风湿病的室检查及临床意义课件

,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,风湿病的实验室检查及临床意义,中国医科大学第一附属医院风湿免疫科,侯 平,风湿病的实验室检查及临床意义中国医科大学第一附属医院风湿免疫,1,一、一般检查,（一）血、尿常规,（二）血沉,（三）C-反应蛋白（CRP）,（四）血尿酸,（五）心肌酶谱,（六）抗链球菌溶血素“O”（ASO）,（七）循环免疫复合物（CIC）,（八）免疫球蛋白,（九）补体,（十）血清蛋白电泳,一、一般检查（一）血、尿常规（六）抗链球菌溶血素“O”（AS,2,二、自身抗体,抗自身细胞内、细胞表面和细胞外抗原的免,疫球蛋白,抗自身细胞内抗原的抗体 如抗核抗体,（ANA）,抗自身细胞表面抗原的抗体 如抗红细胞膜,抗体，即Coombs试验直接反应,抗自身细胞外抗原的抗体 如类风湿因子,（RF）,二、自身抗体抗自身细胞内、细胞表面和细胞外抗原的免,3,（一）抗核抗体（ANA）,ANA是抗细胞核抗原成份的自身抗体的总称。,ANA是针对细胞核内DNA、RNA、蛋白质、脂类、,酶类或这些物质的分子复合物的抗体。上述这些,物质不仅存在细胞核内，也可存在于细胞浆和其,他细胞器中。因此，ANA的概念已不再局限于抗,核成份。,ANA是指抗核酸与核蛋白抗体的总称。,用间接免疫荧光法（IIF）检测，大于1：40为,ANA阳性。,（一）抗核抗体（ANA）ANA是抗细胞核抗原成份的自身抗体的,4,ANA阳性时常见的荧光染色核型,均质型（H型）：与抗DNA抗体及抗组蛋白抗体,相关。,斑点型（S型）：与抗ENA抗体相关。,核膜型（M型）：与抗双链DNA抗体相关。,核仁型（N型）：多见于硬皮病。,ANA阳性时常见的荧光染色核型均质型（H型）：与抗DNA抗体,5,ANA阳性的临床意义,1、是结缔组织病（CTD）的筛选试验 见于,SLE、SS、SSc、MCTD等。,2、肝脏病如CAH、PBC、AIH等。,3、肺疾患原发性肺纤维化（IPF）、原发性肺动,脉高压、石棉肺等。,4、血液病 淋巴瘤、骨髓瘤、ITP、AIHA等。,5、慢性感染 如肺结核、麻风、血吸虫病等。,ANA阳性的临床意义1、是结缔组织病（CTD）的筛选试验,6,（二）抗核抗体谱,目前已发现具有不同临床意义的ANA约20余种,这些ANA组成了“抗核抗体谱”。,抗核抗体谱分为四类：,类：抗DNA抗体：抗双链DNA抗体抗单链DNA,抗体,类：抗组蛋白抗体（AHA）,类：抗非组蛋白抗体：抗ENA抗体抗着丝点抗,体（ACA）,类：抗核仁抗体,（二）抗核抗体谱目前已发现具有不同临床意义的ANA约20余种,7,1、抗双链DNA抗体（抗ds-DNA抗体）,以马疫锥虫为底物，用IIF检测，在SLE的阳性,率为40%,是SLE的标记性抗体,抗体滴度的高低与SLE病情活动正相关,此抗体阳性时，易罹患狼疮性肾炎,1、抗双链DNA抗体（抗ds-DNA抗体）以马疫锥虫为底物,8,2、抗组蛋白抗体（AHA）,组蛋白是一组与DNA结合的富含赖氨酸和精氨,酸的碱性蛋白。,AHA用ELISA方法检测，其阳性的临床,意义：,SLE患者50%为阳性,药物性狼疮（DIL）95%100%呈阳性,AHA阳性对诊断DIL有帮助，但不能确诊,2、抗组蛋白抗体（AHA）组蛋白是一组与DNA结合的富含赖氨,9,3、抗非组蛋白抗体,抗非组蛋白抗体中最重要的是抗ENA抗体。可,提取性核抗原（ENA）是用生理盐水从动物胸,腺、肝脾等细胞核中提取的酸性糖蛋白。抗,可提取性核抗原抗体称为抗ENA抗体。抗ENA,抗体也是一组抗体，目前用免疫印迹法,（IBT）检测的有7种，分述如下,3、抗非组蛋白抗体抗非组蛋白抗体中最重要的是抗ENA抗体。可,10,抗Sm抗体,在名为Smith的SLE患者血清中发现该抗体,简称,为抗Sm抗体。该抗体在SLE患者的阳性率为25,30%。