湖南省食品科学技术实验教学中心

单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,Page,*,单击此处编辑母版标题样式,湖南省食品科学技术实验教学中心,食 品 分 析 实 验,使用专业：食品科学与工程,食品质量与安全,食品加工与卫检专科,郭华 罗凤莲 合编制,实验教学中心,200,9,年,9,月,实 验 项 目,实验一 食品中水分含量的测定,直接干法,实验二 食品中水分含量的测定,蒸馏法,实验三 食品中水分活度的测定,扩散法,实验四 食品中总灰分的测定,实验五 水溶性灰分及水不溶性灰分的测定,实验六,酸溶性及酸不溶性灰分的测定,2,实验七 果蔬中总酸的测定,实验八 蛋白质的测定,微量凯氏定氮法,实验九 蛋白质的测定,双缩脲法,实验十 氨基酸总量测定,双指示剂法,实验十一 脂肪的测定,索氏提取法,实验十二 还原糖的测定,直接滴定法,实验十三 还原糖的测定, 3,，,5,二硝基水杨酸比色法,3,实验十四 可溶性总糖的测定,实验十五 淀粉的测定,酶水解法,实验十六 淀粉的测定,酸水解法,实验十七 酱油中氯化钠含量的测定,莫尔法,实验十八 肉制品中亚硝酸钠的测定,实验十九 二氧化硫的测定,实验二十 食品中钙含量的测定,4,实验二十一 果蔬制品中铁含量的测定,实验二十二 碘含量的测定,氯仿萃取比色法,实验二十三 铜含量的测定,实验二十四 食品中砷的测定,实验二十五 硒含量的测定,二氨基萘荧光光度法,实验二十六 黄曲霉毒素,B,1,的测定,5,实验一 食品中水分含量的测定,直接干燥法,一、实验目的,掌握用直接干燥法来测定食品中水分含量及干燥箱的使用方法。,二、实验原理,基于食品中的水分受热以后，产生的蒸汽压高于空气在电热干燥箱中的分压，使食品中的水分蒸发出来，同时，由于不断的加热和排走水蒸汽，而达到完全干燥的目的，食品干燥的速度取决于这个压差的大小。,6,三、适用范围,该法适用于在,95,l05,范围内不含或含其他挥发性成分极微且对热稳定的各种食品。,四、仪器及试剂,仪器：,1.,称量皿,2.,干燥器,3.,坩埚钳,4.,鼓风干燥箱,5.,分析天平（精确到,0.0001g,）,试剂：变色硅胶,7,五、实验步骤,1.,固态样品,固态样品必须磨碎，全部经过,20,40,目筛，混匀。在磨碎过程中，要防止样品中水分含量变化。,制备好的样品存于干燥洁净的磨口瓶中备用。测定时，精确称取上述样品,2,10g(,视样品性质和水分含量而定,),，置于已干燥、冷却并称至恒重的有盖称量瓶中，移入,95,l05,常压烘箱中，瓶盖斜支于称量瓶上烘,2,4h,后取出，加盖置干燥器内冷却,0.5h,后称重。再烘,1h,左右，又冷却,0.5h,后称重。重复此操作，直至前后两次质量差不超过,2mg,即算恒重。,8,测定结果按下式计算：,式中：,m,1,干燥前样品与称量瓶质量, g,m,2,干燥后样品与称量瓶质量, g,m,3,称量瓶质量, g,9,对于水分含量在,16,以上的面包类样品，通常采用二步干燥法进行测定。首先将样品切分，称取一定质量样品后，在自然条件下风干,15,20h,，使其达到安全水分标准，再准确称重，然后再将风干样品粉碎、过筛、混匀，按上述安全水分含量的样品的操作步骤进行。,10,分析结果按下式计算：,式中：,m,1,新鲜样品总质量, g,m,2,风干后样品总质量, g,m,3,干燥前样品与称量瓶质量, g,m,4,干燥后样品与称量瓶质量, g,m,5,称量瓶质量, g,11,2.,浓稠态样品,浓稠态样品直接加热干燥，其表面易结硬壳焦化、使内部水分蒸发受阻，故在测定前，需加入精制海砂或无水硫酸钠，搅拌均匀，以增大蒸发面积。但测定中，应先准确称样， 再加入已知质量的海砂或无水硫酸钠，搅拌均匀后干燥至恒重。,12,测定结果按下式计算：,式中：,m,1,干燥前样品与称量瓶质量, g,m,2,海砂（或无水硫酸钠）质量, g,m,3,干燥后样品与称量瓶质量, g,m,4,称量瓶质量, g,13,3.,液态样品,液态样品直接置于高温下加热，会因沸腾而造成样品损失，故需经低温浓缩后，再进行高温干燥。测定时先准确称样于已烘干至恒重的蒸发皿内，置于热水浴上蒸发至近干，再移入干燥箱中干燥至恒重。结果计算公式同上述一步干燥法。,14,六、操作条件选择,1.,称样数量：,称样数量一般控制在其干燥后的残留物质量在,1.5,3.0g,为宜。对于固态、浓稠态食品，将称样数量控制在,3,5g,，而液态食品每份样量控制在,15,20g,为宜。,2.,称量皿规格：,称量皿分为玻璃称量瓶和铝质称量盒两种。前者能耐酸碱，不受样品性质的限制，故常用于干燥法。铝质称量盒质量轻，导热性强，但对酸性食品不适宜，常用于减压干燥法。称量皿规格的选择，以样品置于其中平铺开后厚度不超过皿高的,1,3,为宜。,15,3.,干燥设备,:,一般使用风量可调节的循环通风式电热烘箱。温度计通常处于离上隔板,3cm,的中心处，一批测定的称量皿最好为,8,12,个，并排放在隔板的较中心部位。,4.,干燥条件：,温度一般控制在,95,105,，对热稳定的谷物等，可提高到,120,130,范围内进行干燥；对含还原糖较多的食品应先用低温,(50,60),干燥,0.5h,，然后再用,100,105,干燥。,16,七、说明及注意事项,1.,水果、蔬菜样品，先洗去泥沙，用纱布吸干表面水分。,2.,在测定过程中，称量皿从烘箱中取出后应迅速放入干燥器中进行冷却，否则不易达到恒重。