第二十五章肝炎病毒hepatitisvirusHV课件

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,第二十五章 肝炎病毒,(hepatitis virus, HV),以侵害肝脏为主引起病毒性肝炎的一组不同种属的病毒。,临床表现相似：乏力、消化道症状、肝功能异常、部分有黄疸,甲型肝炎病毒（,HAV,）、乙型肝炎病毒（,HBV,）、,丙型肝炎病毒（,HCV,）、丁型肝炎病毒（,HDV,）、,戊型肝炎病毒（,HEV,）、,GBV-C/HGV,、,TTV,黄热病毒、,CMV,、,EBV,、风疹病毒等,第二十五章 肝炎病毒 (hepatitis virus,Viral Hepatitis - Historical Perspective,other : GBV-C/HGV, TTV,?,A,Viral hepatitis,Enterically,transmitted,E,B,C,D,Parenterally,transmitted,Viral Hepatitis - Historical P,肝炎类型,甲型,乙型,丙型,丁型,戊型,virus,HAV,HBV,HCV,HDV,HEV,科,小,RNA,病毒,嗜肝,DNA,病毒,黄病毒,未定,肝炎病毒,生物学性状,大小,(nm),27,42,60,35,30-32,形状,二十面体,球状,球状,球状,二十面体,基因组,ssRNA,dsDNA,ssRNA,ssRNA,ssRNA,包膜,+(HBsAg),+,+(HBsAg),传播途径,粪,-,口,输血、性行为、垂直,输血、性行为、垂直,输血、性行为、垂直,粪,-,口,临床特点,潜伏期,2-6 w,1-6 w,2-10 w,1-6 w,2-8 w,急性,+,+,+,+,+,慢性,+,+,+,重症,少,少,少,经常,妊娠,携带者,+,+,+,诱发肝癌,+,+,不明确,预防,Ig,丙球蛋白,HBIg,丙球蛋白,疫苗,灭活或减毒,重组,(HBsAg),HBsAg,肝炎类型甲型乙型丙型丁型戊型virusHAVHBVHCVHD,一、甲型肝炎病毒,（,hepatitis A virus,，,HAV,）,Feinstone,于,1973,年应用免疫电镜技术在急性期肝炎患者粪便中发现。,1982,年国际病毒命名委员会将其分类为小,RNA,病毒科肠道病毒属,72,型。,近年又被单列为肠道病毒科的嗜肝,RNA,病毒属（,heparnavirus,）。,HAV,引起的,甲型肝炎,是急性肝炎，主要经过粪,-,口途径传播，可造成暴发或散发流行，潜伏期短，发病急，一般不转为慢性，亦无慢性携带者，预后良好。,一、甲型肝炎病毒Feinstone于1973年应用免疫电镜技,形态与结构,一）生物学性状,衣壳,: 20,面体立体对称，分实心颗粒和空心颗粒两种；由,VP1-VP4,等,4,种多肽组成，其中,VP1,是主要的衣壳蛋白，其抗原决定簇的,NT,抗体，能中和所有的,HAV,株。,1,个血清型，,7,个基因型。,球形颗粒，无包膜和突起,:,基因组,:,线状,+ssRNA,，稳定性高。,形态与结构 一）生物学性状衣壳: 20面体立体对称，分实心颗,易感动物和细胞培养,一）生物学性状,人、黑猩猩、狨猴、猕猴、恒河猴等灵长类动物对,HAV,易感，接种病毒后均可出现临床、生化和组织学上急性肝炎的改变，粪便内可检出病毒。,HAV,可用,Vero,细胞、人胚肾细胞、传代猴肾细胞,(FRhK-4,、,FRhK-6),、人胚肺,2,倍体成纤维细胞和人肝癌细胞株,(PLC/PRF/S),等分离培养。但不引起,CPE,。因此需用免疫荧光法或放射免疫法检出培养的,HAV,。,易感动物和细胞培养 一）生物学性状 人、黑猩猩、狨猴、,抵抗力,一）生物学性状,耐酸碱（,pH2-10,）、耐热、耐有机溶剂。,高压,(121 20 min),、煮沸,(5 min),、干热,(180 1 h),、,UV (1.1,瓦,1 min),、甲醛,(1:4 000,、,37 3 d),以及氯,(10-5 ppm,、,30 min),等处理均可使之灭活。,鉴于,HAV,有相当大的抵抗力，因此对肝炎患者及其排泄物处理应特别小心。,抵抗力 一）生物学性状耐酸碱（pH2-10）、耐热、耐,传染源与传播途径,二）致病性与免疫性,传染源：,多为患者和隐性感染者。患者潜伏期后期及,急性期的血液和粪便均有传染性。,传播途径：,主要通过粪,-,口途径传播，或经粪便污染的,食物。未有患急性甲型肝炎的孕妇传染给胎儿的病例。,传染源与传播途径二）致病性与免疫性传染源：多为患者和隐性感染,传播方式,传播方式,致病机制,二）致病性与免疫性,HAV,主要侵犯儿童和青年，且多为隐性感染,;,机体的免疫应答也参与了肝脏的损伤，即抗,HAV(IgM,和,IgG),在肝脏与,HAV,结合形成免疫复合物，或,Tc(CTL),对感染病毒肝细胞的攻击所致。