yzh11红细胞血型系统概述

Titelmasterformat durch Klicken bearbeiten,Textmasterformate durch Klicken bearbeiten,Zweite Ebene,Dritte Ebene,Vierte Ebene,Fnfte Ebene,*,JLMC,第一 章 红细胞血型系统,第一节 概述,第二节,ABO,血型系统,第三节,H,系统及,Lewis,血型系统,第四节,Rh,血型系统,第五节 其他血型系统,1,第一节 概述,1901,年,卡尔,.,兰德斯坦纳,发现,ABO,血型系统；,1927,年又发现,MNS,、,P,血型系统；,1940,年发现,Rh,血型系统；,1945,年,Coombs,抗球蛋白试验，发现更多血型,Ag;,1945-1951,年发现,Lutheran,、,Kell,、,Lewis,、,Duffy,、,Kidd,、,Diego,系统；,以后又发现其他血型系统。,2,第一节 概述,血型系统研究工作分为三个阶段：,1950s,血型血清学方法发现和检测血型,Ag;,1960-70s,血型抗原的生物化学本质；,1980s,以后,血型分子生物学。,3,一、红细胞血型抗原,(,一,),抗原的一般特性：,1.,免疫原性：刺激机体产生,Ab,及免疫效应细胞,.,反应原性：与,Ab,及致敏淋巴细胞特异性结合,.,2.,抗原决定簇或表位：决定抗原特异性的特殊,化学基团。,4,一、红细胞血型抗原,(,一,),抗原的一般特性：,3.,抗原分子量：决定抗原的免疫原性，,MW1,万,.,4.,完全抗原：具有免疫原性、反应原性；,大多蛋白质,半抗原：无免疫原性、有反应原性；,大多数多糖和所有类脂质,半抗原,+,大分子蛋白,=,完全抗原,5,(,二,),RBC,血型抗原的生化性质,组织血型抗原,器官血型抗原,决定簇 糖分子（,糖抗原,） 多肽（,蛋白抗原,）,血型抗原,ABO,、,Hh,、,Lewis,、,P,、,I,Rh,、,MNSs,、,Kell,、,Kidd,.,人体分布 各种组织细胞及 人体,RBC,及,体液,、,分泌液,(,除,NC,),其他血细胞膜,肿瘤标志 存在 未见,成熟,出生后 出生时,抗体 天然为主，少数免疫抗体 免疫抗体,与疾病有关 多见 很少,自然界 细菌真菌动植物细胞 少数高级哺乳动物细胞,化学组成 糖蛋白,、,糖脂 蛋白质,、,糖蛋白,、,脂蛋白,基因,编码糖基转移酶 直接控制抗原,6,携带血型抗原的蛋白分别以单次跨膜、多次跨膜或,链接于糖基磷脂酰肌醇方式嵌入红细胞膜。,分子量,25-100kD,；每个红细胞抗原位点数,万,-100,万。,7,8,(,三,),血型抗原免疫原性的强弱,不同血型抗原的免疫原性不同,.,缺乏该抗原的患者，输入,1U,含该抗原红细,胞后产生相应抗体的概率的大小。,D,K,c,E,k,e,Fy,a,C,JK,a,S,JK,b,s.,献血员必须检测,A,、,B,、,D,抗原,.,9,(,四,),血型抗原的剂量效应及位置效应,1.,剂量效应：,基因为,纯合子,时，抗原为相对的“,双倍剂量,”，与对应的抗体反应强度强，,抗体反应滴度高,；,基因为,杂合子,时，抗原为相对的“,单倍剂量,”，,与对应抗体反应强度弱，,抗体反应滴度低,；,这种现象称为,剂量效应,。见于共显性基因。,见于：,Rh(,除,D),、,MNSs,、,Kidd,、,Duffy,、,Lutheran.,10,(,四,),血型抗原的剂量效应及位置效应,2.,位置效应：,是指,基因之间的相互影响,，主要发生在,Rh,血型系统。,“顺式效应”：发生在,同一染色体,上基因之间的位置效应，如,E,抗原量在,DcE,dcE,。,“反式效应”：发生在,两条同源染色体,上基因之间的位置效应，如基因型为,CDe/cde,中,D,抗原,Cde/cDe,中。