,3.,干燥器内一般用硅胶作干燥剂，当硅胶蓝色减褪或变红时，需及时换出，置,120,左右烘,2h,3h,使其再生后再用。,4.,果糖含量较高的样品，如水果制品、蜂蜜等，在高温下,(,70),长时间加热，其果糖会发生氧化分解作用而导致明显误差，故宜采用减压干燥法测定水分含量。,17,5.,含有较多氨基酸、蛋白质及羰基化合物的样品则会发生碳氨反应析出水分而导致误差，对此类样品宜用其他方法测定水分含量。,6.,在水分测定中，恒重的标准一般定为,1,3mg,，依食品种类和测定要求而定。,7.,对于含挥发性组分较多的样品，如香料油、低醇饮料等宜采用蒸馏法测定水分含量。,8.,测定水分后的样品，可供测脂肪、灰分含量用。,18,实验二 食品中水分含量的测定,蒸馏法,一、实验目的,掌握用蒸馏法测定食品中的水分含量及蒸馏装置的使用。,二、实验原理,基于两种互不相溶的液体二元体系的沸点低于各组分的沸点这一原理，将食品中的水分与甲苯、二甲苯或苯共沸蒸出，冷凝并收集馏液。由于密度不同，馏出液在接收管中分层，根据馏出液中水的体积，即可计算出样品中水分含量。,19,三、适用范围,该法设备简单，操作方便，现已广泛用于谷类、果蔬、油类、香料等多种样品的水分测定，特别对于香料，此法是唯一公认的水分含量的标准分析法 。,四、仪器及试剂,甲苯或二甲苯：取甲苯或二甲苯，先以水饱和后，分去水层，进行蒸馏，收集馏出液备用。,20,五、实验方法,准确称取适量样品，放入水分测定仪的烧瓶中，加入新蒸馏的甲苯,(,或二甲苯,)50,75mL,使样品浸没，连接冷凝管及接收管，从冷凝管顶端注入甲苯,(,或二甲苯,),，使之充满水分接收刻度管。 先慢慢加热蒸馏，使每秒钟约蒸出,2,滴馏出液，待大部分水分蒸出后，加速蒸馏使每秒钟约蒸出,4,滴馏出液，当水分全部蒸出后,(,接收管内水的体积不再增加时,),，从冷凝管顶端注入少许甲苯,(,或二甲苯,),冲洗。如发现冷凝管壁或接收管上部附有水滴，可用带有小橡皮头的铜丝擦下，再蒸馏片刻直至接收管上部及冷凝管壁无水滴附着为止。读取接收管水层的容积。,21,六、结果计算,式中：,V,接收管内水的体积，,ml,W,样品的质量, g,七、说明及注意事项,1.,样品用量,：,谷类、豆类约,20g,，鱼、肉、蛋、乳制品约,5,10g,，蔬菜、水果约,5g,。,22,2.,有机溶剂一般用甲苯，对于在高温易分解样品则用苯作蒸馏溶剂,(,纯苯沸点为,80.2,，水,苯混合物其沸点为,69.25),，但蒸馏的时间需延长。,3.,加热温度不宜太高，温度太高时冷凝管上端水汽难以全部回收。蒸馏时间一般为,1,2h,，样品不同则蒸馏时间各异。,4.,为了尽量避免接收管和冷凝管壁附着水滴，仪器必须洗涤干净。,23,实验三 食品中水分活度的测定,扩散法,一、实验目的,掌握用康威氏,(Conway),微量扩散皿测定食品的水分活度方法。,二、实验原理,样品在康威氏微量扩散皿的密封和恒温条件下，分别在,Aw,较高和较低的标准饱和溶液中扩散平衡后，根据样品质量的增加和减少的量，求出样品的,Aw,值。,24,三、主要仪器,1.,康威氏微量扩散皿：（每组,3,4,个）,2.,分析天平：感量,0.0001g,3.,小铝皿或玻璃皿：直径,25mm,、深度,5mm,的圆形小 皿，放样品用（每组,3,4,个）,4.,恒温箱：,070,可调。,四、试剂,标准水分活度试剂如表,3-1,所示,25,表,3-1,标准水分活度试剂及其在,25,时的,Aw,值,26,五、操作方法,在预先准确称重过的铝皿或玻璃皿中，准确称取约,1.000g,均匀切碎样品，迅速放入康威氏皿的内室中。在康威氏皿的外室预先放入标准饱和试剂,5mL,，或标准的上述各式盐,5.0g,，加入少许蒸馏水润湿。操作时选择,3,4,份标准饱和试剂,(,每只皿装一种,),，其中,1,2,份的,Aw,值大于或小于试样的,Aw,值。然后在扩散皿磨口边缘均匀地涂上一层凡士林。加盖密封后在,250.5,温度下放置,20.5 h,，然后取出铝皿或玻璃皿，用分析天平迅速称重，记录下各称量值，并分别计算各样品每克质量的增减数。,27,六、结果计算,以各种标准饱和溶液在,25,时的,Aw,值为横坐标，每克样品质量增减数,W,为纵坐标在方格坐标纸上作图，将各点连结成一条直线，此线与横轴的交点即为所测样品的,Aw,值。,七、说明及注意事项,1.,每个样品测定时应作平行试验。其测定值的平行误差不得超过,0.02,。,2.,取样要在同一条件下进行，操作要迅速。,28,3.,试样的大小和形状对测定结果影响不大。,4.,康威氏微量扩散皿密封性要好。,5.,取食品的固体或液体部分，样品平衡后其结果没有差异。,6.,绝大多数样品可在,2,小时后测得,Aw,值，但米饭类、油脂类、油浸烟熏鱼类则需,4,天左右时间才能测定。为此，需加入样品量,0.2,的山梨酸防腐，并以山梨酸的水溶液作空白。,29,实验四 食品中总灰分的测定,一、实验目的,掌握食品中总灰分的测定方法及灰化炉的使用。,二、实验原理,把一定量的样品经炭化后放入高温炉内灼烧，使有机物质被氧化分解，以二氧化碳、氮的氧化物及水等形式逸出，而无机物质以硫酸盐、磷酸盐、碳酸盐等无机盐和金属氧化物的形式残留下来，这些残留物即为灰分，称量残留物的重量即可计算出样品中总灰分的含量。,30,三、实验仪器,1.,箱式电阻炉,2.,瓷坩埚,3.,坩埚钳,4.,干燥器,5.,分析天平,四、实验试剂,1. (1+4),盐酸溶液,2. 0.5,三氯化铁溶液和等量蓝墨水的混合液,3. 6mol/L,硝酸,4. 