典型药物分析

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,典型药物分析,学习目标,1.,掌握典型药物的鉴别和含量测定的方法原理,2.,熟悉典型药物中主要特殊杂质的来源及检查方法,3.,了解典型药物的结构特征和主要理化性质,4.,学会根据药品质量标准，对典型药物进行鉴别、检查和含量测定操作，学会正确计算和判断检查结果。,导学情景,情景描述：,小王协助检查盐酸普鲁卡因的质量。老师要求他查阅该药物的药典相关内容，他清楚了如何分析盐酸普鲁卡因的质量。,学前导语：,分析依据是药典。通过本章学习，同学们学会如何进行检验药物的结构性质等基础知识。,第一节 水杨酸类药物的分析,一、典型药物的结构和性质,药典,2015,年版收载的水杨酸类药物有消毒防腐药水杨酸；解热镇痛非甾体抗炎药阿司匹林；抗结核药对氨基水杨酸钠。,阿司匹林,酯键 水解性,羧基 酸性,贝诺酯,1.酯键 水解性,2.酰胺键 水解后重氮化偶合反应,3.苯环 紫外特征吸收,对氨基水杨酸钠,1.芳香第一胺 重氮化偶合反应,2.酚羟基 三氯化铁反应,3.钠盐的鉴别反应,二、阿司匹林制剂的分析,（一）性状,1.,外观与臭味 白色结晶粉末，酸味,2.,溶解度,水中微融，在氢氧化钠中溶解，分解。,（二）鉴别,1.,三氯化铁反应 加三氯化铁，显示紫色,阿司匹林，贝诺酯分子中无酚羟基，与三氯化铁试液不发生显色反应。但加热，加碱，产生酚羟基，发生反应。,2.,水解反应 阿司匹林有酯键，发生水解反应。,3.,红外分光光度法,4.,高效液相色谱法,（三）杂质检查,1.,溶液的澄清度 反应的过程中出现各种杂质，杂质的特点是不含羧基，利用药物与杂质在碳酸钠中溶解度的差异，来检查杂质。,2.,游离水杨酸 生产过程中乙酰化不完全等产生水杨酸，药典,2015,年版采用高效液相色谱法检查游离水杨酸。,3.,有关物质,（四）含量测定,1.,（阿司匹林）的含量测定,（,1,）原理：阿司匹林羧基和氢氧化钠发生中和反应,（,2,）方法：直接酸碱滴定法，阿司匹林加中性乙醇，加酚酞，用氢氧化钠滴定。,（,3,）注意：阿司匹林用中性乙醇溶解，选用酚酞作为指示剂，中性乙醇的配制。,2.,阿司匹林制剂的含量测定 采用高效液相色谱法,一、结构与性质,第二节 芳胺类药物的分析,(,一,),对氨基苯甲酸酯类药物,盐酸普鲁卡因,盐酸丁卡因,苯佐卡因,芳伯氨基,:,重氮化偶合反应,叔胺氮原子：,弱碱性,酯键,一、结构与性质,(,二,),芳酰胺类药物,对乙酰氨基酚,(,扑热息痛,),醋氨苯砜,盐酸利多卡因,盐酸布比卡因,叔胺,酚羟基,酰胺基,二、盐酸普鲁卡因及其制剂的分析,（一）性状,1.,外观和臭味,2.,溶解度 水中易溶解,（二）鉴别,1.,芳香第一胺反应 又名重氮化偶合反应，盐酸普鲁卡因，加盐酸，加亚硝酸钠生成重氮盐，再加碱性萘酚，出现颜色。,2.,水解反应 加氢氧化钠，出现沉淀；加热变成油状物，出现的蒸汽使湿润的红色石蕊试纸变为蓝色；待油状物消失后，放冷，加盐酸，出现白色沉淀。,3.,红外分光光度法,4.,氯化物反应,5.,高效液相色谱法 注射液采用此法进行鉴别。,（三）杂质检查,1.,杂质来源 酯键水解产生。最后可能出现苯胺，苯胺被氧化为有色物质，变黄，疗效下降，毒性增加。,2.,检查方法 药典,2015,年版规定，采用高效液相色谱法检查盐酸普鲁卡因中对氨基苯甲酸。