,致病机制二）致病性与免疫性HAV主要侵犯儿童和青年，且多为隐,HAV,的致病性,粪口,途径传播,小肠淋巴结中大量增殖,入血并形成病毒血症,肝脏为最终靶器官（病毒直接损伤或免疫病理作用）,通过胆汁随粪便排出体外,HAV的致病性粪口小肠淋巴结中大量增殖入血并形成病毒血症肝,感染后可产生持久免疫力。,早期：,IgM,；同时，从粪便中检出,sIgA,抗体。,恢复期：,IgG,，并可持续多年；,特异细胞免疫应答。,免疫性,二）致病性与免疫性,感染后可产生持久免疫力。免疫性二）致病性与免疫性,甲型肝炎血清学变化过程,甲型肝炎血清学变化过程,实验室诊断不依靠分离病毒,1.,血清学检查：,检测抗,HAV,常用,RIA,和,EIA,法。检测抗,HAV IgM,有助于早期诊断；测抗,HAV IgG,有助于流行病学调查；测粪便中抗,HAV IgA,也有助于诊断。,2.,病毒检测：,潜伏期末期和急性期早期，取粪便用免疫电镜检测,HAV,颗粒；用放射免疫,(RIA),或酶免疫,(EIA),法检测,HAV,的抗原。,3.,病毒核酸检测：,应用,cDNA-RNA,分子杂交技术及,PCR,技术检测,HAV,的,RNA,，方法特异、敏感。用斑点杂交法可检出,10-9 mg,核酸。,三）微生物学检查法,实验室诊断不依靠分离病毒三）微生物学检查法,HAV,感染后以隐性感染和无黄疽型病例占多数，因此传染源较难控制。,预防,：,一般性预防,：搞好卫生，切断传播途径。,特异性预防,：接种疫苗，,减毒甲型肝炎活疫苗,(H2,株和,L1,株,),；国外灭活疫苗（,HM175,株、,CR326-F,株），,HAV,基因工程疫苗正在研制中。,人工被动免疫,：注射丙种球蛋白。,四）防治原则,HAV感染后以隐性感染和无黄疽型病例占多数，因此传染源较难控,治疗：,甲型肝炎为自限性疾病，经治疗可痊愈，不转慢性亦不留后遗症。,用药宜简。,四）防治原则,治疗：甲型肝炎为自限性疾病，经治疗可痊愈，不转慢性亦不留后遗,HAV,引起的甲型肝炎是一个,消化道,传染病，传播途径为,粪,-,口途径,，甲型肝炎的过程是一个,病毒消灭性,的感染，,无,HAV,携带者,，可用,减毒,活疫苗进行预防。,HAV,总结,HAV引起的甲型肝炎是一个消化道传染病，传播途径为粪-口途径,1989,年在美国夏威夷召开的国际肝癌会上，将肠道传播的非甲非乙型肝炎病毒正式命名为,戊型肝炎病毒,，,是戊型肝炎（,hepatitis E,，,HE,）的病原体。,戊型肝炎主要经粪口途径传播常引起大流行，其临床和流行病学特点类似甲型肝炎。,二、戊型肝炎病毒,（,hepatitis E virus,，,HEV,）,1989年在美国夏威夷召开的国际肝癌会上，将肠道传播的非甲非,HEV,呈球形，无包膜，表面呈现锯齿状，类似杯状病毒。到目前为止，世界各地分离到的病毒只有一个血清型。,HEV,直径,27-38 nm,，,20,面体立体对称，核酸为线形,+ssRNA,，,易感染动物是猕猴，也可感染非洲绿猴、恒河猴、猫猴和黑猩猩等灵长类动物，口服或静注含有,HEV,病原材料均可使之感染。,一）生物学性状,HEV呈球形，无包膜，表面呈现锯齿状，类似杯状病毒。到目前为,主要通过粪,-,口途径传播，饮水被病毒污染可造成水源性暴发流行，也可通过密切接触、食物污染等方式传播。,患者多见于,20-40,岁成年人，潜伏期为,2-9 w,，多数患者于病后,6 w,即好转或痊愈。少数患者可表现为重症肝炎，甚至可导致死亡。孕妇感染时，发病率高，病情严重，常发生流产或死产。,HEV,致病机制尚不明了，可能是病毒本身作用及机体免疫应答造成肝细胞损伤。,病后有一定免疫力。,二）致病性和免疫性,主要通过粪-口途径传播，饮水被病毒污染可造成水源性暴发流行，,Symptoms,ALT,IgG anti-HEV,IgM anti-HEV,Virus in stool,0,1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11,12,13,Serological Course of HEV infection,Titer,Weeks after exposure,SymptomsALTIgG anti-HEVIgM ant,1.,免疫电镜：,可取病人粪便标本进行常规免疫电镜检查,HEV,颗粒。,2.,血清学方法,ELISA,或,Western,印迹试验检测抗,HEV,，包括抗,HEV IgM,和抗,HEV IgG,。,3. HEV,核酸检测：,多采用,PCR,法。可取患者粪便标本或血清标本检测,HEV RNA,。,三）微生物学检查法,1. 免疫电镜： 三）微生物学检查法,原则上与甲型肝炎相同。主要措施是保护水源，防止被粪便污染，保证安全用水。在流行地区广泛宣传不喝生水，改善环境卫生和个人卫生，降低新患发病率。,免疫球蛋白预防无效。,本病治疗原则是早期发现，早期治疗。合并重症肝炎时按抢救暴发性肝功能衰竭的原则处理。,四）防治原则,原则上与甲型肝炎相同。主要措施是保护水源，防止被粪便污染，保,嗜肝,DNA,病毒科（,hepadnaviridae,）；,是,乙型肝炎,病原体，主要经输血、注射、性行为和母婴传播。