《化学发光免疫分析技术》课件讲义

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,（,Suitable for teaching courseware and reports,）,化学发光免疫分析技术,（Suitable for teaching coursew,1,一、,化学发光免疫技术的概念,二、,化学发光免疫分析基本原理,三、化学发光免疫分析的类型,四、临床应用,五、发展与展望,一、化学发光免疫技术的概念,一、,化学发光免疫技术的,概念,化学发光免疫技术,：,化学发光分析是根据化学反应产生的辐射光的强度来确定物质含量的分析方法。化学发光免疫分析是将化学发光系统与免疫反应相结合，用化学发光相关的物质标记抗体或抗原，与待测的抗原或抗体反应后，经过分离游离态的化学发光标记物，加入化学发光系统的其它相关物产生化学发光，进行抗原或抗体的定量或定性检测。,一、化学发光免疫技术的概念 化学,化学发光免疫分析,（,Chemiluminescence Immunoassay,，,CLIA,）,是近十年来在世界范围内发展非常迅速的非放射性免疫分析。它具有高灵敏度、检测范围宽、操作简便快速、标记物稳定性好、无污染、仪器简单经济等优点。它是放射性免疫分析与普通酶免疫分析的取代者，是免疫分析重要的发展方向。,CLIA,发展迅猛，已占各种免疫分析的首位，是目前放射免疫分析和酶联免疫分析最佳的取代者。,化学发光免疫分析技术课件讲义,是目前世界公认先进的标记免疫测定技术，化学发光免疫分析技术具有高度的准确性和特异性，成为检验方法中最为重要的技术之一。化学发光免疫分析技术作为疾病诊断的主要手段已被广泛用于机体免疫功能、传染性疾病、内分泌功能、肿瘤标志物、性激素、甲状腺功能等方面的体外诊断实验中。,是目前世界公认先进的标记免疫测定,化学发光免疫分析的优势,灵敏度高,灵敏度高是化学发光免疫分析关键的优越性，其灵敏度可达,10-22 mol/L,（,RIA,为,10 -12 mol/L,）。化学发光免疫分析能够检出放射免疫分析和酶联免疫分析等方法无法检出的物质，对疾病的早期诊断具有十分重要的意义。,发光强度在,4,6,个量级之间与测定物质浓度间呈线性关系。这与显色的酶免疫分析吸光度（,OD,值）为,2.0,的范围相比，优势明显。虽然,RIA,也有较宽的线性动力学范围，但放射性限制了其应用。,化学发光免疫分析的优势灵敏度高,宽的线性动力学范围,光信号持续时间长,辉光型的,CLIA,产生的光信号持续时间可达数小时甚至一天。简化了实验操作及测量。,绝大多数分析测定均为仅需加入一种试剂（或复合试剂）的一步模式,宽的线性动力学范围,分析方法简便快速,结果稳定、误差小,样品系直接自己发光，不需要任何光源照射，免除了各种可能因素（光源稳定性、光散射、光波选择器等）给分析带来的影响，使分析结果灵敏稳定可靠。,安全性好及使用期长,免除了使用放射性物质。到目前为止，还未发现其危害性；试剂稳定，保存期可达一年。,分析方法简便快速,二、化学发光免疫分析基本原理,化学发光免疫分析包含两个部分,即免疫反应系统和化学发光分析系统。免疫反应系统是将标记物质标记在抗原或抗体上,经过特异性免疫反应后,形成抗原,2,抗体复合物。然后进行对标记物进行检测,来测定待检物。化学发光分析系统是利用化学发光物质经催化剂的催化和氧化剂的氧化,形成一个激发态的中间体,当这种激发态中间体回到稳定的基态时,同时发射出光子,利用发光信号测量仪器光量子产率。,二、化学发光免疫分析基本原理 化学发光免疫分析包含两,化学发光免疫分析仪是通过检测患者血清内待测物质从而对人体进行免疫分析的医学检验仪器。将定量的患者血清和辣根过氧化物（HRP）加入到固相包被有抗体的白色不透明微孔板中，血清中的待测分子与辣根过氧化物酶的结合物和固相载体上的抗体特异性结合。分离洗涤未反应的游离成分。然后，加入鲁米诺Luminol发光底液 ，利用化学反应释放的自由能激发中间体，从基态回到激发态，能量以光子的形式释放。此时，将微孔板置入分析仪内，通过仪器内部的三维传动系统，依次由光子计数器读出各孔的光子数。样品中的待测分子浓度根据标准品建立的数学模型进行定量分析。最后，打印数据报告，以辅助临床诊断。,化学发光免疫分析仪是通过检测患者血清内待测物质从而对人体进行,三、化学发光免疫分析的类型,化学发光免疫分析法根据其标记物的不同可分为三大类,即化直接化学发光免疫分析、化学发光酶免疫分析和电化学发光免疫分析法。,三、化学发光免疫分析的类型 化学发光免疫分析,用吖啶酯直接标记抗体,(抗原)，与待测标本中相应的抗原(抗体)发生免疫反应后，形成固相包被抗体-待测抗原-吖啶酯标记抗体复合物，这时只需加入氧化剂（H,2,O,2,）和,NaOH使成碱性环境，吖啶酯在不需要催化剂的情况下分解、发光 。,由集光器和光电倍增管接收、记录单位时间内所产生的光子能，这部分光的积分与待测抗原的量成正比，可从标准曲线上计算出待测抗原的含量。