加氢氧化钠试液课件

第五章第五章 中药制剂分析总论中药制剂分析总论药物分析教研室药物分析教研室第五章 中药制剂分析总论1第一节第一节 中药制剂定性分析中药制剂定性分析中药定性分析的方法 目的：目的：检定制剂的真实性。检定制剂的真实性。显微鉴别法显微鉴别法理化鉴别法理化鉴别法 一般化学反应法一般化学反应法升华法升华法荧光法荧光法光谱法光谱法色谱法色谱法 第一节 中药制剂定性分析2一、中成药的显微鉴别 （一）制片方法一）制片方法 1 1散剂、胶囊剂散剂、胶囊剂 取粉末，直接加水或水合氯醛取粉末，直接加水或水合氯醛 透化装片。透化装片。2 2片剂片剂 用刀片直接从药片断面刮取少量粉末或用刀片直接从药片断面刮取少量粉末或 研碎后取少量样品透化装片。研碎后取少量样品透化装片。3 3水丸、锭剂水丸、锭剂 研成粉末后取少量直接透化装片。研成粉末后取少量直接透化装片。4 4蜜丸蜜丸 取蜜丸切碎，加水搅拌，洗涤后，置离取蜜丸切碎，加水搅拌，洗涤后，置离 心管中离心分离沉淀。如此反复处理以心管中离心分离沉淀。如此反复处理以 除去蜂蜜后透化装片。除去蜂蜜后透化装片。u 若观察细胞内含物形状，应选用不同试剂制片。若观察细胞内含物形状，应选用不同试剂制片。淀粉粒淀粉粒 水或甘油醋酸试液；水或甘油醋酸试液；糊粉粒糊粉粒 甘油；甘油；水溶性内含物水溶性内含物 乙醇或水合氯醛试液乙醇或水合氯醛试液(不加热不加热)。一、中成药的显微鉴别3固定标本片制片方法固定标本片制片方法 取中成药粉末置离心管中，加乙醇浸过上面，取中成药粉末置离心管中，加乙醇浸过上面，玻棒搅拌玻棒搅拌5 51010分钟后离心使粉末沉分钟后离心使粉末沉积，倾去稀醇液，再加无水乙醇二次，积，倾去稀醇液，再加无水乙醇二次，丙酮一次，丙酮、二甲苯等量混合液丙酮一次，丙酮、二甲苯等量混合液一次，如前操作，每次一次，如前操作，每次10102020分钟；分钟；最后加入纯二甲苯，略加搅拌，取处最后加入纯二甲苯，略加搅拌，取处理后的样品微量置载玻片上，滴加中性树胶，加盖理后的样品微量置载玻片上，滴加中性树胶，加盖玻片封藏，贴标签。玻片封藏，贴标签。固定标本片制片方法4（二）观察要点（二）观察要点 中成药粉末镜检时，首先要了解处方中的药味组成，明确其中成药粉末镜检时，首先要了解处方中的药味组成，明确其来源的药用植物的部位，才能根据该部位的显微特征来进行检出。来源的药用植物的部位，才能根据该部位的显微特征来进行检出。1.1.根类根类u 木栓组织碎片，表面观多为多角形细胞，木栓组织碎片，表面观多为多角形细胞，排列紧密。排列紧密。u 导管导管 直径、节的长短、末梢壁的穿孔及增厚壁的纹理类型。直径、节的长短、末梢壁的穿孔及增厚壁的纹理类型。u 草酸钙结晶晶形、草酸钙结晶晶形、u 分泌组织、分泌组织、u 淀粉粒的形状、淀粉粒的形状、u 脐点脐点u 层纹层纹 2.2.根茎类根茎类 与根类药材粉末特征相似。而淀粉粒有时较大，有鳞叶组织，退化的与根类药材粉末特征相似。而淀粉粒有时较大，有鳞叶组织，退化的 鳞叶表皮细胞大多狭长，细胞壁平直或波状弯曲。