,11,(,五,),红细胞血型抗原的生物功能,1.,膜转运蛋白：分子的跨膜转运,带,3,蛋白、,Diego,系统抗原：转运阴离子；,Kidd,糖蛋白,(Jk),：转运尿素,;,Colton,糖蛋白：转运水通道；,Rh,蛋白及,RhAG,：可能转运铵,.,D,多肽：转运阳离子,.,12,(,五,),红细胞血型抗原的生物功能,2.,受体及粘附分子：,Duffy,糖蛋白：,G,蛋白偶联受体超家族成员,.,可能是趋化因子受体。,LW,、,Lutheran,、,Ok,糖蛋白：,Ig,超家族成员,.,13,(,五,),红细胞血型抗原的生物功能,3.,补体调节糖蛋白：已发现,3,个血型系统,Chido/Rogers,抗原：,C4,分子的一部分；,Cromer,抗原：位于,CD55(DAF);,Knops,抗原：,C3,受体的一部分,.,4.,酶活性：,Yt,抗原：乙酰胆碱酯酶,神经传递,.,Kell,抗原：肽链内切酶,产生内皮素,.,14,(,五,),红细胞血型抗原的生物功能,5.,维持红细胞的完整性：,Diego,抗原,-,带,3,蛋白,-,骨架蛋白,Cerbich,抗原,-GPC and D-,骨架蛋白,编码这些蛋白的基因突变形态异常,.,6.,构成细胞外糖链基质：,带,3,蛋白,/GPA-,细胞外糖链,构成外衣,保护,.,15,(,五,),红细胞血型抗原的生物功能,7.,血型抗原多态性的意义：不清,血型抗原的糖蛋白、糖脂是病原微生物的受体,Duffy,抗原是间日疟原虫的受体；,基因突变非洲黑人,Fy(a-b-),缺乏,Duffy,抗原或糖蛋白免受间日疟原虫感染,.(,突变选择优势,),16,生物学功能 血型抗原分子 说明,一、免疫学功能,幽门螺旋杆菌受体,Le,b,、,2,型,H,大肠杆菌受体,P,、,P,1,、,P,k,志贺痢疾杆菌受体,P,疟原虫受体,Fy6,、,GPA,、带,3,蛋白,P-fimbriated,大肠杆菌受体,Globoside(P,抗原,),细小病毒,B19,的受体,血型抗原与细胞功能,17,生物学功能 血型抗原分子 说明,一、免疫学功能,补体及补体受体,补体,CH(C4B),和,RG(C4A),分子成分,Chido/Rodger(CH/RG),补体功能调节,Cromer,抑制,C3,和,C5,转化酶的聚集，,加速其降解,.,位于,CR1 Knop,结合,C3b,和,C4b,，抑制补体激活,保护自体红细胞不被溶解，介,导中性粒细胞和单核细胞吞噬,作用,.,血型抗原与细胞功能,18,生物学功能 血型抗原分子 说明,一、免疫学功能,粘附分子、其受体及,CD,受体,B,细胞粘附因子,(B-CAM) Lu,介导镰状细胞至血管内皮,细胞的粘附,.,C,、,X-C,和,C-C,受体,Duffy Fy(a-b-),人红细胞不结,(IL-8,MGSA,MCP-1,RANTES),合趋化因子,.,粘附因子,Xg(CD99,12E7),有,Ewing,肉瘤，一些神,经外胚层肿瘤，淋巴母细胞淋巴,病和急性淋巴母细胞白血病细胞,有关，水平,Xg,抗原表达,.,血型抗原与细胞功能,19,生物学功能 血型抗原分子 说明,红细胞系细胞穿膜粘附,/,受体蛋白,Scianna,粘附因子,(ICAM-4),整联蛋白受体,LW,CD44,分子粘附分子、淋巴细胞、,India,在细胞间信,单核细胞和其他肿瘤细胞 号传递和免疫,刺激有关,.,CD147,分子 纤维细胞活性配体,OK,类风湿、获得性关,节炎增高与肿瘤转,移有关,.,CD108,分子 粘附分子,JMH,清除衰老和受损红细胞 带,3,蛋白,(,包,括,Diego,抗原,),血型抗原与细胞功能,20,生物学功能 血型抗原分子 说明,二、分子转运功能,红细胞转运尿素通道,Jk Jk(a-b-),人浓缩,尿液功能缺陷,.,离子交换通道,Diego,膜中的,C,端功能区,.,水转运体,Colton,水、尿素、甘油转运通道,GIL,血型抗原与细胞功能,21,生物学功能 血型抗原分子 说明,三、细胞膜结构蛋白,细胞膜结构蛋白,Rh