,四、含量测定,亚硝酸钠滴定法,适用范围：具有芳香第一胺或水解后具有芳香第一胺,的药物,原理：,亚硝酸钠滴定法,2,、测定条件：,1,）反应速度：加入适量溴化钾加快反应；,2,）温度：,温度升高，反应加快,温度太高：亚硝酸逸失分解，重氮盐分解,室温,10,30,；,2,、测定条件：,3,）酸度：,作用：参与反应，加速反应，重氮盐在酸性溶液中稳定，抑制偶氮化合物的形成,过量：妨碍芳香第一胺的游离，亚硝酸分解,比例：,1:2.56,；,2,、测定条件：,4,）滴定速度：,先快后慢,避免亚硝酸的挥发和分解，滴定管尖端插入液面下,2/3,滴定,一次将大部分亚硝酸钠滴定液在搅拌下迅速加入,近终点，滴定管尖端提出液面，用水冲洗,每滴入,1,滴，搅拌,1-5,分钟,3,、指示终点的方法,电位法、,永停滴定法,、,外指示剂法,、内指示剂法,永停滴定法,盐酸普鲁卡因的含量测定,盐酸普鲁卡因含量,=VTF10,-3,/m100%,V:,滴定液消耗的体积,T,：每毫升滴定液相当于待测物的质量,F,：矫正因子，溶液的真实浓度,/,溶液的理论浓度,三、对乙酰氨基酚及其制剂的分析,（一）性状,1.,外观与臭味 白色结晶粉末，无臭味,2.,溶解度 热水中易溶解，水中略溶解,（二）鉴别,1.,三氯化铁反应 对乙酰氨基酚有酚羟基，发生三氯化铁反应。,2.,水解产物出现芳香第一胺反应 对乙酰氨基酚水解出现对氨基酚，因此与亚硝酸钠，碱性萘酚发生重氮化偶合反应。,3.,红外分光光度法进行鉴别,4.,高效液相色谱法 对乙酰氨基酚注射液、泡腾片等。,5.,紫外,-,可见分光光度法,（三）杂质检查,1.,乙醇溶液的澄清度与颜色,2.,对氨基酚及有关物质,（,1,）杂质来源 ：对乙酰氨基酚中间产物，有毒变色，有害人体。,（,2,）检查方法：高效液相色谱法,3.,对氯苯乙酰胺 高效液相色谱法检查杂质,（四）含量测定,1.,对乙酰氨基酚的含量测定,（,1,）原理 利用紫外吸收,-,分光光度法,（,2,）方法,（,3),计算,A/E/100VD/m,2.,对乙酰氨基酚制剂的含量测定 均采用高效液相色谱法,第三节 巴比妥类药物分析,一、典型药物结构与性质,R1,R2,苯巴比妥：二酰亚胺基团 弱酸性,酰亚胺 水解性,丙二酰脲 与重金属离子反应,苯环 与苯环作用,司可巴比妥 双键 还原性，被氧化,硫喷妥钠 硫元素 与醋酸铅试液反应,补充知识：,1.PH=2,的酸性溶液 不含硫的巴比妥药物无明显紫外吸收，而含硫的有。,2.PH=10,硫喷妥钠有大峰和小峰。巴比妥药物最大吸收峰一般在,240,波长处,3.PH=13,硫喷妥钠只有,304,大峰。巴比妥药物最大峰变为,255nm,处。,（二）鉴别,1.,丙二酰脲类的鉴别反应,（,1,）银盐反应,苯巴比妥在碳酸钠溶液中，加硝酸银，一银盐，可以溶解，再过量加硝酸银，最后不溶解。,（,2,）铜盐反应,供试品加吡啶,-,硫酸铜，出现紫色或者绿色。,2.,苯环的鉴别反应,（,1,）硫酸,-,亚硝酸钠反应：显色,（,2,）甲醛,-,硫酸：显色,无苯环的无此反应，用来区别,（三）杂质检查,1.,酸度 控制副产物苯基丙二酰脲,2.,乙醇溶液的澄清度,3.,有关物质 高效液相色谱法,4.,中性或碱性物质 控制副产物 比如酰胺类杂质，原理利用这类杂质不溶于氢氧化钠而溶于乙醚，而苯巴比妥溶于氢氧化钠，用乙醚提取杂质后称重，判断杂质是否超过限量。,（四）含量测定,1.,苯巴比妥的含量测定 银量法,（,1,）原理：苯巴比妥与硝酸银反应生成银盐,（,2,）方法,（,3,）计算,VTF/m,(4),注意：碳酸钠溶液必须新鲜配制，用电位法指示终点。,2.,苯巴比妥片的含量测定 采用高效液相色谱法,第四节 杂环类药物的分析,杂环化合物：指环状有机化合物的碳环中夹杂有非碳素原子（如,O、S、N,等）的化合物，主要包括以下两类,1、天然有活性的，例如生物碱、抗生素和维生素类,2、化学合成的，含O（呋喃），含N（吡啶、嘧啶），含S（吩噻嗪）,本章主要介绍含氮和含硫的杂环类药物,共性:,(1)杂环类药物是合成药物中所占比例最多的一大,类药物。,(2)多为五元环或六元环，单环或并合环。,(?),(3)杂环结构一般稳定,，不易开环，其性质受杂原子,种类、数目、位置影响。,(4)杂环上取代基性质较活泼，常用于分析。,(?),(5)含氮杂环，其碱性的强弱往往用于分析。