实验5-肠道杆菌课件

,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,实验五肠道杆菌,实验五肠道杆菌,Content,示教：,主要肠道杆菌，大肠埃希菌、痢疾志贺菌、伤寒沙门菌及变形杆菌的形态、染色性,主要肠道杆菌的培养特性：,SS,平板,/EMB,平板,主要肠道杆菌的生化反应：双糖、尿素分解反应,Content示教：,Content,操作：,肥达反应,粪便肠道致病菌的分离和鉴定,甘露醇发酵实验结果观察,药敏试验结果观察,录像：,厌氧菌,Content,肠道杆菌的分类,肠杆菌科,志贺菌属,埃希菌属,沙门菌属,克雷伯菌属,变形杆菌属,ETEC, EIEC, EPEC, EHEC, EAEC,痢疾、福氏、 鲍氏、宋内,伤寒，副伤寒， 猪霍乱，肠炎,肠道杆菌的分类肠杆菌科志贺菌属埃希菌属沙门菌属克雷伯菌属变形,肠道杆菌的基本特征,形态结构相似,培养要求不高,生化反应活跃,抗原结构复杂,抵抗力不强,易发生变异,肠道杆菌的基本特征形态结构相似,肥达试验,原理,：,用已知伤寒沙门菌,O,、,H,抗原，以及引起副伤寒甲、乙杆菌,H,抗原的诊断菌液与受检血清作定量凝集试验，测定受检血清中有无相应抗体及其效价的试验。,用途：辅助诊断伤寒，副伤寒,肥达试验原理：用已知伤寒沙门菌O、H抗原，以及引起副伤寒甲、,肥达试验,原理：,伤寒沙门菌菌体,O,抗原,伤寒沙门菌鞭毛抗原,甲型副伤寒沙门菌鞭毛,H,抗原,肖氏沙门菌鞭毛抗原,已知抗原,病人血清中的未知抗体,凝集,肥达试验原理：伤寒沙门菌菌体O 抗原伤寒沙门菌鞭毛抗原甲型,Ag,测,Ab,已知 未知,滴度,病人,1,：,10,血清 血清,1,：,20 0.2ml4,第一列小孔,0.8 ml,吸管吹打,3,次,1.6ml,生理盐水,0.8 ml,混匀,0.8ml,混匀,1,：,40,0.2ml4,第二列小孔,生理盐水,0.8 ml 0.8ml,混匀,生理盐水,0.8 ml,1,：,80,Ag,加样方向,1.,稀释,Ab,2.,加,Ag,3.45,孵育,30,4.,结果观察,Ag 测 Ab病人1：10血清,粪便标本肠道致病菌鉴别流程,标本,鉴别培养基,（,SS,培养基）,生化反应,（双糖管）,血清学鉴定,SS,平板挑取可疑菌落,2,个,(,无色,透明,小,菌落,),接种双糖管,培养,观察,粪便标本肠道致病菌鉴别流程标本鉴别培养基生化反应血清学鉴定S,SS,平板,分离肠道病原菌的强选择培养基,成分：,基础培养基、乳糖、枸橼酸钠、硫代硫酸钠、枸橼酸铁、胆盐、煌绿、中性红（,pH6.8-8.0,，红橙黄）,作用：,乳糖，中性红,：致病菌不分解乳糖，但分解蛋白胨产生碱性物质菌落淡黄色；大肠杆菌分解乳糖产酸，菌落呈红色。,胆盐、枸橼酸钠、煌绿,：抑制肠道非致病菌如,E.coli,的生长，对肠道致病菌抑制作用弱。可增加标本接种量以提高肠道病原菌分离率。,病原菌,:,小,无色,透明,非致病菌,:,大,红色,EMB,平板,病原菌,:,透明,无色 非致病菌,:,紫黑色,SS平板 分离肠道病原菌的强选择培养基成分：EMB平板,双糖管,发酵乳糖,H,2,S,试验,发酵葡萄糖,(,产酸产气,),及动力,上层：乳糖,Fe,2+,固体,下层：葡萄糖,半固体,指示剂,:,酚红（,pH6.8-8.4,黄 红）,致病菌红色,非致病菌黄色,观察：,双糖管上层：乳糖,Fe2+致病菌红色非致病菌黄色 观察：,乳糖 葡萄糖 动力 硫化氢,尿素酶,大肠埃希菌,+ -,痢疾志贺菌,+ - -,伤寒沙门菌,+ + +/-,副伤寒沙门菌,+ + -,变形杆菌,+ + +,实验5-肠道杆菌课件,红色,黄色,双糖管结果观察,黄色,黄色,可疑肠道致病菌,大肠埃希菌,红色黄色双糖管结果观察黄色黄色可疑肠道致病菌大肠埃希菌,肥达试验,原理：,伤寒沙门菌菌体,O,抗原,伤寒沙门菌鞭毛抗原,甲型副伤寒沙门菌鞭毛,H,抗原,肖氏沙门菌鞭毛抗原,已知抗原,病人血清中的未知抗体,凝集,肥达试验原理：伤寒沙门菌菌体O 抗原伤寒沙门菌鞭毛抗原甲型,肥达试验结果分析（,1,）,凝集程度：,（）上层液澄清，细菌全部凝集于孔底,（）上层液基本透明，细菌大部分（,75,）凝集于孔底,（）上层液半透明，细菌在孔底有明显凝集,（）上层液混浊，孔底有少量凝集,（）不凝集，同于对照,书写报告,：,反应的最高稀释度为凝集效价,肥达试验结果分析（1）凝集程度：,肥达试验结果分析（,2,）,凝集效价,：伤寒沙门菌,O 1,：,80,，,H 1,：,160,副伤寒沙门菌,H 1,：,80,动态观察：双份血清，效价,4,倍,O,与,H,抗体的诊断意义：,OIgM, HIgG,肥达试验结果分析（2）凝集效价：伤寒沙门菌O 1：80，H,肥达试验结果分析（,2,）,O,、,H,抗体均高：肠热症,O,、,H,抗体均低：未患病,O,抗体不高，,H,抗体高：回忆反应，预防接种,O,抗体高，,H,抗体不高：感染早期，交叉反应,肥达试验结果分析（2）,The End,Thanks,The EndThanks,