是SLE的标记抗体，但与病情活动无关。此,抗体阳性的SLE患者易患狼疮性脑病。,抗Sm抗体在名为Smith的SLE患者血清中发现该抗体,简称,11,抗U1RNP抗体,核糖核蛋白（RNP）富含尿嘧啶（Uridine),且主要存在于U族小分子RNP的第一组分中，故称,为U,1,RNP，其抗体简称抗U,1,RNP抗体。,高滴度的抗U,1,RNP抗体是MCTD的必备指标。,低滴度的抗U,1,RNP抗体尚可见于SLE和SSc。,此抗体阳性时，肾炎的发生率低。,抗U1RNP抗体核糖核蛋白（RNP）富含尿嘧啶（Uridi,12,值得注意的是：,抗Sm抗体阳性时，抗U1RNP抗体肯定阳性；,抗U1RNP抗体阳性时，抗Sm抗体可阴性；,即SLE时，抗Sm抗体阳性时，抗U1RNP抗体肯定,是阳性。而MCTD时，抗U1RNP抗体阳性而抗Sm抗,体却阴性。,值得注意的是：抗Sm抗体阳性时，抗U1RNP抗体肯定阳性；,13,Sm抗原和U1RNP抗原均属于小核核糖核蛋白,（snRNP)，由于它们富含尿嘧啶又称为,U族小分子RNP。目前已发现至少13种，即U1-,13RNP。,其中U1RNP仅存在于U族小分子RNP的第一组分,中，称为U1RNP。而Sm抗原不仅含有U1RNP，,还含有U2、U4/U6和U5RNP，所以抗Sm抗体阳,性时，抗U1RNP抗体一定阳性。,Sm抗原和U1RNP抗原均属于小核核糖核蛋白,14,抗SSA/Ro抗体,50年代末首先在干燥综合征（Sjgrensyndrome,SS)患者血清中发现这种抗体，称为抗SSA抗体。60年代中期又在名为Ro的SLE患者血清中也发现了抗SSA抗体。曾称名抗Ro抗体。现已证实SSA和Ro抗原是同一物质，故称为抗SSA抗体（或抗SSA/Ro抗体）,抗SSA/Ro抗体 50年代末首先在干燥综合征（Sj,15,抗SSA抗体的临床意义,在原发性干燥综合征时，此抗体阳性率,为60%。,约40%SLE患者此抗体为阳性。,RA及SSc等继发干燥综合征时此抗体为阳性,在亚急性皮肤型红斑狼疮（SCLE）时，此,抗体阳性率可高达75%而ANA可阴性。,抗SSA抗体的临床意义在原发性干燥综合征时，此抗体阳性率,16,抗SSB/La抗体,现已证实1975年命名抗SSB抗体与1974年发,现的抗La抗体为同一抗体，简称抗SSB抗体。,其临床意义如下：,原发性干燥综合征，此抗体阳性率为40%。,抗SSB抗体阳性对诊断SS比抗SSA抗体阳性更具,特异性，故可认为抗SSB抗体是SS的标记性抗体,抗SSB抗体阳性时，抗SSA抗体肯定阳性，但抗,SSA抗体阳性时，抗SSB抗体可以阴性。,抗SSB/La抗体 现已证实1975年命名抗SSB抗体,17,抗Scl-70抗体,Scl是硬皮病的英文简写，70是该抗体相对应,的抗原的分子量70KD。抗Scl-70抗体阳性,临床意义如下：,是硬皮病的标记性抗体（IBT阳性2040%）,硬皮病合并肿瘤时，该抗体阳性率可高达80%,以上。,此抗体阳性的硬皮病患者，易合并肺间质病变,此抗体与心肾受累无关。,抗Scl-70抗体Scl是硬皮病的英文简写，70是该抗体相对,18,抗Jo-1抗体,抗Jo-1抗体是以John患者的名字命名，1980,年首次在多发性肌炎（PM）患者血清中发,现。Jo-1抗原是组氨酰tRNA合成酶，分子量,为55KD。其抗体又称抗PL-1抗体。,抗Jo-1抗体是PM/DM的标记性抗体，阳性率约,为25%。,PM/DM合并肺间质病变时抗Jo-1抗体阳性率可,达60%。,抗Jo-1抗体抗Jo-1抗体是以John患者的名字命名，19,19,抗Jo-1抗体综合征,抗Jo-1抗体阳性的PM/DM患者，除肌无力外，尚有发热、白细胞增高、间质性肺炎、关节炎、雷诺现象和“技械工人手”（指双手外侧掌面皮肤出现角化、皲裂伴色素沉着）。