不常见药敏结果阅读课件

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,*,不常见细菌耐药表型结果探讨,胡付品,华山医院抗生素研究所,不常见细菌耐药表型结果探讨胡付品华山医院抗生素研究所,1,药物敏感性试验方法,稀释法,试管稀释法（肉汤稀释法）,平板稀释法（琼脂稀释法）,微量肉汤稀释法,扩散法（纸片法）,Kirby-bauer,（,K-B）法,E-test,自动化仪器,药物敏感性试验方法稀释法试管稀释法（肉汤稀释法）扩散法,2,纸片扩散法,原理：将浸有抗菌药物的纸片贴在涂有细菌的琼脂平板,上，抗菌药物在琼脂内向四周扩散，因此敏感细菌在纸,片周围一定距离内的生长受到抑制。,纸片扩散法原理：将浸有抗菌药物的纸片贴在涂有细菌的琼脂平板,3,Colonies,Lose Resistance,One colony,Plasmid,Multiple,colonies,如何制备菌悬液？,May,ColoniesLose ResistanceOne col,4,正确测量苯唑西林、万古霉素和利奈唑胺对葡萄球菌；以,及万古霉素对肠球菌的抑菌圈直径,不要用反射光,要使用透射光,正确测量苯唑西林、万古霉素和利奈唑胺对葡萄球菌；以不要用反射,5,大肠埃希菌污染肠球菌；,菌落再次纯分,铜绿假单胞菌有耐药菌落,抑菌圈内有菌落，怎么办,?,大肠埃希菌污染肠球菌；铜绿假单胞菌有耐药菌落抑菌圈内有菌落，,6,第,1,问：,如何解释阿米卡星对大肠埃希菌的抑菌现象？,阿米卡星,厄他培南,第 1问：如何解释阿米卡星对大肠埃希菌的抑菌现象？阿米卡星厄,7,J. Exp. Med., Jul 1948; 88: 99 - 131,药物：青霉素,G,细 菌 ：,-,溶 血 性 链 球 菌,J. Exp. Med., Jul 1948; 88: 99,8,矛盾的现象,(,Eagle,现象,),指抗菌药物在高浓度的时候反而降低杀菌活性,这种现象第一次由,Eagle,和,Musselman,两位科学家,发现并报道。,青霉素类抗菌药物在作用于葡萄球菌、,溶血性,链球菌以及肠球菌时出现药物低浓度（仍超过,MIC,值）时抗菌活性好于高浓度。,J. Exp. Med., Jul 1948; 88: 99 - 131,矛盾的现象 (Eagle现象 )指抗菌药物在高浓度的时候反,9,表型,结果,克林霉素报告,红霉素耐药,( R),阴性,敏感,(S),评论或解释：该菌不表现为体外诱导型克,林霉素耐药。,红霉素耐药,( R),阳性,耐药,(R),评论或解释：该菌表现为体外诱导型克林,霉素耐药，用克林霉素治疗可能无效。,第,2,问：金黄色葡萄球菌,D,试验,erm,基因编码改变的核糖体结构,(23,S,rRNA,甲基化,),，导致对大环内酯类和林可,霉素类耐药。,erm,基因需诱导，红霉素具诱导作用。,若 出 现 红 霉 素,R,而 克 林 霉 素,S,， 但,D,试 验,阳性。若未进行,D,试验，克林霉素很可能,会被报告敏感而误导临床用药。,表型结果克林霉素报告红霉素耐药( R)阴性敏感 (S) 评论,10,第,3,问：如何解释万古霉素,E-,试验结果？,万古霉 素依赖 的粪肠 球菌,长期使 用包括 糖肽类 、氨基 糖肽类 等,抗生素 压力下 ，必须 依赖万 古霉素 才能生 长,The change at the ninth codon resulted in the,inactivation of the,ddl gene,and,vancomycin-dependent growth.,第 3问：如何解释万古霉素 E-试验结果？万古霉 素依赖,11,第,4,问 ： 铜 绿 假 单 胞 菌 对 复 方 新 诺 明 天 然 耐 药 ？,第 4问 ： 铜 绿 假 单 胞 菌 对 复 方 新 诺 明,12,第,4,问 ： 铜 绿 假 单 胞 菌 对 复 方 新 诺 明 天 然 耐 药 ？