大孔吸附树脂在新药研究开发和生产中应用及存在问题

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,大孔吸附树脂在新药研究开发和生产中的应用及存在的问题,1,概 述,中药有效成分的不断阐明,中药现代化的要求,当前用于中药纯化的主要技术：,溶剂法：,沉淀法：,色谱法：,大孔吸附树脂、离子交换树脂、 聚酰胺、葡聚糖凝胶等,超临界流体萃取法：,超滤法：,结晶法：,2,一、树脂简介,1,、常用树脂的类型,凝胶树脂,大孔树脂,离子交换树脂,3,2,、离子交换树脂,4,离子交换树脂的种类,种 类 活 性 基 团,1,强酸性 磺酸基,(SO,3,H),2,弱酸性 磷酸基,(PO3H2),、,羧酸基(,COOH),3,强碱性 型：三甲基胺(-,N+(CH3)3),型：二甲基乙醇胺(,N+(CH3)2C2H4OH,4,弱碱性 伯氨基(-,NH2),、,仲氨基(-,NHR),、,叔氨基(-,NR2),5,两性 强碱弱酸,弱碱弱酸,5,3,、大孔吸附树脂,6,目前国产树脂的主要类型,致孔剂：,甲苯、石蜡、溶剂汽油、煤油、碳醇、聚乙烯醇等,7,国产大孔吸附树脂的主要型号、性能、生产企业,型号 性能 生产企业,D-101,非极性 天津晶莹提取树脂有限责任公司,D-201,弱极性 天津晶莹提取树脂有限责任公司,D-301,极性 天津晶莹提取树脂有限责任公司,HPD-100,非极性 河北沧州宝恩化工有限公司,HPD-300,弱极性 河北沧州宝恩化工有限公司,HPD-600,极性 河北沧州宝恩化工有限公司,X-5,非极性 南开大学化工厂,AB-8,弱极性 南开大学化工厂,NKA-9,极性 南开大学化工厂,8,三菱化学的大孔吸附树脂,聚苯乙烯系列合成树脂：,Diaion: HP20, HP21,Sepabeads: SP825, SP850,Sepabeads: SP70, SP700,修饰的聚苯乙烯系列合成树脂,:,Sepabeads: SP207,异丁烯系列合成树脂,:,Diaion: HP2MG,9,大孔吸附树脂的主要理化性质,颜色：白色、乳白色至微黄,物理化学性质稳定，不溶于任何酸、碱及有机溶剂，加热不溶，可在,150,以下使用,含水量：,60,80,堆积密度：,0.6,0.9,10,影响树脂性能的主要因素及国产树脂存在的主要问题,交联度,比表面积,吸附容量,粒度分布,强度,11,二、大孔吸附树脂的预处理,12,1,、树脂预处理的方法,回流提取法,渗漉法,水蒸气蒸馏法,2,、树脂预处理的溶剂,乙醇,丙酮,异丙醇,2,5,盐酸,2,5,氢氧化钠,13,3,、渗漉法纯化树脂,色谱柱：,不锈钢柱；径高比为,1:3,1:7,装柱：,湿法装柱,洗脱溶剂：,乙醇,2,5,盐酸,2,5,NaOH ,水,甲醇,2,5,盐酸,2,5,NaOH ,水,混合溶剂,2,5,盐酸,2,5,NaOH ,水,洗脱方法：,乙醇法：,乙醇浸泡,12h 2BV,洗脱,浸泡,3,5h 2BV,洗脱,浸泡,3,5h 3,5BV,洗脱,浸泡,3,5h 3,5BV,洗脱,2,3BV,盐酸浸泡24,h ,洗脱水洗脱,2,3BV NaOH,浸泡24,h ,洗脱水洗脱,14,混合溶剂法：,混合溶剂浸泡,12h 2BV,洗脱,浸泡,3,5h 2BV,洗脱,浸泡,3,5h 3,5BV,洗脱,2,3BV,盐酸浸泡24,h ,洗脱水洗脱,2,3BV NaOH,浸泡24,h ,洗脱水洗脱,新方法：,乙醇浸泡,3,5h 3,5BV,乙醇洗脱,2,3BV,盐酸浸泡24,h ,洗脱水洗脱,2,3BV NaOH,浸泡24,h ,洗脱水洗脱,15,4,、乙醇法纯化树脂有机残留物检测,16,17,三、大孔吸附树脂的再生,再生溶剂的选择,乙醇：,50,95,甲醇：,50,100,异丙醇：,丙酮：,50,100,碱性乙醇溶液：,2,5,盐酸：,2,5,NaOH,：,洗脱方法,正洗脱：,逆流洗脱：,18,四、大孔吸附树脂在新药研究中的应用,19,1,、适用的新药类型,中药有效成分的粗分和精制,单味中药有效部位的制备,中药复方有效部位的制备,注意：,性质相似成分可混煎后一起制备,各味药所含成分性质差别较大的复方应单独提取后，再制备,单味药有效成分性质差别较大的应分别制备,20,2,、成分的类型与树脂的选择,脂溶性成分包括甾体类、二萜、三萜、黄酮、木脂素、香豆素、生物碱等,：应选择非极性或弱极性的树脂，如,D101,、,AB-8,、,HPD100,等,皂苷和生物碱苷类成分,：应选择弱极性或极性树脂，如,D201,、,D301,、,HPD300,、,HPD600,、,AB-8,、,NKA-9,等,黄酮苷、蒽醌苷、木脂素苷、香豆素苷等,：应选择合成原料中加有甲基丙烯酸甲酯或丙烯氰的树脂，如,D201,、,D301,、,HPD600,、,NKA-9,等,环烯醚萜苷类成分,：应选择极性树脂，如,D301,、,HPD600,、,NKA-9,等,21,3,、树脂用于新药研究应考察的内容,(1),树脂型号的选择,比吸附值考察,分离性能考察,(2),药材树脂比例的考察,(3),色谱柱的径高比考察,(4),洗脱溶剂的考察,(5),吸附流速和洗脱流速考察,(6),收集洗脱液量考察,(7),树脂的使用寿命考察,(8),工艺放大试验,22,4,、树脂分离条件的正交试验,表头的设计,因素 药材树脂 色谱柱 洗脱流速 收集洗脱,水平 比例 径高比,BV/h,液量,1 1:1 1:3 1 3,2 1:2 1:5 2 5,3 1:3 1:7 3 7,23,实例一：某中药中苯乙醇苷类成分的分离、精制,该中药所含的成分：苯乙醇苷类、环烯醚萜及其苷类、木脂素及其苷类、多元醇、水溶性生物碱、单糖、双糖、氨基酸等,24,1,、树脂型号的考察,25,2,、树脂用量和吸附次数的考察,26,3,、洗脱液乙醇浓度的考察,乙醇浓度,20,40,60,80,洗脱量,9,倍,5,倍,4,倍,3,倍,检出杂质 脂溶性 脂溶性,成分 成分,27,4,、收集洗脱液量的考察,第一次洗脱,第二次洗脱,洗脱溶剂 水洗脱,40,乙醇洗脱,收集量,4 5,TLC,检测 未检出糖 难检出苯乙醇苷,洗脱溶剂 水洗脱,40,乙醇洗脱,收集量,3 4,TLC,检测 未检出糖 难检出苯乙醇苷,28,实例二、某中药中黄酮苷类成分的分离、精制,1,、树脂型号的考察,29,3,、洗脱条件的正交试验,30,31,5,、成品中有机残留物的限量检查,检查方法：,气相色谱法,检查成分：,应根据树脂合成中所接触的有机成分确定检查成分,测定方法：,顶空进样或溶剂法,含量限度：,苯：,2ppm,；,其它：20,ppm,方法学考察：,溶剂的气相色谱检测,基线噪音和最低检测限的测定,对照品的测定,供试品的测定,32,标准的书写格式,色谱条件和系统适用性试验,对照品溶液的制备,供试品溶液的制备,测定法,起草说明,33,五、大孔吸附树脂在中药及植物提取物生产中的应用,34,1,、槐花米中黄酮苷类成分的分离、纯化,槐花花穗,9.9kg,MeOH,提取,36,L,HP20,吸附,MeOH,溶解,50,-10L+100%-10L,LH-20,吸附,MeOH,溶解,CHP20P,吸附,50%,EtOH,流份,ODS,层析分离,45%,MeOH,洗脱,3,4,5,7-,四羟基黄酮,-,3-,葡萄糖酸苷,35,2,、大孔树脂在绞股蓝总皂苷精制中的应用,绞股蓝,水煎液,D101,树脂,水洗脱,弃去,95,乙醇洗脱,收集洗脱液,浓缩得总皂苷,36,3,、大孔树脂在贯叶金丝桃提取物制备中的应用,贯叶金丝桃,80,乙醇提取物,正己烷,脱脂,乙酸乙酯提取,黄酮和双萘醌,残渣,溶于水,D101,树脂,水洗脱,除去杂质,95,乙醇洗脱,总黄酮,37,3,、大孔树脂在贯叶金丝桃提取物制备中的应用,贯叶金丝桃,80,乙醇提取物,正己烷,脱脂,乙酸乙酯提取,黄酮和双萘醌,残渣,溶于水,D101,树脂,水洗脱,除去杂质,95,乙醇洗脱,总黄酮,38,谢 谢！,屠鹏飞,100083,，北京市学院路,38,号,北京大学药学院,电话、传真：,010,39,