葡萄球菌肠毒素C纯化探究总结课件

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,葡萄球菌肠毒素C纯化探究总结,31、别人笑我太疯癫，我笑他人看不穿。(名言网),32、我不想听失意者的哭泣，抱怨者的牢骚，这是羊群中的瘟疫，我不能被它传染。我要尽量避免绝望，辛勤耕耘，忍受苦楚。我一试再试，争取每天的成功，避免以失败收常在别人停滞不前时，我继续拼搏。,33、如果惧怕前面跌宕的山岩，生命就永远只能是死水一潭。,34、当你眼泪忍不住要流出来的时候，睁大眼睛，千万别眨眼!你会看到世界由清晰变模糊的全过程，心会在你泪水落下的那一刻变得清澈明晰。盐。注定要融化的，也许是用眼泪的方式。,35、不要以为自己成功一次就可以了，也不要以为过去的光荣可以被永远肯定。,葡萄球菌肠毒素C纯化探究总结葡萄球菌肠毒素C纯化探究总结31、别人笑我太疯癫，我笑他人看不穿。(名言网),32、我不想听失意者的哭泣，抱怨者的牢骚，这是羊群中的瘟疫，我不能被它传染。我要尽量避免绝望，辛勤耕耘，忍受苦楚。我一试再试，争取每天的成功，避免以失败收常在别人停滞不前时，我继续拼搏。,33、如果惧怕前面跌宕的山岩，生命就永远只能是死水一潭。,34、当你眼泪忍不住要流出来的时候，睁大眼睛，千万别眨眼!你会看到世界由清晰变模糊的全过程，心会在你泪水落下的那一刻变得清澈明晰。盐。注定要融化的，也许是用眼泪的方式。,35、不要以为自己成功一次就可以了，也不要以为过去的光荣可以被永远肯定。葡萄球菌肠毒素C,的纯化研究,主讲人,鲍行豪,研究人员:鲍行豪夏占强蓝明玉,培养基及培养条件的优选,二、用分子截留方法浓缩肠毒素原液,三、用DEAE纤维素(系 Pharmacia,品)柱层析作第一步提取,四、用 Sephadex g-75分子筛层析柱进一,步纯化,五、纯化前后SETC的SDS-PAGE鉴定,六、纯化后的SETC分子量测定,七、对SETC纯化品的N末端氨基酸测定,视听结合，感知理解，提高阅读效率 阅读教学是语文教学的重要组成部分，教师凭借着一篇篇课文，以理解内容为起点，向学生传授遣词造句、组句成段、连段成篇和记叙、议论、说明等语言文字运用知识。长期以来，由于阅读的方法比较单一，缺乏生动直观的形象，学生只能眼观文字，耳听讲解，依靠想象来理解课文内容，不仅阅读速度缓慢，而且认识也非常模糊，更谈不上理解和掌握。对教材中的许多课文，如果在教学时充分利用电教手段，则可以给学生以清晰的感性认识，为理解课文打下良好的基础.,利用录音，激发兴趣，培养整体感知能力,“兴趣是最好的老师”，是学习的原始动力，它能让一个人寻求知识、研究事物产生稳定的倾向。传统教学方法所使用的传输教学信息的手段，已逐渐让生活在科技高度发展、教学条件已极大改善的今天的学生感到不满足，甚至厌倦。电教媒体的运用，可以在教学中调动学生的多种感官，激发学生的学习兴趣。直观、生动、逼真的画面，悦耳的音响，对学生来说是陌生的，而恰恰是这些陌生的信息，能给学生以新异感；正是这种新异的刺激，往往容易引起学生的学习兴趣。,通过“读”来感知课文了解内容，是阅读教学的首要环节。所谓感知，是指通过眼耳等感觉器官，使事物在意识中直接得到反映。整体感知就是首先要对课文有一个总的了解，总的印象。格式塔心理学认为，整体先于部分，并决定部分的性质和意义。一篇课文在讲解之前，首先要让学生知道课文的主要内容，这样，教师交待学习的目标才会有所依托。整体感知的另一个意义是对课文的感情基调和字词的整体把握。在阅读教学中，学生若能与作者在清感上产生共鸣，学习注意力就格外集中。同样，字词如果离开具体的语言环境，其含义就难以把握。就一篇课文而言，感知能力是通过听和读发展起来的。一个感知能力强的人，在听读语言文字的同时，不需经过思考过程，凭着感知就能迅速领悟其中丰富的内蕴和情味。