,第 4问 ： 铜 绿 假 单 胞 菌 对 复 方 新 诺 明,13,耐药率（）,2011,年,CHIN,ET,监测,6981,株克雷伯菌属耐药率（,%）,9.3,12.4,19,24.7,27.5,34.8,94.7,20,10,30,40,90,80,70,60,50,100,0,亚胺培南 阿米卡星 头孢西丁 头孢吡肟 环丙沙星 头孢他啶 头孢噻肟 氨苄西林,抗菌药物,耐药率（）2011年 CHINET监测 6981株克雷伯菌,14,不常见药敏结果阅读课件,15,肺炎克雷伯菌对氨苄西林,天然耐药,是,天然产,SHV,型酶,160,株肺杆中,20,株对氨苄西林敏感,19,株细菌,SHV,基因出现“点突变”，,mRNA,逆转录失败，,无法翻译出由,SHV,基因正确编码的,-,内酰胺酶。,肺炎克雷伯菌对氨苄西林 天然耐药 是 天然产 SHV型酶,16,第,6,问 ： 大 肠 埃 希 菌 对 头 孢 噻 肟 的 耐 药 机 制 ？,第 6问 ： 大 肠 埃 希 菌 对 头 孢 噻 肟 的 耐,17,头孢呋 辛,头孢唑 林,第,7,问：如何解释大肠埃希菌对头孢唑啉,S,但头孢呋辛,R,的现象？,头孢呋辛酶,可水解,头孢呋辛但,不能水解,头孢唑啉,头孢呋 辛头孢唑 林第 7问：如何解释大肠埃希菌对头孢唑啉,18,第,8,问：,大肠埃希菌纸片法药敏结果，结果可能吗？,头孢唑林,S,头孢他啶,R,2005 年，Ling Ma发现一株大肠埃希菌具有特殊的耐药表型，,该菌对氨苄西林和头孢他啶耐药，但对头孢西丁、头孢曲松、头,孢噻肟、亚胺培南和头孢唑啉敏感。分子生物学试验研究结果证,实，该菌产SHV-57 型ESBL,第 8问：大肠埃希菌纸片法药敏结果，结果可能吗？头孢唑林 S,19,第,9,问 ： 这 株 大 肠 埃 希 菌 可 能 的 耐 药 机 制 是 什 么 ？,第 9问 ： 这 株 大 肠 埃 希 菌 可 能 的 耐 药,20,第,10,问：,这株铜绿假单胞菌可能的耐药机制是什么？,可能的 机制：,1,、,膜,孔蛋白缺失：,导致亚胺培南耐药,2,、,AmpC,酶：,对头孢西丁耐药,3,、,E,SBL,：,对头孢他啶和头,孢吡肟耐药,第 10问：这株铜绿假单胞菌可能的耐药机制是什么？可能的 机,21,产,ESBL,菌株,的检测,含酶抑制剂复合制剂与相应单药抑菌圈直径相差,5mm,，,即判断该菌为产,ESBLs,菌株,产 ESBL菌株的检测含酶抑制剂复合制剂与相应单药抑菌圈直径,22,头孢他啶：0.5,g/mL,头孢他啶/克拉维酸：0.19,g/mL,= 2.63,头孢他啶：32,g/mL,头孢他啶/克拉维酸：0.19,g/mL,=,168,第,11,问：该菌一定为产,ESB,L,菌株？,头孢他啶：0.5g/mL= 2.63头孢他啶：32,23,MIC,比值,假阳性结果,MIC比值假阳性结果,24,不常见药敏结果阅读课件,25,第,12,问：,如何解释这株大肠埃希菌的药敏结果？,耐药,阿莫西林、哌拉西林、头孢噻吩、头孢呋辛、头,孢哌酮,阿莫西林,/,克拉维酸、,哌拉西林,/,他唑巴坦、头孢,哌酮,/舒巴坦,敏感,头孢噻肟、头孢他啶,第 12问：如何解释这株大肠埃希菌的药敏结果？耐药阿莫西,26,第,12,问：,如何解释这株大肠埃希菌的药敏结果？,ESBL,确证试验阴性,本株细菌产生,TEM-1,型,内酰胺酶、膜孔蛋白缺失。,头孢西丁的耐药性可能是由膜孔蛋白缺失所致，而非,-,内酰胺酶,Pa/Pb,调控,TEM-1b,高表达所致，强启动子,Pa/Pb,是由弱启动子,P3,经,32C,T,突变而成,第 12问：如何解释这株大肠埃希菌的药敏结果？ESBL确证,27,第,13,问：肠杆菌科细菌对头孢西丁耐药就表示细菌产,AmpC,酶吗？,肠杆菌科细菌对头孢西丁耐药只能表示该菌是产,AmpC,的,可疑菌株。