Rh,抗原和,GPA,、,GPB,、,LW,、,CD47,、,ankyrin,、,4.2,带膜蛋白形成稳,定复合物,.,细胞膜结构蛋白,Diego N,端细胞浆内功能区,.,细胞膜结构蛋白,Kx,细胞膜结构蛋白,Gerbich,血型抗原与细胞功能,22,膜蛋白成分 说明,葡萄糖转运 位于,1,号染色体，相对分子质量,4.5,体第,4.1,带蛋白 万,-6.5,万；,492aa,，每个红细胞上有,20,万,-70,万个分子，,12,次穿膜结构；,携带有,A,、,B,、,H,和,I,抗原，广泛组织分布,.,第,7.2,带蛋白 位于,9q33-q34.2,，相对分子质量,3.1,(,阳离子转运体,),万；,288aa,；每个红细胞上有,1,万个分,子，单次穿膜,.,红细胞膜其他蛋白质组成、结构及功能,23,膜蛋白成分 说明,Rh,相关糖蛋白,(RhAG,位于,6p21.1-p11,，相对分子质量,RH50,2D10) 4.5,万,-10,万，,409aa,，每个红细胞,上有,10,万,-20,万个分子，,12,次穿膜,结构；,携带有,A,、,B,、,H,、,I,和,2D10,抗原，广泛组织分布,.,CD47(,整白相关的 位于,3q13,；相对分子质量,4.7-,蛋白,IAP) 5.2,万，,323aa,，每个红细胞上,有,1-5,万个分子，,5,次穿膜结构，,细胞外,N,端；,免疫球蛋白超家族,成员,.,红细胞膜其他蛋白质组成、结构及功能,24,膜蛋白成分 说明,LFA3(CD58),位于,1p13,，相对分子质量,5.5-7,万，,222aa,，每个红细胞上有,3000-8000,个,分子，,细胞粘附分子，,T,淋巴细胞表面,CD2,的配体，广泛组织分布,.,CD59,位于,11p1314,，相对分子质量,1.8-2,万,128aa,，每个红细胞上有,2-4,万个分子,为,补体调节蛋白,.,红细胞膜其他蛋白质组成、结构及功能,25,膜蛋白成分 说明,运铁蛋白受体,(CD71),位于,3q26.2-qter,；相对分子质量,18-19,万,760aa,。在网织红细胞上,比成熟红细胞上量多,.2,型膜蛋白,.,4F2(2F3,，,CD98),相对分子质量,12.5,万,2,型膜蛋白,.,4,1,(,整联蛋白,) 4,是,CD49d,1,是,CD29,。与造血功,能有重要关系,.,MHC1,类抗原,(HLA1,、,2;,复合物的轻链是,2-,巨球蛋白,.,HLA-A,、,B,、,C),成红细胞,-,巨噬红 相对分子质量,4.3,万，,395aa,。,细胞蛋白质,(EMP),红细胞膜其他蛋白质组成、结构及功能,26,膜蛋白成分 说明,已被钙激活的钾通道,1200aa,每个红细胞上,200,个分子,(Gardos channel),核酸转移体 相对分子质量,5.5,万,每个红细胞,上,1,万个分子,C8,结合蛋白 相对分子质量,5.5,万,对膜攻击复,合物为抑制因素,Na/K-ATP,酶,Ca-ATP,酶,Ca/Mg-ATP,酶,Mg-ATP,酶,CD75,与细胞分化有关的糖分子抗原,K-Cl,共转运体,(KCCl),红细胞膜其他蛋白质组成、结构及功能,27,(,六,),红细胞血型抗原基因,等位基因的表达一般为共显性，如,K,、,k,抗原。,某些基因产物有多种抗原，如,GPB,携带有,S,或,s,、,N,、,U,抗原。,一对染色体携带相同的沉默基因，则血型表现为缺失型。,有些血型系统抗原表达受独立的调控基因或修饰基因的控制。如修饰基因,In(Lu,),可抑制,Lutheran,系统所有抗原的表达，还抑制,P1,、,i,血型抗原的表达。,28,(,六,),红细胞血型抗原基因,血型多态性的产生：,大多为一个或多个错义突变所致。,SNPaa,改变,抗原多态性；,单个核苷酸缺失、整个基因缺失或插入、基因重排。,29,(,七,),红细胞血型抗原的命名,单个字母表示：如,ABO,；,MN,；,Lewis,、,Duffy,、,Kidd,；,LW,等位基因编码的对偶抗原用不同大写字母表示：,A,、,B,，,M,、,N,等位基因编码的对偶抗原用大小字母表示：,S,、,s,，,K,、,k,；,Le,a,、,Le,b,；,Fy,a,、,Fy,b,；,Jk,a,、,Jk,b,。