清洁级实验动物房的使用

单击此处编辑母版标题样式,*,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,清洁级实验动物房的使用,唐甩恩,进入动物房要更衣、戴口罩、帽子，经过风淋,为什么？,对实验动物为什么要实行环境控制？,如何维护实验动物房正常运行？,进入动物房要更衣、戴口罩、帽子，经过风淋，,为什么？,实验动物 实验用动物,实验动物是指经人工培育，对其携带微生物实行控制，遗传背景明确，来源清楚，可用于科学实验、药品、生物制品的生产和检定及其它科学实验的动物。,有三大特点：,1 遗传角度有要求，必须经人工培育，遗传背景明确，来源清楚。根据基因的纯合程度，实验动物分为：近交系、突变系、杂交群、封闭群。,2 对其携带的微生物、寄生虫实行人工控制。,3 用于科学实验，它是人类的替身，最精密的仪器都无法替代。,实验用动物是指一切能用于科学实验的动物，除实验动物外，还包括野生动物、经济动物和观赏动物。,实验、野生、经济、观赏动物的区别,动物,人工培育,繁育,遗传背景,物种来源,微生物、寄生虫,用途,实验动物,严格,人工,明确,明确,人工控制,科学实验,野生动物,未经,自然,不明确,不明确,自然选择,保护或发展经济,经济动物,一定程度,人工,一般,一般,择优劣汰,发展经济,观赏动物,一定程度,人工,一般,一般,择优劣汰,观赏宠物,按微生物学控制原理分类：,实验动物可分为,普通级,清洁级,SPF,级（,Specific Pathogen Free),无特定病原体的动物,无菌动物,无菌动物是指动物体内外无任何微生物和寄生虫的动物。,是经人工剖腹产净化培育出来的。,饲养在隔离环境设施中。,SPF,级（无特定病原体的动物）是指实验动物体内不存在特定病原微生物和寄生虫的特殊动物。,不允许存在干扰实验的潜在感染，如绿脓杆菌。 饲养在屏障环境设施系统中。,来源：无菌动物悉生动物,SPF,动物,悉生动物指体内携带的微生物是经人工有计划投给的已知菌或动物生存必需菌。如大肠杆菌或双歧杆菌。,清洁级动物动物体内外不携带人畜共患的病原体或动物传染病病原体的动物。,对动物危害大的、科学研究干扰大的微生物不允许存在。如肝炎病毒、仙台病毒。,普通级动物未经严格控制微生物的动物，饲养在开放环境设施中。用于教育示教。,不允许存在人畜共患病和严重的动物传染病。如沙门氏菌、出血热、弓形虫、螨、虱，猴疱疹病毒（,B,病毒），鼠痘病毒。,普通环境：该环境设施符合动物居住的基本要求，不能完全控制传染因子，适用于饲育教学等用途的普通级实验动物。,屏障环境：该环境设施适用于饲育清洁实验动物及无特定病原体实验动物，该环境严格控制人员和物品的进出。,隔离环境：该环境设施采用无菌隔离装置以保存无菌或无外来污染动物，隔离装置内的空气、饲料、水、垫料和设备均为无菌，动物和物料的动态传递须经特殊的传递系统，该系统既能保证与环境的绝对隔离，又能满足转运动物时保持内环境一致。该环境设施适用于饲育无特定病原体（,SPF）、,悉生（,Gnotobiotic,）,及无菌（,Germ Free）,实验动物。,动物实验设施（设备）环境指标,项 目,指 标,小鼠、大鼠、豚鼠、地鼠,犬、猴、猫、兔、小型猪,鸡,普通环境,屏障环境,隔离环境,普通环境,屏障环境,隔离环境,隔离环境,温度，,1926,2025,1626,1822,1626,日温差， ,4,3,4,3,3,相对湿度，,4070,换气次数，次/,h,810,1020,2050,810,1020,2050,2050,气流速度，,m/s,0.10.2,压强梯度，,Pa,-,2050,100150,-,2050,100150,100150,空气洁净度，级,-,10000,100,-,10000,100,100,落下菌数，个/皿 ,30,3,无检出,30,3,无检出,无检出,氨浓度，,mg/m,3,14,噪声，,dB ,60,照度，,lx,工作照度,150300,动物照度,1520,100200,510,昼夜明暗交替时间,h,12/12或10/14,对实验动物为什么要实行环境控制？,影响实验结果的遗传和环境因素,基因型,表现型,演出型,发育环境,周围环境,动物实验的目的是对演出型进行各种有控制的处理而获得实验结果。为求得动物实验结果重复性好，就必须要求演出型稳定。这就需要对决定演出型的遗传和环境条件加以控制。反应的重复性指不同的实验工作者，在不同的实验地点，不同的时间，用同一品系动物所做的实验，几乎没有差异地均能获得相同的结果。