,3.1 直接化学发光免疫分析,用吖啶酯直接标记抗体(抗原)，与待测标本中相应的抗原,发光,Y,Y,Y,磁微粒,被测抗原,+,抗体,+,带吖啶酯标记物抗体,Y,Y,Y,Y,Y,Y,Y,Y,Y,Y,Y,冲洗后,- 夹心法,（,1）,加入H,2,O,2,（,pH10）,直接化学发光的机理,发光YYY磁微粒被测抗原+抗体+带吖啶酯标记物抗体YYYYY,磁,微粒,模式图,Y,Y,Y,Y,Y,Y,Y,Y,Y,Y,Y,Y,Y,Y,Y,Y,Y,Y,Y,Y,Y,Y,Y,Y,Y,Y,Y,Y,Y,Y,Y,Y,Y,Y,Y,特点,抗原和抗体结,合与未,结合部分,的,易,分离,磁微粒,技术,磁微粒模式图YYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYY,化学发光酶免疫分析,（,chemiluminescence enzyme immunoassay，CLEIA）是用参与催化某一化学发光反应的酶如辣根过氧化物酶（HRP）,或碱性磷酸酶,(ALP)来标记抗原或抗体，在与待测标本中相应的抗原(抗体)发生免疫反应后，形成固相包被抗体-待测抗原-酶标记抗体复合物，经洗涤后，加入底物(发光剂)，酶催化和分解底物发光，由光量子阅读系统接收，光电倍增管将光信号转变为电信号并加以放大，再把它们传送至计算机数据处理系统，计算出测定物的浓度。,3.2、化学发光酶免疫分析,化学发光酶免疫分析（chemiluminescence,该分析系统采用辣根过氧化物酶（,HRP）标记抗体(或抗原)，在与反应体系中的待测标本和固相载体发生免疫反应后，形成固相包被抗体-待测抗原-酶（HRP）标记抗体复合物，这时加入鲁米诺发光剂、H,2,O,2,和化学发光增强剂使产生化学发光。, 辣根过氧化物酶标记的化学发光免疫分析,该分析系统采用辣根过氧化物酶（HRP）标记抗体(或抗原)，在,辣根过氧化物酶标记化学发光免疫分析示意图,辣根过氧化物酶标记化学发光免疫分析示意图,该分析系统以碱性磷酸酶 标记抗体,(或抗原)，在与反应体系中的待测标本和固相载体发生免疫反应后，形成固相包被抗体-待测抗原-酶标记抗体复合物，这时加入AMPPD发光剂，碱性磷酸酶使AMPPD脱去磷酸根基团而发光。, 碱性磷酸酶标记的化学发光免疫分析,该分析系统以碱性磷酸酶 标记抗体(或抗原)，在与反应体系中的,碱性磷酸酶标记化学发光免疫分析示意图,碱性磷酸酶标记化学发光免疫分析示意图,分析步骤,分配样品,磁颗粒,和试剂,孵育,使反应物,结合,在磁场中,清洗去除,未结合物质,加入,底物,产生,信号,孵育,促使信号,的产生,信号,检测,分析步骤分配样品,孵育加入孵育,信号,电化学发光免疫分析,（,electrochemiluminescence immunoassay，,ECLIA）,是以电化学发光剂三联吡啶钌标记,抗体,(抗原)，以三丙胺(TPA)为电子供体，,在电场中因电子转移而发生特异性化学发光,反应，它包括电化学和化学发光两个过程。,3.3 电化学发光免疫分析,电化学发光免疫分析（electrochemiluminesc,在电化学发光免疫分析系统中，磁性微粒为固相载体包被抗体,(抗原)，用三联吡啶钌标记抗体(抗原)，在反应体系内待测标本与相应的抗原 (抗体)发生免疫反应后，形成磁性微粒包被抗体-待测抗原-三联吡啶钌标记抗体复合物，这时将上述复合物吸入流动室，同时引人TPA缓冲液。当磁性微粒流经电极表面时，被安装在电极下面的电磁铁吸引住，而未结合的标记抗体和标本被缓冲液冲走。与此同时电极加压，启动电化学发光反应，使三联吡啶钌和TPA在电极表面进行电子转移，产生电化学发光，光的强度与待测抗原的浓度成正比。,在电化学发光免疫分析系统中，磁性微粒为固相载体包被抗体(抗原,电化学发光免疫分析示意图,电化学发光免疫分析示意图,电化学发光免疫测定示意图,电化学发光免疫测定示意图,标记磁颗粒在电场中发光工作示意图,标记磁颗粒在电场中发光工作示意图,目前我院最新引进的迈瑞,CL-2000i,全自动化学发光免疫分析系统主要以,化学发光酶免疫分析,为主。拥有国内完全自主知识产权，它的酶促化学发光是目前免疫诊断中最灵敏的化学发光体系之一，其核心性能达到了国际同类产品先进水平。,目前我院最新引进的迈瑞CL-2000i 全自动,该机采用高灵敏全球主流化学发光技术的,CL-2000i,分析系统，拥有业内领先的高效处理能力，可实现,240T/H,检测；智能优化的测试流程，专利逻辑设计，提升测试通量，瀑布式真空气吸清洗技术降样本携带干扰至最低，涵盖甲状腺功能、激素、肿瘤标志物、传染病等,50,多个检测项目。,目前我科开展,肿瘤标志物，甲状腺功能检测，生殖内分泌激素检查,项目，后续依临床需要酌情开展新的项目，更好的服务临床，服务患者,该机采用高灵敏全球主流化学发光技术的CL-2000i 分析系,四、临床应用,1.,甲状腺激素,2.,生殖激素,3.,肾上腺,/,垂体激素,4.,贫血因子,5.,肿瘤标记物,6.,感染性疾病,7.,糖尿病,8.,心血管系统,9.,病毒标记物,10.,骨代谢,11.,过敏性疾病,12.,治疗药物监测,四、临床应用1.甲状腺激素 2,甲状腺功能检测项目及临床意义,甲功五项是T3、T4、FT3、FT4和TSH的总称，它与甲状腺功能有密切关系，是诊断甲亢、甲减的重要依据 。检测甲状腺激素在甲亢和甲减病人的诊断中已得到广泛应用，并成为判断疗效、监测复发的重要手段,甲状腺功能检测项目及临床意义 甲功五项是T3、T4、FT3、,甲状腺素（T4）,甲状腺素（,T4,）是由甲状腺合成、分泌的激素，在调节机体代谢中起着重要作用，被分泌到血液循环中的,T4,能对垂体的促甲状腺激素（,TSH,）的调节起反应；下丘脑、甲状腺、垂体所组成负反馈机制对,T4,的分泌起着调节作用。,在血循环中，,T4,约,60%,与甲状腺结合球蛋白（,thyroxine-binding,globulin,，,TBG,）结合，,30%,与甲状腺激素转运蛋白（,Transthyretin,，,TBPA,）结合，其余约,10%,与白蛋白结合，仅,0.03%-0.04%,为游离状态,游离的,T4,有活性，而结合的,T4,无活性，主要起备用作用。