体外孵育的小白鼠肝脏切片对戊巴比妥钠的代谢作用课件

,Click to edit Master text styles,Second level,Third level,Fourth level,Fifth level,*,Click to edit Master title style,单击此处编辑母版标题样式,*,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,SUMMER TEMPLATE,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,No61113体外孵育的小白鼠肝脏切片对戊巴比妥钠的代谢作用,No61113体外孵育的小白鼠肝脏切片对戊巴比妥钠的代谢作用No61113体外孵育的小白鼠肝脏切片对戊巴比妥钠的代谢作用体外孵育的小白鼠肝脏切片对戊巴比妥钠的代谢作用南京医科大学,药理学系【目的】,通过肝组织与戊巴比妥钠体外孵育，以睡眠开始及维持时间为指标，了解肝脏对戊巴比妥钠的代谢作用,【原理】,肝组织内含有细胞色素P450,可致戊巴比妥钠代谢失活，从而影响其催眠作用,No61113体外孵育的小白鼠肝脏切片对戊巴比妥钠的代谢作用,1,体外孵育的小白鼠肝脏切片对戊巴比妥钠的代谢作用课件,体外孵育的小白鼠肝脏切片对戊巴比妥钠的代谢作用课件,3,体外孵育的小白鼠肝脏切片对戊巴比妥钠的代谢作用课件,4,体外孵育的小白鼠肝脏切片对戊巴比妥钠的代谢作用课件,5,【,步骤与方法,】,1.,取离心管及试管各,5,支，分别标记为,A,、,B,、,C,、,D,、,E,2.,取正常小鼠和肝损伤小鼠各两只，颈椎脱臼处死，置方盘内剖腹暴露肝脏，,注意保持胆囊的完整，先去除胆囊，再取肝脏,【步骤与方法】注意保持胆囊的完整，先去除胆囊，再取肝脏,6,【,步骤与方法,】,3.,用镊子小心取出肝脏，置于生理盐水中漂洗，并将胆囊摘除，,滤纸吸干,，放在天平上称取,1,克,肝组织（一只小鼠的肝脏）,4.,将称好的肝组织放在离心管口，用小剪刀剪碎,5.A,、,B,、,C,、,D,、,E,各管中均准确加入,0.4%,戊巴比妥钠溶液,5ml,。同时置于,37,恒温水浴中孵育，,A,、,C,管孵育,30min,，,B,、,D,、,E,管孵育,1h,，培养期间每,10min,通入气体一次,【步骤与方法】,7,【,步骤与方法,】,6.,将上述孵育液,3000r/min,离心,5min,，然后将上清液移至相应的,A,、,B,、,C,、,D,、,E,试管内,7.,取小白鼠,10,只，分为,A,、,B,、,C,、,D,、,E,五组，每组,2,只，称重后均按,0.1ml/10g,分别腹腔注射相应,A,、,B,、,C,、,D,、,E,管内上清液,【步骤与方法】,8,【,流程图,】,A,B,C,D,E,正常肝,1g,正常肝,1g,受损肝,1g,受损肝,1g,0.4%,戊巴比,妥钠溶液,5ml,37,孵育,通气,30mim,60mim,30mim,60mim,60mim,3000r/mim,5mim,取上清液,2,只,2,只,2,只,2,只,2,只,记录给药时间、翻正反射消失及恢复时间,腹腔注射,【流程图】ABCDE正常肝 1g正常肝 1g受损肝 1g受损,9,【,注意事项,】,肝分离操作应迅速，以免延误时间影响药酶活性,肝切片孵育过程中，应经常用玻璃棒搅动离心管中的内容物，以使肝切片与药物充分发挥作用,培养液内通气时气泡需小而均匀，勿超过培养液的液面,【注意事项】,10,【,实验结果,】,组别,处理,给药时间,翻正反射,消失时间,翻正反射,恢复时间,睡眠潜伏,期,/min,睡眠持续,时间,/min,A,B,C,D,E,正常肝孵,育,30min,正常肝孵,育,60min,受损肝孵,育,30min,受损肝孵,育,60min,未处理,【实验结果】组别处理给药时间翻正反射翻正反射睡眠潜伏睡眠持续,11,【,预测结果,】,睡眠潜伏时间,E C D A C D A B,【预测结果】,12,【,讨论,】,戊巴比妥钠经肝、受损肝组织孵育后，对小鼠的睡眠有什么影响？为什么？,【讨论】,13,【,结论,】,1.,戊巴比妥钠经肝脏代谢,2.,戊巴比妥钠有镇静、催眠作用,【结论】,14,药物代谢,药物作为一种异物进入体内后，机体要动员各种机制使药物发生化学结构的改变，即药物的转化或称生物转化又称药物代谢，从体内消除，代谢是药物在体内消除的重要途径,体内各种组织均有不同程度的代谢药物的能力，但肝脏是最主要的的药物代谢器官,体内药物代谢有一部分不经酶促而自动发生，但绝大多数药物是通过特异性细胞酶催化的,药物代谢药物作为一种异物进入体内后，机体要动员各种机制使药物,15,巴比妥类药物的抗惊厥作用,巴比妥类药物的抗惊厥作用,【,目的和原理,】,了解大剂量中枢兴奋药尼可刹米的中毒表现惊厥,观察巴比妥类的抗惊厥作用,【目的和原理】,17,【,实验步骤,】,取体重相近的小白鼠,2,只，分别编号、标记,两只分别,腹腔注射,生理盐水和,0.5%,戊巴比妥钠溶液,0.15ml/10g,15min,后，分别,皮下注射,5%,尼可刹米溶液,0.1ml/10g,，盖好笼盖，观察现象,【实验步骤】,18,【,流程图,】,1,号,2,号,0.15ml/10g,生理盐水,i.p.,0.15ml/10g 0.5%,戊巴比妥钠,i.p.,15min,后,0.1ml/10g,尼可刹米,s.c.,观察现象,【流程图】1号2号0.15ml/10g 生理盐水,19,【,结果,】,注射生理盐水的小鼠出现惊厥,注射戊巴比妥钠的小鼠没有出现惊厥,【结果】,20,尼可刹米,：对延脑呼吸中枢有直接兴奋作用，可提高中枢对,CO,2,的敏感性。还可通过刺激颈动脉体和主动脉体化学感受器而反射性的兴奋呼吸中枢，使呼吸加深加快。本品在呼吸抑制时兴奋作用尤为明显。临床用于中枢性呼吸抑制及循环衰竭、各类继发的呼吸抑制,【,讨论,】,尼可刹米：对延脑呼吸中枢有直接兴奋作用，可提高中枢对C,21,巴比妥类：,有较强的抗惊厥和抗癫痫作用。对多种原因引起的惊厥有较好的疗效。,体外孵育的小白鼠肝脏切片对戊巴比妥钠的代谢作用课件,22,【,结论,】,过量尼可刹米可致惊厥，戊巴比妥钠有抗惊厥作用,【结论】,23,谢谢！,61,、奢侈是舒适的，否则就不是奢侈。,CocoChanel,62,、少而好学，如日出之阳；壮而好学，如日中之光；志而好学，如炳烛之光。,刘向,63,、三军可夺帅也，匹夫不可夺志也。,孔丘,64,、人生就是学校。在那里，与其说好的教师是幸福，不如说好的教师是不幸。,海贝尔,65,、接受挑战，就可以享受胜利的喜悦。,杰纳勒尔,乔治,S,巴顿,谢谢！61、奢侈是舒适的，否则就不是奢侈。CocoCha,24,