,结构与化学性质,含有N原子的六元单环，例如：异烟肼、尼克刹米和硝苯地平,氯氮卓,地西泮,二 、异烟肼制剂分析,（一）性状,本品为无色结晶，白色或类白色的结晶性粉末；无臭，味微甜后苦；遇光渐变质。,本品在水中易溶，在乙醇中微溶，在乙醚中极微溶解。,鉴别,（1）取本品约10mg，置试管中，加水2ml溶解后，加氨制硝酸银试液1ml，即发生气泡与黑色浑浊，并在试管壁上生成银镜。,（2）在含量测定项下记录的色谱图中，供试品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致。,（3）本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱（药品红外光谱集166图）一致。,（三）杂质检查,1.,离肼,取本品，加丙酮水（1：1）溶解并稀释制成每1ml中约含100mg的溶液，作为供试品溶液；另取硫酸肼对照品，加丙酮水（1：1）溶解并稀释制成每1ml中约含0.08mg（相当于游离肼20g）的溶液，作为对照品溶液；取异烟肼与硫酸肼各适量，加丙酮水（1：1）溶解并稀释制成每1ml中分别含异烟肼100mg及硫酸肼0.08mg的混合溶液，作为系统适用性试验溶液。照薄层色谱法（2010年版药典二部附录 B）试验，吸取上述三种溶液各5l，分别点于同一硅胶G薄层板上，以异丙醇丙酮（3：2）为展开剂，展开，晾干，喷以乙醇制对二甲氨基苯甲醛试液，15分钟后检视。系统适用性试验溶液所显游离肼与异烟肼的斑点应完全分离，游离肼的Rf值约为0.75，异烟肼的Rf值约为0.56。在供试品溶液主斑点前方与对照品溶液主斑点相应的位置上，不得显黄色斑点。,2.,有关物质,取本品，加水溶解并稀释制成每1ml中约含0.5mg的溶液，作为供试品溶液；精密量取1ml，置100ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液。照含量测定项下的色谱条件，取对照溶液10l注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分色谱峰的峰高约为满量程的20%;再精密量取供试品溶液与对照溶液各10l，分别注入液相色谱仪，记录色谱图至主成分峰保留时间的3.5倍。供试品溶液的色谱图中如有杂质峰，单个杂质峰面积不得大于对照溶液主峰面积的0.35倍（0.35%），各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积（1.0%）。,（四）含量测定（高效液相色谱法）,用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以0.02mol/L磷酸氢二钠溶液（用磷酸调pH值至6.0）甲醇（85：15）为流动相；检测波长为262nm。理论板数按异烟肼峰计算不低于4000。,测定法,取本品，精密称定，加水溶解并定量稀释制成每1ml中约含0.1mg的溶液，精密量取10l注入液相色谱仪，记录色谱图；另取异烟肼对照品，同法测定。按外标法以峰面积计算，即得。,地西泮及其制剂的分析,（一）性状,1.,外观 本品为白色或类白色的结晶性粉末；无臭,2.,溶解度 本品在丙酮或三氯甲烷中易溶，在乙醇中溶解，在水中几乎不溶。,（二）鉴别,1.,硫酸,-,荧光反应 取本品约,10mg,加硫酸,3ml,，振摇使溶解，在紫外光灯（,365nm),下检视，显黄绿色荧光。,2.,紫外线分光光度法 取本品，加,硫酸的甲醇溶液制成每,1ml,中含,5g,的溶液，照紫外线,-,可见分光光度法（通则,0401,）测定，在,242nm,、,284nm,与,366nm,波长处有最大吸收；在,242nm,波长处的吸光度约为，在,284nm,波长处的吸光度约为。,3.,红外分外分光光度法 本品的红外吸收图谱应与药品红外光谱集中相应的对照图谱（光谱集,138,图）一致。