鳞叶表皮细胞大多狭长，细胞壁平直或波状弯曲。（二）观察要点5 3.3.茎类茎类 （1 1）茎类）茎类 表皮细胞及垂周壁的形状，气孔的类型，毛茸的类型及形态；表皮细胞及垂周壁的形状，气孔的类型，毛茸的类型及形态；导管的类型、直径、长短。导管的类型、直径、长短。管胞的形态；管胞的形态；纤维的形状、直径、长短、有无晶纤维等。纤维的形状、直径、长短、有无晶纤维等。草酸钙结晶多为方晶及簇晶，单子叶植物偶见针晶。草酸钙结晶多为方晶及簇晶，单子叶植物偶见针晶。薄壁组织碎片、石细胞。薄壁组织碎片、石细胞。（2 2）皮类）皮类 纤维的直径、长短及形状，是否成束存在，纤维的直径、长短及形状，是否成束存在，细胞壁厚薄、木化与否，能否看到胞腔及壁孔等。细胞壁厚薄、木化与否，能否看到胞腔及壁孔等。石细胞的形状、细胞壁增厚情况。石细胞的形状、细胞壁增厚情况。草酸钙结晶多为方晶及簇晶，砂晶及针晶较少。草酸钙结晶多为方晶及簇晶，砂晶及针晶较少。皮类药材粉末不应含有木质部组织，如导管、管胞等。皮类药材粉末不应含有木质部组织，如导管、管胞等。（3 3）木类）木类 可见导管、管胞、木纤维、木射线及木薄壁细胞。细胞壁可见导管、管胞、木纤维、木射线及木薄壁细胞。细胞壁 通常均木化。不应有木栓细胞及绿色组织等。通常均木化。不应有木栓细胞及绿色组织等。3.茎类6 4.4.花类花类 （1 1）苞片及花萼）苞片及花萼 构造类同叶片，表面上可见到气孔及毛茸。构造类同叶片，表面上可见到气孔及毛茸。（2 2）花冠）花冠 上表皮细胞常呈乳头状或绒毛状突起而无气孔，上表皮细胞常呈乳头状或绒毛状突起而无气孔，下表皮细胞常不呈乳头状，下表皮细胞常不呈乳头状，细胞壁微波状弯曲。细胞壁微波状弯曲。维管束组织细小。维管束组织细小。（3 3）雄蕊）雄蕊 1 1）花粉囊内壁细胞的壁不均匀地增厚，呈网状、螺旋状、）花粉囊内壁细胞的壁不均匀地增厚，呈网状、螺旋状、环纹状及点状等；环纹状及点状等；2 2）花粉粒具圆形、长圆形或多面形等多种形状。）花粉粒具圆形、长圆形或多面形等多种形状。通常具内外两层壁，外壁多数具各种雕纹。通常具内外两层壁，外壁多数具各种雕纹。（4 4）雌蕊）雌蕊 柱头的表皮细胞呈乳头状突起，或分化成绒毛状。柱头的表皮细胞呈乳头状突起，或分化成绒毛状。4.花类7 5.叶类叶类 （1 1）表皮）表皮 上下表皮细胞的形状、大小，角质层的形态，上下表皮细胞的形状、大小，角质层的形态，垂周壁的形状、厚度或增厚情况以及有无气孔、毛茸等。垂周壁的形状、厚度或增厚情况以及有无气孔、毛茸等。（2 2）气孔）气孔 气孔的形状、大小、型式，保卫细胞的形状及内含物，气孔的形状、大小、型式，保卫细胞的形状及内含物，副卫细胞的数目、大小、形状。副卫细胞的数目、大小、形状。（3 3）毛茸）毛茸 注意毛茸的种类。注意毛茸的种类。非腺毛：注意细胞的数目、形状、长短、大小、细胞壁的非腺毛：注意细胞的数目、形状、长短、大小、细胞壁的 厚薄及表面形态等。多为单列性多细胞毛，少为单细胞毛。