,抗Jo-1抗体综合征 抗Jo-1抗体阳性的PM/D,20,肌炎特异性抗体,第一类 抗氨酰t-RNA合成酶抗体,合成酶 对应抗体 PM/DM阳性率(%),组氨酰合成酶 抗J,O,-1(PL-1)20-30,苏氨酰合成酶 抗PL-7 1-5,丙氨酰合成酶 抗PL-12 1-5,异亮氨酰合成酶 抗OJ 1-5,甘氨酰合成酶 抗EJ 1-5,肌炎特异性抗体第一类 抗氨酰t-RNA合成酶抗体,21,第二类 抗信号识别颗粒抗体(anti-signal recognition particl抗SRP抗体)抗合成酶抗体与抗SRP抗体同属抗胞浆蛋白的自身抗体，故抗原SRP存在于胞浆中，分子量为54KD.用IBT法检测。抗SRP抗体对PM更特异，阳性率约4-5%。此抗体阳性之PM着，其肌炎的临床表现更明显，如肌痛（100%），肌无力（43%），肌萎缩（14%），肺间质病变发生率低（10%）。对激素反应不佳，死亡率高（43%）,第二类 抗信号识别颗粒抗体(anti-signal re,22,第三类 抗Mi-2抗体,1972年在名为Mi的DM患者血清中被发现此抗体。在凝胶免疫扩散中，原有两条沉淀线，分别成为抗Mi-1和抗Mi-2抗体。前者诊断意义不大。而抗Mi-2抗体只在DM中出现，属DM特异性抗体.,此抗体在DM阳性率约为21%，此抗体阳性的DM患者95%出现典型的颈部“V”形皮疹，88%者有Gottron斑,第三类 抗Mi-2抗体,23,抗核糖体抗体（抗Rib抗体）,抗核糖体抗体全称为抗核糖体核糖核,蛋白抗体，也简称为抗rRNP抗体。,其临床意义如下：,约10%SLE患者此抗体阳性，也是SLE的标记性,抗体。,此抗体阳性的SLE，易合并狼疮性脑病。,此抗体阳性而ANA阴性的患者，数年后终将发,展成典型的SLE。,抗核糖体抗体（抗Rib抗体）抗核糖体抗体全称为抗核糖体,24,抗核抗体（ANA）CTD筛选试验,抗ds-DNA抗体 SLE标记性抗体,抗ENA抗体，其中包括：,抗Sm抗体 SLE标记性抗体,抗U1RNP抗体MCTD标记性抗体,抗SSA抗体SS的抗体,抗SSB抗体SS标记性抗体,抗Scl-70抗体硬皮病标记性抗体,抗Jo-1抗体PM/DM标记性抗体,抗Rib抗体SLE标记性抗体,抗核抗体（ANA）CTD筛选试验,25,（三）狼疮细胞（LE cell),1948年美国学者在SLE患者胸水中发现了狼疮细,胞，并认识到这是由于其体内存在LE因子的缘故,LE因子就是抗脱氧核糖核蛋白抗体即抗DNP抗体,LE cell除见于SLE外，尚可见于干燥综合征、硬,皮病等，特异性差，操作复杂，耗时费力，故,1994年美国已废弃此项检查，用抗DNP抗体替代,（三）狼疮细胞（LE cell)1948年美国学者在SLE患,26,（四）抗核小体抗体（AnuA）,核小体（nucleosome)是细胞凋亡过程中染色,体裂解后释放的染色质成份，由8个带正电荷,的组蛋白分子（H2A、H2B、H3和H4各2个分,子）组成。,2000年国外学者用ELISA方法检测抗核小体抗,体（AnuA），本抗体识别的抗原表位是,（H2A-H2B）-DNA复合物，该复合物可能是引,起狼疮性肾炎的原因之一。,（四）抗核小体抗体（AnuA）核小体（nucleosome),27,AnuA的临床意义,1、对SLE诊断的敏感性高（56%），特异性强（97%）。,2、出现在SLE早期，是病情活动的指标之一。,3、与狼疮性肾炎密切相关。,4、对抗ds-DNA、抗Sm抗体和抗DNP抗体阴性的SLE的诊断具有重要意义。,5、在SSc和MCTD等也可阳性。,AnuA的临床意义1、对SLE诊断的敏感性高（56%），特异,28,（五）类风湿因子（RF）,类风湿因子是抗人或动物免疫球蛋白IgG分子,Fc片段的特异性抗原决定簇的免疫球蛋白。,常用乳胶凝集法检测IgM型类风湿因子,（IgM-RF)。,RF在类风湿关节炎的阳性率为70%。,RF在SLE、SS、SSc等风湿病也可阳性。,RF在慢性肝病、结核等某些感染性疾病也可阳性,RF在正常老年人约5%阳性。