中山毒理ppt课件微核试验和染色体畸变

,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,中山毒理课件微核试验和染色体畸变,31、别人笑我太疯癫，我笑他人看不穿。(名言网),32、我不想听失意者的哭泣，抱怨者的牢骚，这是羊群中的瘟疫，我不能被它传染。我要尽量避免绝望，辛勤耕耘，忍受苦楚。我一试再试，争取每天的成功，避免以失败收常在别人停滞不前时，我继续拼搏。,33、如果惧怕前面跌宕的山岩，生命就永远只能是死水一潭。,34、当你眼泪忍不住要流出来的时候，睁大眼睛，千万别眨眼!你会看到世界由清晰变模糊的全过程，心会在你泪水落下的那一刻变得清澈明晰。盐。注定要融化的，也许是用眼泪的方式。,35、不要以为自己成功一次就可以了，也不要以为过去的光荣可以被永远肯定。,中山毒理课件微核试验和染色体畸变中山毒理课件微核试验和染色体畸变31、别人笑我太疯癫，我笑他人看不穿。(名言网),32、我不想听失意者的哭泣，抱怨者的牢骚，这是羊群中的瘟疫，我不能被它传染。我要尽量避免绝望，辛勤耕耘，忍受苦楚。我一试再试，争取每天的成功，避免以失败收常在别人停滞不前时，我继续拼搏。,33、如果惧怕前面跌宕的山岩，生命就永远只能是死水一潭。,34、当你眼泪忍不住要流出来的时候，睁大眼睛，千万别眨眼!你会看到世界由清晰变模糊的全过程，心会在你泪水落下的那一刻变得清澈明晰。盐。注定要融化的，也许是用眼泪的方式。,35、不要以为自己成功一次就可以了，也不要以为过去的光荣可以被永远肯定。小鼠骨髓细胞微核试验受试物: 环磷酰胺,受试动物: 小鼠实验目的,学习和掌握小鼠骨髓多染红细胞(PCE)微核测定方法,近年来，各地学校的办学条件比以前有了很大的改良，各种硬件、软件设施日趋完善，为学生创造了一个良好、舒适的学习环境，按理说学生应该爱学、乐学，可是现实却不容乐观，如地处城郊结合部的我校，学生厌学现象十分严重，老师、家长十分痛心但大多束手无策。主要表现在以下几个方面：其一，晚自习时无所事事，或搞小动作，或对学习认真的同学说风凉话，或打瞌睡等。其二，课堂上注意力不集中，思想开小差，不做笔记甚至连书都不翻，不做老师布置的课堂练习，把老师的话当耳旁风，我行我素等。其三，课余时间在教室或走廊追逐打闹，甚至打伤同学，毁坏桌椅；喜欢到学校商店买零食吃；抄作业，不交作业，或者拖欠作业等。其四，逃学，借故旷课，有的学生放学后爬围墙出去上网等。,一、学生厌学的内在原因,1.学习没有动机，目标不明确,“不懂就学”这是人与生俱来的能力。为什么这些正处于思维发展黄金时期的中学生放弃了对学习的追求呢？我校地处县城城郊结合部，多数学生的家庭靠种植茉莉花过上了不错的生活。学生认为把花拿到花市场卖就有钱了，学习好不好没关系，大不了回家种茉莉花。这样，学生目标不明确，只是为了应付家长或者只是为了完成九年义务教育，不能充分认识学习的意义。,2.学习没有兴趣,首先，相对小学生来说，初中生学习任务重，学习时间长。我校是一所高完中，学生人数多，活动场地有限，一个星期只能做两次早操（初中部与高中部轮换），学校生活比较单调、乏味，导致学生学习兴趣下降。其次，班级人数过多，一个班近七十人，老师的教学难以顾及学生的个性差异。第三，学生的兴趣转移。上网、打游戏机、卡通漫画等对心智发展还不成熟的学生来说诱惑太大，很多学生沉迷其中，忽视了学习，渐渐对学习失去兴趣。,3.学习困难，失去信心，很少能够体验到成功的喜悦,很多家长都有这样的疑惑：我的孩子小时候学习成绩很好，为什么上了中学成绩这么差甚至会厌学呢？