,起病徐缓，部分患者可转为慢性，少数还可导致肝硬化和肝癌。,三、乙型肝炎病毒,（,hepatitis B virus,，,HBV,）,嗜肝DNA病毒科（hepadnaviridae）；三、乙型肝,1963,年,Blumberg,在澳大利亚土著人血清中发现一种新抗原，称为澳大利亚抗原（,Australia antigen,）；,1968,年确定这种抗原与血清型肝炎密切相关，称为肝炎相关抗原（,hepatitis associated antigen,，,HAA,）；,1970,年,D.S. Dane,在肝炎患者血清中发现具有传染性的颗粒，即,Dane,颗粒（,Danes particle,）。从而,HBV,被确认。,概 述,1963年Blumberg在澳大利亚土著人血清中发现一种新抗,a,小球形颗粒,(small spherical particle),，直径,22 nm,，,HBsAg,，不含,DNA,和,DNA,多聚酶，无感染性；,b,管形颗粒,(tubular particle),，直径,22 nm,，长度在,50-700 nm,之间，由小球形颗粒串联而成，无感染性；,c,大球形颗粒,(large spherical particle),，即,Dane,颗粒，直径,42 nm,，有感染性。,形态与结构,一）生物学性状,a 小球形颗粒(small spherical partic,Electron microscopy of hepatitis B virus-positive serum reveals 3 morphologically distinct forms of particles,spherical particle,(HBsAg),Dane particle,(complete virion ),tubular particle,large spherical particle,Electron microscopy of hepatit,Hepatitis B virus. Dane particle and incomplete particles that are found in patients serum,Hepatitis B virus. Dane partic,第二十五章肝炎病毒hepatitisvirusHV课件,形态与结构,一）生物学性状,Dane,颗粒是具有感染性的完整成熟的,HBV,颗粒，直径为,42 nm,，具有双层核壳结构：,核心颗粒,：直径为,27 nm,。,颗粒内部：双股不完全环状,DNA,和,DNA,多聚酶,。,颗粒表面（内衣壳）：含有,HBcAg,和,HBeAg,。,外壳（包膜）,：厚,7 nm,。,脂质双层：来源于宿主细胞,包膜蛋白：病毒编码。含有,HBsAg,和,PreSAg,形态与结构一）生物学性状Dane颗粒是具有感染性的完整成熟的,HBV,基因结构,一）生物学性状,HBV DNA,是由长链,L (,负链,),和短链,S (,正链,),组成的不完全双链环状,DNA,，短链的长度相当于长链的,50-85%,。,HBV DNA,长链有转录和翻译蛋白的功能，载有病毒蛋白质的全部密码，有,4,个开放读码框架,(ORF),，分别为,S,、,C,、,P,和,X,区 。,HBV基因结构一）生物学性状HBV DNA是由长链L (,乙型肝炎病毒基因结构模式,乙型肝炎病毒基因结构模式,S,区,：衣壳蛋白。分别由,S,基因、,PreS1,与,PreS2,基因编码,HBsAg,、,PreS1,和,PreS2 Ag,。,主蛋白,(main protein),：,HBsAg,中蛋白,(middle protein),：,HBsAg+PreS2Ag,大蛋白,(large protein),：,HBsAg+PreS2Ag+ PreS1Ag,C,区,：,C,基因和,preC,基因分别编码,HBcAg,和,PreC,蛋白（是,HBeAg,的前体蛋白，经切割加工后形成,HBeAg,并分泌到血循环中）。,S区：衣壳蛋白。分别由S基因、PreS1与PreS2基因编码,P,区,：最长，,P,基因编码,HBV DNA,多聚酶。,末端蛋白区,(terminal protein, TP),间隔区,(spacer),聚合酶,/,逆转录酶区,(DNA pol/RT),Rnase H,区。,X,区,：编码,X,蛋白，可反式激活一些细胞的癌基因及病毒的基因等，可能与肝癌的发生有关。,P区：最长，P基因编码HBV DNA多聚酶。,HBV,复制周期,HBV复制周期,1. absorption, uncoating,2.,dsDNA,cccDNA,3. L- DNA mRNA,0.8kb,HBxAg,2.1kb envelope proteins (,HBsAg,PreS2,),2.4kb envelope proteins (,HBsAg,PreS2,PreS1,),3.5kb,P,蛋白、,HBcAg,、,HBeAg,前体蛋白,template for DNA replication(,pregenomic RNA,，,PgRNA,),4.,PgRNA,L- DNA S+ DNA dsDNA,5.,virion packaging and release,1. absorption, uncoating,抗原组成,外壳：,HBsAg,：,三种颗粒所共有，是机体受,HBV,感染的主要标志之一。