TJ1528大鼠静脉重复给药90天毒性试验

TJ1528大鼠静脉注射重复给药大鼠静脉注射重复给药3个月毒性个月毒性试验研究试验研究汇报目录汇报目录试验背景试验背景1 1试验结果试验结果3 3试验结论试验结论4 4试验方法试验方法2 27试验背景背景基本原基本原则：成分清晰纯净度高疗效有充分证据毒副作用明确中中药注射注射剂 特点：特点：成分复杂未知水中不稳定和不溶性微粒问题：局部栓塞性损伤和坏死，如肉芽肿、微血管阻塞、炎症反应等临床使用环节问题多：发烧用清开灵，感冒用双黄连，心血管疾病用香丹针过敏原多疗效不确切不良反应事件多注射注射剂 9月CFDA要求召回喜炎平、红花注射液，全国停用。10月8日，中办、国办印发关于深化审评审批制度改革鼓励药品医疗器械创新的意见，其中第十一条，第二十五条，让中药注射液的安全性问题再次成为热议焦点。（十一）严格格药品注射品注射剂审评审批批。严格控制口服制剂改注射制剂，口服制剂能够满足临床需求的，不批准注射制剂上市。严格控制肌肉注射制剂改静脉注射制剂，肌肉注射制剂能够满足临床需求的，不批准静脉注射制剂上市。大容量注射剂、小容量注射剂、注射用无菌粉针之间互改剂型的申请，无明显临床优势的不予批准。（二十五）开展开展药品注射品注射剂再再评价价。根据药品科学进步情况，对已上市药品注射剂进行再评价，力争用5至10年左右时间基本完成。上市许可持有人须将批准上市时的研究情况、上市后持续研究情况等进行综合分析，开展产品成份、作用机理和临床疗效研究，评估其安全性、有效性和质量可控性。通过再评价的，享受仿制药质量和疗效一致性评价的相关鼓励政策。试验背景试验背景-中药注射剂中药注射剂1不管是西不管是西药还是中是中药，都会有毒副作用和不都会有毒副作用和不良反良反应，国内外均如，国内外均如此。此。2中中药注射注射剂的不良反的不良反应之之所以争所以争议大，主要在于大大，主要在于大多数中多数中药注射注射剂不良反不良反应类型的不确定性以及不良型的不确定性以及不良反反应发生率的数据缺乏，生率的数据缺乏，前者会造成前者会造成抢救的复救的复杂性性以及以及结果的不可控，后者果的不可控，后者会增加会增加临床床应用的用的风险。中药注射剂中药注射剂-临床前再评价临床前再评价中药注射剂突破了传统剂型，直接进入体循环，较传统剂型，风险明显加大；传统用药经验对注射剂处方组成配伍及配比的指导作用有限，需要通过充分研究阐明其安全性、有效性，保证其质量可控性。背景信息-中药注射剂TJ1528成分：成分：红花、赤芍、川芎、丹参、当归等中药材的提取物成方依据：成方依据：以血府逐瘀汤为基础，在“菌毒炎并治”的理论指导下，根据“三证三法”辨证原则研制。功效：功效：活血化瘀，疏通经络、溃散毒邪临床适床适应症：症：脓毒症/因感染诱发的全身炎症反应综合征（SIRS）临床床疗效：效：大样本量多中心临床研究和Meta分析结果表明，在常规综合治疗基础上，联合使用TJ1528，能够降低脓毒症患者28天病死率、并发症发生率及平均住院天数，有效改善患者全身炎症反应、凝血功能以及APACHE II评分等临床指标，保护器官功能，显著提高临床治疗有效率。临临床不良反床不良反应应：偶见皮肤红痒感，停药后消失；未见严重不良反应中药注射剂中药注射剂-临床前再评价临床前再评价安全性评价研究项目1、安全药理试验，合并于非啮齿动物重复给药毒性试验中2、单次给药毒性试验3、重复给药毒性试验4、过敏、刺激和溶血试验：过敏试验应进行全身主动、被动过敏试验，刺激试验结合在长毒试验中进行。均应采用啮齿类、非啮齿类两种动物TJ1528非临床安全性评价指标的设计关注点大鼠重复给药毒性试验-试验方法u实验动物:SD大鼠，SPF级，雌雄各半，4-5周龄。u给药途径:静脉缓慢推注u给药体积：6ml/kgu给药周期:每天给药1次，连续静脉注射给药3个月，停药恢复观察30天。u试验剂量设计组别剂量（g生药/kg）浓度临床拟用倍数动物数对照组00016/16低剂量3临床用浓度4.216/16中剂量9临床3倍浓缩12.716/16高剂量30临床10倍浓缩42.316/16大鼠重复给药毒性试验-试验方法 检查指指标：临床观察：除外观体征、行为活动、腺体分泌、呼吸等，同时观察供试品对大鼠的刺激和过敏症状；体重、进食量检查；尿液生化检查；血液学、凝血功能检查：根据药物具有活血化瘀的特点，增加TT、FIB-C检查；血清生化、血清电解质检查；大体剖检、脏器重量及系数检查；组织病理学检查。大鼠重复给药毒性试验-试验结果u一般观察：给药期间尿液色黄尿液色黄，停药后尿液颜色即恢复正常，从药物性状和临床表现推测，黄色尿液为供供试品排泄品排泄的结果，非药物毒性。