30%,过氧化氢,5.,辛醇或纯植物油,31,五、测定步骤,1.,瓷坩埚的准备,将坩埚用,(1+4),盐酸煮,1,2 h,，洗净晾干后，用三氯化铁与蓝墨水的混合液在坩埚外壁及盖上写上编号，置于规定温度,(55025 ),的中灼烧,0.5 h,，,移至炉口冷却到,200 ,左右后，再移入干燥器中，冷却至室温后准确称重，再放入高温炉内灼烧,30min,，取出冷却称重，直至恒重,(,两次称量之差不超过,0.5 mg),。,2.,称样,通常奶粉、麦乳精、大豆粉、调味料及海产品等取,1,2 g;,谷物及其制品、肉及其制品、糕点、牛乳等取,3,5 g,；蔬菜及其制品、砂糖及其制品、淀粉及其制品、蜂蜜、奶油等取,5,10 g,；水果及其制品取,20 g,油脂取,50 g,。,32,3.,样品预处理,液体试样,准确称取适量试样于已知重量的瓷坩埚,(,或蒸发皿,),中，置于水浴上蒸发至近干，再进行炭化。这类样品若直接炭化，液体沸腾，易造成溅失。,含水分较多的试样,准确称取适量试样于已知重量的坩埚中，置烘箱中干燥，再进行炭化。也可取测定水分后的干燥试样直接进行炭化。,含量较少的固体试样,先粉碎成均匀的试样，取适量试样于已知重量的坩埚中再进行炭化。,富含脂肪的样品,把试样制备均匀，准确称取一定量试样提取脂肪，再将残留物移入已知重量的坩埚中，进行炭化。,33,4.,炭化,把坩埚置于电炉或煤气灯上，半盖坩埚盖，小心加热使试样在通气情况下逐渐炭化，直至无黑烟产生。对特别容易膨胀的试样,(,如含糖多的食品,),，可先在试样上加数滴辛醇或纯植物油，再进行炭化。,5.,灰化,：,炭化后，把坩埚移入已达规定温度,(55025),的高温炉炉口处稍停留片刻，再慢慢移入炉膛内，灼烧一定时间至灰中无碳粒存在时，打开炉门，将坩埚移至炉口处冷却至,200,左右，移入干燥器中冷却,30min,，取出准确称重、再灼烧、冷却、称重，直至前后两次称量相差不超过,0.5 mg,为恒量。,34,六、结果汁算,式中 ：,m,1,空坩埚质量, g,m,2,样品加空坩埚质量, g,m,3,残灰加空坩埚质量, g,七、说明,1.,样品炭化时要注意热源强度，防止产生泡沫溢出坩埚。,2.,把坩埚放入高温炉或从炉中取出时，要放在炉口停留片刻，使坩埚预热或冷却，防止因温度剧变而使坩埚破裂。,35,3.,灼烧后的坩埚应冷却到,200,以下再移入干燥器中，否则因热的对流作用，易造成残灰飞散，且冷却速度慢，冷却后干燥器内形成较大真空，盖子不易打开。,4.,从干燥器中取坩埚时，开干燥器盖时应注意使空气缓缓流入，以防残灰飞散。,5.,灰化后所得残渣可留作,Ca,、,P,、,Fe,等成分的分析。,6.,新坩埚在使用前须在盐酸溶液（,1+4,）中煮沸,1,2h,，然后用自来水和蒸馏水分别冲洗干净并烘干。用过的旧坩埚经初步清洗后，可用粗盐酸或废盐酸浸泡,10,20min,再用水来冲洗洁净。,36,实验五 水溶性灰分及水不溶性 灰分的测定,向测定总灰分所得残留物中加入,25mL,无离子水，盖上表面皿，加热至近沸。用无灰滤纸过滤，用,25mL,热的无离子水分多次洗涤坩埚、滤纸及残渣，将残渣连同滤纸移回原坩埚中，在水浴上蒸发至干涸，放入干燥箱中干燥，再进行炭化、灼烧、冷却、称重、直至恒重。,37,水不溶性灰分含量,式中 ：,m,4,不溶性灰分和坩埚质量, g,其他符号意义同总灰分的计算,水溶性灰分含量,水溶性灰分,(,) =,总灰分,(,),水不溶性灰分,(,),38,实验六 酸溶性灰分及酸不溶性 灰分的测定,向总灰分或水不溶性灰分中加入,25mL,（,1,9,）盐酸，盖上表面皿，小火加热煮沸,5min,。用无灰滤纸过滤，用热水洗涤至滤液无,Cl,-,反应为止。将残渣和滤纸一同放入原坩埚中，进行干燥、炭化、灼烧、冷却、称重、直至恒重。,39,酸不溶性灰分含量,式中：,m,5,酸不溶性灰分和坩埚质量, g,其他符号意义同总灰分的计算,酸溶性灰分含量,酸溶性灰分,(,) =,总灰分,(,),酸不溶性灰分,(,),40,实验七 果蔬制品中总酸的测定,一、实验目的,掌握果蔬制品中总酸的测定方法及滴定管的使用。,二、实验原理,食品中的有机弱酸在用标准碱液滴定时，被中和生成盐类。用酚酞作指示剂，当滴定至终点,(pH=8.2,，指示剂显微红色,),时，根据耗用标准碱液的体积，可计算出样品中总酸含量。,41,三、适用范围,本法适用于各类颜色较浅的食品中总酸含量的测定,。,四、仪器及试剂配置,仪器：,1.,分析天平,2.,容量瓶,3.,烧杯,4.,锥形瓶,5. 9cm,漏斗,6.,碱式滴定装置,试剂：,1.,邻苯二甲酸氢钾,AR,2. 0.1mol,L NaOH,标准溶液,42,五、操作方法,1,氢氧化钠标准溶液的标定,精密称取,0.6g (,准确至,0.0001g),在,105,110,干燥至恒重的基准邻苯二甲酸氢钾，加,50mL,去,CO,2,的蒸馏水，振摇使其溶解，加,2,滴酚酞指示剂，用,NaOH,标准溶液滴定至溶液呈微红色,30,秒不褪。同时做空白试验。,计算：,式中：,C,氢氧化钠标准溶液的浓度，mol /L；,m,基准邻苯二甲酸氢钾的质量，g；,V,1,标定时所耗用氢氧化钠标准溶液的体积，mL；,V,2,空白试验中所耗用氢氧化钠标准溶液的体积，mL；,0.2042,1.000 mol/L,相当的邻苯二甲酸氢钾的质量, g,。,43,2.,样液制备, 固体样品样品：,将样品用粉碎机或高速组织捣碎机捣碎并混合均匀。