,具有抗原性，能刺激机体产生保护性抗体，即抗,HBs,。,根据,HBsAg,抗原性差异，,HBV,可分为,a,dr/,a,dw,、,a,yr/,a,yw,等,4,种血清型。血清型分布有明显的地区差异，并与种族有关。,如欧美主要是,adr,型，为,A,基因型；我国以,adr,、,ayw,为多见。,一）生物学性状,抗原组成 外壳：一）生物学性状,HBsAg,的,a,抗原决定簇,A,抗原决定簇由,HBsAg,的,124-147,位氨基酸组成，亲水性强，,124/137,、,139/147,的半胱氨酸形成二硫键，构成两个环状结构。,连续性抗原决定基，细胞免疫和体液免疫。,制备疫苗。,HBsAg的a抗原决定簇A抗原决定簇由HBsAg的124-1,抗原组成,PreS1,和,PreS2,：,存在吸附肝细胞受体的表位；,部分,PreS1,与内壳的,HSP70,结合，使内外层衣壳紧密联系；,其抗原性比,HBsAg,更强，抗,PreS1,和抗,PreS2,通过阻断,HBV,与肝细胞的结合而起抗病毒作用。,一）生物学性状,抗原组成 PreS1和PreS2：一）生物学性状,抗原组成,衣壳,HBcAg,：,主要定位于感染细胞核内，不易从患者血清中检出。,也可在肝细胞膜表面表达，宿主,CTL,作用的主要靶抗原。,抗原很强，能刺激机体产生抗,HBc,，但无中和作用。,检出高效价抗,HBc,，抗,HBc IgM,则表示,HBV,在肝内处于复制状态；抗,HBc IgG,则表示感染过,HBV,。,一）生物学性状,抗原组成 衣壳一）生物学性状,抗原组成,衣壳,HBeAg,：,可作为,HBV,复制及血清具有传染性的标志。,急性乙型肝炎进入恢复期时,HBeAg,消失，抗,HBe,阳性；,但抗,HBe,亦见于携带者及慢性乙型肝炎血清中。,一）生物学性状,抗原组成 衣壳一）生物学性状,易感动物和细胞培养,一）生物学性状,只有,黑猩猩,对,HBV,易感，接种后可发生与人类相似的急慢性感染。,体外细胞培养尚未成功。,近年来应用基因克隆技术，可使,HBV,基因转移给小鼠或转染细胞株。将病毒,DNA,导入肝癌细胞后，病毒可复制并在细胞中表达,HBsAg,、,HBcAg,和,HBeAg,。有此细胞株可持续地产生,Dane,颗粒。,易感动物和细胞培养一）生物学性状只有黑猩猩对HBV易感，,抵抗力,一）生物学性状,HBV,对理化因素的抵抗力相当强：,对低温、干燥、紫外线、醚、氯仿、酚等均有抵抗性。,高压灭菌,(121 15 min),、,0.5%,过氧乙酸、,5%,次氯酸钠、,3%,漂白粉液、,0.2%,新洁尔灭等均可使,HBV,失去感染性，但仍保持,HBsAg,的抗原活性,。,HBV,的感染性与,HBsAg,的抗原活性并非一致,。,抵抗力一）生物学性状HBV 对理化因素的抵抗力相当强：,传染源,急性、慢性乙肝患者及,HBsAg,无症状携带者均为传染源，特别是无症状的,HBsAg,携带者,做为传染源危害性更大。,二）致病性和免疫性,传染源二）致病性和免疫性,乙型肝炎主要是经血液或注射途径传播即,非胃肠道的感染,(parenteral infection),：,1.,血液、血制品传播：,有少数,HBsAg,阴性、而,HBV DNA,阳性的血液仍可引起感染。,2.,医源性传播：,通过注射、手术、采血、拔牙、内窥镜检查、预防接种、针刺、纹身、各种医疗器具、甚至工作人员的手，均可传播乙型肝炎。,传播途径,二）致病性和免疫性,乙型肝炎主要是经血液或注射途径传播即非胃肠道的感染,3.,母婴传播：,主要是在围产期，分娩时新生儿经产道接触或吸吞入含,HBV,的母血、羊水、或分泌物所致，少数可由于宫内感染,(,10%),，也可通过母乳、体液或密切接触而传播。,4.,接触传播：,日常生活中如共用牙刷、洗澡刷子、剃须刀等可引起,HBV,感染。通过唾液传播的可能性也应受到重视。性交，尤其男性同性恋亦可传播,HBV,。因此，在西方国家将乙肝列为性传播疾病,(STD),之一。尿液、鼻液、汗液和粪,-,口传播的可能性很小。,3. 母婴传播：主要是在围产期，分娩时新生儿经产道接触或吸吞,致病机制,二）致病性和免疫性,乙型肝炎的临床表现呈多样性，可表现为,无症状病毒携带者、急性肝炎、慢性肝炎及重症肝炎,等。,HBV,的致病机制，除了,HBV,对肝细胞直接损害外，主要是通过宿主的免疫应答引起肝细胞的病理改变的临床表现。