,4.,氯化物的鉴别 取本品,20mg,，用氧瓶燃烧法（通则,0703,）进行有机破坏，以,5,氢氧化钠,5ml,为吸收液，燃烧完全后，用稀硝酸酸化，并缓缓煮沸,2,分钟，溶液显氯化物鉴别（,1,）的反应（通则,0301,）,地西泮结构中的氯原子以共价键与苯环相连，结合牢固，不能直接鉴别，须先用氧瓶燃烧法破坏，使有机结合的氯转化为游离的,CL,，再行鉴别,（三）杂质检查,地西泮除需要检查,“,乙醇溶液的澄清度与颜色,”,、,“,氯化物,”,、,“,干燥失重,”,及,炽灼残渣,”,等一般杂质外，还应作,有关物质,的检查,中国药典2015年版用高效液相色谱法，采用不加校正因子的主要成分自身对照法检查地西泮原料药，片剂及注射中的有关物质。,(,四）含量测定,1,地西泮原料药的含量测定,（,1,）原理：利用地西泮结构中二痰杂卓上的氮原子呈弱碱性，在非水介质中碱性增强，可被被高氯酸滴定液直接滴定，故药典,2015,年版采用非水溶液滴定法测定地西泮原料药的含量。,（,2,）方法,（,3,）含量计算：,VTF/m,2.,地西泮制剂的含量测定 采用高效液相色谱法,第五节 生物碱类药物分析,一、典型药物的结构与性质,盐酸麻黄碱,盐酸伪麻黄碱,硫酸阿托品,氢溴酸山莨菪碱,硫酸奎宁,盐酸吗啡,盐酸小檗碱,二、盐酸麻黄碱及其制剂的分析,（一）性状,1.,白色结晶或粉末,2.,溶解度 水中易溶,3.,比旋度 左旋,（二）鉴别,1.,双缩脲反应 芳环侧链具有氨基醇结构的生物碱类药物的特征鉴别反应。,2.,红外分光光度法,3.,氯化物反应,4.,高效液相色谱法,（三）杂质检查,1.,杂质来源 从药用植物提取比如盐酸伪麻黄碱、其他麻黄碱类物质。,2.,检查方法 高效液相色谱法,（四）含量测定,1.,盐酸麻黄碱的含量测定,（,1,）原理：非水溶液滴定法,（,2,）方法 本法实际为置换反应,（,3,）含量计算 盐酸麻黄碱,=,（,V-V0,）,TF/m,2.,盐酸麻黄碱注射液的含量测定,采用高效液相色谱法。,三、硫酸阿托品及其制剂的分析,（一）性状,1.,外观与臭味 白色结晶粉末，无臭味。,2.,溶解度 水中极易溶解，乙醇中易溶,(,二）鉴别,1.,托烷生物碱类反应,vitali,反应,2.,硫酸盐反应,3.,红外分光光度法,（三）杂质检查,1.,莨菪碱,（,1,）杂质来源 莨菪碱,（,2,）检查方法：旋光度法,2.,有关物质,（,1,）杂质来源 生产过程中引入莨菪碱，颠茄碱等生物碱杂质，中间体，副产物及分解产物等有关杂质。,（,2,）检查方法：药典,2015,年版采用高效液相色谱法进行检查。,（,四）含量测定,1.,硫酸阿托品的含量测定,（,1,）原理：非水溶液滴定法 一个高氯酸分子与一个硫酸阿托品发生反应，被滴定到硫酸氢盐阶段。,（,2,）方法,（,3,）含量计算：,=,（,V-V0,）,TF/m,2.,硫酸阿托品片的含量测定,（,1,）硫酸盐阿托品在某,pH,下形成阳离子，而酸性染料为阴离子，结合生成有色的离子对。通过测定离子对的吸光度，来计算含量。,（,2,）供试品溶液的制备,（,3,）对照品溶液的制备,（,4,）方法,（,5,）含量计算：,Ax/Ar *CR V *1.027*,平均片重,/(m*,标示量）,第六节 糖类药物分析,一、典型药物的结构与性质,蔗糖结构,二、葡萄糖及其制剂的分析,（一）性状,1.,外观与臭味 本品为无色结晶或白色结晶粉末，无臭味，微甜,2.,溶解度 水中易溶,3.,比旋度 比旋度为右旋,（二）鉴别,1.,碱性酒石酸铜的试液反应,（,1,）原理 葡萄糖主要呈半缩醛的环状结构，可以开环形成具有醛基的链状结构，具有还原性。,（,2,）鉴别方法：本品水溶液，加碱性酒石酸铜，出现氧化亚铜砖红色沉淀。,2.,红外分光光度法,（三）杂质检查,1.,乙醇溶液的澄清度 主要控制糊精，葡萄糖溶于热乙醇，而糊精溶解度小。