取适量样品,(,按其总酸含量而定,),，用,15mL,无,CO,2,蒸馏水,(,果蔬干品须加,8,9,倍无,CO,2,蒸馏水,),将其移入,250mL,容量瓶中，在,75,80,水浴上加热,0.5h(,果脯类沸水浴加热,1h),冷却后定容，用干燥滤纸过滤，弃去初始滤液,25mL,，收集滤液备用。,含,CO2,的饮料、酒类：,将样品置于,40,水浴上加热,30min,，以除去,CO2,，冷却后备用。,44, 调味品及不含,CO,2,的饮料、酒类,： 将样品混匀后直接取样，必要时加适量水稀释,(,若样品混浊，则需过滤,),。, 咖啡样品：,将样品粉碎通过,40,目筛，取,10g,粉碎的样品于锥形瓶中，加入,75mL 80,乙醇，加塞放置,16h,，并不时摇动，过滤。,3.,样液滴定,准确吸取样液,50mL,，加入酚酞指示剂,3,4,滴，用,0.1mol,L NaOH,标准溶液滴定至微红色,30,秒不褪，记录消耗,0.1mol,L NaOH,标准溶液,mL,数。,45,六、结果计算,式中：,C,标准NaOH溶液的浓度，mol /L；,V,滴定消耗标准NaOH标准液体积，mL；,m,样品质量或体积，g或mL；,V,0,样品稀释液总体积，mL；,V,1,滴定时吸取的样液体积，,mL,；,K,换算为主要酸的系数。,46,因食品中含有多种有机酸，总酸度测定结果通常以样品中含量最多的那种酸表示。一般分析葡萄及其制品时，用酒石酸表示，,K= 0.075,；分析柑桔类果实及其制品时，用柠檬酸表示，,K= 0.064,或,0.070(,带一分子水,),；分析苹果、核果类果实及其制品时，用苹果酸表示，,K= 0.067,；分析乳品、肉类、水产品及其制品时用乳酸表示，,K= 0.090,；分析酒类、调味品时，用乙酸表示，,K= 0.060,。,47,七、说明,1.,浸渍样品和稀释用的蒸馏水必须除去,CO,2,。即将蒸馏水在使用前煮沸,15min,并迅速冷却备用。样品中,CO,2,对测定有干扰，对含有,CO,2,的饮料、酒类等样品须除去,CO,2,。,2.,样液制备方法、浸渍与稀释用水量和滴定方法等应根据样品中总酸含量来慎重选择，为使误差不超过允许范围一般要求滴定时消耗,0.1mol /L NaOH,溶液不得少于,5mL,最好在,10,15mL,。,3.,若样液带有颜色，则在滴定前用与样液同体积的不含,CO,2,蒸馏水稀释之或采用试验滴定法测定。,48,实验八 蛋白质的测定,微量凯氏定氮法,一、实验目的,掌握用微量凯氏定氮法测定蛋白质的含量的方法。,二、实验原理,样品与浓硫酸、催化剂一同加热消化，使蛋白质分解，其中碳和氢被氧化为二氧化碳和水逸出，而样品中的有机氮转化为氨与硫酸结合成硫酸铵。然后加碱蒸馏，使氨蒸出，用硼酸吸收后再以标准盐酸或硫酸溶液滴定。根据标准酸消耗量可计算出蛋白质的含量。,49,三、适用范围,此法可应用于各类食品中蛋白质含量的测定。,四、仪器、试剂及玻皿配置,仪器：,1.,凯氏烧瓶,2.,微量凯氏定氮装置,3.,锥形瓶,4.,分析天平,5.,酸式滴定装置,6.,容量瓶,试剂：,1.,浓硫酸,2.,硫酸铜,3.,硫酸钾,4. 40%,氢氧化钠溶液,5. 4%,硼酸吸收液,6. 0.1000 mol/L,盐酸标准溶液：,7.,甲基红,-,溴甲酚绿混合指示剂,50,半微量凯氏消化与定氮装置,51,微量凯氏定氮装置,52,五、操作方法,1.,盐酸标准溶液的标定：,精密称取分析纯硼砂约,1.9g,，放入,100 mL,烧杯中，加入,20,30 mL,蒸馏水使其溶解转入,100 mL,容量瓶中，用少量蒸馏水淌洗烧杯,3,4,次，洗涤液一并转入容量瓶中，定容至,100 mL,，,摇匀备用。,准确吸取上述硼砂标准溶液,20.00 mL,，放入,100 mL,锥形瓶中，加入,2,3,滴甲基红,-,溴甲酚绿混合指示剂。用盐酸溶液滴定至恰好变为橙色即为终点。由消耗盐酸的体积，计算盐酸的准确浓度。,53,2.,样品测定：,准确称取固体样品,0.20 g,2.00 g(,半固体样品,2.00 g,5.00 g,，液体样品,10.00 mL,20.00 mL),，小心移入干燥洁净的,500 mL,凯氏烧瓶中，然后加入研细的硫酸铜,0.5 g,、硫酸钾,10 g,和浓硫酸,20 mL,，摇匀后，安装好消化装置，于凯氏瓶口放一小漏斗，并将其以,45,角斜支于石棉网上。用电炉以小火加热，待内容物全部炭化泡沫停止产生后，加大火力，保持瓶内液体微沸，至液体变蓝绿色透明后，再继续加热微沸,30 min,。停止加热，待消化液冷却后，转入,100 mL,容量瓶中，加蒸馏水至刻度，摇匀。,54,3.,蒸馏与滴定,装好微量定氮装置，准确移取消化稀释液,10 mL,于反应管内，经漏斗再加入,10 mL 40%,氢氧化钠溶液使呈强碱性，用少量蒸馏水洗漏斗数次，夹好漏斗夹，进行水蒸汽蒸馏。冷凝管下端预先插入盛有,30 mL 2%,硼酸吸收液的液面下。蒸馏至吸收液中所加的混合指示剂变为蓝绿色开始计时，继续蒸馏,10 min,后，将冷凝管尖端提离液面再蒸馏,1 min,，用蒸馏水冲洗冷凝管尖端后停止蒸馏。馏出液用,0.1000 mol/L HCl,标准溶液滴定至微红色为终点。同时做一空白试验。,55,六、结果计算,1.,盐酸准确浓度的计算,式中：,C,盐酸标准溶液的摩尔浓度，mol /L,W,硼砂,硼砂的质量，g,V,HCl,消耗盐酸的体积，,mL,0.1906,与,1.00mL,盐酸标准溶液,c(HCl),1.000 mol/L,相当的硼砂的质量，,g,56,2.,样品中粗蛋白的含量,式中：,C,盐酸标准溶液的浓度，,mol/L,V,1,滴定样品吸收液时消耗盐酸标准溶液体积，mL,V,2,滴定空白吸收液时消耗盐酸标准溶液体积，mL,m,样品质量，g,M,氮,样品稀释液总体积，mL,F,换算为主要酸的系数，即,1,毫摩尔氢氧化钠相当于主要酸的克数。