,1,细胞介导的免疫病理损伤,2,体液免疫所致的免疫损伤,3,自身免疫所致的损伤,致病机制 二）致病性和免疫性乙型肝炎的临床表现呈多样性,细胞免疫损伤,肝细胞内出现,HBV,抗原，细胞免疫强弱与临床过程轻重与转归密切相关,免疫力过强可出现重症肝炎，过低则是慢性肝炎,体液免疫损伤,先天性无丙种球蛋白血症患者乙肝仍表现为典型的肝炎病变,免疫复合物沉积于肝内，诱生大量,TNF,，导致重症肝炎，主要造成肝外症状表现,自身免疫损伤,HBV,感染后，肝细胞自身抗原性改变，诱生自身免疫反应,肝特异性脂蛋白抗原（,Liver specific protein, LSP,）暴露,细胞免疫损伤,免疫性,体液免疫：,抗,HBs,：,中和体液中,HBV,，使其失去感染性。,抗,PreS2,：,封闭病毒与肝细胞表面的,PHSA,受体，阻止,病毒吸附于肝细胞。,抗,HBe,：,可与肝细胞表面,HBeAg,结合后，通过补体,介导而参与破坏病毒感染的肝细胞。,NT,抗体,二）致病性和免疫性,免疫性 体液免疫：NT抗体二）致病性和免疫性,细胞免疫：,主要依靠,CTL,。,CTL,对,HBV,感染的肝细胞,(,靶细胞,),有直接杀伤作用。据认为，针对,HBcAg,的,CTL,在清除,HBV,感染的靶细胞中有较重要的作用。,免疫性,二）致病性和免疫性,细胞免疫：免疫性二）致病性和免疫性,HBV,与原发性肝癌,HBV,感染与原发性肝癌的发生有密切关系，其依据是：,经流行病学调查表明，乙型肝炎患者及,HBsAg,携带者的原发性肝癌发生率明显高于未感染人群（,217,倍）；,用与,HBV,分子生物学相似的土拨鼠肝炎病毒,(WHV),可诱发土拨鼠原发性肝癌。而未感染鼠则无一只发生肝癌；,用,HBVDNA,探针与肝癌组织进行,Southern,印迹核酸杂交时，获得阳性结果，说明肝癌细胞染色体上整合有,HBV DNA,。,HBV与原发性肝癌HBV感染与原发性肝癌的发生有密切关系，其,Possible Outcomes of HBV Infection,3-5% of adult-acquired,infections,95% of infant-acquired infections,12-25% in 5 years,6-15% in 5 years,20-23% in 5 years,Acute hepatitis B infection,Chronic HBV infection,Cirrhosis,Chronic hepatitis,Liver failure,Hepatocellular carcinoma,Liver transplant,Death,Death,Possible Outcomes of HBV Infec,采用,血清学方法,检测患者血清中,HBV,抗原、抗体，并根据这些标志进行分析判断。,近年来，临床上也常采用,PCR,技术,对乙型肝炎进行辅助诊断。,三）微生物学检查法,采用血清学方法检测患者血清中HBV抗原、抗体，并根据这些标志,检测,HBV,抗原、抗体,常用的方法有,RIA,、,ELISA,法，间接血凝、反向间接血凝，对流免疫电泳、双向琼脂扩散法等。,检测的项目主要是,HBsAg,和抗,HBs,、,HBeAg,和抗,HBe,、以及抗,HBc,（两对半）,，必要时也可检测,PHSA,、,PreS1,和,PreS2,的抗原和抗体。,上述各项检查组成一套乙型肝炎病毒抗原抗体检测系统,(HBV,血清标志,),。,三）微生物学检查法,检测HBV抗原、抗体三）微生物学检查法,Symptoms,HBeAg,anti-HBe,Total anti-HBc,IgM anti-HBc,anti-HBs,HBsAg,0,4,8,12,16,20,24,28,32,36,52,100,Typical Serologic Course,Weeks after Exposure,Titre,Acute Hepatitis B Virus Infection with Recovery,SymptomsHBeAganti-HBeTotal ant,IgM anti-HBc,Total anti-HBc,HBsAg,Acute,(6 months),HBeAg,Chronic,(Years),anti-HBe,0,4,8,12,16,20,24,28,32,36,52,Years,Weeks after Exposure,Titre,Progression to Chronic Hepatitis B Virus Infection,Typical Serologic Course,IgM anti-HBcTotal anti-HBcHBsA,1. HBsAg,：感染性（,+,）；传染性（,+,）；,抗,HBs,：,NT,抗体，免疫力（,+,）；,2. HBcAg,：,DNA,复制标志，血清中（,-,），肝细胞核内（,+,）；,抗,HBc,：无中和作用，包括,抗,HBc IgM,：体内有病毒复制，急性乙肝或慢性乙肝的急性发作期,抗,HBc