,（五）类风湿因子（RF）类风湿因子是抗人或动物免疫球蛋白Ig,29,（六）抗角蛋白抗体谱,这是与早期类风湿关节炎相关的一组自身抗体，包括:,抗核周因子（APF）,抗角蛋白抗体（AKA）、,抗聚角蛋白微丝蛋白抗体（AFA）,抗环瓜氨酸肽抗体（抗CCP抗体）,（六）抗角蛋白抗体谱 这是与早期类风湿关节炎相关的一组自,30,1、抗角蛋白抗体（AKA）,用IIF检查大鼠食道中1/3的角质层，若出现板,层状和线状沉积的荧光时，为AKA阳性。,AKA是早期RA的诊断指标之一。,AKA在RA的阳性率为4060%，特异性为96%。,AKA与RA的病情严重程度正相关。,AKA阳性的RA患者，预后较差。,1、抗角蛋白抗体（AKA）用IIF检查大鼠食道中1/3的角质,31,2、抗环瓜氨酸肽抗体（抗CCP抗体）,目前用ELISA方法检测。,是诊断早期RA的指标之一。,在RA阳性率为46.6%，特异性为96.6%。,此抗体阳性的RA患者骨质破坏较重。,是国内目前最常用的诊断早期RA的指标。,2、抗环瓜氨酸肽抗体（抗CCP抗体）目前用ELISA方法检测,32,（七）抗中性粒细胞胞浆抗体（ANCA）,ANCA是第一个被证实与血管炎相关的自身抗体,胞浆型ANCA（c-ANCA）,核周型ANCA（p-ANCA）,c-ANCA的靶抗原主要是丝氨酸蛋白酶3,（PR3）。c-ANCA阳性常见于Wegener肉芽肿，,且其滴度与该病的活动性正相关，故对诊断,Wegener肉芽肿有高度的敏感性和特异性。,（七）抗中性粒细胞胞浆抗体（ANCA）ANCA是第一个被证实,33,p-ANCA的靶抗原主要是髓过氧化酶（MPO）,P-ANCA阳性除见于显微镜下多血管炎、变应性,肉芽肿血管炎（Churg-Strauss)、系统性红斑狼,疮、类风湿关节炎和坏死性新月体肾小球肾炎,外，还可见于自身免疫性肝病、溃疡性结肠,炎、克隆病等。可见，p-ANCA与疾病的相关性,较c-ANCA特异性差。,p-ANCA的靶抗原主要是髓过氧化酶（MPO）,34,（八）抗磷脂抗体,抗磷脂抗体包括抗心磷脂（ACL）抗体和狼疮抗,凝物等针对自身不同磷脂成份的自身抗体。目,前临床上常用的是用ELISA方法检测的抗心磷脂,（ACL）抗体。中高滴度阳性的IgG型ACL抗体最,具特异性，用于诊断抗磷脂综合征。,抗磷脂综合征（APS）是一组与抗磷脂抗体（主,要是ACL）有关的临床征侯群。除ACL抗体阳性,外，还有反复动脉、静脉血栓形成，习惯性流,产和血小板减少等临床表现。,（八）抗磷脂抗体抗磷脂抗体包括抗心磷脂（ACL）抗体和狼疮抗,35,（九）抗线粒体抗体（AMA）,AMA是以线粒体为靶抗原的自身抗体。,AMA阳性是诊断原发性胆汗性肝硬化（PBC）的实,验室指标。AMA阳性除PBC外，尚可见于系统性红,斑狼疮、干燥综合征、硬皮病等。,近来研究发现AMA共有九个亚型（M 19），其,中M2靶抗原的主要成份是丙酮酸脱氢酶复合物，,其抗体称为AMA-M2。,AMA-M,2,在PBC的阳性率为96%，是PBC的特异性抗体,（九）抗线粒体抗体（AMA）AMA是以线粒体为靶抗原的自身抗,36,（十）抗平滑肌抗体（SMA）,SMA是一种抗肌动蛋白抗体。由于在平滑肌胞,浆中富含肌动蛋白，因此血清中SMA与肌动蛋,白结合，用IIF观察到平滑肌呈蓝绿色荧光，,为SMA阳性。,SMA阳性最常见于自身免疫性肝炎I型。,还可见于自身免疫性疾病如,系统性红斑狼疮、硬皮病、干燥综合征。,（十）抗平滑肌抗体（SMA）SMA是一种抗肌动蛋白抗体。由于,37,三、人类白细胞抗原（HLA）,人类白细胞抗原（HLA）由三类基因组成，其,中第I类的HLA-B27是HLA-B位点的等位基因。,目前用微量细胞毒试验检测。,HLA-B27阳性，见于95%的强直性脊柱炎患者，,这类患者易有家族聚集性。,三、人类白细胞抗原（HLA）人类白细胞抗原（HLA）由三类基,38,谢 谢,谢 谢,39,