学习内容的增多和难度的加深使部分学生对学习感到困难，加上教师和家长期望值过高，既定的学习目标没能实现，对学习产生了畏难情绪。学习是一系列复杂的心理活动过程，需要不断鼓励和被肯定，特别是初中生的心理发展还不成熟，更需要来自学校、老师、家长恰当、真诚、公正的评价。,4.自制力差，个性叛逆，放任自己的行为,相对我县其他农村学校的学生来说，我校多数学生的家庭条件较好，加上家中孩子少，家长宠爱，不少学生自制力差，好逸恶劳，个性叛逆，老师稍有批评便认为是有意与他过不去，冲撞老师，有的甚至对老师污言秽语等。,二、解决厌学内因的对策,1.培养和激发学生的学习动机,德国教育家第惠斯多曾经说过，教学的艺术在于激励、唤醒、鼓舞。教师要唤醒学生学习的内部动因，学生的学习动机是推动学生学习的内部动力，有了学习的动力，学生就不会产生厌学的情绪。如今“班班通”惠及各校，老师们应充分利用这种现代教学手段，结合授课内容和时政热点，精心制作课件，帮助学生树立健全的人格，让他们树立远大的理想和争取社会地位、实现自我价值而学习的决心。这样学生认为学习有必要，便积极、乐意地去学，而不会把它当成一种沉重的负担。,2.创造成功机会，让学生体验成功的快乐,苏霍姆林斯基说过，学生只要有两三个月看不到自己智力劳动的效果，就会失去学习的愿望。他还说过，学生学习愿望的源泉，是智力上的不懈努力，是胜利的欢乐。可见，体验到成功的快乐对学生多么重要。老师应从学生实际考虑，合理地设立学习目标，课堂问题的设置应顾及不同层次的学生，给学习感到困难的学生创设成功或自我表现的机会，让他们觉得自己也是课堂的主人，使其心里获得积极的满足感与自豪感。,3.给学生玩的机会与时间,学校应充分利用所有的活动场地，尽量拓宽学生课余活动的空间，适当安排课外活动时间，组织学生进行一些有意义的活动，如班际篮球、气排球比赛，拔河、节日游园活动等等，让那些厌学的学生觉得在学校除了学习之外还能玩得痛快。这样他们就会喜欢学校的生活，觉得学习生活有意思，进而消除厌学情绪。,当然，学生厌学心理的内在原因由于各自个性的差异会有很多的不同，但也有很多共性，只要我们老师勤做工作，善做工作，就能找到方法，有效地消除学生的厌学情绪，帮助学生健康成长。,体育课程标准的实施建议指出：体育与健康课程是以目标的达成来统领教学内容和教学方法的选择。换句话说，即无论选择什么样的教学内容，运用何种教学方法，只要能达成学习目标就行。这也说明了一定的教学内容和运用相应的教学方法是完成学习目标的决定因素，同一教学内容如果运用不同的教学方法所达成的学习目标是不同的。,教学过程是一个极其复杂的动态过程。因此，千篇一律的简单做法或者把教学方法固定化、模式化，必然导致教学思想僵化，不可能适应千变万化、生动活泼的学习局面。我们常说，教学有法，但无定法，贵在得法。尽管教学方法有各种各样的定义和不同的理解，但教学方法又是具体的、形式多样的。著名教育学家巴班斯基认为：“从实际意义来说教学方法的概念总是综合的。懂得这一点，在实际过程中就不会人为地把各种方法割裂开来”。也就是说，各类方法都有其主要特点，其功能是多方面的，往往是相互渗透，从各方面发挥作用。同时每种方法都有所长，也有局限，实际运用是必须取长补短，互相配合。,常见的体育课堂教学方法有：语言法（讲解、口令、指导、提示、口头评价等）、讲解示范法、预防改正错误动作法、保护与帮助法，表扬鼓励法，完整与分解法、电化教学法等。这些教学法对每一位体育教师来说已再熟悉不过了，在此就不过多地介绍。下面介绍近几年来涌现出来的一些新的教学方法。