IgG,：慢性过程或恢复期,3. HBeAg,：感染性（,+,）；传染性（,+,）；恢复期（,-,）；,抗,HBe,：无中和作用，恢复期（,+,），携带者，慢性（,+,）；,4. PreS1,、,PreS2,和,PHSA,受体：新感染（,+,）；,抗,PreS1,、抗,PreS2,：,NT,抗体，恢复期（,+,）；,1. HBsAg：感染性（+）；传染性（+）；,HBsAg,anti-,HBsAg,HBeAg,anti-,HBeAg,anti-,HBcAg,描述,+,-,-,-,-,肝功正常为无症状携带者；,肝功异常为正患乙肝,+,-,+,-,-,同上，传染性强,+,-,+,-,+,“大三阳”传染性最强,+,-,-,+,+,“小三阳”急性感染趋向恢复,-,+,-,+,+/-,肝炎恢复期,-,-,-,-,+,感染过,HBV,或“窗口期”,-,+,-,-,-,接种乙肝疫苗成功；,感染过,HBV,已恢复,“两对半”及其临床意义,HBsAganti-HBeAganti-anti-描述+-,血清,HBV DNA,检测,核酸分子杂交及,PCR,技术检测,HBV DNA,可用于乙型肝炎的诊断及流行病学调查。,常用斑点杂交法将特异的,HBV DNA,探针与患者血清进行杂交检测血清中,HBV DNA,，方法敏感、特异，能测出,0.1-1pg,核酸。,用,PCR,技术检测患者血清中,HBV DNA,在临床上也已用于辅助诊断，特别是定量,PCR,能测出,DNA,拷贝数量，可做为药物疗效的考核指标。,血清HBV DNA检测,采取切断传播途径为主的综合性措施：,对乙肝患者及携带者的血液、分泌物和用具等要严格消毒灭菌；,严格筛选献血员，防止血液传播；,提倡使用一次性注射器及输液器；,凡手术操作，使用接触过血液的医疗器械等也必须严格消毒，要防止病人与医务人员间的相互传播；,对高危人群要进行特异性预防。,四）防治原则,采取切断传播途径为主的综合性措施：四）防治原则,主动免疫,接种乙型肝炎疫苗是最有效的预防措施。,乙型肝炎疫苗是纯化的,HBsAg,，不含,HBV DNA,，具有良好免疫原性，而无感染性。,应用的疫苗有两种，即,HBsAg,血源疫苗和,HBV,基因重组疫苗。另有,HBsAg,多肽疫苗或,HBV DNA,疫苗均在研究之中。,四）防治原则,主动免疫 四）防治原则,被动免疫,乙肝免疫球蛋白（,HBIg,）是由含有高效价抗,HBs,人血清提纯而成，可用于紧急预防。主要用于以下情况：, 医务人员或皮肤损伤被乙型肝炎患者血液污染伤口者；, 母亲为,HBsAg,、,HBeAg,阳性的新生儿；, 发现误用,HBsAg,阳性的血液或血制品者；,HBsAg,、,HBeAg,阳性者的性伴侣。,四）防治原则,被动免疫 四）防治原则,HBV,小结,有包膜的病毒，有特异的肝组织亲嗜性,HBV,感染的细胞可释放大量的无,DNA,的,HBsAg,颗粒,病毒的多种蛋白质共用一个基因序列骨架，但有不同的启动子启动转录,基因组为部分环状双链,DNA,，病毒含逆转录酶借环状的,RNA,中间型复制,HBV,的,DNA,基因成分可整合到宿主染色体上,HBV小结有包膜的病毒，有特异的肝组织亲嗜性,HCV,主要经血或血制品传播，目前占输血后肝炎的,80-90%,，在我国丙型肝炎流行率为,2.1%,。,其临床和流行病学特点类似乙型肝炎，但症状较轻，演变为慢性者多见，部分患者可发展为肝硬化或肝癌。,四、丙型肝炎病毒,（,hepatitis C virus,，,HCV,）,HCV主要经血或血制品传播，目前占输血后肝炎的80-,1978,年,WHO,将非甲非乙型肝炎病毒按传播途径分为肠道传播的非甲非乙型病毒和肠道外传播的非甲非乙型肝炎病毒,1989,年进一步将前者命名为戊型肝炎病毒（,HEV,），将后者命名为丙型肝炎病毒（,HCV,）,目前将,HCV,和庚型肝炎病毒（,HGV,）列入黄病毒科（,Flavivurus,）,Hepacivirus,属,1978年WHO将非甲非乙型肝炎病毒按传播途径分为肠道传播的,HCV,呈球形，其直径约为,30-60 nm,，外有脂蛋白包膜。,一）生物学性状,核酸,单正链,RNA,、含,9,个基因区,衣壳,C,蛋白组成,包膜,含,E1,、,E2/NS1,基因编码蛋白,形态结构,HCV呈球形，其直径约为30-60 nm，外有脂蛋白包膜。,一）生物学性状,5,端,UTR,核酸序列保守性强，病毒株间差异小，可用于诊断。,包膜蛋白区和非结构蛋白,1,区基因易变异，包膜蛋白抗原性变异，不被抗体识别，病毒持续存在，易发展成慢性；,单一的,ORF,，编码区位于,5,端，非编码区位于,3,端。,基因结构,一）生物学性状5 端UTR核酸序列保守性强，病毒株间差异小,第二十五章肝炎病毒hepatitisvirusHV课件,目前对,HCV,尚不能通过血清分型，而根据,NS5,基因序列同源性及亲缘关系分析可将世界各地分离到的毒株分为,6,个基因型，,11,个基因亚型,(a,、,b,、,c,表示,),。,准种：,HCV,同一基因亚型内不同基因异质性群体。,(E2),一）生物学性状,基因分型,目前对HCV尚不能通过血清分型，而根据NS5基因序列同源性及,黑猩猩是,HCV,唯一易感动物模型。,细胞模型为,JFH-1/HCVcc,（,cell culture,）,一）生物学性状,HCV,对氯仿、乙醚等有机溶剂敏感，,UV,照射、,100 5 min,、,20%,次氯酸、福尔马林,(1:1000),均可使,HCV,失活。