,甲状腺素（T4）甲状腺素（T4）是由甲状腺合成、分泌的激素，,参考范围：,5.014.5ug/dl,（,CENTAUR,）,临床意义：,T4,升高：见于甲状腺功能亢进的病人，但轻型甲亢、早期甲亢、亚临床甲亢的变化未如,T3,明显； 凡引起,TBG,升高的因素均可使,T4,升高，如妊娠、应用雌激素、葡萄胎、淋巴瘤、血卟啉病等；药物如胺碘酮、含碘造影剂、,受体阻断剂、奋乃近、海洛因等,T4,降低： 见于甲状腺功能减退的病人，轻型甲减、亚临床甲减的变化较,T3,明显； 缺碘性甲状腺肿可见,T4,降低或在正常低限，而,T3,正常； 肾病综合征、肝功能衰竭、遗传性,TBG,缺陷症、肢端肥大症、重症全身性疾病状态等；以及应用糖皮质激素、雄激素、生长激素、苯妥英钠等药物,参考范围：5.014.5ug/dl（CENTAUR）,血清中的三碘甲状腺原氨酸（,T3,）,血清中的三碘甲状腺原氨酸（T3），仅20%由甲状腺直接分泌而来，80%以上在外周组织通过T4脱碘而来。血液循环中的T3能对垂体的促甲状腺激素（TSH）的调节起反应，下丘脑、垂体、甲状腺所组成负反馈机制对T3的分泌起着调节作用。,在血循环中，约99.5%的T3与TBG结合，但T3与TBG的亲和力明显低于T4；T3不与TBPA结合,未结合的T3有活性；而结合的T3无活性，主要起备用作用。,血清中的三碘甲状腺原氨酸（T3）血清中的三碘甲状腺原氨酸（T,参考范围：,0.581.62 ug/dL,临床意义：,T3,升高：见于甲状腺功能亢进的病人，轻型甲亢、早期甲亢、亚临床甲亢的变化较,T4,明显，适合轻型甲亢、早期甲亢和亚临床甲亢以及甲亢治疗后复发的诊断；,T3,型甲亢仅有,T3,和,FT3,升高； 与,T4,一样，,T3,亦受,TBG,变化影响，但受影响程度不及,T4,。,T3,降低： 仅于较重甲状腺功能减退的病人，,T3,和,T4,均下降，轻型甲减,T3,不一定下降； 重症全身性疾病状态或慢性病变可导致,T3,下降，多见于慢性肾功能不全、慢性心功能不全、糖尿病、心梗等疾病的患者。,参考范围：0.581.62 ug/dL,游离甲状腺素（,FT4,）游离三碘甲状腺原氨酸（,FT3,）,FT3,和,FT4,分别为,T3,和,T4,在血清中未与蛋白结合的部分，其不受血清中,TBG,的影响，直接反映甲状腺功能的状态，其敏感性和特异性均高于,T3,和,T4,参考范围：,FT3,：,2.34.0pg/mL,FT4,：,0.61.2ng/dL,游离甲状腺素（FT4）游离三碘甲状腺原氨酸（FT3）FT3和,临床意义：,血清,FT3,和,FT4,升高：甲亢；低,T3,综合征，由于,5,脱碘酶受抑制，,T4,外周脱碘作用障碍使,FT4,升高；甲状腺素不敏感综合征，,FT3,和,FT4,升高，而无甲亢表现；某些药物，胺碘酮、肝素等可使,FT4,升高；,FT3,适合于甲亢和左旋甲状腺素治疗中药物是否过量的判断。,血清,FT3,和,FT4,降低： 甲减病人两者皆下降，但轻型甲减、甲减初期多以,FT4,下降为主；低,T3,综合征仅有,FT3,下降； 某些药物，如苯妥英钠、多巴胺、糖皮质激素也可使,FT3,和,FT4,降低。,临床意义：,T3,、,T4,均升高：,高,TBG,血症、甲亢、甲状腺激素不敏感综合征。,T4,升高，,T3,正常或下降：,家族性白蛋白异常性高,T4,血症；胰高血糖素瘤；药物普萘洛尔、胺碘酮、胆囊造影剂；全身性疾病、精神性疾病；苯丙胺成瘾；,T4,型甲亢、甲亢伴,T4,转换,T3,障碍。,T4,正常，,T3,升高：,T3,型甲亢；甲减用,T3,或者其他甲状腺激素制剂替代治疗后,T4,正常，,T3,下降：,患有全身性疾病时；,5,单脱碘酶活性下降；血皮质醇升高的各种情况；营养不良综合征。,T4,下降、,T3,升高：,医源性甲亢；甲状腺功能正常病人服用甲状腺激素制剂。,T4,下降，,T3,正常：,轻至中度甲减；碘缺乏；苯妥英钠、卡马西平。,T3,和,T4,均下降：,中至重度甲减；重症全身性疾病；低,TBG,血症；大剂量使用水杨酸制剂,T3、T4均升高：高TBG血症、甲亢、甲状腺激素不敏感综合征,促甲状腺激素（,TSH,）,促甲状腺激素是由,、,两亚单位非共价结合而成的糖蛋白，,亚单位与,LH,、,FSH,的,亚单位相似；而,亚单位与上述垂体糖蛋白的相应部分完全不同，有自已独特的生化及免疫特性；,TSH,主要由垂体合成，主要针对,FT3,、,FT4,的负反馈起反应；下丘脑三肽、促甲状腺激素释放激素（,TRH,）都可直接刺激,TSH,的产生。,TSH,主要通过与甲状腺细胞膜受体作用发挥以下三种功能，一是促进甲状腺细胞产生与肥大；二是促进碘代谢；三是促进甲状腺合成,T3,、,T4,。,参考范围：,0.5-7.30mIU/ml,（,CENTAUR,）,促甲状腺激素（TSH）促甲状腺激素是由、两亚单位非共价结,促甲状腺激素（,TSH,）,TSH,降低,正常,升高,FT3,、,FT4,FT3,、,FT4,降低,正常,升高,升高,正常或降低,甲亢,甲状腺自主调节功能,继发性甲减,垂体性甲亢,原发性甲减,甲状腺功能正常,不排除继发性甲减,促甲状腺激素（TSH）TSH降低正常升高FT3、FT4FT3,肿瘤标志物,（,tumor marker,，,TM,）,肿瘤标志物（,tumor marker,，,TM,）是指在肿瘤的发生和增殖过程中，由肿瘤细胞本身所产生的或者是由机体对肿瘤细胞反应而产生的，反映肿瘤存在和生长的一类物质，包括蛋白质、激素、酶（同工酶）、多胺等。