,30,(,七,),红细胞血型抗原的命名,1961,年,Allen,及,Rosenfield,介绍,数字化符号命名法,：,KK1,kK2;DRh1,CRh2,ERh3;,缺失的抗原在数字前加“,-”,1980,年,ISBT,命名法,：,3,5,字母符号,+,数字：,KEL:-1,2,-3,4.,基因用斜体字母*数字，,KEL*1,*2,*3,*4.,31,32,33,1.,六位数字命名法,：,前三位数字表示系统,、集合或系列血型，,后三位,数字表示,血型抗原的特异性,。,001001ABO,系统,A,抗原；,004001Rh,系统,D,抗原,.,205,、,207,、,208,、,209,、,210,表示,5,个血型集合,.,207001,血型集合,抗原；,207002,血型集合,i,抗原,.,700,低频抗原；,901,高频抗原,.,红细胞血型,ISBT,命名：,1996,年,34,红细胞血型,ISBT,命名：,1996,年,2.,字母数字命名法,：,抗原：,血型系统符号用,2-4,个大写字母,表示，,血型抗原用字母加数字表示,。（,RH1,表示,Rh,血型系统,D,抗原）,表型：系统符号加冒号，再加上系统内各抗原编号，用逗号隔开，抗原缺失的在抗原编号前加“,-”,。,DCEceRH:1,2,-3,4,5,表示红细胞血型,基因和基因型,的,大写字母和数字符号,均用,斜体,字。,35,国际输血协会,(ISBT),分类：,308,个抗原,血型系统,(system),：,30,个，,270,个抗原,血型集合,(collection),：,6,个，,12,个抗原,血型系列,(series),：,901,系列,（高频组）：,8,个抗原,700,系列,（低频组）：,18,个抗原,(,八,),红细胞血型抗原分类,36,分 类,定 义,抗原数,血型系统,由独立遗传的单个基因座或多个紧密连锁的基因座上的等位基因编码的一组抗原。,30,个系统,270,个抗原,血型集合,在生物化学、血清学或遗传学上有相关性,但又达不到血型系统命名标准且与血型系统无关的血型抗原。,6,个集合,12,个抗原,低频率,700,系列,不能归类于血型系统和血型集合的血型抗原，在人群中分布频率,1%,。,18,个抗原,高频率,901,系列,不能归类于血型系统和血型集合的血型抗原，在人群中分布频率,90%,。,8,个抗原,国际输血协会,(ISBT),分类：,2009,年,37,分 类,定 义,抗原数,血型系统,由单一基因位点，或两个或多个紧密邻接的而其间又极少重组的同源基因所编码的一个或多个抗原组成。,29,个系统,221,个抗原,血型集合,在血清学、生物化学或遗传学上有相关性,但又达不到血型系统命名标准且与血型系统无关的血型抗原。,5,个集合,11,个抗原,低频率,700,系列,不能归类于血型系统和血型集合的血型抗原，在人群中抗原发生率小于,1%,。,22,个抗原,高频率,901,系列,不能归类于血型系统和血型集合的血型抗原，在人群中抗原发生率大于,90%,。,11,个抗原,国际输血协会,(ISBT),分类：,2004,年,38,六位数字命名法,：,前三位数字表示系统,、集合或系列血型，,后三位,数字表示,血型抗原的特异性,。,001001ABO,系统,A,抗原；,004001,Rh,系统,D,抗原,.,205,、,207,、,208,、,209,、,210,、,212,表示,6,个血型集合,.,207001,血型集合,抗原；,207002,血型集合,i,抗原,.,700,低频抗原；,901,高频抗原,.,红细胞血型,ISBT,命名：,1996,年,39,红细胞血型,ISBT,命名：,1996,年,字母数字命名法,：,抗原：,血型系统符号用,2-4,个大写字母,表示，,血型抗原用字母加数字表示,。