小鼠腹腔注射课件

1.独立完成实验，不串岗，认真如实记录数据；2.遵守实验室规制制度，离开实验室须经教师许可；3.数据资料用邮件发回，请不要使用移动存储器；4.器具须用水擦洗、擦干，按原样整齐放置；5.实验台须用湿的干净抹布擦拭干净。用品摆放整齐、关机；6.每次实验后安排2个小组值日：督查各组善后工作；扫地、拖地，凳子放整齐；清洁洗涤台、将动物尸体送动物中心；7.动物尸体和一般实验垃圾必须严格分开放置；8.实验报告在2周内提交。注意事项注意事项实验课注意事项1.独立完成实验，不串岗，认真如实记录数据；注意事项实验课注注意事项注意事项药理学与药物研发内 容1实验1：介绍实验药理学，常用动物试验方法，肝功能对药物代谢的影响实验。2实验2:M胆碱受体和H1受体激动药对离体豚鼠回肠的作用3讨论课1：新药发现案例讨论4讨论课2：心血管用药案例讨论5讨论课3：抗生素案例讨论注意事项药理学与药物研发内容1实验1：介本次课安排一、动物实验的基本技能和实验技术基础1.实验动物的标记,捉持,给药方法（大、小鼠）和处死2.示教二、肝功能对药物代谢的影响实验1.讲解和讨论2.自主实验3.讨论：实验设计,原理,结果及其意义本次课安排一、动物实验的基本技能和实验技术基础实验动物基本操作1、实验动物的标记大、小鼠和白色家兔的标记常用35黄色苦味酸溶液涂于皮毛上标号。实验动物基本操作1、实验动物的标记小鼠性别鉴别性别外生殖器与肛门之间雄性距离长，有毛生长，无纵行沟雌性距离短，无毛生长，能见到一条纵行沟小鼠性别鉴别性别外生殖器与肛门之间雄性距离长，实验动物随机分组No.1234567891011121314151617181920Randomnumber0437608802032417978156519234866082555133Groupabaaababbbabaaaaabbb用Excel产生随机数字将20只小鼠分为A,B二组实验动物随机分组No.1234567891011121314动物实验每组所需的样本数动物动物计量资料计量资料计数资料计数资料小小(小鼠、大鼠、蛙小鼠、大鼠、蛙)10103030中中(兔、豚鼠兔、豚鼠)662020大大(犬、猫犬、猫)551010动物实验每组所需的样本数动物计量资料计数资料小(小鼠、大鼠、2、实验动物的捉持（大、小鼠）小鼠的捉持:右手抓鼠尾鼠尾略向后拉左手的拇指和食指抓住小鼠两耳后项背部皮毛以无名指及小指夹住鼠尾左手翻转使鼠腹部朝上,头略朝下。实验动物基本操作2、实验动物的捉持（大、小鼠）实验动物基本操作大鼠的捉持:捉持和固定方法基本同小鼠，无经验者可戴上防护手套，并应动作轻柔。用右手捉住鼠尾，放在鼠笼盖上，向后轻拉鼠尾；左手掌面向鼠背，食指和中指压住鼠的头顶，拇指和无名指分别从鼠的两腋下插入，将鼠的两前肢卡住；或拽紧鼠后颈及后背皮肤即可。实验动物基本操作大鼠的捉持:捉持和固定方法基本同小鼠，无经验者可戴上防护手3、实验动物的给药方法（大、小鼠）（1）小鼠灌胃（i.g.）将小鼠固定后，使颈部拉直，右手持装有灌胃针头的注射器，自口角插入口腔，压其头部，使口腔与食道成一直线，沿上腭壁向鼠口腔的后下方轻轻插入食道。如遇阻力，可将针头抽出再插，以免刺破食管或误入气管。一般给药量为0.10.3ml/10g（体重）。实验动物基本操作3、实验动物的给药方法（大、小鼠）实验动物基本操作大鼠灌胃实验动物基本操作大鼠灌胃实验动物基本操作（2）小鼠腹腔注射(i.p.)右手持注射器，45度角刺入腹白线偏左的下腹部，进针3mm左右有落空感时表示已进入腹腔，回抽无肠液、尿液（有空气）即可注射。给药容积一般为510ml/kg。注意：切误使针头向上注射，以防针头刺伤内脏；取药时略多，针头向上赶去气泡后多余药品放回原瓶。