,利用影像，培养分析思维能力,感知只是认识的开始，理解才是目的。理解是在感知基础上的认识和深化。语文教材中有不少记述和介绍事物发生、发展的历史过程以及性状、特征等的课文，它们对学生来说是比较陌生的，有些课文反映的客观事物连教师自身也未见过，仅凭教材、教参的文字介绍和简单的图示向学生进行讲解，学生难以理解。为突破这一难点，教师若善于巧借电教媒体来解决，则为理解课文、学习语言文字表达知识铺平了道路。,阅读教学中，一篇课文的重点、难点怎样突出和突破，是教师感到棘手的问题。实践证明，电教媒体是解决这一问题的有效手段，它能使较复杂、难理解的内容变为直观、浅显的、易懂的感性材料，使学生易于理解和掌握。同样以朱自清先生的文章绿为例，阅读这篇课文，梅雨潭、梅雨瀑、梅雨亭三者的位置关系是教学的难点。课文中有这样一段文字：“梅雨亭正对着那条瀑布，坐在亭边，不必仰头，便可见它的全体了。亭下深深的便是梅雨潭。这个亭踞在突出的一角的岩石上，上下都是空空的，仿佛一只苍鹰展着羽翅浮在天宇中一般。三面都是山，像半个环拥着，人如在井底了。”这段话清楚地介绍了三者的位置关系，但学生读后虽经教师讲解，仍然没有清晰的印象。于是，在另外一个班教学到这一段时，我便先播放了中央电视台神州风采栏目中介绍温州仙岩梅雨潭风景点的录像，让学生在认真观察完录像画面后，自己说出三者的位置关系。学生表述虽不如课文生动形象，却也能说得清清楚楚，很快就解决了难点，而且大大节省了教师讲解、启发的教学时间。学生学得轻松愉快，且印象深刻。,图文对照，集思广益，培养作文能力,“劳于读书”、“逸于作文”，阐明了阅读与写作的密切关系。阅读是写作的基础，是自外而内的吸收，是学习语言；写作是阅读的目的，是自外而内的表达，是运用语言。运用语言的能力必须以学习语言为基础，必须通过阅读的内化吸收来完成。在语文教学中运用电教媒体，不仅能提高阅读教学效率，而且还能培养学生的作文能力。,电教媒体运用于教学，不仅是知识信息的载体，而且是调控教学的有效手段。在作文教学中恰当地运用电教媒体，主要是为了帮助学生采集、储存、分析、运用写作材料与方法信息输出、反馈练习情况信息，以强化教学目标，优化教学效果。,借助影像培养学生采集储存写作材料的能力,俗话说，“巧妇难为无米之炊。”学生作文普遍患有“畏难症”。不论是命题作文，还是给材料作文，教师在提出写作要求后，尽管反复提示、启发、引导，学生还是不知从何处下笔，常有“无话可写”之感。教育心理学研究表明：“学生写作必须拥有与作文相关的感性表象，包括生活中所积累的材料以及在特定的活动中通过观察所获得的材料。”这就要求学生在写作前必须对客观事物和社会生活进行多侧面、多角度、全方位的观察，获取写作素材。由于学生平时并未做“生活的有心人”，其对客观事物和社会生活的印象是模糊的、零乱的，面对作文题目自然也就难以下笔成文。倘若所写之物，都让学生走出课堂去实地观察后再写，这又是极不现实的。针对这一情况，可以借助投影（或幻灯）、录像（或电影），对学生进行课前指导。,借助影像进行课后评改，培养学生分析运用写作材料的能力作文是培养学生正确运用语言文字能力的重要途径和手段。评改是学生作文训练的重要环节，它的作用是指导、帮助学生分析、运用写作材料，以不断提高作文质量。传统的作文教学方法是：学生包写作，教师包评改。其结果是教师疲于奔命而学生收效甚微。如何把教师从评改作文的重负中解脱出来，又能使学生作文水平不断提高，是一个尚未彻底解决的问题。,小班化教育强调“以学生为本”，教学活动必须遵循学生差异，使每位学生都拥有均等的参与教学机会，要让每一个学生都能在原有的基础上得到最大程度的发展。那么，如何在小班环境下，既以全体学生的发展为本，又兼顾个体间的差异，让不同的学生在数学上获得各自最佳的发展呢？