,57,七、说明,1.,所用试剂溶液应用无氨蒸馏水配制。,2.,消化时不要用强火，应保持和缓沸腾并不时转动凯氏烧瓶，以便利用冷凝酸液将附在瓶壁上的固体残渣洗下。,3.,样品中若含脂肪或糖较多时，消化过程中易产生大量泡沫。为防止泡沫溢出瓶外，在开始消化时应用小火加热，或者加入少量消泡剂如辛醇，同时注意控制热源强度。,4.,当样品消化液不易澄清透明时，可将凯氏烧瓶冷却，加入,30%,过氧化氢,2,3mL,后再继续加热消化。,5.,蒸馏装置不能漏气,蒸馏前若加碱量不足，消化液呈蓝色不生成氢氧化铜沉淀，此时需再增加氢氧化钠用量。,58,实验九 食品中蛋白质的测定,双缩脲法,一、实验目的,掌握用双缩脲法测定蛋白质的方法及分光光度计的使用。,二、实验原理,当脲被小心地加热至,150,160,时，可由两个分子间脱去一个氨分子而生成双缩脲。双缩脲与碱及少量硫酸铜溶液作用生成紫红色的配合物。由于蛋白质分子中含有肽键,(-CO-NH-),，与双缩脲结构相似，故也能呈现此反应而生成紫红色配合物，在一定条件下其颜色深浅与蛋白质含量成正比，据此可用吸收光度法来测定蛋白质含量。,59,三、方法特点及应用范围,本法灵敏度较低，但操作简单快速，可适用于豆类、油料、米谷等作物种子及肉类等样品测定。,四、主要仪器试剂及玻皿配置,仪器,1.,分光光度计,2.,离心机,(4000r/min),3. 50 mL,纳氏比色管,试剂,1.,四氯化碳,(CCl,4,),2.,碱性硫酸铜溶液,以甘油为稳定剂，将,10 mL10 mol/L,氢氧化钾和,3.0 mL,甘油加到,937 mL,蒸馏水中，激烈搅拌，同时慢慢加入,50 mL 4%,硫酸铜,(CuSO,4,5H,2,O),溶液。,60,五、操作方法,1.,标准曲线的绘制,以采用凯氏定氮法测出蛋白质含量的样品作为标准蛋白质样。按蛋白质含量,40 mg,、,50 mg,、,60 mg,、,70 mg,、,80 mg,、,90 mg,、,100 mg,、,110 mg,分别称取混合均匀的标准蛋白质样于,8,支,50 mL,纳氏比色管中，然后各加入,1 mL,四氯化碳，再用碱性硫酸铜溶液准确稀释至,50 mL,，振摇,10 min,，,40,水浴放置,40min,，取上层清液离心,10 min,，取离心后的透明液于比色皿中。在,560 nm,波长下以蒸馏水作参比液调零，测定各溶液的吸光度,A,，以蛋白质的含量为横坐标、吸光度,A,为纵坐标绘制标准曲线。,61,2.,样品的测定：,样品粉碎过,60,目筛，,准确称取样品适量,(,使得蛋白质含量在,40 mg,110 mg,之间,),于,50 mL,纳氏比色管中，加,1 mL,四氯化碳，按上述步骤显色后，在相同条件下测其吸光度,A,。查标准曲线得蛋白质,mg,数，计算蛋白质含量。,六、结果汁算,式中：,C,由标准曲线上查得的蛋白质,mg,数,m,样品质量，g,62,实验十,氨基酸总量测定,双指示剂甲醛滴定法,一、实验目的,掌握用双指示剂甲醛滴定法测定氨基酸总量的方法。,二、实验原理,氨基酸具有酸性的,-C00H,基和碱性的,-NH,2,基。它们相互作用而使氨基酸成为中性的内盐。当加入甲醛溶液时，,-NH,2,基与甲醛结合，使其碱性消失。这样就可以用强碱标准溶液来滴定,-C00H,基，间接测定氨基酸总量。,63,三、仪器试剂及玻皿配置,仪器,1.,锥形瓶,2.,量筒,3.,移液管,4.,分析天平,5.,碱式滴定装置,试剂,1. 40%,中性甲醛溶液： 以百里酚酞作指示剂，用氢氧化钠将,40%,甲醛中和至淡蓝色,2. 0.1%,百里酚酞乙醇溶液,3. 0.1%,中性红,50%,乙醇溶液,64,四、操作方法,准确吸取含氨基酸约,20 mg,30 mg,的样品溶液,2,份，分别置于,250 mL,锥形瓶中，各加,50 mL,蒸馏水，其中,l,份加入,3,滴中性红指示剂，用,0.100 0 mol/L,氢氧化钠标准溶液滴定至由红变为琥珀色为终点；另,1,份加入,3,滴百里酚酞指示剂及中性甲醛,20 mL,，摇匀，静置,1 min,，用,0.100 0 mol/L,氢氧化钠标准溶液滴定至淡蓝色为终点。分别记录两次所消耗的碱液体积。,65,五、结果计算,式中：,C,氢氧化钠标准溶液的浓度，,mol/L,V,1,用中性红作指示剂滴定时消耗氢氧化钠标准溶液体积，,mL,V,2,用百里酚酞作指示剂滴定时消耗氢氧化钠标准溶液体积，mL,m,测定用样品溶液相当于样品的质量，g,0.014,氮的毫摩尔质量，,g/mmol,66,六、说明及注意事项,1.,此法适用于测定食品中的游离氨基酸。,2.,固体样品应先进行粉碎，准确称样后用水萃取，然后测定萃取液；液体试样如酱油、饮料等可直接吸取试样进行测定。萃取可在,50,水浴中进行,0.5 h,即可。,3.,若样品颜色较深，可加适量活性炭脱色后再测定，或用电位滴定法进行测定。,4.,与本法类似的还有单指示剂,(,百里酚酞,),甲醛滴定法，此法用标准碱完全中和,-C00H,基时的,pH,为,8.5,9.5,，但分析结果稍偏低，即双指示剂法的结果更准确。,67,实验十一 大豆中脂肪的测定,索氏提取法,一、实验目的,掌握用索氏提取法测定大豆中脂肪的方法及索氏提取器的使用。