,可在肿瘤患者血液或体液中检测到肿瘤标志物。,肿瘤标志物（tumor marker，TM）肿瘤标志物（tu,肿瘤标志物临床应用,正常人群中的筛查,有症状者的辅助诊断,癌症的临床阶段的分期,疾病进程的预后指标,评估治疗方案,判断癌症是否复发,治疗应答的监测,血清肿瘤标志物的检测是肿瘤诊断的常用方法之一，对于恶性肿瘤的诊断、疗效的观察、病情进展的判断和复发的监测等皆有一定的临床应用价值，并具有简便无创、测定结果定量客观、可重复测定以便动态监测、费用相对低廉等优点。,肿瘤标志物临床应用 正常人群中的筛查,甲胎蛋白,(AFP),参考值：,500g/L,持续,1,个月或,AFP200g/L,持续,2,好个月，应高度怀疑肝癌，同时应有医学影像学好的证据参与诊断,低浓度（,50,200g/L,）持续时间超过,2,个月的好患者，应视为肝癌的高危人群,当谷丙转氨酶（,ALT,）正常，用,AFP,来诊断肝癌，可取性可达,100,。,若,AFP,及胆红素同时明显升高，病人存活期很短,通常由非原发性肝癌引起的,AFP,升高，一般都不会高于,400g/L,甲胎蛋白(AFP) 参考值：7.0ng/ml胎儿发育早期,3.6,5.2,的胆管上皮癌、,84,以上的肝母细胞癌和,70,左右的生殖性畸胎瘤及较少比例的胰腺癌、肺癌、肾癌和白血病患者也可出现,AFP,低浓度的异常升高。,良性病变中的,AFP,升高，升高一般是散在的和暂时的。肝炎病人，,10,升高，水平,50g/L,；肝硬化病人，,30,升高，水平,500g/L,；,3.65.2的胆管上皮癌、84以上的肝母细胞癌和70,癌胚抗原（,CEA,）参考值：,4.5ng/ml,是一种可溶性糖蛋白，胚胎期主要存在于胎儿的胃肠管、胰腺和肝脏。胃肠道恶性肿瘤时可见血清,CEA,升高，在乳腺癌、肺癌及其他恶性肿瘤中也可出现表达，并分泌于体液中。,CEA,在中晚期肿瘤中的阳性率,胰腺癌,88,91,肺癌,76,结肠癌,73,乳腺癌和卵巢癌,73,膀胱癌、宫颈癌和子宫内膜癌中也有升高,癌胚抗原（CEA）参考值：4.5ng/ml是一种可溶性糖蛋,铁蛋白（,SF,）男,:27-375ug/l,女,:12-135ug/l,铁蛋白升高可见于下列肿瘤：急性白血病、何杰金氏病、肺癌、结肠癌、肝癌和前列腺癌。检测铁蛋白对肝脏转移性肿瘤有诊断价值，,76%,的肝转移病人铁蛋白含量高于,400g/L,，当肝癌时，,AFP,测定值较低的情况下，可用铁蛋白测定值补充，以提高诊断率。在色素沉着、炎症、肝炎时铁蛋白也会升高。升高的原因可能是由于细胞坏死，红细胞生成被阻断或肿瘤组织中合成增多。,铁蛋白（SF）男:27-375ug/l 女:12-135u,乳腺癌相关抗原（,CA15-3,）参考值：,15U/ml,CA15-3,是乳腺癌的最重要的特异性标志物。,30%-50%,的乳腺癌患者的,CA15-3,明显升高。,CA15-3,动态测定有助于,II,期和,III,期乳腺癌病人治疗后复发的早期发现；当,CA15-3,大于,100U/ml,时，可认为有转移性病变。,肺癌、胃肠癌、卵巢癌及宫颈癌患者的血清,CA15-3,也可升高，应予以鉴别，特别要排除部分妊娠引起的含量升高。,乳腺癌相关抗原（CA15-3）参考值：15U/mlCA15,卵巢癌相关抗原（,CA125,）,:,参考值：,35U/ml,的病人中有,95%,在第二次手术时仍有肿瘤存在,早期复发的监测,:75%,的患者在肿瘤复发前一年左右时间,CA125,的水平就已升高,CA125,在子宫内膜异位症、,1%,的健康妇女、,3%,的患良性卵巢疾病妇女及其他非肿瘤患者也可见到升高。,卵巢癌相关抗原（CA125）:参考值：35U/ml在卵巢肿,胰腺胃肠癌相关抗原（,CA19-9,）参考值：,30U/ml,CA19-9,是胰腺癌，胃癌，结、直肠癌、胆囊癌的相关标志物，是对胰腺癌敏感性最高的标志物。,胰腺癌患者,85%-95%,为阳性。当,CA19-9,小于,1000U/ml,时，有一定的手术意义，肿瘤切除后,CA19-9,浓度会下降，如再上升，则可表示复发。对胰腺癌转移的诊断也有较高的阳性率，当血清,CA19-9,水平高于,10000U,ml,时，几乎均存在外周转移。,胃癌、结直肠癌、胆囊癌、胆管癌、肝癌的阳性率也会很高。,胃肠道和肝的多种良性和炎症病变，如胰腺炎、轻微的胆汁郁积和黄疸，,CA19-9,浓度也可增高，但往往呈“一过性”，而且其浓度多低于,120U/ml,。,胰腺胃肠癌相关抗原（CA19-9）参考值：30U/mlCA,总前列腺特异性抗原（,TPSA,）参考值：,4.0ng/ml,PSA,是前列腺癌的特异性标志物，也是目前公认的唯一具有器官特异性肿瘤标志物。血清,TPSA,升高一般提示前列腺存在病变（前列腺炎、良性增生或癌症）。血清,PSA,是检测和早期发现前列腺癌最重要的指标之一，血清,TPSA,定量的阳性临界值为大于,10g/L,，前列腺癌的诊断特异性达,90,-97,。,TPSA,也可用于高危人群前列腺癌的筛选与早期诊断，是第一个由美国癌症协会推荐用于筛查,50,岁以上男性前列腺癌的肿瘤标志物。,TPSA,测定还可用于监测前列腺癌患者或接受激素治疗患者的病情及疗效，,90%,前列腺癌术后患者的血清,TPSA,值可降至不能检出的痕量水平，若术后血清,TPSA,值升高，提示有残存肿瘤。