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单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,技术知识,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,实验五,果蝇唾腺染色体的观察,1,技术知识,实验五果蝇唾腺染色体的观察 1技术知识,1,、学习果蝇幼虫唾腺的剖取方法和唾腺染色体的制片方法；,2,、观察果蝇唾腺染色体的形态特征。,一、实验目的,2,技术知识,1、学习果蝇幼虫唾腺的剖取方法和唾腺染色体的制片方法；一、实,双翅目昆虫（果蝇等）幼虫期唾腺细胞中具有相当于普通染色体,100,150,倍的巨大染色体，由于存在于唾液腺细胞中，所以称为唾腺染色体,(salivary gland chromosome),。它是由于唾腺细胞发育到一定阶段后就不再进行有丝分裂，永久停留在间期，唾腺染色体经过多次复制而不分开，约有,1000,4000,根染色体丝的拷贝，所以又叫多线染色体（,polytene chromosomes,）。,二、实验原理,3,技术知识,双翅目昆虫（果蝇等）幼虫期唾腺细胞中具,黑腹果蝇巨大的唾腺染色体是从染色中心向四周放射状地伸出,5,长,1,短共,6,条臂。果蝇染色体数为,2n,8,。其中,1,号染色体（,X,染色体）为端着丝粒染色体，其着丝粒附着地一端在染色中心上，另一端游离；,2,号、,3,号染色体为中部着丝粒染色体，每条呈“,V“,伸展两臂，,4,号染色体很短小，呈点状附在染色中心边缘。,4,技术知识,黑腹果蝇巨大的唾腺染色体是从染色中,特征,巨大；,体细胞配对，染色体只有半数（,n,）；,各染色体的异染色质多的着丝粒部分互相靠拢形成染色中心；,深浅不同、疏密个别的横纹。,5,技术知识,特征 5技术知识,染色质丝的不同部位螺旋化程度不同，其中螺旋化程度较高的部位形成染色粒，这些染色粒经多线染色体的“放大”，形成染色较深的横纹。横纹的相对大小和空间排列是恒定的，可以作为天然的精确基因定位的“坐标”。这些横纹的数目和位置一般是恒定的，具有果蝇种的特征，染色体的缺失、重复、倒位、易位等，都能在唾腺染色体上辨别出来。,banded chromosomes 1000x,6,技术知识,染色质丝的不同部位螺旋化程度不同，其中螺旋化程度较高,材料：果蝇的三龄幼虫,试剂：,1%,醋酸洋红,器具：显微镜、镊子、解剖针、载玻片、盖玻片、滤纸、绘图纸,三、仪器与材料,7,技术知识,材料：果蝇的三龄幼虫三、仪器与材料7技术知识,（,1,）取果蝇三龄幼虫置于载玻片上，由于果蝇的唾腺位于幼虫体前,1/3-1/4,处，所以左手持镊子按压住虫体后端三分之一的部位，固定幼虫，右手持解剖针扎住幼虫头部口器部位，适当用力向右拉唾腺腺体随之而出。,四、实验程序,8,技术知识,（1）取果蝇三龄幼虫置于载玻片上，由于果蝇的唾腺位于幼虫体前,9,技术知识,9技术知识,果蝇三龄幼虫解剖图,Salivary gland,：唾腺,Gonad:,性腺,Ganglion:,神经节,Trachea:,气管,Ovary,：卵巢,Intestine,：肠,10,技术知识,果蝇三龄幼虫解剖图Salivary gland：唾腺10技术,挑取果蝇唾腺的过程,11,技术知识,挑取果蝇唾腺的过程11技术知识,唾腺的位置及形态特征,12,技术知识,唾腺的位置及形态特征12技术知识,13,技术知识,13技术知识,（,2,）滴加一滴醋酸洋红，在显微镜下（,4,倍镜）去除唾腺周围的脂肪等其他组织部分。唾腺是一对透明的棒状腺体，外有白色的脂肪组织（不透明）。去除幼虫其它组织部分，并把唾腺周围的白色脂肪剥离干净。,14,技术知识,14技术知识,分离出来的果蝇唾腺,位置：在幼虫体前约,1/3,处；,形状：形如一对香蕉，上小上大。一边常附着带状的不透明的脂肪。,颜色：半透明如玻璃，略带白色，比周围组织透明；,细胞特征：唾腺上的细胞较大，轮廓清晰，用低倍镜即可清楚看到。,15,技术知识,分离出来的果蝇唾腺位置：在幼虫体前约1/3处；15技术知识,唾腺组织,16,技术知识,唾腺组织16技术知识,不同人操作得到的唾腺组织可能不一样,17,技术知识,不同人操作得到的唾腺组织可能不一样17技术知识,放大的唾腺组织,18,技术知识,放大的唾腺组织18技术知识,放大的唾腺组织,19,技术知识,放大的唾腺组织19技术知识,放大的唾腺组织,20,技术知识,放大的唾腺组织20技术知识,（,3,）盖上盖玻片，用刀片支起盖玻片一角，按住盖玻片另一边，用解剖针轻轻敲打盖玻片，去掉刀片，稍加热后覆上滤纸垂直压片。,（,4,）观察，先在,10,倍镜下观察找到染色体后，再换高倍镜下观察，比较各染色体的横向纹带、带宽大小、带纹排列顺序，以及由着丝点纠集组成的染色体中心。,21,技术知识,（3）盖上盖玻片，用刀片支起盖玻片一角，按住盖玻片另一边，用,10,倍镜,22,技术知识,10倍镜22技术知识,40,倍镜,23,技术知识,40倍镜23技术知识,100,倍镜,24,技术知识,100倍镜24技术知识,重要实验步骤,：,取果蝇三龄幼虫，一手持镊子夹住虫体中部稍后，固定幼虫，另一手持解剖针按住幼虫头部，轻缓拉开头部，去除幼虫的其他组织部分和唾腺周围的脂肪等其他组织，再用常规染色体制片方法制片。,25,技术知识,重要实验步骤：25技术知识,实验注意事项,：,1,、取果蝇三龄幼虫最佳，其行动迟缓，肥大，爬上管壁（将要化蛹）。,2,、要辨别清楚哪些是唾腺细胞。,3,、去除唾腺周围的其它组织部分。,26,技术知识,实验注意事项 ：26技术知识,作业,：,1,、绘出所观察到的唾腺染色体简图。,2,、果蝇唾腺染色体与其他染色体在形态结构上有什么区别？,27,技术知识,作业 ：27技术知识,
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