,二、实验原理,将粉碎干燥的样品用无水乙醚或石油醚等溶剂回流提取，使样品中的脂肪进入溶剂中，回收溶剂后所得到的残留物，即为粗脂肪。其中主要成分是游离脂肪，此外还含有磷脂、色素、树脂、挥发油、糖脂等物质。,68,索氏提取法,Soxhlet extractor method,Dried,sample,Crude,lipids,Evaporating,solvent,Solvent,extracting,Principle,69,三、适用范围与特点,此法适用于脂类含量较高，结合态脂类含量较少，结构疏松，能烘干磨细，不易吸湿结块样品的测定。,四、仪器及试剂,仪器,1.,索氏抽提器,2.,恒温水浴锅,3.,干燥箱,4.,分析天平（精确到,0.0001g,）,5.,干燥器,试剂,1.,无水乙醚或石油醚,2.,海砂,70,五、测定方法,1.,样品处理,固体样品；精密称取干燥并研细的样品,2,5g(,可取测 定水分后的样品，无损地移入滤纸筒内。,半固体或液体样品：称取,5.0,10.0g,于蒸发皿中，加 入海砂约,20g,于沸水浴上蒸干后，再于,95,105,烘干、研细， 移入滤纸筒内。,2.,脂肪抽提,将滤纸筒封口后放入抽提筒内，连接已干燥至恒重的脂肪接受瓶，从冷凝管上端加入,无水乙醚,或石油醚,100-150mL,，通入冷凝水，于水浴上,(,夏天,40,，冬天,55,),加热回流提取,6,12h,。,71,3.,回收溶剂、烘干、称重,取出滤纸筒，重新安装好索式提取器，利用抽提筒回收乙醚或石油醚。待接受瓶内乙醚只剩下,1,2mL,时，取下接受瓶，在水浴上挥发去掉溶剂，再于,100,105,干燥,2h,，取出放干燥器内冷却,30min,，称重，并重复操作至恒重。,式中 ：,m,样品的质量(如为测定水分后的样品,以测定水分,前的质量计)，g,m,1,接受瓶质量, g,m,2,接受瓶和脂肪的质量, g,72,实验十二 还原糖的测定,直接滴定法,一、实验目的,掌握用直接滴定法测定食品中还原糖的方法。,二、实验原理,样品经除去蛋白质后，在加热条件下，以次甲基蓝作为指示剂，用样液直接滴定标定过的碱性酒石酸铜溶液，达到终点时，稍过量的还原糖把蓝色的次甲基蓝指示剂还原为无色，而显出氧化亚铜的砖红色。根据样品液消耗体积，计算出样品中还原糖的含量。,73,各步反应式（以葡萄糖为例）如下：,(1) Cu,2,SO,4,2 NaOH = 2 Cu(OH),2,Na,2,SO,4,(2) Cu(OH),2,KNaC,4,H,4,O,6,= KNaC,4,H,2,O,6,Cu,2H,2,O,(3) C,6,H,12,O,6,6KNaC,4,H,2,O,6,Cu,6H,2,O = C,6,H,12,O,7,6KNaC,4,H,4,O,6,3Cu,2,O ,H,2,CO,3,从上述反应式可知，,1mol,葡萄糖可以将,6mol Cu,2+,还原为,Cu,+,。但实际上此反应为非定量反应，即不能根据反应式直接计算出还原糖含量。因此在测定过程中要严格遵守所规定的操作条件，如热源强度,(,电炉功率,),、锥形瓶规格、,加热时间、滴定速度等。,74,三、适用范围及特点,本法又称快速法，特点是试剂用量少，操作和计算都比较简便、快速，滴定终点明显。适用于各类食品中还原糖的测定。但测定酱油、深色果汁等样品时因色素干扰，滴定终点常常模糊不清，影响准确性。本法是国家标准分析方法。,四、试剂及玻皿配置,仪器,1.,容量瓶,2.,移液管,3.,锥形瓶,4.,电炉,5.,恒温水浴锅,6.,碱式滴定装置,7.,分析天平,75,试剂,1.,碱性酒石酸铜甲液： 称取,15g,硫酸铜及,0.05g,次甲基蓝溶于水中并稀释到,1000mL,。,2.,碱性酒石酸铜乙液：称取,50g,酒石酸钾钠及,75g,氢氧化钠，溶于水中，再加入,4g,亚铁氰化钾，完全溶解后，用水稀释至,1000mL,贮存于橡皮塞玻璃瓶中。,3.,乙酸锌溶液,4. 10.6,亚铁氰化钾溶液,5.,葡萄糖标准溶液：准确称取,1.0000g,经过,98,100,干燥至恒重的无水葡萄糖，加水溶解后移入,1000mL,容量瓶中，加入,5mL,盐酸，用水稀释到,1000mL,。,76,五、测定方法,1.,样品处理,视样品含糖量的多少，称取,2,10g,样品。例如奶粉，准确称样,5,克左右于,200mL,烧杯中,加入,100,150mL,温水，搅拌，置于,45,恒温水浴锅中，放置,45min,，中间不时搅拌，取出，将提取液移入,250mL,容量瓶中，慢慢加入,5mL,乙酸锌溶液和,5mL,亚铁氰化钾溶液，加水至刻度，摇匀后静置,30min,。用干燥滤纸过滤，弃去,15,20mL,初滤液，收集滤液备用。,77,(2),碱性酒石酸铜溶液的标定,准确吸取碱性酒石酸铜甲液和乙液各,5mL,，置于,150mL,锥形瓶中，加水,10mL,，加玻璃珠,4,粒。从滴定管滴加约,9mL,葡萄糖标准溶液，加热使其在,2min,内沸腾，准确沸腾,30,秒钟后，以每,2,秒,1,滴的速度继续滴加葡萄糖标准溶液，直至溶液蓝色刚好褪去为终点。记录消耗葡萄糖标准溶液的总体积。平行操作,3,次，取其平均值，按下式计算,10mL,碱性酒石酸铜溶液相当于葡萄糖的质量。,F = CV,S,式中：,F10mL,碱性酒石酸铜溶液相当于葡萄糖的质量, mg,C,葡萄糖标准溶液的浓度，,mg,mL,V,S,标定时消耗葡萄糖标准溶液的总体积，,mL,78,(3),样品溶液预滴定,吸取碱性酒石酸铜甲液及乙液各,5.00mL,，置于,150mL,锥形瓶中，加水,10mL,，加玻璃珠,3,粒，加热使其在,2min,内沸腾，准确沸腾,30,秒钟后，趁热以先快后慢的速度从滴定管中滴加样品溶液，滴定时要始终保持溶液呈沸腾状态。