（,RH1,表示,Rh,血型系统,D,抗原）,表型：系统符号加冒号，再加上系统内各抗原编号，用逗号隔开，抗原缺失的在抗原编号前加“,-”,。,DCEce,RH:1,2,-3,4,5,表示红细胞血型,基因和基因型,的,大写字母和数字符号,均用,斜体,字。,40,ISBT,1900,1926,1926,1939,1945,1946,1946,1950,1951,1955,1956,1962,1962,1965,1967,1940,1967,1952,1975,1960,1965,1970,1974,41,血型系统,ISBT,符号 编号 抗原数 基因名 染色体位点,Ok OK 024,1979,1,OK,RAPH MER2 025,1987,1,MER2,JMH JMH 026 1,JMH(CD108),I I 027 1,IGnT(GCNT2),6p24,Globoside GLOB 028 1,GalT3,3q25,GIL GIL 029 1,AQP3,9p13,RHAG RHAG 030 3,表,3-3,血型系统的命名和在染色体上的定位,(,续,),42,血型基因在染色体上的定位：,大多数血型基因位点都定位于,22,对常染色体上。,ABO,基因在,9,号染色体上；,RH,、,FY,和,SC,位点在,1,号染色体上；,H,、,Lewis,、,Lutheran,和,LW,位点在,19,号染色体；,XG,、,XK,位点在,X,染色体上。,43,二、红细胞血型抗体,(,一,),抗体,(antibody,，,Ab),：,是抗原刺激机体免疫,系,统产生,的一种免疫球蛋白，并且能和,抗原发生特异性结合反应。,44,免疫球蛋白,(immunoglobulin,Ig),分类,45,抗体的分子结构,46,免疫球蛋白的基本结构,“,Y”,型，四肽链,重链,(5,种,:,),轻链,(2,种,:,、,),可变区,（,V,区）,超变区,（,HVR,，,3,个，,又称,CDR,互补决定,区）,骨架区,: FR,（,4,个）,恒定区,（,C,区）,铰链区,:,蛋白酶敏感区,47,轻链：,VL,、,CL,重链：,VH,CH1,、,CH2,、,CH3,、,CH4,IgG IgM,IgA IgE,IgD,免疫球蛋白的功能区,功能区：是不连续，紧密折叠的区域，由重链和轻链经链内二硫键连接而成的球状结构。该区具有特殊的功能特性。,48,主要功能,:,1. VL,和,VH,是抗原结合的部位（,V,区）。,2. CL,和,CH,上具有同种异型的遗传标记。,3. IgG,的,CH2,和,IgM,的,CH3,具有补体固有成分,C1q,的结合点，参与激活补体系统。,4. CH3/CH4,具有结合包括单核细胞、巨噬细胞、,粒细胞、,B,细胞、,NK,细胞等细胞的,Fc,段受体,的功能。,5. IgG,的,CH2+CH3,具有介导,IgG,通过胎盘的特性。,49,50,51,52,1.,天然抗体（,IgM,）,免疫性抗体（,IgG,）, 冷抗体,22,24,不耐热 温抗体,37,耐热,易被可溶性血型物质中和 只能部分被可溶性血型物质中和,分子量,90,万 分子量,15,万,不能通过胎盘 能通过胎盘,ABO,Hh,Lewis,Ii,P,MNS. Rh:IgG1,和,IgG3,；抗,K,、抗,Fy:IgG1;,抗,JK:IgG3;,严重,HDN,常与,IgG1,有关,.,盐水中与相应,RBC,发生聚集 仅在酶处理或白蛋白溶液中聚集,被,2-Me,或,DTT,灭活 不被灭活,(,二,),各种,Ig,在输血中的意义,53,2. IgA,：,单体、二聚体、三聚体。,多聚体以,J,链及分泌片相连。,ABO,系统的抗,A,、抗,B,抗体中,IgA,占,30%,；缺乏,IgA,的患者血液中可能存在抗,IgA,抗体，输入含,IgA,的血液成分可能发生,严重的过敏反应,；,IgA,还能增强,IgG,诱导的溶血,。,3. IgE:,血浆中含量非常少，参与过敏反应。