放疗后疗效显著者，,50,以上患者在,2,个月内血清,TPSA,降至正常。,总前列腺特异性抗原（TPSA）参考值：4.0ng/mlPS,游离前列腺特异性抗原（,FPSA,）参考值,:1ng/ml,单项的血清总,PSA,（,TPSA,）测定不能明确鉴别前列腺癌和良性的前列腺增生，主要是因为在浓度,2,20ng/ml,范围内，二组病人有交叉。而,FPSA/TPSA,不受此因素及年龄的影响，通过,FPSA/TPSA,比值达到鉴别前列腺癌或良性的前列腺增生的目的。前列腺癌患者的,FPSA/TPSA,比值明显偏低，良性的前列腺增生患者的,FPSA/TPSA,比值显著增高。,FPSA/TPSA,界限指定为,0.15,，低于该值高度怀疑前列腺癌，其诊断敏感性为,90.9%,，特异性为,87.5%,，准确性为,88.6%,，明显优于,TPSA,单独测定。,FPSA,检测主要适用于未经治疗、,TPSA,值为,2,20ng/ml,病人，当,TPSA,值低于,2ng/ml,或高于,20ng/ml,时，,FPSA/TPSA,比值并不能用于鉴别前列腺癌和良性的前列腺增生。,游离前列腺特异性抗原（FPSA）参考值:1ng/ml单项的,一种肿瘤可分泌多种肿瘤标志物，而不同的肿瘤或同种肿瘤的不同组织类型可有相同的肿瘤标志物，而且在不同的肿瘤患者体内，肿瘤标志物的质和量变化也较大。因此，单独检测一种肿瘤标志物，可能会因为测定方法的灵敏度不够而出现假阴性，联合检测多种肿瘤标志物有利于提高检出的阳性率。为此，选择一些特异性较高，可以互补的肿瘤标志物联合测定，对提高肿瘤的检出率是有价值的。,一种肿瘤可分泌多种肿瘤标志物，而不同的肿瘤或同种肿瘤的不同组,肿瘤标志物的相关肿瘤,肿瘤标志物,主诊,所预示的肿瘤,CEA,广谱,结肠直肠癌，乳腺癌,AFP,肝脏,睾丸癌，肝细胞癌,CA125,卵巢,卵巢癌，胰腺癌，肺癌，乳腺癌,CA19-9,消化道,胰腺癌，胆管癌，胃癌，肠癌,CA72-4,胃,胃癌，卵巢癌,CA15-3,乳腺,乳腺癌,CA50,广谱,胰腺癌，肝癌，卵巢癌，肠癌，胃癌，肺癌,PSA,前列腺,前列腺癌,HC,G,子宫,胚胎细胞癌，滋养层肿瘤,NSE,肺,小细胞肺癌，神经内分泌系统肿瘤,SCC,鳞癌,鳞状细胞癌（肺、食道、上鄂、宫颈、皮肤）,CYFRA 21-1,肺,非小细胞肺癌,肿瘤标志物的相关肿瘤肿瘤标志物主诊所预示的肿瘤CEA广谱结肠,肿瘤标志物,的,联合应用,肿瘤类型,肿瘤标志物（按检测的顺序排）,肝,AFP,CEA,结、直肠、胆道,CEA,CA199,CA50,胰,CEA,CA199,CA242,CA50,胃,CEA,CA724,CA199,食道,CEA,SCC,肺,NSE,CYFRA 21-1,CEA +CA50,CA199/SCC,乳腺,CA153,CEA,CA125,卵巢,CA125,-HCG,AFP,CEA,CA724,宫颈,CEA,CA724,子宫,CEA,SCC,SF,-HCG,肾,CEA,-MG,前列腺,FPSA/TPSA,PAP,甲状腺,CEA,CA199,TBG,T3,T4,FT3,FT4,TSH,鼻咽,CEA,SCC,EBV,肿瘤标志物的联合应用肿瘤类型 肿瘤标志物（按检测的顺序排）肝,性激素检测系列,下丘脑水平,：促性腺激素释放激素（,GnRH,）,脑垂体水平,：促卵泡激素（,FSH,），促黄体生成素（,LH,），垂体催乳素（,PRL,）,性腺水平,（睾丸，卵巢分泌）：睾酮（,T,），雌二醇（,E2,），雌三醇（,E3,），孕酮（,P,）（胎盘分泌）：胎盘催乳素（,HPL,），人绒毛膜性腺激素（,HCG,）,其它,：性激素结合球蛋白（,SHBG,），硫酸去氢表酮（,DHEA-SO4,），妊娠相关血浆蛋白,A,（,PAPP-A,）,性激素检测系列下丘脑水平：促性腺激素释放激素（GnRH）,卵巢、子宫内膜与激素水平,卵巢、子宫内膜与激素水平,雌二醇,E2,参考值,;男性为2584pg/ml。女性卵泡期为25138 pg/ml；黄体期为31317 pg/ml；排卵期为100440 pg/ml；绝经期为2584 pg/ml。,1.判断闭经原因,(1)激素水平符合正常的周期变化，表明卵泡发育正常，应考虑为子宫性闭经；,(2)雌激素水平偏低，闭经原因可能因原发或继发性卵巢功能低下或受药物影响而抑制卵巢功能，也可见于下丘脑-垂体功能失调、高催乳激素血症等。,2. 诊断无排卵：雌激素无周期性变化，常见于无排卵性功能失调性子宫出血、多囊卵巢综合征、某些绝经后子宫出血。,3. 监测卵泡发育：应用药物诱导排卵时，测定血中E,2,作为监测卵泡发育、成熟的指标之一，用以指导,HCG用药及确定取卵时间。,4. 女性性早熟：临床多以8岁以前出现第二性征发育诊断性早熟，血E,2,水平升高为诊断性早熟的激素指标之一。,雌二醇E2参考值;男性为2584pg/ml。女性卵泡期为2,雌三醇,E3,未孕妇女：,(0.310.17) ng/ml。在妊娠妇女则随妊娠周龄而升高：21周，(0.2-5.8) ng/ml;35周，(4.9-15.7) ng/ml;41-42周，(8.2-24.2) ng/ml。男性：(0.240.17) ng/ml。,(1) 糖尿病妊娠患者监测E3有助于了解胎盘功能和胎儿发育情况。凡胎儿发育正常者妊娠中期E3浓度逐渐缓慢上升，41-42周达到高峰。一般认为足月妊娠时血清E3应大于31nmol/L，6.9nmol/L、13.9nmol/L者示胎儿危急。24h尿10mg，亦提示胎儿胎盘功能低下。