待溶液蓝色变浅时，以每,2,秒,1,滴的速度滴定，直至溶液蓝色刚好褪去为终点。记录样品溶液消耗的体积,。,79,(4),样品溶液精确滴定,吸取碱性酒石酸铜甲液及乙液各,5.00mL,，置于,150mL,锥形瓶中，加玻璃珠,3,粒，从滴定管中加入比预测时样品溶液消耗总体积少,1mL,的样品溶液，加热使其在,2min,内沸腾，准确沸腾,30,秒钟后，以每,2,秒,1,滴的速度继续滴加样液，直至蓝色刚好褪去为终点。记录消耗样品溶液的总体积。平行操作,3,次，取平均值。,80,六、结果计算,式中：,m,样品质量，,g,F,10mL,碱性酒石酸铜溶液相当于葡萄糖的质量，,mg,Vx,测定时消耗样品溶液的平均体积，,mL,V,样品溶液的定容体积，,mL,七、说明与讨论,碱性酒石酸铜的氧化能力较强，醛糖和酮糖都可被氧化，所以测得的是总还原糖量。,81,实验十三,还原糖的测定,3,，,5,二硝基水杨酸比色法,一、实验目的,掌握用,3,，,5,二硝基水杨酸比色法测定还原糖的方法及分光光度计的使用。,二、实验原理,在氢氧化钠和丙三醇存在下，还原糖能将,3,，,5,二硝基水杨酸中的硝基还原为氨基，生成氨基化合物。此化合物在过量的氢氧化钠碱性溶液中呈桔红色，在,540nm,波长处有最大吸收，在一定浓度范围内其吸光度与还原糖含量呈线性关系。,82,三、适用范围及特点,此法适用于各类食品中还原糖的测定，具有准确度高、重现性好、操作简便、快速等优点，尤其适用于大批样品的测定。,四、仪器试剂及玻皿配置,仪器：,1.,恒温水浴锅,2.,分光光度计,3.,分析天平,试剂：,1. 3,，,5,二硝基水杨酸溶液：称取,6.5g 3,，,5,二硝基水杨酸溶于少量水中，移入,1000mL,容量瓶中，加入,2mol/L,氢氧化钠溶液,325mL,，再加入,45g,丙三醇，摇匀，冷却后定容到,1000mL,。,83,五、测定方法,准确吸取,0,、,1,、,2,、,3,、,4,、,5,、,6,、,7mg,mL,的葡萄糖标准溶液各,1mL,，样液,1mL(,含糖,3,4mg),，分别置于,25mL,容量瓶中，各加入,3,，,5,二硝基水杨酸溶液,2mL,，置沸水浴中煮,5min,显色，然后以流水迅速冷却，用水定容到,25mL,，摇匀。以空白调零，在,540nm,处测定吸光度，绘制标准曲线，计算样品中还原糖的含量。,六、计算,还原糖,%=AV,定,/10,（,W,样,V,测,）,式中：,A,从标准曲线上查得的葡萄糖质量，,mg,W,样,称取样品的质量，,mg,V,定,样品溶液的定容体积，,mL,V,测,测定时吸取样液体积，,mL,84,实验十四 可溶性总糖的测定,一、实验目的,掌握食品中可溶性总糖的测定方法。,二、实验原理,样品经处理除去蛋白质等杂质后，加入盐酸，在加热条件下使蔗糖水解为还原性单糖，以直接滴定法测定水解后样品中的还原糖总量。,三、仪器试剂及玻皿配置,仪器,仪器及玻皿配置同直接滴定法测定还原糖。,85,试剂,1. (1,1),盐酸溶液。,2. 0.1,甲基红乙醇溶液：称取,0.1g,甲基红，用,70,乙醇溶解并定容到,100mL,。,3. 30,氢氧化钠溶液。,4. 0.1,转化糖标准溶液：准确称取,105,烘干至恒重的纯蔗糖,1.0526g,于锥形瓶中，用,100mL,水溶解后，加,(1,1),盐酸,5mL,，在,68,70,水浴中加热,15min,，取出于流动水下迅速冷却，加甲基红指示剂,2,滴，用,30,NaOH,溶液中和至中性，转移至,1000mL,容量瓶中，加水至刻度，混匀。此溶液每毫升含转化糖,1mg,。,86,四、测定方法,1.,样品处理,同直接滴定法测定还原糖。,2.,测定,称取一定量样品，按直接滴定法中的样品提取方法处理，吸取处理后的样液,50mL,，放入,100mL,容量瓶中。加入,5mL(1,1),盐酸溶液，置,68,70,水浴中加热,15min,，取出迅速冷却至室温，加,2,滴甲基红指示剂，用,30% NaOH,溶液中和至中性，加水至刻度，混匀。将样液灌入滴定管中，按直接滴定法测定还原糖含量。,87,五、结果计算,式中：,F10mL,酒石酸钾钠铜溶液相当的转化糖的质,量，,mg,V,1,样品溶液定容体积，,mL,V,2,测定时消耗样品水解液的体积，,mL,m,样品质量，,g,88,实验十五 淀粉的测定,酶水解法,一、实验目的,掌握酶水解法测定淀粉含量的方法。,二、实验原理,样品经除去脂肪和可溶性糖类后，在淀粉酶的作用下，使淀粉水解为麦芽糖和低分子糊精，再用盐酸进一步水解为葡萄糖，然后按还原糖测定法测定其还原糖含量，并折算成淀粉含量。,89,三、仪器试剂及玻皿配置,仪器及玻皿,配置同可溶性总糖的测定,试剂,1.,乙醚,2. 85,乙醇,3. 0.5,淀粉酶溶液,4.,碘溶液：称,3.6g,碘化钾溶于,20mL,水中，加入,1.3g,碘,溶解后加水稀释到,100mL,。,5.,其余试剂。,四、测定方法,1.,样品处理,称取,2,5g,样品,(,含淀粉,0.5g,左右,),，置于铺有折叠滤纸的漏斗内，先用,50mL,乙醚分,5,次洗涤以除去脂肪。再用约,100mL 85,的乙醇分次洗去可溶性糖类。用,50 mL,水将残渣移至,250 mL,烧杯中。,90,2.,酶水解,将烧杯置沸水浴上加热,15min,，使淀粉糊化，放冷至,60,以下，加入,20mL,淀粉酶溶液，在,55,60,保温,1 h,，并不时搅拌。