,易感动物和细胞培养,抵抗力,黑猩猩是HCV唯一易感动物模型。一）生物学性状HCV对氯仿、,HCV,主要通过输血或血制品、注射、性交和母婴传播。,潜伏期为,2-26 w,，平均,7.4 w,，但由输血或血制品引起的丙型肝炎潜伏期较短，大多数在输血后,5-12 w,发病。大多数患者不出现症状或症状较轻，多为无黄疽型，,90%,以上的患者演变为慢性肝炎，进而发展为肝硬变，甚至原发性肝癌。,关于,HCV,感染的慢性化机制，目前认为,HCV,直接损害肝细胞、免疫病理损伤、细胞凋亡,三个方面导致肝细胞破坏。,二）致病性和免疫性,HCV主要通过输血或血制品、注射、性交和母婴传播。二）致病,HCV,感染后：,抗,HCV IgM,：出现较早，持续时间短；,抗,HCV IgG,：出现较迟,(82 d),。,保护作用不强（准种），常,HBV,、,HCV,同时感染。,二）致病性和免疫性,HCV感染后：二）致病性和免疫性,Serologic Pattern of Acute HCV Infection with Recovery,Symptoms +/-,Time after Exposure,Titer,anti-HCV,ALT,Normal,0,1,2,3,4,5,6,1,2,3,4,Years,Months,HCV RNA,Serologic Pattern of Acute HCV,Serologic Pattern of Chronic HCV Infection with Progression infection,Symptoms +/-,Time after Exposure,Titer,anti-HCV,ALT,Normal,0,1,2,3,4,5,6,1,2,3,4,Years,Months,HCV RNA,Serologic Pattern of Chronic H,1.,抗,HCV,抗体的检测,通过,ELISA,、放射免疫法检测抗,HCV IgG,或,IgM,。若抗,HCV IgM,阳性时可对,HCV,感染进行早期诊断。,2.HCV RNA,检测,多采用,RT-PCR,检测,HVC RNA,。该法敏感性和特异性好，可以提高,HCV RNA,检出率，供诊断时做参考。,三）微生物学检查法,1.抗HCV抗体的检测三）微生物学检查法,严格筛选献血人员和加强血制品的管理，控制输血传播。,其他预防措施同,HBV,。,免疫球蛋白有无预防作用尚无定论。,目前还无特异性防治对策，,IFN-,联合利巴韦林,。,四）防治原则,严格筛选献血人员和加强血制品的管理，控制输血传播。四）防治原,1977,年，,肝炎病毒（,hepatitis virus,），,1984,年，,HDV,，丁型肝炎的病原体。,缺陷病毒，必须在,HBV,或其它嗜肝,DNA,病毒辅助下才能复制，因此其致病必须同时有,HBV,感染，病情较单纯感染,HBV,的患者严重。,五、丁型肝炎病毒,（,hepatitis D virus,，,HDV,）,1977年，肝炎病毒（hepatitis virus）,HDV,为直径,35-37 nm,的球形颗粒，核心含有环状,-ssRNA,和,HDAg (,抗原,),。,HDV,表面为,HBV,包膜，主要含有,HBsAg,。,HDV,不能独立复制，须在,HBV,或其他嗜肝,DNA,病毒辅助下才能增殖。,抗基因组可编码,HDAg,，刺激机体产生抗,HD,。,HDV,仅有一血清型，敏感动物是黑猩猩、土拨鼠和北京鸭等。,一）生物学性状,HDV为直径35-37 nm的球形颗粒，核心含有环状-ssR,HBsAg,RNA,d,antigen,HBsAgRNAd antigen,传播方式：,与,HBV,基本相同，主要经输血或注射传播。与,HBV,相比，,HDV,母婴垂直传播少见，而性传播相对重要。,由于,HDV,是缺陷病毒，而且其衣壳为,HBsAg,，从而决定了,HDV,只能感染,HBsAg,阳性者，其感染有两种形式：,共同感染,(coinfection),：与,HBV,同时感染；,重叠感染,(superinfection),：在慢性乙型肝炎或,HBsAg,携带者的基础上再感染,HDV,。,二）致病性和免疫性,传播方式：与HBV基本相同，主要经输血或注射传播。与HBV相,重,叠,感,染,慢性,HBV+HDV,联,合,感,染,HBV+HDV,潜伏期,急性肝炎,肝,硬,化,暴发性肝炎,慢性丁肝,重慢性HBV+HDV联HBV+HDV潜伏期急性肝炎肝暴发性肝,HDV,致病作用主要是病毒对肝细胞的,直接损伤,，而机体免疫应答对丁型肝炎发病无明显影响。,HDV,感染后产生抗,HDV IgM,，抗,HDV IgG,。,丁型肝炎发展为慢性时，抗,HDV IgM,和,IgG,常呈持续高效价，可做为慢性丁型肝炎诊断指标。,抗,HDV,不能清除病毒，其作用还有待研究。