厚薄及表面形态等。多为单列性多细胞毛，少为单细胞毛。形状一般呈长圆锥形或线形；细胞壁一般较薄，外壁表面大形状一般呈长圆锥形或线形；细胞壁一般较薄，外壁表面大 都光滑。都光滑。腺毛：腺毛：注意头部的形状、大小、细胞的数目、排列情况以注意头部的形状、大小、细胞的数目、排列情况以 及柄部的长短、细胞数目及行列数目等。及柄部的长短、细胞数目及行列数目等。5.叶类8 6.6.果实类果实类 （1 1）果皮细胞的形状、大小。）果皮细胞的形状、大小。（2 2）外果皮上可能有非腺毛及腺毛，注意长短、形状。）外果皮上可能有非腺毛及腺毛，注意长短、形状。（3 3）中果皮内的分泌组织）中果皮内的分泌组织 油细胞，油室、油管、石细胞等油细胞，油室、油管、石细胞等 （4 4）内果皮石细胞，大小、细胞壁的厚薄，如为镶嵌层，则）内果皮石细胞，大小、细胞壁的厚薄，如为镶嵌层，则 应注意其排列形式。应注意其排列形式。6.果实类9 7.7.种子类种子类 （1 1）种皮）种皮 表皮毛的形状、细胞壁的厚薄、是否木化、有无纹理；表皮毛的形状、细胞壁的厚薄、是否木化、有无纹理；石细胞形状、大小、色泽散布及细胞壁的增厚情况。石细胞形状、大小、色泽散布及细胞壁的增厚情况。栅状细胞及油细胞。栅状细胞及油细胞。（2 2）外胚乳）外胚乳 细胞大小、形状、壁厚、色泽、细胞内含物。细胞大小、形状、壁厚、色泽、细胞内含物。（3 3）内胚乳）内胚乳 细胞形状、厚度、内含物。细胞形状、厚度、内含物。（4 4）胚的子叶）胚的子叶 有无分泌组织及细胞的内含物。有无分泌组织及细胞的内含物。7.种子类10 （三）应用实例三）应用实例 六味地黄丸的显微定性鉴别 显微鉴别显微鉴别 取本品置显微镜下观察，取本品置显微镜下观察，(1)(1)薄壁组织棕色至黑棕色，细胞多皱缩，内含棕色核状物。薄壁组织棕色至黑棕色，细胞多皱缩，内含棕色核状物。(熟地黄熟地黄)(2)(2)果皮表皮细胞橙黄色，表面观类多果皮表皮细胞橙黄色，表面观类多 角形，垂周壁略连珠状增厚。角形，垂周壁略连珠状增厚。(山茱山茱 萸萸)(3)(3)淀粉粒三角状卵形或矩圆形，直淀粉粒三角状卵形或矩圆形，直 径径2440um2440um，脐点短缝状或人字状。，脐点短缝状或人字状。(山药山药)3a)3a草酸钙针晶束草酸钙针晶束3b3b淀粉粒淀粉粒 (4)(4)草酸钙簇晶存在于无色薄壁细胞中草酸钙簇晶存在于无色薄壁细胞中 ，有时数个排列成行。，有时数个排列成行。(牡丹皮牡丹皮)(5)(5)不规则分枝状团块无色，遇水合不规则分枝状团块无色，遇水合 氯醛溶化；菌丝无色，直径氯醛溶化；菌丝无色，直径4-6um4-6um。(茯苓茯苓)(6)(6)薄壁细胞类圆形，有椭圆形纹孔，薄壁细胞类圆形，有椭圆形纹孔，集成纹孔群。集成纹孔群。(泽泻泽泻)（三）应用实例11二、中药制剂的一般理化鉴别法 （一）一般化学反应法一）一般化学反应法 中药制剂一般选择有效成分、特征成分作为鉴别的对象。中药制剂一般选择有效成分、特征成分作为鉴别的对象。