直接测定脑脊液葡萄糖含量，但不能直接测定,尿液,葡萄糖含量,。这是因为尿液中的尿酸等干扰性物质浓度过高，可干扰过,氧化氢酶反应，而造成假性偏低。,2.,对于血液样品需及时分离血细胞。因红细胞的酵解将导致测定结果偏低。,建议测定样品以,草酸钾,-,氟化钠,为抗凝剂以抑制糖酵解。,3.,严重黄疸，溶血及乳糜样血清应先制备,无蛋白,血滤液，然后再进行测定。,THANKS,