,一、目标教学法,目标教学法是围绕所设立的学习目标而开展教学工作的一种教学方法。课程标准的一个重要特点就是设立三级目标体系，即课程目标、领域目标和水平目标。在体育课堂教学中，首先要设立学习目标，然后根据这个目标开展教学工作，即在目标的统领下，选择教学内容，实施教学方法，以实现学习目标。,二、主题教学法,主题教学法就是根据教学内容的特点和学生的身心特征，围绕一个主题开展教学，并实现课的学习目标的一种教学方法。例如，以“环境保护”为主题，通过活动中的跑动、跳跃、搬运、传接、竞赛等开展一系列的场地、周边的环境保护活动，激发学生参与活动的积极性，培养相互协作的精神，加强对学生环保意识的教育，从小树立良好的环保意识。又如，以“为孤寡老人献爱心”为主题的教学活动，可以培养学生尊敬老人，关注社会的意识,三、分层教学法,分层教学法是把同一个教学内容分成不同的难易程度，学生根据自己的能力和水平分层次进行练习。在教学活动中，可让学生选择适合自己的练习难度，在完成较容易的一个练习后，可进行高一层难度的练习。这样的教学方法，可以满足不同层次学生的需求，提高学生的学习积极性和自信心。但在分层教学中，教师应让学生自主选择练习难度，而不要硬性作出规定，否则会损伤学生的自尊心，失去分层教学的实际意义。分层教学法一般可应用在跨栏跑、单双杠、跳高、支撑跳跃等教学内容中。,四、信息教学法,信息教学法是信息技术应用在体育教学中的一种教学方法。使用这一方法旨在通过多媒体的音响、影像、文字、图表、图象来提高教学效果。尤其是近几年来体育教学课件、信息网络技术的运用为体育教学带来了一道亮丽的风景线。体育教学课件、信息网络技术在体育教学上的应用，确实能收到其他教学方法无法比拟的效果。但体育教学课件、信息网络技术只是一种教学辅助工具，不是万能的，不能生搬硬套，必须结合教学内容有选择地应用，这样才能起到信息教学的真正效果。,五、情景教学法,情景教学法是在体育课堂教学中，设置一些与教学内容相关的情景，让学生在该情景中表达感情，活动身体，掌握基本的运动技能，活跃课堂气氛的方法。例如，为了使学生的身心达到充分的放松，有经验的教师通常会通过创设幽闲、舒心的潺潺流水声、鸟叫声和柔美抒情音乐，使同学有一种身如其境的感受，一边欣赏音乐，一边轻松愉快地做着各种的动作。又如，以“见义勇为捉小偷”为情景开展教学活动，以此促进学生参与活动，达到发展学生体能，培养学生见义勇为精神的目的（见案例十一）。再如，以“抗洪抢险”为情景，让学生在活动中，通过对“抗洪物资”和“国家、人民财产”的搬运和传送，锻炼学生的体能，激发学生参与活动的积极性，促进学生相互间的密切配合，培养学生集体主义的观念。,案例十一：见义勇为捉小偷,（一）学习目标：激发运动兴趣，提高奔跑能力，培养见义勇为的精神。,（二）学习内容：耐久跑,（三）学习过程：,1.教师向学生讲解见义勇为捉小偷的动人故事，以故事导入练习。,2.扮演角色练习：把班级里耐力跑水平较高的学生分在一组，扮演“小偷”，其他同学扮演见义勇为的好少年。,3.活动方法：“小偷”跑离15秒后，好少年开始“追捕”，路线不限。,4.活动要求：必须确保安全，不影响其他班级上课。,5.激励方法：在10分钟内将“小偷”全部捉获为胜。,（四）评析：以上是一个耐力跑的教学片段。教师以创设“见义勇为捉小偷”为情景，开展耐力跑的游戏性活动，改变平时的计圈跑、定时跑的形式，克服单调枯燥的教学组织形式，从而激发学生参与活动的积极性，并通过情景教学达到对学生进行教育的目的。,总之，体育教学方法是随着体育教学理论和实践的发展而发展的。