实验动物基本操作（2）小鼠腹腔注射(i.p.)注意：切误使针头向上注射，以防大鼠腹腔注射(0.1-0.2ml/100g)实验动物基本操作大鼠腹腔注射(0.1-0.2ml/100g)实验实验方法实验方法（3）小鼠尾静脉注射(i.v.)小鼠置于套桶，用左手抓住小鼠尾巴中部。拔去沿尾部静脉走向的毛，置尾巴于4550温水中浸泡几分钟或用75%酒精棉球反复擦拭尾部，以达到消毒和使尾部血管扩张及软化表皮角质的目的。持4号针头注射器，使针头与静脉平行(小于30角)，从尾巴的下1/4处进针注射量为0.050.1ml/10g体重。拔出针头后，用拇指按住注射部位轻压12min，防止出血。实验动物基本操作实验方法（3）小鼠尾静脉注射(i.v.)实验动物基本操作实验方法实验方法小鼠尾静脉注射(i.v)实验动物基本操作实验方法小鼠尾静脉注射(i.v)实验动物基本操作实验动物给药方法实验动物给药方法实验动物给药方法实验动物给药方法实验动物给药量的计算（1）药物浓度的表示方法溶液的质量（g）百分浓度（）=100%溶液的体积（ml）（2）实验动物给药剂量一般按mg/kg(或g/kg)计算。为了方便，大鼠和豚鼠可按每100g计算，小鼠可按每10g计算。给药剂量=药物浓度给药体积（3）给药容量的计算：从已知药的浓度和已知给药剂量算出相当于每1kg体重应给药的毫升数（ml）。实验动物给药量的计算（1）药物浓度的表示方法4、实验动物给药量的计算例：小鼠体重22g，腹腔注射A药10mg/kg,药物浓度为0.1%,应注射多少毫升?药物浓度：0.1%=0.1g/100ml=100mg/100ml=1mg/ml给药剂量：10mg/kg=10ml/kg小鼠体重：22g=0.022kg10ml/kg0.022kg=0.22ml或换算成ml/10g：10ml/kg=0.1ml/10g。4、实验动物给药量的计算例：小鼠体重22g，腹腔注射A药104、实验动物给药量的计算注射途径小鼠大鼠豚鼠家兔狗腹腔0.2-1.01-32-55-105-15肌肉0.1-0.20.2-0.50.2-0.50.5-1.02-5静脉0.2-0.51-21-53-105-15皮下0.1-0.50.5-1.00.5-21.0-3.03-10几种动物不同给药途径的常用注射量（ml）4、实验动物给药量的计算注射途径小鼠大鼠豚鼠家兔狗腹(1)颈椎脱臼法常用于小鼠。(2)空气栓塞法常用于家兔的处死。(3)击打法适用于豚鼠等。(4)断头法适用于蛙、蟾蜍、小鼠和大鼠。5、实验动物的处死方法颈椎脱臼法常用于小鼠。5、实验动物的处死方法肝功能对药物作用的影响实验目的了解肝脏在药物代谢中的重要性肝功能对药物作用的影响实验目的了解肝脏在药物代谢中的重要性药物效应动力学（Pharmacodynamics）作用、作用机制吸收、分布、代谢、排泄药物代谢动力学（Pharmacokinetics）药物效应动力学作用、作用机制吸收、分布、代谢、排泄药物代谢动Drug Drug AdministrationAdministrationDrug Concentration in Systemic CirculationDrug in Tissues of DistributionDrug Metabolism or ExcretedDrug Concentration at Site of ActionPharmacologic EffectClinical ResponseToxicityToxicityEfficacyEfficacyPharmacokineticsPharmacodynamicsAbsorptionAbsorptionDistributionDistributionEliminationEliminationDrugAdministrationDrugConcen小鼠腹腔注射课件小鼠腹腔注射课件Drug