,(2) 妊娠高血压综合征在无胎儿窘迫的情况下，早期由于子宫-胎盘血流增加，E3可保持正常。中、重度妊高症由于肾素-血管紧张素-醛固酮系统活性增强，致胎盘缺血，血清E3可明显下降。,(3) 多胎妊娠、超重胎儿血清E3多升高。过期妊娠、胎儿宫内生长迟缓、胎儿肾上腺发育不全、死胎等血清E3下降。,雌三醇E3 未孕妇女：(0.310.17) ng/ml。在,孕激素,PROG,男：成人,0.7-2.1 ng/ml 女： 卵泡期,0.21.6 ng/ml 排卵期 0.32.1 ng/ml,排卵后 1.822.5 ng/ml,1. 监测排卵,血孕酮水平在黄体期范围内提示有排卵。若孕酮水平符合有排卵，而无其它原因的不孕患者，需配合,B型超声检查观察卵泡发育及排卵过程，以除外黄素化未破裂卵泡综合征。原发性或继发性闭经、无排卵性月经或无排卵性功能失调性子宫出血、多囊卵巢综合征、口服避孕药或长期使用GnRH激动剂，均可使孕酮水平下降。,2.了解黄体功能,黄体期血孕酮水平低于生理值，提示黄体功能不足；月经来潮,45日血孕酮仍高于生理水平，提示黄体萎缩不全。,3. 观察胎盘功能,妊娠期胎盘功能减退时,血孕酮水平下降。异位妊娠时,孕酮水平较低如孕酮水平25ng/ml,基本可除外异位妊娠。单次血清孕酮水平低于黄体期孕酮正常范围，提示为死胎。先兆流产时，孕酮值若有下降趋势，有可能流产。,4. 孕酮替代疗法的监测,孕早期切除黄体侧卵巢后,应用孕酮替代疗法时应监测血清孕酮水平。,孕激素PROG 男：成人0.7-2.1 ng/ml 女： 卵,雄激素,TESTO,成人：男,2.279.76 ng/ml 女0.11.23 ng/ml,睾酮增高：特发性男性性早熟，家族性男性性早熟，肾上腺皮质增生，肾上腺皮质肿瘤（腺癌显著增高，腺瘤亦常增高），,睾丸肿瘤,，睾丸女性化，,多囊卵巢综合征,，卵巢雄性化肿瘤，,松果体瘤,，特发性多毛症，甲减，雄激素，,HCG和,雌激素,治疗中等。 降低：,21三体综合征，尿毒症，肌强直营养不良征，,肝功能不全,，陷睾症，原发性或继发性性腺功能减退症（,Klinefelter,综合征,，,Kallman综合征等），,雄激素,治疗停药后等。,睾酮降低：男性,睾丸,发育不全、类无睾综合征、下丘脑或垂体性性腺功能减低。此外，也见于甲状腺功能亢进、肝硬化、肾衰竭、严重创伤以及久病体弱患者。,雄激素TESTO成人：男2.279.76 ng/ml 女0,垂体催乳激素,PRL,参考范围,;男性：3.0-16.5 ng/ml 女性：3.8-30.7 ng/ml非妊娠期女性：3.224.9 ng/ml,1. 闭经、不孕及月经失调者,无论有无泌乳,均应测PRL,以除外高催乳激素血症。,2. 垂体肿瘤患者伴PRL异常增高时，应考虑有垂体催乳激素瘤。,3. PRL水平升高还见于性早熟、原发性甲状腺功能低下、卵巢早衰、黄体功能欠佳、长期哺乳、神经精神刺激、药物作用(如氯丙嗪、避孕药、大量雌激素、利血平等)因素等；PRL水平降低多见于垂体功能减退、单纯性催乳激素分泌缺乏症等。,垂体催乳激素PRL 参考范围;男性：3.0-16.5 ng,垂体促性腺激素（,LH和FSH）,参考范围；,LH,在排卵前期为,1.911.6mIU/ml，排卵期为12.9105.2mIU/ml，排卵后期为0.810.5mIU/ml。一般在非排卵期的正常值是6.664.4mIU/ml。,FSH,在排卵前期为,2.07.1mIU/ml，排卵期为2.712.3mIU/ml，排卵后期为14.4mIU/ml。一般以540mIU/ml作为正常值。,1. 协助判断闭经原因,FSH及LH水平低于正常值，提示闭经原因在腺垂体或下丘脑。FSH及LH水平均高于正常，病变在卵巢。,2. 测定LH峰值,可以估计排卵时间及了解排卵情况，有助于不孕症的治疗及研究避孕药物的作用机制。,3. 测定LH/FSH比值,如,LH/FSH3表明LH呈高值，FSH处于低水平，有助于诊断多囊卵巢综合征。,4. 诊断性早熟,有助于区分真性和假性性早熟。真性性早熟由促性腺激素分泌增多引起，,FSH及LH呈周期性变化。假性性早熟的FSH及LH水平较低，且无周期性变化。,垂体促性腺激素（LH和FSH） 参考范围；LH在排卵前期为1,人绒毛膜促性腺激素（HCG）,1,、诊断早孕：在受精卵着床后,5-7,天（未次月经后,26,天左右）即能测出,HCG,，以血清,HCG,值作为诊断早孕的指标，符合率达,98-100%,2,、滋养层细胞肿瘤的诊断、疗效观察和预后判断：葡萄胎和绒毛膜上皮癌患者的血清,HCG,明显高于正常妊娠，且其分泌量与癌细胞总数以及病情严重程度呈正相关。在治疗过程中动态检测,HCG,浓度，实际上反映了癌细胞群生长或退化的状态。,3,、诊断宫外孕：对月经过期而无早孕症状，,HCG,较高而人工流产未见绒毛组织者，应考虑为宫外孕,4,、先兆流产的处理依据：临床上发现孕妇有先兆流产的症状时，通过动态检测，观察,HCG,的变化，对,HCG,浓度下降不明显而仍接近正常者，可积极保胎，经治疗,HCG,浓度渐上升，并与妊娠月份相符，多能继续妊娠；而对,HCG,逐渐下降，且下降至一定程度者，孕妇流产已不可避免，宜人工流产以终止妊娠。,人绒毛膜促性腺激素（HCG）1、诊断早孕：在受精卵着床后5-,5,、不全流产的鉴别诊断：流产,4,周后,HCG,应转为正常，而不全流产者,HCG,仍会高于正常；若宫腔感染或产后子宫复旧不全，其,HCG,在正常范围,6,、诊断异位,HCG,肿瘤：作为肿瘤标志物，不同组织脏器肿瘤,HCG,的阳性检出率高低不一，依次分别为：绒毛细胞管细胞瘤,66%,，乳腺瘤,60%,，睾丸瘤,51%,，卵巢腺瘤,36%,，胰腺瘤,33%,，胃癌,22%,，肝癌,17%,，肠癌,13%,，肺癌,9%,。