现代化的体育教学方法赋予身体练习以更多的智力化色彩，将发展体力与开发智力结合起来，提高体育教学的科学化水平，有助于学生的身心健康发展，新课程要求教师不囿于传统的程式，而在课堂教学中富有个性，根据不同的教学内容和不同的教学对象，设计不同的教学方式方法。应确立“一切为了学生的发展，为了一切学生，为了学生的一切”的指导思想，积极探求和建立新的教学方式，特别是努力营造平等、民主、开放、互动、愉快的教学环境和氛围，积极倡导自主学习、合作学习、探究学习等多种学习方式，让课堂充满浓厚的人文气息，焕发出生命活力。,中山毒理课件微核试验和染色体畸变31、别人笑我太疯癫，我笑他,1,中山毒理ppt课件微核试验和染色体畸变,2,中山毒理ppt课件微核试验和染色体畸变,3,中山毒理ppt课件微核试验和染色体畸变,4,中山毒理ppt课件微核试验和染色体畸变,5,微核,（micronucleus）,是染色体或染色单体的无着丝点片断或纺锤体受损而丢失的整个染色体，于细胞分裂后期留在细胞质中，末期后，单独形成几个规则的次核，包含在子细胞的胞质内，比主核小，故叫微核。,中山毒理ppt课件微核试验和染色体畸变,6,原理：,1,有丝分裂毒物的作用使个别染色体或带着丝点 的染色体环和断片在细胞分裂后期被滞留在细胞质中,2,断片或无着丝点染色体在细胞分裂后期不能定向移动，从而遗留在细胞质中,原理：,7,结论,：,微核试验能检测化学或其他物质因素诱导产生的染色体完整性改变和染色体分离改变这两种遗传学终点,结论：,8,微核可出现于多种细胞中，但在有核细胞中难以与正常核的分叶及核突出物区分，故常计数PCE细胞中的微核，因为成红细胞发展为红细胞时，主核排出，成为PCE，这些细胞保持其嗜碱性约24小时，然后成为正染红细胞（NCE）,并进入外周血。,注：在主核排除时，微核仍保留在细胞中,微核可出现于多种细胞中，但在有核细胞中难以与正常核的分叶,9,操作步骤：,一,染毒,：,染毒途径：腹腔注射环磷酰胺，染毒二次，,0、24小时各染毒一次，6h后取样,染毒剂量：50mg/kg,二,处死,：,颈椎脱臼法处死小鼠,中山毒理ppt课件微核试验和染色体畸变,10,三,：,骨髓液的制备和涂片,1 处理：方法：取胸骨，去掉血污和肌肉，剪去每节骨骺，用弯止血钳将骨髓挤于预先滴有小牛血清的清洁载玻片上，混合均匀后推片,2 固定：将推好凉干的骨髓片放进染色缸，甲醇固定15分钟，取出晾干,3 染色：用新鲜配制的Giemsa应用液（Giemsa储备液一份加pH6.8的磷酸盐缓冲液9份）染色1015分钟，细流水冲掉玻片染色液，晾干,中山毒理ppt课件微核试验和染色体畸变,11,四观察和计数：,观察：先用低倍镜观察，选择分布均匀的域，再在油镜下观察计数。PCE细胞呈灰蓝色，正染红细胞（NCE）桔黄色。细胞中的微核大半呈圆形，边缘光滑，嗜色性与核质一致，一个细胞内可以出现一个或多个微核。, 计数：1000个PCE中含微核的PCE数，并计算200个细胞中PCE/NCE的比值,四观察和计数：,12,结果与分析：,1 结果：试验只计数PCE中的微核，微核率以千分率表示。每组的雌雄动物分开计数微核PCE均值。,2 分析：正常的PCE/NCE比值为1（0.6-1.2），如果0.1，则表示PCE形成受到严重抑制；如果0.05，则表示受试物剂量过大，结果不可靠。