一一般般化化学学反反应应鉴鉴别别法法多多在在试试管管中中用用湿湿法法反反应应进进行行，制制剂剂样样品品要要先先制制成成适适宜宜的的供供试试液液。一一般般情情形形下下用用5050-70-70乙乙醇醇回回流流提提取取制备供试液。制备供试液。一般化学反应法用于中药制剂鉴别应该注意以下几点：一般化学反应法用于中药制剂鉴别应该注意以下几点：(1)(1)慎慎重重使使用用专专属属性性不不好好的的分分析析反反应应，如如泡泡沫沫生生成成反反应应、三三氯氯化铁显色反应等。化铁显色反应等。(2)(2)在在分分析析前前对对样样品品进进行行分分离离、精精制制，除除去去干干扰扰分分析析反反应应的的物物质借此改善鉴别方法的专属性。质借此改善鉴别方法的专属性。(3)(3)采采用用阴阴性性对对照照和和阳阳性性对对照照的的方方式式，对对拟拟定定的的鉴鉴别别方方法法进进行行反复验证，防止出现假阳性。反复验证，防止出现假阳性。二、中药制剂的一般理化鉴别法12 实例实例1 1 牛黄解毒片中大黄、黄芩的定性鉴别反应牛黄解毒片中大黄、黄芩的定性鉴别反应 取本品取本品6 6片片(去包衣去包衣)，研细，加乙醇，研细，加乙醇10ml10ml，温热，温热1010分钟，分钟，过滤，滤液作如下反应：过滤，滤液作如下反应：(1)(1)取滤液取滤液5ml5ml，加镁粉少量与盐酸，加镁粉少量与盐酸0.5ml0.5ml，加热，即显，加热，即显红色。（黄芩中有大量黄酮）红色。（黄芩中有大量黄酮）(2)(2)另取滤液另取滤液4ml4ml，加氢氧化钠试液，显红色，再加，加氢氧化钠试液，显红色，再加3030过氧化氢溶液，加热，红色不消失，加酸或酸性时，红色变为黄色。过氧化氢溶液，加热，红色不消失，加酸或酸性时，红色变为黄色。（大黄中含有羟基蒽醌）（大黄中含有羟基蒽醌）实例实例2 2 牙痛一粒丸中蟾蜍、朱砂、雄黄的定性鉴别反应牙痛一粒丸中蟾蜍、朱砂、雄黄的定性鉴别反应 (1)(1)取取本本品品约约0.1 0.1 g g，研研细细，加加氯氯仿仿5ml5ml，浸浸泡泡1 1小小时时，滤滤过过，滤滤液液蒸蒸干干，残渣加醋酐少量使溶解，再滴加硫酸，初显蓝紫色，渐变为蓝绿色。（蟾蜍）残渣加醋酐少量使溶解，再滴加硫酸，初显蓝紫色，渐变为蓝绿色。（蟾蜍）(2)(2)取取本本品品约约0.2g0.2g，研研细细，加加水水湿湿润润后后，加加氯氯酸酸钾钾的的硝硝酸酸饱饱和和溶溶液液2ml2ml，振振摇摇，放放冷冷，离离心心，取取上上清清液液，加加氯氯化化钡钡试试液液0.5ml0.5ml，摇摇匀匀，溶溶液液呈呈白白色色浑浑浊浊，离心，弃去上层酸液，再加水离心，弃去上层酸液，再加水2ml2ml，振摇，沉淀不溶解。（雄黄），振摇，沉淀不溶解。（雄黄）(3)(3)取取本本品品适适量量，研研细细，用用盐盐酸酸湿湿润润后后，在在光光洁洁的的铜铜片片上上摩摩擦擦，铜铜片片表表面面即显银白色光泽，加热烘烤后，银白色消失。（朱砂）即显银白色光泽，加热烘烤后，银白色消失。（朱砂）实例1 牛黄解毒片中大黄、黄芩的定性鉴13 （二）显微化学鉴别法二）显微化学鉴别法 1.