实验五 鸡新城疫的实验室诊断及免疫效果的评价

单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,单击此处编辑母版标题样式,*,实验五 鸡新城疫的实验室诊断及免疫效果的评价,一、实验,目的,1,、掌握鸡新城疫的临诊要点。,2,、了解和掌握鸡新城疫的实验室诊断和免疫监测技术。,二、实验内容,1,、鸡新城疫的临诊要点。,2,、鸡新城疫的实验室诊断。,3,、鸡新城疫的免疫效果评价。,HA,和,HI,的原理,1,、,HA,试验：,许多病毒表面有血凝素，能与各种动物的红细胞表面受体结合，而出现红细胞凝集现象，简称为病毒的血凝现象,。,2,、,HI,试验：,病毒的红细胞凝集现象，可以被特异性免疫血清所抑制，称,HI,试验。,1,、鸡新城疫的,血凝试验,(HA),【,材料,】,新城疫病毒鸡胚接种尿囊液,1,份,0.6,鸡红细胞悬液,1,管,生理盐水或,PBS 1,瓶,96,孔微量血凝板,1,块,微量加样器,1,支,【,病毒血凝试验的操作方法,】,孔 号,1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11,12,病毒稀释度,1:2,1:4,1:8,1:16,1:32,1:64,1:128,1:256,1:512,1:1024,1:2048,对照,生理,盐水,50,50,50,50,50,50,50,50,50,50,50,50,病毒液,50,50,50,50,50,50,50,50,50,50,50,0.5%,红细胞,50,50,50,50,50,50,50,50,50,50,50,50,微型振荡器,1min,，静置,30min,弃,50,结果观察,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,-,-,以,100%,凝集的病毒最大稀释度为该病毒血凝价，即为一个凝集单位,单位：,L,置于振荡器上振荡,1,分钟，静置后,30 min,开始观察结果，待对照孔红细胞已沉淀即可进行结果观察。红细胞全部凝集，沉于孔底，平铺呈网状，即为,100%,凝集（,+,），不凝集者（,-,）红细胞沉于孔底呈点状。,以,100%,凝集的病毒最大稀释度为该病毒血凝价，即为一个凝集单位。从表,4-1,看出，该新城疫病毒液的血凝价为,1:128,，则,l:128,为,1,个血凝单位，,1:64,、,l:32,分别为,2,、,4,个血凝单位，或将,128/4=32,，即,1:32,稀释的病毒液为,4,个血凝单位。,【,结果判定,】,2,、鸡新城疫的,血凝抑制试,(HI),【,材料,】,除血球凝集试验所用材料外，血清取鸡免疫血清或者取高免卵黄抗体。,【,病毒血凝抑制试验的操作方法,】,弃,50,以,100,抑制凝集（完全不凝集）的被检血清最大稀释度为该血清的血凝抑制效价，即,HI,效价。,单位：,L,以,100,抑制凝集（完全不凝集）的被检血清最大稀释度为该血清的血凝抑制效价，即,HI,效价。凡被已知新城疫阳性血清抑制血凝者，该病毒为新城疫病毒。,从表,4-2,看出，该血清的,HI,效价为,1:64,，用以,2,为底的负对数,(-log2),表示，即,6log2,。,【,结果判定,】,1,、免疫鸡群发生新城疫流行有何特点？,2,、简述确证新城疫的实验室诊断方法。,3,、记录并分析,HA,、,HI,实验的结果。,4,、进行,HA,、,HI,实验时有哪些注意事项？,作 业,