取,1,滴此液于白色点滴板上，加,1,滴碘液应不呈蓝色，若呈蓝色，再加热糊化，冷却至,60,以下，再加,20 mL,淀粉酶溶液，继续保温，直至酶解液加碘液后不呈蓝色为止。加热至沸使酶失活，冷却后移入,250 mL,容量瓶中，加水定容。混匀后过滤，弃去初滤液，收集滤液备用。,91,3.,酸水解,取,50 mL,上述滤液于,250mL,锥形瓶中，加,5 mL (1,1),盐酸，装上回流装置，在沸水浴中回流,1 h,，冷却后加,2,滴甲基红指示剂，用,20,氢氧化钠溶液中和至红色刚好消失。把溶液移入,100 mL,容量瓶中，洗涤锥形瓶，洗液并入,100 mL,容量瓶中，加水定容，摇匀，供测定用。,4.,测定,按还原糖测定法中直接滴定法进行。同时取,50 mL,水及与样品处理时相同量的淀粉酶溶液，做试剂空白试验。,92,六、结果计算,式中：,F10 mL,碱性酒石酸铜相当的葡萄糖量，,mg,V,滴定时样品水解液消耗量，,mL,V,0,滴定时空白溶液消耗量，,mL,m,样品质量，,g,93,实验十六 淀粉的,测定,酸水解法,一、实验目的,掌握酸水解测定淀粉含量的方法。,二、实验原理,样品经乙醚除去脂肪，乙醇除去可溶性糖类后，用酸水解淀粉为葡萄糖，按还原糖测定方法测定还原糖含量，再折算为淀粉含量。,三、适用范围及特点,此法适用于淀粉含量较高，而半纤维素和多缩戊糖等其他多糖含量较少的样品。,94,四、仪器试剂及玻皿配置,仪器,1. 40,目筛,2 .,精密,pH,试纸,3.,组织捣碎机,4.,恒温水浴锅,5.,分析天平,试剂,1.,乙醚,AR 2. 85,乙醇,3. 40,氢氧化钠,4. 21.9,醋酸锌溶液,5. 10.6,亚铁氰化钾溶液,6. 0.2,甲基红乙醇溶液,7. 10,氢氧化钠,8. ( 1,1),盐酸溶液,95,五、测定方法,1.,样品处理, 粮食、豆类、糕点、糕干粉、代乳粉等较干燥、易研细的样品：称取,2,5g (,含淀粉,0.5g,左右,),磨碎、过,40,目筛的样品，置于铺有慢速滤纸的漏斗中，用,30 mL,乙醚分三次洗去样品中的脂肪，再用,150 mL 85,乙醇分数次洗涤残渣以除去可溶性糖类。然后用,100mL,水把漏斗中残渣全部转移至,250 mL,锥形瓶中。,96, 蔬菜、水果、粉皮等水分较多，不易研细的样品：先按,1:1,加水在组织捣碎机中捣成匀浆。称取,5,10g(,含淀粉,0.5g,左右,),匀浆于,250 mL,锥形瓶中，加,30 mL,乙醚振荡提取脂肪，用滤纸过滤除去乙醚，再用,30 mL,乙醚分二次洗涤滤纸上残渣，然后以,150 mL 85,乙醇分数次洗涤残渣，以除去可溶性糖类。以,100 mL,水把残渣转移到,250 mL,锥形瓶中。,97,2.,酸水解,于上述,250 mL,锥形瓶中加入,30 mL ( 1,1),盐酸，装上冷凝管，置沸水浴中回流,2h,。取出用流动水冷却。加入两滴甲基红指示剂，先用,40,氢氧化钠调到黄色，再用,(1,1),盐酸调到刚好变为红色，再用,10,氢氧化钠调到红色刚好褪去。若水解液颜色较深，可用精密,pH,试纸测试，使样品水解液的,pH,值约为,7,。然后加入,5 mL 21.9,醋酸锌，,10.6%,亚铁氰化钾，摇匀后放置,20min,，以沉淀蛋白质、果胶等杂质。摇匀后用水转移至,250 mL,容量瓶中，加水定容，过滤，弃去初滤液，收集滤液供测定用。,98,空白试验；取,100mL,水和,30 mL(1,1),盐酸于,250 mL,锥形瓶中，按上述方法操作，得试剂空白液。,3.,测定 ：按直接滴定法测定还原糖进行。,六、结果计算,（公式同淀粉的测定,-,酶水解法）,99,实验十七 酱油中氯化钠含量的测定,莫尔法,一、实验目的,掌握酱油或其它液体食品中氯化钠的测定方法。,二、实验原理,样品中的氯化钠溶于水，其中的氯离子能与硝酸银反应生成乳白色沉淀，当反应到达终点时，稍过量的硝酸银能与铬酸钾反应生成砖红色沉淀从而指示终点。可用铬酸钾作指示剂，用硝酸银滴定来测定氯化钠含量。,100,三、仪器试剂及玻皿配置,仪器,1.,分析天平,2.,恒温水浴锅,3.,酸式滴定装置,试剂,1. 0.1mol/L AgNO,3,溶液,2. NaCl AR,3. 5% K,2,CrO,4,四、测定方法,1.,样品处理,准确吸取酱油样品,2.00 ml,，于,100 ml,容量瓶中，用蒸馏水定容。,2.,样品测定,吸取,1,中样品溶液,5.00 mL,于,250 ml,锥形瓶中，加水至,80 ml,，加,5%,铬酸钾指示剂,1 ml,，摇匀，用,0.1mol/L AgNO,3,溶液滴定出现砖红色沉淀，记下消耗,AgNO,3,溶液的体积,V,1,。,101,3.,空白试验：,取蒸馏水,80 mL,，加,5%,铬酸钾指示剂,1 ml,，用,0.1mol/L AgNO,3,溶液滴定出现砖红色沉淀，记下消耗,AgNO,3,溶液的体积,V,0,。,4. 0.1mol/L AgNO,3,溶液的标定,精密称取经,98,102,烘干的氯化钠固体,0.5850g,，于,100 mL,小烧杯中溶解后，转入,100 mL,容量瓶中，用蒸馏水洗涤烧杯,2,3,次，洗液一并转入容量瓶中，定容。,准确吸取上述氯化钠标准溶液,20.00 mL,，置于,250 mL,锥形瓶中，加水至,80 mL,，再加,5%,铬酸钾指示剂,1 mL,，用,0.1mol/L AgNO,3,溶液滴定出现砖红色沉淀，记下消耗,Ag