第六章+样品采集技术课件

Click to edit Master title style,Slide #,Click to edit Master text styles,Second level,Third level,Fourth level,Fifth level,第六章,样品采集技术,Slide #,2,讨论主题:,SCAN,采集方式的适用性,各种数据采集参数对数据的影响,Scan,采集原理,Slide #,3,12,50,100,150,200,250,300,11,10,9,8,7,6,Time minutes,Mass ,daltons,质谱数据是三维的,Slide #,4,Time -,Abundance,4.76,5.77,5.88,6.43,6.80,7.07,4.50,5.00,5.50,6.00,6.50,7.00,7.50,0,2000000,4000000,6000000,8000000,1,e+007,1.2,e+007,TIC: DRUGDEMO.D,总离子色谱,Slide #,5,M/Z,Abundance,82,166,182,303,50,100,150,200,250,1000000,Scan 32 (5.281 min): ALKDEMO.D,M/Z,Abundance,82,166,182,303,50,100,150,200,250,1000000,Scan 33 (5.289 min): ALKDEMO.D,M/Z,Abundance,82,166,182,303,50,100,150,200,250,1000000,Scan 34 (5.297 min): ALKDEMO.D,M/Z,Abundance,82,166,182,303,50,100,150,200,250,1000000,Scan 35 (5.305 min): ALKDEMO.D,Time,Abundance,5.25,5.26,5.27,5.28,5.29,5.30,5.31,5.32,5.33,2000000,4000000,6000000,8000000,TIC: ALKDEMO.D,32,33,34,35,31,36,30,总离子色谱,Slide #,6,MASS,TIME,MS,采集参数,质量范围,e.g. 35 - 350,A/D s,e.g. N = 2,or 4 samples,per 0.1,amu,Scan high low, 0.1,amu,steps,Signal averaging with 2 determinations per 0.1,amu,data point,MASS,TIME,质量峰检测,Slide #,7,影响扫描时间的因素:,平均每 0.1,amu,增加 数据点的数目,(,sampling rate),扫描质量范围,离子检测的真实数目,(,scan threshold),每个色谱峰通过5-10次扫描可以很好地,定性,!,每个色谱峰通过10-20次扫描可以很好地,定量,!,MASS,TIME,程序时间,回扫时间,扫描时间,扫描循环时间,数字式扫描过程,Slide #,8,1,E2,2,E2,3,E2,4,E2,5,E2,6,E2,7,E2,8,E2,9,E2,1,E3,1,E3,ABUNDANCE,150.0,151.0,152.0,153.0,154.0,155.0,M/Z,1.1,E3,阈值,3,2,1,4,5,1,2,3,4,5,3,2,1,4,5,STORES: 154.10, 1137,用五个邻近的数据点平滑,确定中心质量,(,质量峰最大).,质量中心的水平应超过质量阈值,数据文件同时储存质量和丰度,质量峰检测,(,续),Slide #,9,阈值过高,82,182,M/Z,相对强度,M/Z,相对强度,82,303,182,阈值设置适当,阈值,Slide #,10,MS,需考虑的事项,扫描速度/循环时间,GC,需考虑的事项,峰宽,Data,需考虑的事项,信号,:,噪声比率,高斯峰形,峰倾斜,阈值,Slide #,11,讨论主题:,选择离子检测（,SIM,）,与扫描的区别,SIM,采集参数如何影响数据,SIM,方式如何进行数据采集,选择离子检测的原则,Slide #,12,SIM,是什么?,只监视所选择信息的质荷比,它如何做?,控制质量分析器，仅仅对感兴趣的质量进行分析,为什么做?,提高灵敏度,改善峰形,改善精确度,应用,痕量分析,复杂基质,常规定量,选择离子检测,Slide #,13,SIM,数据采集,Dwell,time,SIM,mass 1,SIM,mass 2,SIM,循环时间,四极杆,电压,(,amu,),TIME,SIM,mass 3,空中时间,扫描数据采集,扫描时间,扫描循环时间,空中时间,四极杆,电压,(,amu,),TIME,SIM,与,SCAN,比较,Slide #,14,选择:,离子/组数目,每个离子驻留时间,以便获得良好的数据采集所需的循环/峰数目,目标:,每个峰通过 15-25 次循环,每个离子驻留时间相同,运用时间规划,(,SIM Groups),使,采集/循环离子数目最少,设置,SIM,采集,Slide #,15,该,SIM,质谱图是,9-,羧基,THC,的离子以,0.1,amu,增加量.,选择最大丰度的质量数做,SIM,采集,动态质量校正,9-,CarboxyTHC TMS,Derivative,Mass to charge ratio in 0.1,amu,increments,0,20,40,60,80,100,120,.7,.8,.9,.0,.1,.2,.3,.4,.5,.7,.8,.9,.0,.1,.2,.3,.4,.5,.7,.8,.9,.0,.1,.2,.3,.4,.5,.7,.8,.9,.0,.1,.2,.3,.4,.5,73.0,488.3,473.3,371.2,Normalized Abundance,371.0,473.0,488.0,动态质量校正,Slide #,16,在左图的三种可能性中选择最大丰度质量,不会导致,来源于调谐与调谐之间不正确比率的错误负峰,选择精确质量和整数质量对照,Slide #,17,如果自动调谐质量轴为,-0.1,amu,离子比率将如何,？,左图为精确质量，右图为整数质量,二者化合物相同但测定结果不同,9-,羧基,THC,TMS,衍生物峰比率,Slide #,18,可以监视,30,离子/组,50,组/采集,使用最小数目的,离子/组,以获得最大灵敏度和精度,选择最有特征的离子,高质量,丰度,化合物特有的,可以选择化合物的特征离子以达到分类目的,选择,SIM,离子,Slide #,19,PEAK #1:,质谱图,质量数丰度表,Quant,Ion:,Qualifier Ion:,Qualifier Ion:,20,30,40,50,60,70,80,90,100,110,120,130,140,150,160,0,50000,100000,150000,200000,250000,300000,350000,400000,450000,500000,550000,600000,650000,700000,750000,m/z-,Abundance,28,39,44,51,63,75,76,89,98,102,115,125,128,139,151,154,联苯,%,abund,.,m/z,%,abund,.,m/z,50.1,2,127.1,2,51.1,3,128.2,3,63.1,3,139.1,2,64.1,3,150.2,2,74.0,2,151.2,8,75.1,2,152.1,26,76.1,12,153.1,40,77.1,5,154.1,100,115.1,4,155.1,13,126.1,3,PEAK #2:,质谱图,质量数丰度表,20,40,60,80,100,120,140,160,180,200,0,50000,100000,150000,200000,250000,300000,350000,400000,450000,m/z-,Abundance,26,28,39,51,63,76,87,94,101,113,126,136,149,152,162,177,188,191,氯联苯,m/z,%,abund,.,m/z,%,abund,.,50.1,2,149.1,3,51.1,2,150.1,5,63.1,5,151.2,13,74.1,3,152.1,44,75.1,5,153.1,19,76.1,14,154.1,2,94.1,4,188.2,100,101.1,2,189.1,13,126.1,3,190.2,33,127.1,3,191.1,4,Quant,Ion:,Qualifier Ion:,Qualifier Ion:,选择,离子,SIM,-,Course Problem,Slide #,20,RF,电压,DC,电压,扫描线选择,153,151,152,高,-,维持质量峰宽,为 0.5,amu,低,(,默认值),-,质量峰宽增大到,0.9,amu,选择,“,LOW,”,可增加灵敏度,低分辨方式不适合于质量差别,3,amu,的化合物测定,(,如：,同位素标记内标),低或高质量分辨,Slide #,21,本章将学到,如何输入,GC,参数,如何输入,MS (scan),参数,如何输入,MS (SIM),如何输入,如何设置系统监控,数据采集设置,Slide #,22,Slide #,23,method,是为仪器和计算机设定的采集和处理数据的一个完整指示,数据采集,采集方式,调谐文件,MS,质谱应用参数,GC,质谱应用参数,进样口参数,Methods,在,HPCHEMnMethods,子目录下,由,“,.,m,”,扩展名识别.,数据文件在,HPCHEMnDATA,子目录下,由,“,.,d,”,扩展名识别.,n,represents instrument number,什么是方法?,Slide #,24,所有仪器控制由这一窗口进行,当前方法显示于栏目中,Views -,仪器控制,Slide #,25,输入所有流量和压力参数(选用恒流方式、MSD及Vacuum,色谱柱,Slide #,26,安装柱子,点击,Slide #,27,点击,Slide #,28,Slide #,29,输入柱子编号,，点击,OK,Slide #,30,按,Add,出现这一目录,“,Install”,安装,校正,所安装的柱子,更换柱子,Slide #,31,从目录中选择柱子,在目录中增加柱子,从目录中删除柱子,更换柱子,(,添加新柱子于目录中),Slide #,32,选择柱子以安装,从目录中删除柱子,更换柱子,(“,install”),Slide #,33,使用其他厂家柱子,Slide #,34,填写相关信息，点击,OK,Slide #,35,校正柱长,步骤,1,首先用,1,微升空气进样，记录其保留时间。