,二）致病性和免疫性,HDV致病作用主要是病毒对肝细胞的直接损伤，而机体免疫应答,anti-HBs,Symptoms,ALT Elevated,Total anti-HDV,IgM anti-HDV,HDV RNA,HBsAg,Serological Course of Acute HDV infection,Time after exposure,Titer,anti-HBsSymptomsALT ElevatedTo,Jaundice,Symptoms,ALT,Total anti-HDV,IgM anti-HDV,HDV RNA,HBsAg,Serological Course of HDV superinfection,Time after exposure,Titer,JaundiceSymptomsALTTotal anti-,1.,血清学方法：,用,ELISA,或,RIA,检测血清中,HDVAg,或抗,HDV,。,2.,核酸分子杂交法：,检测血清中,HDV RNA,。其浓度与,HDVAg,平行。抗,HDV,出现后，,HDV RNA,转阴。,HDV RNA,的存在标志,HDV,复制以及血清有传染性。,三）微生物学检查法,1.血清学方法：三）微生物学检查法,目前尚无特效药物，据报道用重组,IFN,或,治疗丁型肝炎，可抑制病毒复制，且可改善临床症状。,预防原则与乙型肝炎相同，主要为严格筛选献血人员和血制品，防止注射或其它操作的医源性传染，开展卫生宣传教育，避免性传播。,四）防治原则,目前尚无特效药物，据报道用重组IFN或 治疗丁型肝炎，可,HAV,、,HEV,甲戊经口入血流,隐急多见免疫久,甲肝助诊,IgM,预防活苗和丙球,HBV,、,HCV,、,HDV,血道为主乙丙丁，母胎性道可入侵,乙肝检测两对半，抗原抗,C,示致病,抗,E,抗,S,表好转，肝功正常不必惊,免疫致病易转慢，疫苗三针注幼婴,HAV、HEV甲戊经口入血流HBV、HCV、HDV血道为主乙,目前，除公认的甲、乙、丙、丁和戊型肝炎外，尚存在可经肠道外传播而引起的急、慢性肝炎，统称为非甲戊型肝炎。其中研究较多的是,庚型肝炎病毒（,HGV,）和输血传染性病毒（,TTV,）,。,它们对肝脏和肝外的致病性至今尚不能确定，特别是,TTV,的感染未发现对人体有致病性。从其分离的来源考虑，将,GBV-C/HGV,和,TTV,统称为新近发现的,肝炎相关病毒（,Hepatitis-related viruses,）,。,六、新近发现的肝炎相关病毒,目前，除公认的甲、乙、丙、丁和戊型肝炎外，尚存在可经肠道外传,A,、庚型肝炎病毒（,HGV,）,1995,年，美国科学家先后从输血后非甲,-,戊型肝炎病人血清中获得的两株肝炎相关病毒核苷酸序列，分别命名为,GB,病毒,-C,和庚型肝炎病毒（,Hepatitis G virus, HGV,）。后来发现二者是同一种病毒的不同分离株。由于至今尚未正式命名，故有,HGV,、,GBV-C,及,GBV-C/HGV,之称。,A、庚型肝炎病毒（HGV）,传染源：,主要是庚型肝炎病毒感染者或病毒携带者。灵长类动物虽可感染该病毒，但其自然感染情况及其作为传染源的意义尚不清楚。,传播途径：,经血或肠道外传播。受血者、静脉内毒瘾者、接触血液的医务人员等感染率高。此外，也可经母婴传播性传播。,传染源：,HGV,多为持续感染。由于传播途径相同，,HGV,常与,HBV,、,HCV,等重叠感染，但该病毒并不加重乙型和丙型肝炎的临床症状和肝脏酶学的变化，有研究表明合并,HGV,感染的,HCV,感染者中，有些病人的,HCV,感染消失，,ALT,恢复正常，而,HGV,感染持续存在。因此，对,HGV,的致病性尚需进一步研究。,HGV,对干扰素敏感，故对,HGV,的治疗，特别对,HCV,和,HGV,合并感染的病例可使用干扰素,(IFN),治疗。临床证明用病毒唑治疗庚型肝炎效果不佳。,HGV多为持续感染。由于传播途径相同，HGV常与HBV、HC,B,、输血传染性病毒（,TTV,）,1997,年日本学者,Nishizawa,等应用代表性差异分析法（,representational difference analysis, RDA,）从一名输血后非甲,-,庚型肝炎病人（,T. T.,）中克隆到一个,DNA,片段，而且发现该,DNA,类似于病毒的基因组。,按病人姓氏缩写命名为,TT,病毒（,TT virus, TTV,），恰与,经血传播病毒,(transfusion transmitted virus,TTV),巧合。,B、输血传染性病毒（TTV）,TTV,主要通过输血或血制品传播，但也可通过粪,-,口途径、唾液飞沫、精液和乳汁等多途径传播。在一些动物血清中亦发现了,TTV DNA,的存在，但其是否具有传染源的意义尚不清楚。,TTV,在人群中感染率高，据报道欧美等发达国家正常献血员血清中,TTV DNA,检出率约,33-76%,，在非甲庚型肝病慢性肝炎检出率为,46,。,TTV,常与,HCV,重叠感染。,TTV,感染一般表现为无症状携带者，至今尚未发现,TTV,有引起肝炎或其他疾病的能力。因此，,TTV,是否有嗜肝性和致病性尚不明确，正在研究之中。,TTV主要通过输血或血制品传播，但也可通过粪-口途径、唾,