在课堂教学中进行“分层教学”无疑是行之有效的方法。,一、学生能力不固定分层,1.分层教学首要任务应承认学生的差异，并根据学生的差异把学生分成不同的层次。为了在分层过程中不挫伤学生的自尊心，我们不能简单地用优、中、差来分层。教师要在对学生的实际情况充分了解的基础上，根据学生的智力、基础和学习态度等，将学生大致分成三个层次：A.基础、智力较差，接受能力不强，学习积极性不高，成绩欠佳；B.基础和智力一般，学习比较自觉，有一定的上进心，成绩中等左右；C.基础扎实，接受能力强，学习方法正确，成绩优秀。对学生的分层应由老师掌握，不宜对学生公开，防止优生自满、差生自卑，尽量保护低层次学生的自尊心。,2.对学生的分层是动态的，要随时注意学生层次的变化，鼓励低层次的学生向高层次发展。,二、课堂教学分层,课堂教学分层是实施分层教学的关键。,（一）教学目标分层,教学目标分层就是根据教材和学生学习的可能性为A、B、C的每一层学生制订相应的教学目标，它包括基本目标、中层目标和发展目标。基本目标指全体学生都应习得的基础知识和基本能力；中层目标是指B、C层学生应掌握的知识拓展和较复杂的思维方法；发展目标是指C层和少数B层学生应掌握的更深的知识和复杂而灵活的综合应用。,如小数除以整数的教学，对于A层学生，要求学会小数除以整数的方法，知道商的小数点与被除数的小数点对齐，会进行计算，初步感受小数、整数转化的辩证思想，在同伴的帮助下，经历数学学习的探讨过程。而对于B层以上的学生则要求理解小数除以整数的算理，能正确地进行小数除以整数的计算，感受联系、转化的辩证思想，体验数学学习是不断探索的过程。,此外，目标达成的时间适当分层。不同程度的学生，接受新事物的能力有强有弱。教师可以针对不同的学生，规定不同的达标时间。B、C层次的学生要求在课堂内达标，A层次的学生可适当放宽达标的时间。,（二）教学形式分层,1.分层提问。不同层次的学生，我们要给他们设计不同层次的问题。在设计问题时，要把握好问题的难易度，给不同层次的学生提难易适度的问题，要让他们想一想能够得着，就是我们平常说的“跳一跳，摘到桃子”。还要根据学生的个性特点，提学生感兴趣的问题，调动学生的积极性。给想象力丰富的学生多提猜测性的问题，理解力较强的学生多提逻辑思维性的问题，表达能力强的学生多提概括性的问题，胆小腼腆的学生多提书上能找到答案的问题，成绩较差的学生多提基础知识概念性的问题如在教学比的意义这个内容时，可设计下列问题：（1）比和除法、分数有什么关系？（基础知识，一般学生都可以找到答案。）（2）什么叫做比？（归纳概念的问题，表达能力较强的学生可以较完整地答出来。）（3）比、分数、除法三者有何区别？（理解能力较强的学生经过思考可以回答。）（4）数学中的比后项不能为零，而体育比赛中的比分后项却可以为零，这是为什么？（想象丰富，思维活跃的学生喜欢答。）好的问题能让全班学生都参与到课堂中来，让每一个学生都体验到成功的喜悦，我们的课堂也因此变得生动而活泼。,提问时，教师不仅要有明确的指向性，还要就同一个问题，注意提问的次序。如：激发性回答（先请低层学生回答，利用其中的错误，激发高层学生进一步思考）、示范性问答（通过高层次学生的回答为低层次学生提供方法与思路）、模仿性回答（在示范性回答后，让低层次学生复述再现，强化记忆理解）。这样的分层施教，既保证每个学生都能达到基本要求，又因人而异，为不同层次的学生创造训练的机会，从而提高整体水平。,2.分层活动。分层教学中，要注重不同层次的学生之间相互援助，教师与学生之间的交流和指导。即教师对A层次学生的学习要通过课间巡视、问题的回答、板演等渠道，主动地向他们伸出援助之手，也可以让C层次学生帮助他们学习。在学习活动中这种合作与帮辅，能让每个学生都有交流的机会，不仅有利于学生对知识的理解，而且能增强学生人际交往能力，促进学生的社会化进程。