实验一：细胞质流动课件

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,实验一：细胞质流动,*,细胞生物学实验,细胞生物学实验,2008生物科学5班,实验一：细胞质流动,实 验 室 守 则,1、,不迟到，不早退，更不能无故缺课；,2、进实验室要,穿白大褂,。实验室内,禁止喧哗,。,3、实验前必须认真,预习,，熟悉实验的内容。,4、实验中应,严格按操作规程进行,，认真操作、仔细观察，及时记录实验现象及结果；,5、,在实验的过程中制造的任何垃圾都要丢到垃圾筐里（或先放在自己的桌面废物缸内），,严禁随地投弃！,实验一：细胞质流动,实 验 室 守 则,6、实验器具应,保持清洁,，,用过的玻璃器皿必须洗净后放回原处。实验台面应保持整洁，仪器、药品摆放整齐。,公用试剂及用具盒用完后，应立即盖好放回原处。,7、,执行,值日生制度,，每天安排3-4人值日，其职责是负责实验器具的整理、操作台、水槽、地板等实验室卫生工作。,8、,保证安全,9、,实验结束后,认真分析和总结,，,实事求是、,独立地完成,实验报告,实验一：细胞质流动,实验报告格式,班级、姓名、学号、日期,实验项目,实验目的,实验原理,实验器材(实验材料,实验试剂,实验仪器),实验步骤,实验结果,（重点）,分析和讨论,（重点）,参考文献,实验一：细胞质流动,实验一,、细胞质流动及其影响因素,实验二,、叶绿体的分离与荧光观察,实验三,、线粒体的制备与活性鉴定,实验四,、,细胞膜的渗透性与植物液泡系的观察,实验五,、细胞的凝集反应与细胞融合,实验六,、动植物细胞骨架的观察,实验七,、细胞吞噬作用和细胞中过氧化物酶的显示,实验八,、电子显微镜演示,细胞生物学实验,安排,第2-9周36学时,实验一：细胞质流动,实验一,细胞质流动及其影响因素,细胞生物学实验,实验一：细胞质流动,观察植物细胞质流动现象,了解影响细胞质流动的因素,实验目的,实验一：细胞质流动,实验原理,在多种植物的细胞中都能观察到植物,细胞质流动,现象，它是,细胞活动强弱的重要指标,。,细胞质流动现象的产生，是细胞骨架中微丝肌动蛋白与肌球蛋白相互滑动的结果。,细胞质流动要消耗能量，受各种因素诸如温度、渗透压及各种离子的影响。,实验一：细胞质流动,引起细胞质流动的因素,内因,微丝束（肌动蛋白纤维）、肌球蛋白、ATP,外因,物理：温度、光、机械刺激,化学： pH、电解质、非电解质、渗透压、呼吸抑制剂,实验一：细胞质流动,细胞质流动的主要形式,细胞质环流：,在液泡发达的植物(如黑藻、 轮藻、伊乐藻)细胞中，细胞质成薄层沿着细胞膜以一定的速度和方向循环流动。这种不断地循环流动称为细胞质环流。,穿梭流动：,穿梭流动是细胞质流动的另一种形式，它与环流不同，是向相反方向来回穿梭。由于流动方向在一定时间内来回交换，因此叫穿梭流动。,布朗运动：,在活细胞中可以看到细胞质内的许多小颗粒在无规则地跳动着，这在暗视野显微镜下观察更为明显，叫做布朗运动。布朗运动的产生除了与微丝的存在有关外，还与微梁网格的收缩有关。,实验一：细胞质流动,实验材料试剂仪器,实验材料,：紫鸭趾草花丝，黑藻（水王荪、轮叶黑藻）叶。,实验一：细胞质流动,实验材料试剂仪器,实验试剂：,0.17 mol/L, 0.35 mol/L, 1 mol/L 氯化钠,0.17 mol/L， 0.35 mol/L , 1 mol/L 丙二酸钠,1 mmol/L 2,4二硝基酚(dinitrophenol, DNP）,1 mol/L 甘露醇,实验仪器：显微镜，载玻片，盖玻片，尖头镊子，刀片,吸水纸等,实验一：细胞质流动,丙二酸钠,结构简式：,NaooC-CH,2,-COONa,丙二酸在结构上与琥珀酸（丁二酸）相似，可与琥珀酸竞争和琥珀酸脱氢酶的活性中心结合。