4.2-培养液中酵母菌种群数量的变化

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,探究培养液中酵母菌,种群数量的动态变化,探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化是一项有着多方面意义和价值的探究活动。在这个探究活动中用到了4个科学方法：（1）数学模型法；,（2）抽样检测法；,（3）显微观察法；,（4）微生物培养法。,基 础 回 扣,（1）酵母菌,酵母菌是,单细胞真核生物,。,生长周期短，增殖速度快，,还可以用酵母菌作为实验材料研究,（探究酵母菌的呼吸方式）,（2）种群数量的变化,种群数量的变化包括,增长、波动、稳定、下降,等,“S”型曲线有一个K值，即环境容纳量。,种群数量的增长也受到许多环境因素（如,温度、培养液的pH、培养液的,成分,、代谢产物,等）的影响。,（3）血球计数板,血球计数板是一种专门用于计算较大单细胞微生物的一种仪器。,计数时，常采用,抽样检测法（或显微直接计数法）,。,（4）探究性实验,探究实验设计时要遵循的原则：,科学性原则,可行性原则,对照,性,原则,单一变量原则,、等量性原则,平行重复原则,培养液中酵母菌种群数量与,时间,的变化关系,1、,实验原理：,种群的数量变化有一定的规律。在,理想条件下，种群呈“J”型增长，在有限的环境下，种群呈“S”型增长,。,酵母菌,生长周期短，增殖速度快且世代间不重叠,，在实验室条件下，用液体培养基培养酵母菌，可以观察酵母菌种群数量随时间变化的情况。,对于压在小方格界线上的酵母菌应取,相邻两边及顶角,计数。,2、,步骤,l,培养液配制,：配制质量分数为5的葡萄糖溶液（葡萄糖20g，1000 mL水），分装到5个,锥形瓶,中（200mL/,锥形瓶,）,l,灭菌,：用高压蒸汽灭菌锅将培养液和取样、计数时所用的滴管分别灭菌。贴标签。,l,接种,：接种时要在酒精灯附近，用灭菌干净的1mL刻度吸管每次吸取0.1mL酵母菌母液，往每个,锥形瓶,中加入。（,注意滴加量不要太多，避免初始菌数过多,。,）,l,培养,：将,锥形瓶,置于 28的恒温箱中培养,3、,计数,a.,取样时间一致,b.,取样前要,将,试管,振荡摇匀,，使酵母菌,均匀分布,c.操作方法：将盖玻片放在计数室上，,用,吸,管吸取培养液,，,滴,于,盖玻片的边缘,，待培养液自行渗入,，多余培养液用滤纸吸去。稍待片刻，待酵母菌细胞全部沉降到计数室底部，将计数板放在载物台中央，计数一个小方格内的酵母菌数量，再估算试管（10ml）中的酵母菌总数。,d.若小方格内酵母菌过多，难以数清，,应对培养液进行,稀释,。,例2:酵母菌的计数通常用血球计数板进行，血球计数板每个大方格容积为0.1mm,3,，由400个小方格组成。现对某一样液进行检测，如果一个小方格内酵母菌过多，难以计数，应先,后再计数。若多次重复计数后，算得每个小方格中平均有5个酵母菌，则10mL该培养液中酵母菌总数有,个。,例,1 :,在用血球计数板（,2mm2mm,方格）对某一稀释,50,倍样品进行计数时，发现在一个计数室内（盖玻片下的培养液厚度为,0.1mm,）酵母菌平均数为,16,，据此估算,10mL,培养液中有酵母菌,个。,2x10,7,210,8,稀释,例3,检测员将1 mL水样稀释10倍后，用抽样检测的方法检测每毫升蓝藻的数量；将盖玻片放在计数室上，用吸管吸取少许培养液使其自行渗入计数室，并用滤纸吸去多余液体。已知每个计数室由2516400个小格组成，容纳液体的总体积为01 mm,3,。,现观察到图中该计数室所示a、b、c、d、e 5个中格80个小格内共有蓝藻n个，则上述水样中约有蓝藻,个mL。,5n10,5,4、,结果分析,（1）数据记录,下表为一周的数据记录表：,（2）构建数学模型：,封闭环境中,的种群数量变化模型,5、,血球计数板的清洁,血球汁数板使用后,用自来水冲洗,切勿用硬物洗刷,洗后自行晾干或用吹风机吹干,或用95%的乙醇,无水乙醇,丙酮等有机溶剂脱水使其干燥.