,某些类型的,ESBL,也能水解头孢西丁,1,2,3,4,1,2,3,1,2,4,3,4,第 13问：肠杆菌科细菌对头孢西丁耐药就表示细菌产 AmpC,28,2009,年,14,家医院大肠埃希菌的耐药率（,%,）（,CHINET,监测）,耐药率,耐药率,抗 菌 药物,阿 米 卡星,庆 大 霉素,哌 拉 西林,哌 拉 西 林,/,他 唑 巴 坦,头 孢 唑林,头 孢 呋辛,头 孢 噻肟,头 孢 他啶,产,ESBL,(4515,株,),10.1,61.8,97.8,5.0,98.4,98.0,85.8,31.2,非产,ESBL,(3477,株,),4.3,40.3,49.5,4.1,26.4,16.5,10.4,6.4,抗 菌 药物,头 孢 吡肟,头 孢 哌 酮,/,舒 巴 坦,头 孢 西丁,亚 胺 培南,美 罗 培南,厄 他 培南,环 丙 沙星,复 方 磺 胺 甲,噁唑,产,ESBL,(4515,株,),36.9,7.4,13.2,0.2,0.3,0.5,71.0,74.0,非产,ESBL,(3477,株,),6.5,2.4,7.2,0.6,0.5,1.1,42.4,56.1,2009年 14家医院大肠埃希菌的耐药率（ %）（ CHIN,29,不常见药敏结果阅读课件,30,第,14,问：改良,Hodg,e,试验阳性就是产,KPC,酶？,第 14问：改良 Hodge试验阳性就是产 KPC酶？,31,改良,Hodge,试验检,测假阳性结果,改良 Hodge试验检测假阳性结果,32,Figure 1. Phenotypic carbapenemase detection by MHT,1,、,K. pneumoniae ATCC BAA-1705, positive result,2,、,K. pneumoniae ATCC BAA-1706, negative result,3,、,CTX-M-producing,K. pneumoniae,clinical isolate,4,、,KPC-producing K. pneumoniae clinical isolate,ETP,MEM,Figure 1. Phenotypic carbapene,33,不常见药敏结果阅读课件,34,改良,Hodge,试验检,测假阴性结果,改良 Hodge试验检测假阴性结果,35,第,15,问：,这株大肠埃希菌对厄他培南可能的耐药机制是什么？,1.,厄他培南：,13 mm,2.,厄他培南,+AP,B,14 mm,3.,厄他培南,+ED,TA,14 mm,4.,亚胺培南：,30 mm,5.,头孢吡肟：,12 mm,第 15问：这株大肠埃希菌对厄他培南可能的耐药机制是什么？,36,第,16,问：,这株大肠埃希菌对厄他培南可能的耐药机制是什么？,1.,厄他培南：,13 mm,2.,厄他培南,+AP,B+EDTA,14 mm,3.,美罗培南：,28 mm,4.,法罗培南：,23 mm,5.,法罗培南,+AP,B,23 mm,第 16问：这株大肠埃希菌对厄他培南可能的耐药机制是什么？,37,第,16,问：,这株大肠埃希菌对厄他培南可能的耐药机制是什么？,1,、 头 孢 美 唑 ：,26 mm,2,、 头 孢 噻 肟 ：,11 mm,3,、 头 孢 噻 肟,/,克 拉 维 酸 ：,30 mm,4,、 头 孢 他 啶 ：,22 mm,5,、 头 孢 他 啶,/,克 拉 维 酸 ：,30 mm,6,、 头 孢 噻 肟,/,硼 酸 ：,13 mm,第 16问：这株大肠埃希菌对厄他培南可能的耐药机制是什么？,38,第,16,问：,这株大肠埃希菌对厄他培南可能的耐药机制是什么？,第 16问：这株大肠埃希菌对厄他培南可能的耐药机制是什么？,39,小结,细菌耐药越来越严重，需加强检测,表型、基因型,做好细菌药敏试验不容易,且做且珍惜,常规和科研是兄弟,常规输送炮弹,科研推进常规,小结细菌耐药越来越严重，需加强检测表型、基因型做好细菌,40,？,不当之处，请批评指正！,？不当之处，请批评指正！,41,