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单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,本实验使用的液体,PBS,生长液,10%,小牛血清（,CS),P.S,用,5.6% NaHCO3,调,PH,至,7.2-7.4,维持液,小牛血清（,CS) 2%,P.S,用,5.6% NaHCO3,调,PH,至,7.2-7.4,断颈法处死鼠，把整个动物放入,75%,酒精的烧杯中数秒，背部向上固定在解剖台。戴口罩及手套等，皮肤消毒（碘伏,),，解剖取肾,(,取双侧肾）。将肾放入无菌平皿中。,处理解剖用具,(,鼠扔塑料袋中，解剖台及使用过的用具放讲台）。,将移入无菌平皿中的肾，用,PBS,液洗两次（用无菌无刻度吸管）。在平皿中将肾剪碎成,1-2mm,3,大小组织块，用,PBS,液洗,2-3,次（用无刻度吸管,轻轻吸液,),移入,50ml,烧瓶中。上述烧瓶中加,10ml PBS,液，再加入,5 ml 0.5%,胰蛋白酶（已量好）重悬沉淀，,混合，封好口，标记姓名,。,37,水浴,15-20 min,分钟,(,棉絮状为最佳）。,轻移烧瓶，吸去上清（尽量吸尽），,加,10ml,生长液，用无刻度吸管反复吹打，分散。,滤网过滤，至无菌平皿，用无刻度吸管移入,培养瓶内,（必要时加点生长液,，,标记姓名和班级（在侧面）。,孵箱培养 培养,72,小时后首次换液，以后每两天换液一次。直到细胞生长并融合成单层,(,此步由我们做）。,中细胞计数一步省略。即获得的单细胞选用少量，按,1,：,5,或,1,：,10,稀释后计数，调整细胞浓度为（,0.5-1,）,X10,6,/ml.,原代鼠肾细胞培养,
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