通过镜检观察每小格内是否残留菌体或其他沉淀物.若不干净,则必须,重复清洗直到干净为止,.,1、,(2009年江苏生物)某小组进行“探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化”实验时，同样实验条件下分别在4个试管中进行培养(见下表)，均获得了“S”型增长曲线。根据实验结果判断，下列说法错误的是(),A.4个试管内的种群初始阶段都经历了“J”型增长,B4个试管内的种群同时达到K值,C试管内种群的K值与试管不同,D试管内的种群数量先于试管开始下降,解析：,和试管中培养液多，营养物质多，其内种群的,K,值大于试管和的。4个试管内种群的起始阶段因空间和食物等比较充裕，属于,“,J,”,型增长。接种量不同，种群的增长速率不同，不能同时达到,K,值，接种量大的先达到稳定期继而先进入衰亡期。,答案：,B,2,.,（2009广东卷，15）,有关“探究培养液中酵母菌,数量动态变化”的实验，正确的叙述是 （ ）,A.改变培养液的,pH,不影响,K,值（环境容纳量）大小,B.用样方法调查玻璃容器中酵母菌数量的变化,C.取适量培养液滴于普通载玻片后对酵母菌准确计,数,D.营养条件并非影响酵母菌种群数量变化的唯一因,素,解析,用培养液培养酵母菌时，营养条件、,pH,、,O,2,浓度等都能影响酵母菌数量。调查酵母菌的数量,时，可采用,抽样检测法；,不可用普通载玻片,，应用血细胞计数板,。,D,（3）设计实验：,A组为实验组，装培养液10 mL，酵母菌母液0.1mL,环境温度28。,B组装培养液10 mL，酵母菌母液0.1mL,环境温度5，与A组形成温度条件对照。,C组不装培养液，只装无菌水10mL,酵母菌母液0.1mL,环境温度28，与A组形成营养条件对照。,3.讨论,（1）在计数前，还应有哪些步骤？需注意些什么？,（2）针对“培养液中酵母菌种群数量的动态变化”，有人提出了新的问题，某同学按下表完成了有关实验。,血球计数板是由一块比普通载玻片厚的特制玻片制成的.玻片中有四条下凹的槽,构成三个平台.中间的平台较宽,其中间又被一短横槽隔为两半,每半边上面,刻有一个方格网.方格网上刻有9个大方格,其中只有中间的一个大方格为计数室,供微生物计数用.这一大方格的长和宽各为1mm,深度为0.1mm,其体积为0.1mm,3,. 计数室通常有两种规格.一种是大方格内分为16中格,每一中格又分为25小格;另一种是大方格内分为25中格,每一中格又分为16小格.但是不管计数室是哪一种构造;它们都有一个共同的特点,即每一大方格都是由1625=2516=400个小方格组成,见图.,以计数酵母菌为例,(1)用血球计数板计数酵母菌悬液的酵母菌个数.(2)样品稀释的目的是便于酵母菌悬液的计数,以每小方格内含有4-5个酵母细胞为宜,一般稀释10倍即可. (3)将血球计数板用擦镜纸擦净,在中央的计数室上加盖专用的厚玻片.(4)将稀释后的酵母菌悬液,用吸管吸取一滴置于盖玻片的边缘,使菌液缓缓渗入,多余的菌液用吸水纸吸取,捎待片刻,使酵母菌全部沉降到血球计数室内.,血球计数板的使用,(5)计数时,如果使用16格25格规格的计数室,要按对角线位,取左上,右上,左下,右下4个中格(即100个小格)的酵母菌数.如果规格为25格16格的计数板,除了取其4个对角方位外,还需再数中央的一个中格(即80个小方格)的酵母菌数. (6)当遇到位于大格线上的酵母菌,一般只计数大方格的,上,方和,右,方线上的酵母细胞(或只计数,下,方和,左,方线上的酵母细胞).(7)对每个样品计数三次,取其平均值,按下列公式计算每1ml菌液中所含的酵母菌个数.,3.计算公式,(1)16格25格的血球计数板计算公式:酵母细胞数/ml=,100小格内酵母细胞个数/10040010,4,稀释倍数,(2)25格x16格的血球计数板计算公式:酵母细胞数/ml=,80小格内酵母细胞个数/8040010,4,稀释倍数,