,7,、用于生育研究：,HCG,可作为观察抗早孕药物效果的指标之一。,5、不全流产的鉴别诊断：流产4周后HCG应转为正常，而不全流,表 妊娠期间血清,HCG水平,（从着床时间算起）,妊娠周数,HCG（IU/L）,0.21 550,12 50500,23 1005000,34 50010000,45 100050000,56 10000100000,68 15000200000,23月 10000100000,表 妊娠期间血清HCG水平（从着床时间算起）,甲状腺素与性激素,甲状腺功能减退可导致闭经，性欲减退及阴毛脱落,甲状腺功能亢进患者血清雌激素增加，卵泡期或黄体期LH较正常人高23倍,甲亢时睾酮和雄烯二酮增加，睾酮代谢清除率下降,甲状腺素与性激素甲状腺功能减退可导致闭经，性欲减退及阴毛脱落,五、发展与展望,化学发光免疫分析法具有选择性好、灵敏度高、分析速度快、设备简单等优点，近年来在环境、临床、食品、药物检测中得到了广泛运用。实际检测常常需要对大量、复杂、低丰度的样品进行测定，因而化学发光免疫分析法逐渐向快速、高通量、高灵敏检测的方向发展。近几年化学发光免疫分析法的研究方向主要涉及到降低温育时间，多组分检测，以及信号放大技术等。这些例子都证明了化学发光免疫分析法具有广泛的应用前景和可操作性。,五、发展与展望,目前我科室开展的成熟项目简介,最近两年我科室紧跟临床发展需要，相继开展了：全程CRP，心梗三联，肌钙蛋白定量，D-二聚体，糖化血红蛋白，胱抑素，同型半胱氨酸。这些项目开展一年多来运行成熟，因其敏感性，特异性，准确性及时为临床诊治提供了参考。现对其做一简要介绍。,目前我科室开展的成熟项目简介最近两年我科室紧跟临床发展需要，,全程CRP,C反应蛋白是一种由肝脏合成的急性时相反应蛋白，在正常情况下健康人的CRP值非常低，机体在感染，炎症，组织损伤后CRP浓度显著升高，CRP感染后4h6h开始增高，24h48h达到高峰，峰值可为正常值的1001000倍，在感染消除后其含量急剧下降,一周内可恢复正常，CRP的浓度与疾病情况正相关，且不受机体，日间差，药物治疗，放化疗影响。全程CRP可广泛适用于发热待查及疑似感染的患者的感染诊断与诊断，感染监控，治疗指导，疾病预后等。,全程CRPC反应蛋白是一种由肝脏合成的急性时相反应蛋白，在正,全程CRP临床应用,1,CRP,与常用感染指标对比，更灵敏，特异性更好。,2,、更快更准确的鉴别细菌感染和病毒感染，及时快速帮助医生对病人病情做出判断、治疗。,3,监控病情变化及术后感染,术前,CRP,值大于,25mg/l,的患者,手术发生感染的概率明显高于术前,CRP,值小于,25mg/l,的患者,建议,:,对术前,CRP,值大于,25mg/l,的患者,加强消炎治疗,手术时间调整到患者,CRP,水平降到,25mg/l.,以下。对术前,CRP,值小于,25mg/l,的患者必须立即进行手术时,术后应加强护理,并视情况预防性使用抗生素。当外科，骨伤科，妇科手术后伴有细菌感染，高,CRP,会持续存在，连续定量测定,CRP,有重要的临床意义。,4,、观察抗生素治疗疗效,5,、,心血管疾病,hsCRP,是心血管炎症病变的生物标志物。个体,hsCRP,基础水平和未来心血管病的发病关系密切（其水平升高同健康人群未来发生,CAD,、脑血管病、周围动脉疾病等事件的危险成正相关,全程CRP临床应用1,CRP与常用感染指标对比，更灵敏，特异,心梗三联,心梗,三项快速诊断实验指：肌钙蛋白（CTnI）、肌酸激酶同工酶（CKMB）、肌红蛋白（Myo）。在进行心肌损伤标志物检测时应该同步检测相关标志物。三种标志物Myo、cTnI、CK-MB释放的时间是不同的，同时快速测定三种标志物，较单独测定更方便,更快速，时间上同步更利于对结果的分析和判断，从而更能够做到快速、准确诊断。,心梗三联心梗三项快速诊断实验指：肌钙蛋白（CTnI）、肌酸,心梗三联临床应用,肌红蛋白（,Myoglobin,，,Myo,）：是目前心肌受损后最早发生异常增加的心肌蛋白标志物,急性心梗（,AMI,）发作,2h,后的血清,Myo,即开始升高，,4-6h,达高峰。由于,Myo,无心肌特异性，肌红蛋白的阴性有助于排除,AMI,的诊断；使用该标志物的最佳战略是利用它的高阴性预测值和灵敏度以排除,心肌梗死,。,肌钙蛋白,I(CTn I),：是目前公认的、特异性最高且持续时间最长的诊断心梗的可靠指标。心肌肌钙蛋白一般在心肌损伤后,4-8,小时在外周血中逐渐增高，最高值在,12-24,小时出现。在心肌损伤后,7-10,天外周血中仍可探测到增高的心肌肌钙蛋白。急性心梗病人的血中,cTnI,浓度可高达,100-300ng,ml,。主要用于对心肌损伤,-,特别是微小损伤的诊断，还可用于心脏手术时,心肌缺血,的可靠指标，可用于评价心肌的保护性措施。急性心梗后溶栓治疗的指示物；判断再灌注效果。,CK-MB:,是目前临床医生最信赖的,AMI,检测“金标准”，特异性较高。,心梗三联临床应用 肌红蛋白（Myoglobin，Myo）：,肌钙蛋白定量,肌钙蛋白（cTn）被认为是目前用于ACS诊断最特异的生化marker，它们出现早，最早可在症状发作后2h出现；具有较宽的诊断窗：cTnT（514天），cTnI（410天）。在它们的诊断窗中，cTn增高的幅度要比CK-MB高510倍。