过敏原与,IgE,的,Fab,段结合时，,IgE,的,Fc,段与肥大细胞和嗜碱细胞结合，促使组胺释放，引起,过敏性输血反应,，但不参与溶血反应。,4. IgD:,血浆中含量少，与,B,细胞分化成熟有关。,(,二,),各种,Ig,在输血中的意义,54,1.,天然抗体,：没有可察觉的抗原刺激，机体内自然存在的抗体。,IgM,为主。,ABO,Hh,Ii,MN,P,Lewis,系统,.,产生：遗传；,细菌,类、花粉、尘埃等,类,A,、,B,抗原,2.,免疫抗体,:,由异型抗原刺激机体产生的抗体。,IgG,为主,.,常见于,Rh,Kell,Duffy,Kidd,MNSs,系统,.,产生：异型间的,输血；,血型不合的,妊娠；,肺炎球菌,感染,；某些,G,-,杆菌感染,.,注射,流感疫苗或破伤风抗毒血清；,(,三,),红细胞血型抗体的分类,55,天然抗体（,IgM,）,免疫性抗体（,IgG,）,温度低时抗体滴度高 温度升高时抗体滴度也高,冷抗体,4,25,不耐热 温抗体,37,耐热,易被可溶性血型物质中和 只能部分被可溶性血型物质中和,分子量,1000kD ,分子量,160kD,不能通过胎盘 能通过胎盘,盐水中,与相应,RBC,发生聚集 仅在,酶处理或白蛋白溶液,中聚集,被,2-Me,或,DTT,灭活 不被灭活,(,三,)ABO,血型系统抗体,56,3.,规则抗体,：符合,Landsteiner,规律产生的抗体,.,见于,ABO,系统,.,借此可进行,ABO,血型反定型。,4.,不规则抗体（意外抗体）,:,不符合,Landsteiner,规律,产生的抗体,.,见于其他血型系统。,正常人一般没有，输血前应常规检查。,(,三,),红细胞血型抗体的分类,57,6.,不完全抗体,：在,盐水,介质中能与相应,RBC,抗,原结合，形成,致敏,RBC,，但,不出现可见反应,并能阻止抗原再与相应完全抗,体结合。,多为,IgG,需用,Coombs,或其他,非盐水介质法,进行检测。,5.,完全抗体,：在,盐水,介质存在下能在试管中,与相应的红细胞抗原,结合,并出现,可见反应,。,多为,IgM.,(,三,),红细胞血型抗体的分类,58,8.,自身抗体,：针对自身抗原产生的抗,体。,引起,AIHA,，也可能,破坏输入的供者红细胞,。,有些无特异性，有些有特异性，常针对高,频抗原，如针对,Rh,蛋白。,7.,同种抗体,：针对患者缺乏的抗原所产生的,抗体。抗,D,抗体,.,(,三,),红细胞血型抗体的分类,59,9.,外源凝聚素,(Lectin),：抗体样物质,植物血凝素,(PHA),、动物血凝素,.,有血型特异性的凝集素：,双花扁豆有抗,-A1,凝集素；,葡萄蜗牛的蛋白腺体有抗,-A,凝集素；,欧洲荆豆有抗,-H,凝集素。,(,三,),红细胞血型抗体的分类,60,(,四,),红细胞血型抗体与相应抗原的反应及影响因素,1.,抗体引起红细胞凝聚分两步：,致敏阶段。,特点：稳定性低，不出现可见的反应现象。,凝集物或沉淀物的形成阶段：,Ag-Ab,复合物交联出现肉眼可见的凝集,物或沉淀物。,61,化学成分、空间结构要匹配。,外因：摇动、离心缩短距离，增加结合的机会。,最适比（,optimal ratio,）：,抗原抗体反应最快,沉淀物形成最多，上清液中几乎无游离抗原或抗体存在。,带现象（,zone phenomenon,）：,等价带前后分别为抗体或抗原过剩则无沉淀物形成。,前带（,prezone,）：,抗体过量,后带（,postzone,）,：抗原过剩,1.,影响因素,:,(1),红细胞抗原与抗体结合,62,抗原抗体比例对反应现象的影响,63,2.,Ag-Ab,之间的化学键,氢键、疏水键、静电键和范德华力四种。,静电（极性）引力：带相反电荷的氨基和羧基，与距离有关。,范德华力：原子与原子、分子与分子相互接近时分子极化发生的引力。,氢键结合力：氢原子与氢受体原子间的引力。,疏水作用力：两个疏水基团对水排斥而趋向聚集。