细菌个体形态的观察 谢茜

*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,*,*,细菌个体形态特征的观察,细菌染色的原理,1,细菌涂片的制备,2,革兰氏染色,3,细菌涂片的制备,4,主要内容,实验材料,接种环、细菌别离培养物上次实验平板,接种环接种针，酒精灯，生理盐水2支，镜油瓶、拭镜纸1套，吸水纸1本，载玻片4张，细菌别离培养物上次实验平板，革兰氏染色液,4,1.1,细菌染色法,单染色法：只用一种染料染色，能清楚观察菌体大小、形态与排列，不能鉴别细菌。,复染色法鉴别染色：采用两种以上的不同染料进行先后染色，可将细菌染成不同的颜色，以便鉴别细菌。,抗酸染色:用于检查结核分枝杆菌、麻风分枝杆菌等抗酸性细菌(一些一旦用某些方法染色后，能够抵抗酸性酒精脱色的细菌)，阳性者为红色。,特殊染色：荚膜染色，芽胞染色，鞭毛染色，极体染色用于白喉杆菌异染颗粒染色。,1.1,细菌染色法,结核分枝杆菌,抗酸染色,麻风分枝杆菌,抗酸染色,产气荚膜梭菌荚膜,Hiss,染色,破伤风梭菌芽胞,芽胞染色,变形杆菌,鞭毛,Leifson,染色,白喉棒状杆菌,异染颗粒,Albert,染色,1.2,革兰氏染色法,革兰染色法是丹麦内科医生,Christain Gram,于,1884,年创立的一种细菌,复染色,方法，已有,130,多年的历史，仍在广泛使用。,2,涂片的制备,无菌操作,灭菌接种环,2,涂片的制备,细菌适宜,细菌较多,接种环取盐水,3ul2,滴,水滴间距小于,2cm,。,取菌苔少许1mm小菌落半个与盐水混匀，涂成大于1cm2均匀涂膜。,涂毕环移至涂膜中,央侧立，待环内菌膜破裂，接种环烧灼灭菌。,无菌操作,2,涂片的制备,固定,Fixation,涂片,smear,枯燥dry,手持载玻片一端，涂膜朝上，两个涂膜快速通过火焰外层,3,次，时间,2,3,秒钟。,促使菌体蛋白质凝固，固定在载玻片上，以免染色水洗的时候，细菌被水洗掉。,初染,：,结晶紫染液染,1min,水洗，甩干,媒染,：,卢戈氏碘液染,1min,水洗，甩干,脱色,：,酒精脱色约,30s,水洗，甩干,复染,：,复红染液染,30s,水洗，甩干,印干,油镜观检,染色,关键步骤！,3,革兰氏染色的方法和步骤,A.,油镜放入光路之前，一定要在标本的观察部位上,加一滴浸油,。,B.,旋转物镜转盘，使,油镜进入光路,，用微调旋钮对好焦距。,C.,如果浸油内有气泡，会影响观察，可稍微旋转物镜转盘，使油镜来回通过,1,2,次浸油，,排除油内气泡。,4 100,倍油镜的使用,自行操作,琼脂平板别离的浓汁标本,EMB平板别离的粪便标本,白,金黄,粉红,紫黑,实验结果,用普通平板，从浓汁标本中别离得到金黄、白色两种菌落，经革兰氏染色后，显微镜油镜下均为紫色的球状，排列不规那么，呈葡萄串状，是典型的G+葡萄球菌。,葡萄球菌,(,电镜,),金黄、白色形态与染色,(,油镜,),酸葡萄,金黄、白色菌落特征,黄色,白色,用伊红美蓝平板,从粪便标本别离、获得紫黑色和粉红色半透明两种菌落。革兰氏染色后，在显微镜下，均为红色的杆菌，散在排列， 为典型的G- 的杆菌。,杆菌,(,电镜,),紫黑、粉红细菌的形态与染色,(,油镜,),紫黑,紫黑、粉红菌落特征,粉红,实验结果,生物平安警告,BIOHAZARD,本次实验操作，可产生几十至几百个微生物,气溶胶颗粒。,气溶胶粒径,100um,沉降很快,50um,在,0.4s,内扩散开,5um,通过呼吸道直接到达肺泡。,Pike,博士对实验室感染统计分析结果发现，不明原因的感染高达,82%,，大多数是气溶胶在空气中扩散引起的。,实验时应坐稳，很专注，不分心，在火焰周围,10,20,厘米内操作，保持安静、有序，尽量少说话，以免感染病原菌。,1、细菌的形态学分类、根本结构和特殊结构,2、掌握细菌涂片标本的制备,3、掌握革兰染色法的原理及关键步骤,4、掌握油镜的使用,5、无菌操作,思考：如何区别致病和非致病的G+球菌、G-杆菌？,内容小结,THANKS,