,（三）教学指导分层,分层教学要讲究教师的指导策略，这种指导策略既包括课前的预习指导，也包括课中的指导以及课后的辅导。,1.A层次学生的指导。补课，是提高A层次学生学习质量的一种方式。但是，补课有许多不当之处。在这里我提倡导学，“导”是针对“补”而提出的较为合理、科学的方式，不是让“漏洞”出现后再去填补，而是防患于未然。“导”，不仅是形式上的变化，而且是教师观念的转变以及方法、手段和时间上的变化。,（1）课前导基础知识。课前导学是一种提前学习的活动，即教师与学生共同研究下一节课将要学习的新知识，以及下一节课怎样上的过程。如：“比的基本性质”教学，教师要提前引导A层次学生复习分数的基本性质、商不变性质、比与分数以及除法之间的关系。通过活动，为A层次学生学习新知识形成新的能力打下基础，使他们能在课堂中与其他学生一样主动参与，成为学习的主人。,（2）课前导基本技能。学生已有的能力是影响新的教学技能形成的重要因素。为使A层次学生的学习能跟上一般的学生，必须有针对性地进行课前技能训练。如：“圆的周长与面积的计算”课前导学时，要进行3.142，3.143，3.144等口算训练，并引导学生熟记，做到脱口而出，使他们在计算时的速度不慢于其他同学，从而培养他们的学习兴趣。,2.B层次学生的指导。他们的基础知识较为扎实，课前的指导重在教给他们课前预习方法。要求列出自学提纲，让他们按提纲进行自学，并逐步使他们掌握自学的方法，培养他们奋发向上的精神。,3.C层次学生的指导。教师重点培养C层次学生关于方法、发展、探索思想等方面。对有些开放性问题要鼓励他们从不同的层次，不同的角度进行解答，培养他们的探索精神。,（四）课堂练习的分层,在设计课堂练习时，教师要充分考虑不同层次学生的情况，将练习设计成三类：第一类为基础练习，全班都做；第二类为综合练习，面对B和C层学生设计，欢迎A层学生参与；第三类为拓展练习，面对C层学生设计，欢迎B层学生参与。其中，综合练习和拓展练习就利用学生完成基础练习的时间差以奖励作业的形式出现，即在同一时间内进行分层练习。下面是几十几加几十几的进位加法一课的练习设计：,基础练习：,列竖式计算,（1）28+36=57+43=64+15=,（2）71+29=68+24=68-24=,综合练习：,把算式补充完整,（1）6（2）5,+3 +8,9 4 8 3,拓展练习：,笑笑是个小马虎，计算一道加法算式时，把十位数字3看成了5，把个位数字7看成了1，结果得数为65，你能找出正确的得数吗？,这样的分层练习，既注重基础知识和基本技能的掌握，完成教学的基本目标，又注重培养学生灵活运用知识解决问题的能力，提升他们的思维水平，同时还让学生们看到了自己的成绩，也发现了不足。,三、分层评价,分层评价是实施分层教学的保证。对不同层次的学生采取不同的评价标准，充分发挥评价的导向功能和激励功能。如对A层次学生采用表扬评价，寻找其闪光点，及时肯定他们的每一点进步，唤起他们对数学的兴趣，培养他们对数学学习的自信心；对B层次的学生采取激励性评价，既揭示不足又指明努力方向，促使他们积极向上；对C层的学生采用竞争性评价，坚持高标准，严要求，促使他们更加严谨、谦虚，不断超越自己。总之通过评价，充分调动各层次学生学习数学的情感、意志、兴趣、爱好等多方面积极因素，促进智商和情商的协调发展，以实现大幅度提高数学的教学质量。正如一位德国教育家所说：“教学的艺术不在于传授本领，而在于激励、唤醒、鼓舞。”