,动物对实验处理的反应：,R=（A+B+C）DER,实验动物的总反应；,A,实验动物种的共同反应；,B,动物品种和品系的特有反应；,C,动物个体反应（个体差异）；,D,环境的影响（包括实验处理）；,E,实验误差。,实验动物环境因素包括两个方面：,自然因素（物理、化学、生物）,人为因素,品质控制,实验动物的环境因素,遗传因素,人为因素：设施、饲养、管理、调教和实验处理等,生物因素：各种病原体（细菌、病毒、寄生虫）,物理因素：,温度,湿度,气流,光照,噪声,笼具,垫料,饲养密度,化学因素：,饲料,饮水,空气,臭气,杀虫剂,消毒剂,有毒物质,如何维护实验动物房正常运行？,清洁级动物引入动物实验室的规定,1,、,外购的大、小鼠品系，需查明该生产单位是否具 备该动物生产合格证，如不具备合法证明，则立即退回。2、,动物运输盒箱包装是否符合该级别要求，如发现有破漏等不符合该级别要求的情况，则立即退回。,3、,如怀疑该品系动物不合要求或不健康，则应立即向法定检测机构要求鉴定，如确属不合格或以次充好，则将该批动物如数退回，并通报上级动物管理委员会严肃处理。,4、,在以上三点均符合要求的前提下，将动物连同包装盒一起送入缓冲间，不得在送入之前将动物包装盒打开,。,5、,动物连同合格的包装盒放入缓冲间后，即喷洒过氧乙酸等空气消毒剂，开启紫外线消毒20分钟，然后打开实验室内缓冲间的门，连盒进入实验室，取出动物入笼架。,动物实验人员操作规定,实验中必需的器件、物品均需严格消毒后由传递仓（大物品由缓冲间）进入，并 按照传递仓或缓冲间的进入程序操作，非实验所需的一切物品严禁带入实验室。,传递仓（缓冲间）使用规定：,物品传递仓（缓冲间）是传送实验用品、各种灭菌物品及更替下的物品的专用通道，严禁随意开启，开而不关或改作其他用途。,传递仓（缓冲间）使用方法如下：,灭菌物品传入：开启外门消毒液喷洒仓内去除外包装（二层包布）放入仓内喷液关闭外门开紫外线灯30分钟关紫外线灯开启内门传入实验室,物品传出：开紫外线灯30分钟关紫外线灯开启内门放入送出物品关闭内门开启外门搬出物品喷液关闭外门开紫外线灯,实验人员进入动物房程序,洗手,更衣室,戴,口罩、帽子,穿鞋套,风淋,内,走廊,动物室,缓冲间,外,走廊,在,进出时不能同时打开两扇门。,加水喂料：饮水采用过滤水，饮水瓶应及时更换，防止漏水、断水。定时消毒。饲料要保持新鲜，灭菌饲料贮藏不超过一周。,更换笼具：每天更换、清洗接粪盘，定期用消毒液擦拭笼架。,动物的排泄物和废物由实验者清除汇总，实验结束后，通过缓冲室带出，交动物实验管理人员处理。,非实验人员不得擅自进入动物实验室。实验后，不必要的仪器、物品、样本或死亡的动物，应在离开实验室时带出（通过缓冲室随身带出），死亡的动物应交实验室管理人员统一处理。,高压饲料的准备,1、,饲料需用可高压灭菌的耐高压饲料。,2、,检查饲料质量，如发现饲料有霉变、结块及虫蛀的情况，不得使用。,3、将饲料装入牛皮纸袋内，外套布袋，扎紧袋口，放高压消毒锅中消毒（120、20分钟）。,4、将消毒过的饲料用脱皮法进入传递仓和实验室。,实验室环境主要参数的例行观察记录,1、每天由值班人员观察并记录动物实验室的温度和相对湿度。,2、大、小鼠要求室内温度保持在2024之间。,3、,发现温度过高或过低时及时调整。,动物健康状况的间接观察和发现异常情况的处置规定,1、,动物在实验中如发现有异常情况应及时报告实验室负责人。,2、,对动物不明原因的死亡，须作必要的尸体解剖，查明原因。,3、,如发现尚未进行实验的动物表现异常，应及时隔离观察，并追查动物来源。,4、,如动物经检验后，发现有烈性传染病的感染，应立即隔离处死，动物实验室需严格消毒。,动物废物处理,1、,动物的废物应统一置于规定地方倾倒，并有专人负责处理。,2、,废物应与动物尸体分开处理。,3、,动物尸体一定要焚烧，其他废物可作焚烧、发酵、无害化处理后丢弃或其他相应办法处理，以不污染环境为原则。,4、,对于有特殊试验的实验动物排泄物，要有专人负责按规定处理。,实验室的例行清洁卫生和例行消毒规定,1、,实验室内环境需符合该动物级别的要求。外环境需整洁，及时处理污迹。,2、,实验结束后作一次清洁消毒（用福尔马林与高锰酸钾熏蒸），再次实验前作一次加强消毒。,3、,对外环境每周进行一次消毒性大扫除。,4、,常用消毒剂应每周更换，以保证其消毒性能可靠。,5、,消毒前后的物品应严格分开保存。,6、,每隔一定时间更换消毒品种，以防抗药性。,谢谢,