,64,抗原抗体结合力示意图,抗原,抗体,氢键结合力,O,N,O,N,H,H,静电引力,-,-,+,+,范得华力,-,+,+,-,+,-,-,+,疏水作用力,排斥的水,65,2.,Ag-Ab,之间的化学键,Ag + Ab Ag-Ab,K,a,K,b,Ag-Ab,AgAb,=,K,a,K,b,=,K,0,离子强度,K,0,利于,Ag-Ab,生成,.,冷,Ab,降低,温度,利于,Ag-Ab,生成,.,温,Ab,在,37,利于,Ag-Ab,生成,.,pH, K,0,利于,Ag-Ab,分解,.,66,3.,红细胞与抗体凝集反应分级,4+： 一个结实的大凝块，背景清楚。,3+： 数个结实的凝块，背景清楚。,2+： 中等大小的凝块加小凝块，背景清楚。,1+： 小凝块，背景较浑浊。,/W+：,细胞有微小的凝块，背景红色浑浊，通常用,显微镜观察。,MF：,混合外观凝集，少数红细胞形成较大的凝,集块，而周围是游离的红细胞。,-/0,： 阴性，红细胞呈游离状态，无凝集现象,H：,溶血，有游离血红蛋白。,67,68,69,4.,红细胞凝集反应的影响因素,Ab,大小及数量：,IgM-,盐水介质凝集；,IgG-,抗球蛋白凝集；,A-RBC,连接,7000,个,IgM,的抗,A.,RBC,间静电排斥：酶处理破坏唾液酸,/,白蛋白,/,低离子强度介质利于凝集,.,RBC-Ag,性质：,Ag,位点多，密度大，突出细胞膜表面,(ABMN,抗原,),利于凝集,.,反应条件：；冷,Ab 4-10,；,温,Ab 37,；反应时间、离心增强凝集,.,70,5.,溶血反应,Ab +Ag Ab-Ag ,激活补体,溶血,阳性,6.,抑制作用,可溶性,Ag+Ab,可溶性,Ab-Ag ,抑制抗体的反应。,HAB,分泌型鉴定,溶血素,(hemolysin),71,The basics of salivary inhibition testing,72,(,五,),红细胞血型抗体的临床意义,引起红细胞寿命缩短、新生儿溶血病、溶血反应的抗体才有临床意义。,一般来说，,37,不与,RBC,反应的,Ab,无临床意义,.,无临床意义的,Ab,，输血时选择交叉配血相合的,RBC,。,输血前对患者进行常规意外抗体筛查阳性进一步鉴定,Ab,的特异性。,73,(,六,),红细胞血型抗体的检测,1.,意外抗体筛查：待检血清,+O,型试剂,RBC,O,型试剂,RBC,是已知,Rh,等主要血型系统抗原的,2-3,人份,RBC,。,应用常见抗原：,DCEce,、,MNSs,、,P,1,、,Le,a,Le,b,、,Kk,、,Fy,a,Fy,b,、,JK,a,JK,b,.,还应根据不同人群增加相应的抗原，如亚洲人群的筛查细胞应具有,M,ia,抗原。,74,(,六,),红细胞血型抗体的检测,2.,意外抗体鉴定：确定特异性,(1),自身细胞检查：自身抗体或与同种抗体共存,(2),谱红细胞鉴定抗体特异性：,8-16,人份已知抗原的,O,型红细胞组成。,阴性反应，以排除方式推测抗体特异性；,同种抗体的特异性不应针对自身红细胞抗原；,存在一种抗体，鉴定较容易；,多种抗体或自身抗体，鉴定较难，须借助血型物质,抑制试验、吸收放散试验等鉴定。,75,(,六,),红细胞血型抗体的检测,2.,意外抗体鉴定：确定特异性,(1),自身细胞检查：自身抗体或与同种抗体共存,(2),谱红细胞鉴定抗体特异性：,蛋白酶破坏的抗原有：,JMH,Inb,Ge2,Yta,S,s,Fya,Fyb.,蛋白酶不破坏的抗原有：,Rh,Kell,Kidd,Colton,Sciana,Diego,76,(,六,),红细胞血型抗体的检测,2.,意外抗体鉴定：确定特异性,(3),吸收放散试验：待检血清中,2,种同种抗体,(4),自身红细胞抗原表型：判断血清抗体特异性,Ab1,Ab2,+,已知,Ag-RBC,+,谱,RBC,不凝,Ab2 Ag-RBC,凝集谱,RBC +,Ab1,Ab2-Ag-RBC,吸收,放散,77,几种,A,亚型红细胞上的,A,抗原,78,H,抗原强弱：,OA2 B A2B A1 A1B,79,