5-3-三萜皂苷汇总课件

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,第三节 三萜皂苷类成分分析,triterpenoid saponins,1,人参,调节机体代谢、增加免疫功能,桔梗,祛痰,甘草,降胆固醇、抗动脉硬化,酸枣仁,镇静、催眠、降压,作用,具多方面的生物活性,一、概述,多数能与胆甾醇结合生成复合物沉淀而产生溶血作用,2,三萜,含30个碳原子的萜类化合物,多以皂苷形式存在,皂苷,水溶液振摇能产生持久性肥,皂样泡沫,（甾体、三萜）,3,二、结构特征和理化性质,（一）结构特征,三萜皂苷元,+,糖,三萜皂苷,多为,四环三萜,以及,五环三萜,葡萄糖,半乳糖,鼠李糖,阿拉伯糖,木糖,4,HO,中性皂苷,糖,糖,四环三萜皂苷元,5,人参皂苷Re,6,人参皂苷Rg,1,7,黄芪甲苷,8,五环三萜皂苷元,酸性皂苷,糖,COOH,COOH,9,齐墩果酸,10,熊果酸,11,甘草酸,12,分析方法特点,1.,多无共轭体系，无明显UV特征,2.,在硫酸作用下，可发生脱水、脱,羧、氧化等变化，产生颜色,，可,用于鉴别和含量测定,3.,以,TLC、HPLC,检测为主,13,（二）理化性质,1. 物理性质,（2）皂苷多为无定形粉末，,有吸湿性，,可降低水溶,液表面张力,（1）皂苷元多为结晶,14,2. 溶解性,三萜皂苷元,+,糖,三萜皂苷,难溶于水,易溶于有机溶剂,可溶于水,易溶于含水正丁醇,难溶于极性小的溶剂,15,3. 与金属盐类的反应,与,Ba,2+,、Cu,2+,、Pb,2+,、Al,3+,16,原理,含不饱和双键或羟（酮）基的三萜化合物可与强酸等作用，使苷元发生脱水、脱羧、氧化、缩合、分子重排等反应，,因生成具有多烯结构的缩合物而改变颜色,4. 显色反应,17,显色剂,多为氧化剂,或,强酸试剂,常用硫酸,或,含硫酸混合溶液,特点,灵敏度低、专属性差,久置后褪色,仅用于药味少的制剂分析,18,（1）醋酐-硫酸反应,（Liebermann-Burchard反应）,醋酐,黄,红,紫,蓝,绿,19,例,甘草浸膏,【鉴别】（1）,取本品细粉约12mg，置,白瓷板上，加硫酸溶液（45）数滴，即显,黄色，渐变为橙黄色至橙红色。,（甘草酸）,20,（2）五氯化锑反应,（Kahlenberg反应）,例,复方丹参片,（丹参、三七、冰片）,CHCl,3,紫蓝色,（三七皂苷）,6070,紫蓝色,21,（3）三氯醋酸反应,（Rosen-Heimer反应）,100,红,紫,60,红,紫,22,（4）冰醋酸-乙酰氯反应,（Tschugaeff反应）,冰醋酸,、,淡红,紫红,或,23,（5）氯仿硫酸反应,（Salkowski反应）,氯仿,红,蓝,荧光,或两液接界处显,红色环,24,例,养心定悸膏,（煎膏剂）,【鉴别】（2）,取本品10mL，加水5mL，摇,匀，加正丁醇10mL，振摇，分取正丁醇液，置,水浴上蒸干，残渣加氯仿1mL使溶解，移至试,管中，沿管壁滴加硫酸0.5mL，两液接界处显,红色环。,（甘草酸）,25,三、定性鉴别,1. 泡沫反应,常用于药材鉴别,强力,15,原理,皂苷具有降低水溶液表,面张力的作用,26,例,暑症片,【鉴别】（2）,取本品2片，研细，加水10,mL，置水浴上加热5分钟，滤过，滤液置具,塞试管中，密塞，强力振摇1分钟，即产生持久性蜂窝状泡沫，在15分钟内不得明显减少。,（桔梗皂苷、甘草酸）桔梗、甘草,27,区分三萜皂苷和甾体皂苷,两管泡沫高度相同,三萜皂苷,碱管泡沫比酸管多,甾体皂苷,0.1mol/L,HCl,5mL,+,药液,(pH1),0.1mol/L,NaOH,5mL,+,药液,(pH13),28,2. 