,2.,亚硫酸盐与可溶性淀粉,3.,蛋白质 蛋白质遇到酸变性，容易出现沉淀。,羟甲基糠醛,（,1,）杂质来源： 葡萄糖缩水等出现，进一步聚合出现沉淀，或进一步分解，导致注射液变黄，产生沉淀，,PH,下降。,（,2,）检查方法：供试品进行规定紫外分光光度法测定，吸光度不得大于,0.32.,（四）含量测定,1.,测定方法 葡萄糖加氨水，测定旋光度,计算公式,2.,注意事项,（,1,）测定前溶剂作空白试验校正,（,2,）温度为,20,（,3,）均应充分溶解，供试液应该澄清,（,4,）测定旋光度应该按照药典规定条件,第七节 维生素类药物分析,一、水溶性维生素类药物分析,（一）典型药物的结构与性质,维生素,B1,维生素,C,（二）维生素,B1,及其制剂的分析,1.,性状,（,1,）外观与臭味：本品为白色结晶或结晶粉末；有微弱的特臭，味苦。,（,2,）溶解度：水中易溶,（,3,）吸收系数：具有氨基嘧啶环和噻唑环等，具有紫外吸收。,2.,鉴别,（,1,）硫色素反应：维生素,B1,在碱性溶液中，被铁氰化钾氧化成硫色素。硫色素能溶解于正丁醇中，使溶液显示蓝色荧光。,(2),红外分光光度法,（,3,）氯化物反应,3.,杂质检查,（,1,）总氯量,2015,年药典采用银量法进行鉴别。,（,2,）有关物质 维生素,B1,合成复杂，中间产物、副产物种类多，且结构性质均与主要成分维生素,B,接近。采用高效液相色谱法检查有关物质。,（,4,）含量测定 对原料药采用非水溶液滴定法，对片剂和注射剂采用紫外分光光度法测定。,（,三）维生素,C,及其制剂的分析,1.,性状,（,1,）外观与臭味 白色结晶粉末，无臭，味酸；久放颜色变黄；水溶液显酸性反应。,（,2,）溶解度：水中易溶,（,3,）熔点：,190-192,（,4,）比旋度：比旋度为右旋。,2.,鉴别,（,1,）硝酸银试液反应：维生素,C,具有还原性，能被硝酸银氧化为去氢维生素,C,，产生黑色沉淀。,（,2,）,2,6-,二氯靛酚反应：,2,6-,二氯靛酚，酸性中为玫瑰红色，碱性介质中为蓝色。当发生氧化还原反应后，变为无色。,（,3,）红外分光光度法,（,4,）薄层色谱法 鉴别：维生素,C,片，维生素,C,注射液，维生素,C,颗粒等。,3.,杂质检查,（,1,）溶液澄清度与颜色的检查,1,）杂质来源 ：维生素,C,易被氧化，变色。药典,2015,年版通过测定吸光度来控制有色杂质的限量。,2,）原料药检查方法 紫外分光光度法,3,）片剂检查方法：本片细粉，加水，取滤液按照紫外,-,可见分光光度法检测，测定吸收度，不得超过,0.03.,（,2,）草酸 控制草酸的限量,（,3,）铁盐和铜盐的检查 原子分光光度法,4.,含量测定,（,1,）原理：维生素,C,具有强还原性，被氧化剂氧化。最常用的方法为碘量法。,（,2,）测定方法：本品，加水，加稀醋酸，加淀粉指示剂，加碘试液溶液显示蓝色。,（,3,）注意事项,1,）稀醋酸介质,2,）新煮沸的蒸馏水,3,）应消除辅料的干扰,二、脂溶性维生素类药物分析,（一）典型药物的结构与性质,维生素A,维生素D2,维生素D3,维生素,E,（二）维生素,E,及其制剂的分析,1.,性状,（,1,）外观与臭味： 黄绿色澄清液体；几乎无臭，遇到光颜色变深。,（,2,）溶解度：水中不溶解,（,3,）比旋度：右旋,（,4,）折光率：,（,5,）吸收系数：采用紫外分光光度法进行鉴别,2.,鉴别,（,1,）硝酸反应：维生素,E,酸性下水解，生成生育酚，被硝酸氧化成生育红而显色。,(2),红外分光光度法,（,3,）气相色谱法：采用气相色谱法测定维生素,E,含量,3.,杂质检查,（,1,）生育酚：通过限制硫酸铈滴定液消耗的体积，来控制游离生育酚的含量。,（,2,）有关物质（合成型）：采用气相色谱法来检查有关物质。,4.,含量测定,采用气相色谱法来测定含量。,谢谢！,