absorptionDrug absorptionDrugabsorptionDrug absorptionDrug absorptionDrugabsorptionDrug distributionDrug distributionDrugdistributionDrug Drug distributiondistributionDrugDrug Drug distributiondistributionDrugDrug biotransformationDrug biotransformationDrugbiotransformationDrug biotransformationDrug biotransformationDrugbiotransformation高亲脂性。血浆蛋白的结合率为96%-98%。代谢迅速，主要在肝脏进行。异丙酚(propofol)异丙酚(propofol)小鼠肝损伤模型Carbon tetrachloride(CCl4)小鼠肝损模型制备方法实验前24h用10%四氯化碳0.2ml/10g体重皮下注射。小鼠肝损伤模型Carbontetrachloride(CC实验步骤1.建立肝脏损伤模型（已制备）；2.小鼠称重、做标记；3.腹腔注射1%propofol溶液，注射体积0.1ml/10g体重。实验步骤建立肝脏损伤模型（已制备）；观察指标1.记录进入翻正反射消失的时间；2.记录翻正反射的消失到恢复的时间；3.处死小鼠，解剖肝脏，肉眼观察正常小鼠和肝损小鼠肝脏的病理变化（表面色泽和颗粒）。观察指标记录进入翻正反射消失的时间；表1异丙酚诱导正常小鼠与肝损小鼠睡眠时间的比较（xs）分组样本(只)进入翻正反射消失的时间（min）翻正反射消失至恢复的时间（min）AB实验结果 表1异丙酚诱导正常小鼠与肝损小鼠睡眠时间的分组样课堂讨论课堂讨论 问题：什么是药物效应动力学？什么是药物代谢动力学？问题：异丙酚腹腔注射后有哪些代谢动力学过程？问题：药物代谢动力学过程与药效间的联系？问题：肝损能够影响药效吗？为什么？问题：实验中诱导小鼠肝损的化学物质是什么？问题：如何制备小鼠肝损模型？问题：实验组小鼠为什么要与对照组同步处理？问题：实验数据的类型？适用的统计分析方法是什么？问题：如何比较肝损组和对照组小鼠的睡眠时间差异？问题和讨论课堂讨论问题：什么是药物效应动力学？什么是药物代谢动力学？课堂讨论课堂讨论 问题：实验中哪一个数据与异丙酚的吸收有关？问题：异丙酚吸收过程中有哪些重要的影响因素？问题：如何评价异丙酚腹腔注射的吸收程度？问题：异丙酚在体内如何分布？问题：哪些因素会影响异丙酚的体内分布过程？问题：采用何种药动学参数评价异丙酚的分布？问题：实验中何种现象与异丙酚清除有关？问题：生物转化过程有哪些重要的影响因素？问题：为什么异丙酚很难经由肾脏排泄？问题：哪些药代动力学参数可用于评价异丙酚的清除过程？问题和讨论课堂讨论问题：实验中哪一个数据与异丙酚的吸收有关？问题和讨课堂讨论课堂讨论 问题：肝药酶参与了异丙酚的代谢吗？问题：异丙酚代谢中主要由哪些酶参与？问题：实验中如何观察肝损？临床上如何评估肝损程度？问题和讨论课堂讨论问题：肝药酶参与了异丙酚的代谢吗？问题和讨论实验报告 1.格式:科技论文格式(浙江大学学报医学版);2.实验后2周内提交实验报告;3.实验报告互评.实验报告1.格式:科技论文格式(浙江大学学报医学版);实验报告互评实验报告须独立完成A评B、B评C、C评A给予评分：满分10分写出评语:好的方面，不知之处评价者签署姓名及时间敷衍了事、与教师评价差异显著者会被扣分实验报告 实验报告互评实验报告