其余大鼠精神状态、外观体征、给药部位、行为活动、腺体分泌、呼吸等无异常表现。但由于该药物具有明显的活血化瘀作用，所以在给药后按按压止血止血时间要有所延要有所延长。大鼠重复给药毒性试验-试验结果刺激反应检查结果：给药部位未见红、肿、溃烂、硬痂等刺激症状；组织病理学检查未见明显异常体重、进食量检查：均未见与药物相关性异常变化。尿液生化检查：均未见与药物相关性异常变化。血液生化、电解质检查：均未见与药物相关性异常变化。血液学、凝血功能检查：白系：WBC，N%、M%，L%红系：RBC、HGB、HCT、MCV、MCH、MCHC；Ret%凝血功能：PLT 大鼠重复给药毒性试验-试验结果大体剖检、脏器重量及系数检查：脾脏重量及系数，存在量效关系；停药后能基本恢复正常。给药期结束及恢复期结束肝脏、脾脏脑系数变化表（g/g脑重）时间性性别项目目空白空白对照照低低剂量量中中剂量量高高剂量量给药期期结束束雄雄肝肝5.371 0.2764.9950.597 5.3340.427 5.9510.756 脾脾0.491 0.1160.4210.053 0.6210.078*0.7900.047*雌雌肝肝3.723 0.2853.4400.288*3.7030.317 4.1560.491*脾脾0.372 0.0790.3560.081 0.4440.062*0.5200.082*恢复恢复期期结束束雄雄肝肝5.987 0.6455.9881.267 6.7871.204 6.3010.568 脾脾0.422 0.1010.4090.051 0.5260.060 0.5690.099*雌雌肝肝4.531 0.6063.8690.737 4.0320.255 3.7510.275*脾脾0.275 0.0520.2720.032 0.3150.024 0.2830.034 大鼠重复给药毒性试验-试验结果组织病理学病理学检查：肝、脾、淋巴结中的巨噬细胞吞噬棕黄色物质，高、中剂量组，具有剂量相关性；恢复期结束检查时病变有所减轻甚至消失；低剂量组脾、淋巴结中的巨噬细胞吞噬棕黄色物质；停药恢复1个月检查，上述病变有所减轻甚至消失 肾小管上皮细胞内有棕黄色物质沉积停药恢复1个月检查，上述病变有所减轻甚至消失供试品为棕黄色澄明液体巨噬细胞强大的吞噬能力，可以直接识别和黏附异物，并将其吞噬上述症状上述症状为：机体免疫系机体免疫系统防御功能的体防御功能的体现肾脏代代谢后在后在肾小管上沉小管上沉积所致所致大鼠重复给药毒性试验-试验结果组织病理学病理学检查：肝：肝血窦中枯否氏细胞吞噬棕黄色物质脾：红髓中部分巨噬细胞轻度增大并吞噬棕黄色物质大鼠重复给药毒性试验-试验结果组织病理学病理学检查：淋巴结：巨噬细胞轻度增生，少量吞噬棕黄色物质肾：部分肾小管上皮细胞内有棕黄色物质沉积大鼠重复给药90天毒性试验-实验结论除大鼠尿液色黄外，大鼠精神状态、外观体征、行为活动、腺体分泌、呼吸等无异常表现；过敏、刺激检查结果阴性；高剂量组Ret%升高，RBC、HGB、HCT、MCV、MCH、MCHC、PLT指标降低，均可能与本品自身具有活血化瘀药理作用有关。高剂量组N%、M%指标升高，WBC、L%指标降低，脾脏重量或系数升高，肝、脾、淋巴结中见巨噬细胞吞噬棕黄色物质，可能与本品自身具有免疫调节药理作用有关；上述症状可能是药物自身药理作用所致；活血化瘀和免疫调节是脓毒症治疗的基本原则。结合多年临床用药的ADR报道情况，综合考虑该药物临床风险较低、可接受。NOVEL为中剂量（9g生药/kg），为临床拟用剂量（0.71g生药/kg）的12.7倍，本实验结果提示TJ1528临床大剂量长期使用中应监控血液学指标。毒性研究结果讨论毒性研究结果讨论食蟹食蟹猴重复猴重复给药毒性毒性1）血液学检查给药组动物RBC、HGB、HCT轻微降低，变化幅度轻微且未低于正常值下限，给药29、60天高剂量组动物N比例与数量升高、L比例降低，N、L比例倒置，给药90天其N、L比例及数量恢复正常2）脏器重量检查给药结束高剂量组动物肝脏湿重及系数偏高，中、高剂量组脾脏湿重及系数偏高3）中、高剂量组肝、脾、较远和给药相关淋巴结中的巨噬细胞吞噬棕黄色物质大鼠及食蟹猴长期毒性试验，两种属均出现尿液颜色加深；血液学中红细胞系轻微减少，白细胞总数不变的情况下其比例分类出现N、L比例倒置的情况；组织病理学及脏器重量检查也表现出相近的毒性反应，主要影响动物肝脏及脾脏；故认为TJ1528在大鼠及食蟹猴长期毒性试验中未出现相悖的毒性反应。敬请各位专家指导谢谢！