,葡萄球菌肠毒素C纯化探究总结31、别人笑我太疯癫，我笑他人看,1,葡萄球菌肠毒素C,的纯化研究,主讲人,鲍行豪,研究人员:鲍行豪夏占强蓝明玉,葡萄球菌肠毒素C,2,培养基及培养条件的优选,二、用分子截留方法浓缩肠毒素原液,三、用DEAE纤维素(系 Pharmacia,品)柱层析作第一步提取,四、用 Sephadex g-75分子筛层析柱进一,步纯化,五、纯化前后SETC的SDS-PAGE鉴定,六、纯化后的SETC分子量测定,七、对SETC纯化品的N末端氨基酸测定,培养基及培养条件的优选,3,前言,为了检测“金葡素”制剂中有效,成份葡萄球菌肠毒素C(SETC),我,们对提纯SETC方法进行了较为,系统的研究。经多次试验,认为,按四部法提取SET-C能获得较好,效果,并对SETC的某些生物学,特性作了探索。现总结如下,前言,4,培养基及培养条件的优选,我们比较了猪心胨汤(原生产,“金葡素”用培养基)、酶解猪心汤,和胰酪胨综合培养基,接种复壮后种,子液,以静置与摇瓶(156r/min),种方式作48小时培养,取出以高速离,心法除去菌细胞,再用0.45um微孔,滤膜过滤除去残存菌,取其无菌滤液,用反相胶乳凝集试验(RPLA)测,SETC含量,培养基及培养条件的优选,5,结果证明:胰酪胨综合培养以摇,瓶培养金黄色葡萄球菌,其产生,SET-C最高。因此,我们在作,SET-C提纯时就决定采用胰酪胨,综合培养基及摇瓶培养方式来制,备肠毒素原液。,结果证明:胰酪胨综合培养以摇,6,二、用分子截留方法浓缩肠毒素原液,采用中科院上海原子核研究所装,配的 POST-FLO TM型流动循环超滤,泵,以10000 dalton超滤膜对肠毒素原,液进行截留浓缩,除去原液中水份及,10000 dalton以下的小分子物质,使原,液浓缩达20倍以上,离心除沉淀,取,其上清,经透析作为纯化SET-C的原液。,二、用分子截留方法浓缩肠毒素原液,7,用DEAE纤维素(系 Pharmacia,产品)柱层析作第一步提取,般要求DEAE纤维素40100目,临用前过筛,再以蒸馏水漂洗,去除细,微粒子。用1%NaoH和和1%HCL交替处,理后直至洗涤液呈中性。再用,0.01mo/LPH54PB冲洗平衡,装柱。,柱大小为4.142cm。装柱时切忌气泡,进入,装好柱后用同一PB缓慢洗涤使整,个柱内达到平衡,然后上样。,用DEAE纤维素(系 Pharmacia,8,将上一步浓缩透析过的SETC,原液缓慢加入使全部入柱后。先,用PH5.00.01mo/LPB洗涤,使,有色液体流尽。其后作分管收集,每10分钟收集一管,其量为,7.5ml,对收集液逐管在OD28onm,紫外分光自动检测仪测蛋白峰出,现管数。,将上一步浓缩透析过的SETC,9,其后相继换用PH66、0.06 mol L PB,和PH68,0.2mo/LPB分步洗脱,洗,速为45m/hr,每管仍用OD230m紫外分,光自动检测仪测洗脱液蛋白吸收峰。,并对各峰洗脱液合并,再用反相胶乳,凝集试验(RPLA)检测是否有SET-C,存在,合并蛋白峰。收集结果证明,SET-C在第峰,结果见图1,并对,峰用PEG浓缩至一定量,提供下一步纯,其后相继换用PH66、0.06 mol L PB,10,0.8,0.7,0.6,0.3,0.2,收集管数,图1:用DEAE纤维素层析结果,0.8,11,葡萄球菌肠毒素C纯化探究总结课件,12,葡萄球菌肠毒素C纯化探究总结课件,13,葡萄球菌肠毒素C纯化探究总结课件,14,葡萄球菌肠毒素C纯化探究总结课件,15,葡萄球菌肠毒素C纯化探究总结课件,16,葡萄球菌肠毒素C纯化探究总结课件,17,葡萄球菌肠毒素C纯化探究总结课件,18,葡萄球菌肠毒素C纯化探究总结课件,19,葡萄球菌肠毒素C纯化探究总结课件,20,葡萄球菌肠毒素C纯化探究总结课件,21,51,、天下之事常成于困约，而败于奢靡。,陆游,52,、生命不等于是呼吸，生命是活动。,卢梭,53,、伟大的事业，需要决心，能力，组织和责任感。,易卜生,54,、唯书籍不朽。,乔特,55,、为中华之崛起而读书。,周恩来,谢谢！,51、天下之事常成于困约，而败于奢靡。陆游52、,22,