显色反应,硫酸反应,（醋酐、氯仿）,五氯化锑反应,三氯醋酸反应,29,3. 薄层色谱法,皂苷类成分结构复杂，又无明显UV特征，故TLC法是常用的分析方法,30,31,32,流动相,用于皂苷元时极性要小些,氯仿-丙酮,（19:1）,用于皂苷时极性要大些,水饱和的正丁醇,33,显色剂,（氧化性或强酸性试剂）,硫酸-乙醇,（10%、50%）,碘蒸气,34,例,生脉饮 ChP,【鉴别】,展开剂,环己烷-丙酮,（2:1）,显色剂,硫酸-甲醇,（1:1）,对照品,人参二醇、人参三醇,35,a,b,36,四、含量测定,提取溶剂,*,皂苷元极性弱，易溶于有机溶剂,*,皂苷极性较大，易溶于亲水性,有机溶剂,（甲醇、乙醇、丁醇）,萃取溶剂,正丁醇,（水饱和）,37,（一）重量法,*,待测组分的含量,正丁醇浸出物,原料药的质量控制,38,例,甘草浸膏,（甘草酸）,ChP,【含量测定】,取本品约6g，精密称定，加水50mL溶解后，移至100mL量瓶中，用乙醇稀释至刻度，混匀，静置12小时，精密吸取上清,液25mL置烧杯中，加氨试液3滴，置水浴上蒸,发至稠膏状，加水30mL使溶解，缓缓加入盐酸溶液（310）5mL，在冰水中静置约30分钟，滤过，沉淀用冰水洗涤4次，每次5mL，弃去洗液及滤液，沉淀置滤纸上放置约23小时，,39,使水分自然挥散，再用预先加热至6070的乙醇10mL使沉淀溶解，滤过，滤器用热乙醇洗涤至洗液无色，合并乙醇液，置已干燥至恒重的烧杯中，在水浴上蒸干，并在105干燥3小时，精密称定，计算供试品中甘草酸的含量，即得。,本品含甘草酸（C,42,H,62,O,16,）不得少于20.0%,40,（二）比色法,主要是通过显色剂与总皂,苷或总皂苷元反应显色，在可,见光区测定，灵敏度高，但专,属性差,41,显色剂,多为氧化性或强酸试剂,香草醛-硫酸,高氯酸,硫酸,（或硫酸-乙醇溶液）,亚甲蓝,42,例,薯蓣皂苷元,与硫酸-甲醇（4:1）反应后可,在405nm波长处测定,例,甘草酸,与亚甲蓝反应后可在640nm波长处,测定,43,（三）薄层色谱法,方法,薄层色谱-比色法,薄层扫描法,（TLCS）,44,例,复方扶芳藤合剂 ChP,提取,水饱和的正丁醇,纯化,D101型大孔吸附树脂柱,对照品,黄芪甲苷,（外标两点法）,薄层板,硅胶G,（含0.1%CMC-Na）,展开剂,正丁醇-醋酸乙酯-水,(4:1:5),上层,-甲醇（10:1）,显色剂,10%硫酸乙醇溶液,（100加热）,测定波长,S,=,530nm ,R,=,700nm,45,（四）HPLC法,*,药物有UV吸收,紫外检测器,柴胡皂苷元A,甘草次酸,46,*,药物弱UV特征,150nm,200nm,400nm,800nm,远UV区,UV区,可见光区,IR区,溶剂（流动相）常有干扰,检测末端吸收,47,15,A. 三萜皂苷 B. 甾体皂苷,C. A和B均可 D. A和B均不可,1. 泡沫反应,2. 与硫酸作用产生颜色,3. 遇三氯醋酸100时斑点由红变紫,4. 酸、碱管泡沫强度相同,5. 三氯化铁反应中显紫堇色,C,C,A,A,D,48,6. 下列中药水溶液能产生泡沫反应是,A.,金银花,B.,黄芩,C.,甘草,D.,乌头,E.,麻黄,49,7. 皂苷类药物的特点,A. 遇碱显红紫红色,B. 遇硫酸显色并增强UV吸收,C. 溶血作用和泡沫反应,D. 盐酸-镁粉反应,E. 多无共轭体系，无明显UV特征,50,8. 三萜皂苷元结构的共同特点是都有,A. 5个环,B. 30个碳原子,C. 8个甲基,D. 羧基,E. 4个环,51,