,结果与分析：,13,图 1 ：正常嗜多染红细胞 PCE （ 400 ）,图 2 带微核嗜多染红细胞 MNPCE （ 400）,图 1 ：正常嗜多染红细胞 PCE （ 400 ）,14,注意事项：,1、剪胸骨时通过剪断两边的肋骨来把整块胸骨取下来，以防不小心把胸骨剪断,2、挤出骨髓处的肌肉要剔除干净,3、滴到玻片上的小牛血清不要太多，涂时要涂匀，以便推片,4、染色前可以先看一下整体涂片情况，细胞分散度是否良好,5、关键步骤是制作良好的骨髓涂片以及优良的染色,注意事项：,15,流程图,处死小鼠，取胸骨,推片,固定,染色,观察并记数,流程图,16,动物骨髓细胞染色体畸变分析,动物骨髓细胞染色体畸变分析,17,目的和意义:,1、学习动物骨髓细胞染色体标本的制作,2、了解动物体内染毒及染色体畸变类型,目的和意义:,18,染色体畸变,：,指染色体的结构改变，它是指遗传物质大的改变，一般可用光学显微镜检查适当细胞有丝分裂中期的染色体来发现,染色体畸变分析：,指观察染色体形态结构和数目改变，又称为细胞遗传学实验,染色体畸变：,19,实验原理,:,1,染色体畸变只能在细胞分裂的,中期,进行观察和分析，为收集足够的中期相细胞，在收获细胞前，用秋水仙碱处理，以阻断微管蛋白的聚合，抑制细胞分裂时纺锤体的形成，使分裂间期和前期的细胞停留在中期相。,2,细胞通过低渗，使染色体均匀散开，然后固定、染色，可在油镜下观察,实验原理:,20,操作步骤,一、收获细胞,1 秋水仙碱处理实验动物（小鼠4mg/kg 处死动物前6h腹腔注射）,2 取股骨,3,PBS液5ml冲洗骨髓，1500r/min离心10min,， 去上清,二、低渗,1 打散沉淀物,，加入37 预温的0.075mol/L的 KCl 6ml混匀，于37低渗1520min,2 再加,固定液,12ml混匀，立即于1000r/min离心10min，去上清,操作步骤一、收获细胞,21,三、固定,1 使细胞悬浮，加入固定液4ml混匀，放置室温1020min，然后1000r/min离心10min，去上清,2 同样方法再固定一次，去上清，留0.5ml,四、制片染色,使细胞悬浮，将细胞悬液滴于,冰冻的,载玻片上，干燥，用10Giemsa染液染色1020min，取出清洗自然干,五、阅片,先在底倍镜下选择分散良好、细胞未破裂的中期分裂相，油镜下观察并记录染色体结构异常和数目异常细胞,三、固定,22,结果分析与评价,结果：,以每只动物为观察单位，每只动物观察100个中期分裂相，计算其畸变细胞率,分析与评价：,1 阴性和阳性对照组的畸变率应与所用动物的种属及有关资料相符,2 试验结果可以用多种统计方法处理，所得结果应该是相同的,3 各实验组即便细胞率与阴性对照组相比较，应该有显著性差异，还应有剂量反应关系,结果分析与评价结果：,23,图 1：正常精母细胞（ 1000 ）,图 2 ：精母细胞染色体环（ 1000,图 3 ：精母细胞链状四价体（ 1000 ）,图 4 ：精母细胞染色体数目减少（ 1000 ）,图 1：正常精母细胞（ 1000 ）,24,注意事项：,低渗是本实验的关键，控制好低渗时间，做出分散良好的染色体标本，关系到实验结果的准确性,注意事项：,25,流程图,处死小鼠，取股骨 取骨髓，离心,低渗、固定、再离心,固定两次,染色,阅片,流程图处死小鼠，取股骨 取骨髓，离心,26,36,、自己的鞋子，自己知道紧在哪里。,西班牙,37,、我们唯一不会改正的缺点是软弱。,拉罗什福科,38,、我这个人走得很慢，但是我从不后退。,亚伯拉罕,林肯,39,、勿问成功的秘诀为何，且尽全力做你应该做的事吧。,美华纳,40,、学而不思则罔，思而不学则殆。,孔子,xiexie!,谢谢！,36、自己的鞋子，自己知道紧在哪里。西班牙xiexie!,27,