,若琥珀酸脱氢酶与丙二酸等结合，则不能再与琥珀酸结合而使之脱氢，产生抑制作用，且抑制程度取决于琥珀酸与抑制剂在反应体系中浓度的相对比例，所以这种抑制是,竞争性抑制,。,实验一：细胞质流动,乙酰CoA,三羧酸循环,电子传递（氧化）,磷酸化,脂肪,多糖,蛋白质,脂肪酸、甘油,葡萄糖、其它单糖,氨基酸,大分子降解成基本结构单位,小分子化合物分解成共同的中间产物（如丙酮酸、乙酰CoA等,共同中间产物进入三羧酸循环,氧化脱下的氢由电子传递链传递生成H,2,O，释放出大量能量，其中一部分通过磷酸化储存在ATP中。,+Pi,生物氧化的三个阶段,实验一：细胞质流动,三羧酸循环,实验一：细胞质流动,2,4-二硝基酚（DNP）,结构式,DNP是氧化磷酸化的,解偶联剂,，解偶联剂使氧化和磷酸化脱偶联，,氧化仍可以进行，而磷酸化不能进行,，解偶联剂作用的本质是增大线粒体内膜对H+的通透性，消除H+的跨膜梯度，因而,无ATP生成,，解偶联剂只影响氧化磷酸化而不干扰底物水平磷酸化，解偶联剂的作用使氧化释放出来的能量全部以热的形式散发。,2,4-二硝基苯酚(,DNP,)等药剂因阻碍磷酸化(形成高能磷酸键)，,会抑制或减慢细胞质流动,实验一：细胞质流动,细胞质流动,及其影响因素,载玻片，滴,12,滴蒸馏水,紫鸭趾草雄蕊花丝(,黑藻,嫩叶),装片,低倍物镜(10)观察,高倍物镜(40)观察,吸水纸吸干水,加试剂,记录,细胞质停止流动的时间,吸水纸吸干,加,清水,流动是否能恢复,实验步骤,实验一：细胞质流动,实验设计：,不同因素对细胞质流动的影响,渗透压：,0.17 mol/L,0.35mol/L NaCl,1.0mol/LNaCl溶液（高渗）,1 mol/L 甘露醇,生物氧化抑制剂：,1mmol/L,2,4-二硝基酚,（解偶联剂）,0.17、0.35、1.0mol/L丙二酸钠溶液,（竞争性抑制剂）,注意：高浓度丙二酸钠有双重影响,实验一：细胞质流动,黑藻叶,紫鸭趾草花丝毛,实验结果,实验一：细胞质流动,注意事项,选 材（,老与嫩叶）,细胞质流动的形式与方向,细胞质流动的快慢（未加试剂前）,加入试剂量（当装片中的水份没完全吸干，则影响加入试剂的实际浓度）,计时,实验一：细胞质流动,实验报告,1.绘制紫鸭趾草雄蕊花丝毛(或黑藻)细胞质流动图,(标明流动方向),。,2.记录各种因素对细胞质流动影响的结果(如流动停止的时间与流动能否恢复)，并分析原因(可以表格形式完成)。,实验一：细胞质流动,记录加入各种化学试剂后细胞质流动停止的时间，并分析原因。,NaCl,丙二酸钠,DNP,甘露醇,停止流动的时间,加水是否恢复,分析原因,实验一：细胞质流动,思考题,1 如何理解细胞质流动原理？,2 胞质环流有何特点? 为什么?,实验一：细胞质流动,渗透压计算,稀溶液的,渗透压,可根据范荷夫公式计算：,P=iCRT,参数说明,C,：溶液的摩尔浓度；,R,：气体常数（,0.083,升巴摩尔,-1,度,-1,）；,i,：渗透常数，,i=1+,（,n-1,）；,n,：,1,分子解离后所得离子数，：电离度；,T,：绝对温度,（注：对于完全离解的电解质溶液，其渗透常数为离解的阴阳离子总数）,实验一：细胞质流动,实验结果分析,我们得出的结果,各不相同,原因何在?,实验材料,环境温度,细胞定位,操作方法,加入试剂量,处理时间,重复实验,关于生物绘图,实验一：细胞质流动,