由于在无心肌损伤时cTn在血液中含量很低，因此也可用于minor mycardial damage（MMD，微小心肌损伤）的诊断，这是以前酶学指标所难以做到的。cTn还具有判断预后的价值，对任何冠状动脉疾患病人，即便ECG或其他检查（如运动试验）阴性，只要cTn增高，应视为具有高危险性。,肌钙蛋白定量肌钙蛋白（cTn）被认为是目前用于ACS诊断最特,肌钙蛋白定量临床应用,1.是早期诊断AMI最好的标志物,2.对于ST段抬高的AMI病人，迅速地再血管化已成为临床标准的治疗方案。,3.估计梗塞面积和心功能,4.其他如钝性心肌外伤、心肌挫伤、甲状腺机能减退病人的心肌损伤、药物的心肌毒性、严重脓毒血症和脓毒血症导致的左心衰时cTn也可升高。,5.其他心肌标志物的心肌特异性不如cTn,6.cTnT用于血透病人心血管事件预测，,肌钙蛋白定量临床应用1.是早期诊断AMI最好的标志物,D-二聚体,-,二聚体水平升高表明在体内有凝血酶形成及继发性纤溶。在临床上对血栓性疾病、等的诊断及某些疾病的预后评估都有一定的临床意义。,D-二聚体-二聚体水平升高表明在体内有凝血酶形成及继发性纤,D-二聚体临床应用,1.,在下肢深静脉血栓形成的应用，有关研究证实下肢深静脉血栓形成患者的,-,二聚体水平升高。并且,-,二聚体还可用于深静脉溶栓的监测和效果评价,2.,在骨折患者术前、后病发血栓性疾病的应用,发生骨折时,骨结构受到破坏性挤压,血管完整性受到损伤,髓腔内部分黄骨髓进入血液中,激活凝血系统和纤溶系统。将会使,D-,二聚体水平升高。如果术前,D-,二聚体异常增高，并血液处于高凝状态，应暂缓手术，可以降低术中发生肺栓塞的风险。,血浆,-,二聚体的动态监测对骨折术后并发血栓性疾病具有早期诊断价值,D-二聚体临床应用1.在下肢深静脉血栓形成的应用，有关研究证,3. 对肺栓塞的诊断,肺栓塞患者的D-二聚体水平升高。有文献报道，D-二聚体试验对肺栓塞诊断的灵敏度为90-100，阴性预测价值为88-100，但特异性和阳性预测值仅为29-42和30-40。由于它的灵敏度高，特异性低，D-二聚体增高只作为考虑肺栓塞的可能，最终的诊断尚需影像学检查和相关临床资料去证实。但如果影像诊断出现非确定性结果，D-二聚体分析可作为其替代或补充诊断方法。,4.对脑梗死的诊断,研究发现急性脑梗死患者无论脑梗死体积大小及神经功能缺损程度如何，发病24小时内血浆D-二聚体水平已升高，随病情发展 天达高峰，而后逐渐下降。血浆D-二聚体升高程度及持续时间的长短与梗死灶的大小及预后成正相关。,5.对DIC的诊断,在发生DIC的前期，纤溶受抑，早期纤溶系统启动以D-二聚体升高为主，动态监测-二聚体对早期发现危重病人DIC，尤其是高凝期，并及时阻断其向纤溶亢进期发展有重要意义。有研究发现D-二聚体变化早于纤维蛋白降解产物（FDP），是DIC早期诊断指标。,3. 对肺栓塞的诊断,糖化血红蛋白,人体血液中红细胞内的血红蛋白与血糖结合的产物是糖化血红蛋白，血糖和血红蛋白的结合生成糖化血红蛋白是不可逆反应，并与血糖浓度成正比，且保持120天左右，所以可以观测到120天之前的血糖浓度。糖化血红蛋白的英文代号为HbA1c。通常可以反映患者近812周的血糖控制情况。,糖化血红蛋白人体血液中红细胞内的血红蛋白与血糖结合的产物是糖,糖化血红蛋白临床应用,1是糖尿病患者血糖总体控制情况的指标,2有助于糖尿病慢性并发症的认识,3指导对血糖的调整,4对判断糖尿病的不同阶段有一定的意义,5区别应激性血糖增高和妊娠糖尿病(GDM)中的检测意义,糖化血红蛋白临床应用 1是糖尿病患者血糖总体,胱抑素,C cystatin c,CysC因其自身特性越来越多地被用于糖尿病肾病肾脏滤过功能早期损伤的评价、高血压肾功能损害早期诊断、肾移植病人肾功能的恢复情况评估、血液透析患者肾功能改变监测、老年人肾功能评价、儿科肾病的诊断、肿瘤化疗中肾功能的监测等。,胱抑素C cystatin cCysC因其自身特性越来越多地,胱抑素临床应用,CysC检测可为糖尿病肾损害的早期诊断提供准确可靠的临床检验指标,检测CysC可为及早干预治疗高血压所致肾损害提供可靠的临床指标。,CysC能更及时、灵敏、准确地反映肾移植术后肾功能的变化，对肾移植术后感染和急性排斥的早期诊断有着明显的优势。,胱抑素临床应用CysC检测可为糖尿病肾损害的早期诊断提供准确,同型半胱氨酸,同型半胱氨酸,（,homocysteine, Hcy,）是一种人体内的含硫氨基酸，为蛋氨酸和半胱氨酸代谢过程中的重要中间产物。,Hcy,水平升高被认为是动脉粥样硬化性疾病独立的渐进性致病因素，血浆中同型半胱氨酸含量与遗传因素、营养因素、雌激素水平、年龄因素等有关，,同型半胱氨酸同型半胱氨酸（homocysteine, Hcy,同型半胱氨酸临床应用,1,、心血管病防治,2,、,HCY,与神经系统疾病,3,、糖尿病及并发症防治,4,、慢性肾功能衰竭并发症防治,5,、肺血栓栓塞症防治,6,、预测骨折风险,7,、诊断与监测肝损伤,8,、肿瘤防治,同型半胱氨酸临床应用1、心血管病防治,演讲结速，谢谢观赏！,Thank you.,演讲结速，谢谢观赏！Thank you.,PPT,常用编辑图使用方法,1.,取消组合,2.,填充颜色,3.,调整大小,选择您要用到的图标单击右键选择“取消组合”,右键单击您要使用的图标选择“填充”，选择任意颜色,拖动控制框调整大小,PPT常用编辑图使用方法1.取消组合2.填充颜色3.调整大小,商务,图标元素,商务,