点击,change/calibrate,Slide #,36,步骤,2,Slide #,37,输入空气峰的真实保留时间,步骤,3,Slide #,38,步骤,4,Slide #,39,步骤,5,Slide #,40,选择进样方式,Slide #,41,选择进样,源,(,GC or other),选择进样,方式,(手动,ALS,或阀),如果手动，需选择进样口,如果选用,MS,采集样品，选择,Use MS .,如果只用,GC,，,则不选此项,进样口和注射器信息,Slide #,42,选择方法的某部分进行编辑,方法/编辑完整方法,编辑方法,Slide #,43,填入关于方法的说明,选择,acquisitions,和,analysis,方法信息,Slide #,44,设置进样量和注射器清洗程序,按键,Configure . . .,设置注射器大小,按键,More .,. .,设置注射速度,注射器控制,Slide #,45,黏度：最后一次泵起至进样的时间有效值,0-7,样品深度,：,0.00,表示针尖与标准瓶底距离,3.6mm,有效值,-2,30.0,进样前注射器在进样口停留时间,有效值,0.00-1.00,进样后注射器在进样口停留时间,有效值,0.00-1.00,进针速度,Slide #,46,首先配置阀,(,如果使用),使用,RunTime,对话框，确定运行过程中阀事件的时间表,阀控制,Slide #,47,阀在,OPEN,位置,超量液体从分流口排出,FS,PS,SPR,流量,限制器,比例,阀 1,流量,控制回路,阱,流量,传感器,隔垫螺母,压力传感器,隔垫,吹扫,调整,柱头压控制回路,隔垫吹扫出口,分流出口,比例,阀 2,吹扫,阀,(,开),分流进样方式,Slide #,48,阀处于,CLOSED,位置,除隔垫吹扫外，全部流量进入柱子,FS,PS,SPR,流量,限制器,比例,阀 1,阱,流量,传感器,隔垫螺母,压力,传感器,隔垫,吹扫,调整,隔垫吹扫出口,分流出口,比例,阀 2,Purge,阀,(,关),进样口压力控制回路,不分流进样方式,Slide #,49,选择,Split,输入全部设定值,进样口-,分流进样,Slide #,50,选择,Splitless,输入全部设定值,进样口,-,不分流进样,Slide #,51,选择,Pulsed,Splitless,输入全部设定值,进样口,-,脉冲不分流进样,Slide #,52,选择,Pulsed Split,输入全部设定值,进样口,-,脉冲分流进样,Slide #,53,柱流量和压力按时间编程,程序变流进样,Slide #,54,输入炉温设定值,炉温,Slide #,55,输入,GC,检测器温度设定值,(,如果有,GC,检测器,),检测器,Slide #,56,保存,GC,检测器数据,(,如果有,GC,检测器,),监控温度,监视流量或压力,信号,Slide #,57,输入辅助部件（,MS,接口）温度,输入辅助部件压力,辅助部件,Slide #,58,运行期间可自动运行25个时间表,运行时间表,Slide #,59,为方法定义压力单位,锁住,HP6890,键盘,GC,检测器柱补偿,(,如果有,GC,检测器,),选项,Slide #,60,从仪器控制面板监视信号时观察或移动,GC,检测器保留时间（ 如果有,GC,检测器）,GC,保留时间绘图,Slide #,61,选择用于,MS,采集的调谐文件,MS,调谐文件,Slide #,62,选择采集方式,输入扫描参数,MS SIM/Scan,参数(扫描方式),Slide #,63,选择采集方式,输入,SIM,参数,MS SIM/Scan,参数,(,SIM,方式,),Slide #,64,检测器,on/off,时间程序,倍增器电压随时间变化程序,阀时间程序,MS SIM/Scan,参数,(,时间事件),Slide #,65,更改,EM,电压,溶剂延迟,采集方式,编辑采集参数,离子源与四极杆温度,编辑时间事件表,5973N MS,采集参数（,SCAN,）,Slide #,66,扫描范围,阈值与采样点数,Slide #,67,输入新方法名称,保存方法,Slide #,68,用于监视,MS,源压力,阀 和,MS,温度范围.,MS,监控,Slide #,69,适用于远距离控制,监控警告器,Slide #,70,选择,Method/Run,样品瓶标识,采集数据,Slide #,71,从,Instrument Control,窗口,选择,Window/Total Ion,保留时间显示,