取药材的切片、粉末或中成药粉末，置载玻片上，滴加各种试剂，加盖取药材的切片、粉末或中成药粉末，置载玻片上，滴加各种试剂，加盖玻片玻片 在显微镜下观察产生的结晶或沉淀，以及特殊的颜色等，作为鉴别的在显微镜下观察产生的结晶或沉淀，以及特殊的颜色等，作为鉴别的特征。特征。例：例：黄连粉末滴加稀盐酸，放置黄连粉末滴加稀盐酸，放置5 5分钟，可见分钟，可见小檗碱盐酸盐小檗碱盐酸盐黄色结晶析出。黄色结晶析出。穿心莲用水湿润，切成横切片，滴加乙醇后加穿心莲用水湿润，切成横切片，滴加乙醇后加KeddeKedde试液，试液，叶肉组织显紫红色叶肉组织显紫红色(穿心莲内酯成分的不饱和内酯环反应穿心莲内酯成分的不饱和内酯环反应)。丁香切片滴加丁香切片滴加3030氢氧化钠饱和溶液，略放置，可见油室氢氧化钠饱和溶液，略放置，可见油室内有针状内有针状丁香酚钠结晶析出。丁香酚钠结晶析出。肉桂粉末加氯仿肉桂粉末加氯仿2 23 3滴，略浸渍，速加滴，略浸渍，速加2 2盐酸苯肼盐酸苯肼1 1滴，可见黄色针状滴，可见黄色针状或杆状结晶或杆状结晶(肉桂酸反应肉桂酸反应)。（二）显微化学鉴别法142.取药材粗粉加适当的溶剂浸提，将浸提液置载玻片上，滴加取药材粗粉加适当的溶剂浸提，将浸提液置载玻片上，滴加各种试剂，加盖玻片，在显微镜下观察反应。各种试剂，加盖玻片，在显微镜下观察反应。例如：例如：槟榔粉末槟榔粉末0.5g0.5g，加水，加水3 34ml4ml及稀盐酸及稀盐酸1 1滴，微热数分钟，过滴，微热数分钟，过滤，取滤液滤，取滤液1 1滴于载玻片上，加碘化铋钾试液滴于载玻片上，加碘化铋钾试液1 1滴，即发生混浊，滴，即发生混浊，放置后可见石榴红球形或方形结晶放置后可见石榴红球形或方形结晶(槟榔碱槟榔碱)。曼陀罗叶少许，加氯仿提取，提取液蒸干，加发烟硝酸曼陀罗叶少许，加氯仿提取，提取液蒸干，加发烟硝酸1 1滴，滴，显黄色，加氢氧化钾显黄色，加氢氧化钾1 1粒，显紫堇色粒，显紫堇色(莨菪烷类成分莨菪烷类成分VitaliVitali反应反应)。2.取药材粗粉加适当的溶剂浸提，将浸提液置载玻片上，滴加各种153.取药材切片或粉末，滴加各种试剂，直接观察反应现象。取药材切片或粉末，滴加各种试剂，直接观察反应现象。例如：例如：钟乳石少许，加浓盐酸数滴，能产生大量气泡钟乳石少许，加浓盐酸数滴，能产生大量气泡(碳酸盐碳酸盐分解分解 产生产生COCO2 2)。番木鳖胚乳薄片，加番木鳖胚乳薄片，加1 1钒酸铵钒酸铵-硫酸试液硫酸试液1 1滴，胚乳速显紫滴，胚乳速显紫色色 (番木鳖碱番木鳖碱)，另取切片加发烟硝酸，另取切片加发烟硝酸1 1滴，即显橙红色滴，即显橙红色(马钱子马钱子 碱碱)。大黄粉末少许，置白磁板上，加氢氧化钠液大黄粉末少许，置白磁板上，加氢氧化钠液l l滴，显深红色滴，显深红色(蒽醌钠盐蒽醌钠盐)。3.取药材切片或粉末，滴加各种试剂，直接观察反应现象。16 （三）升华法三）升华法 操操作作方方法法：取取金金属属片片安安放放在在有有圆圆孔孔(直直径径约约2cm)2cm)的的石石棉棉板板上上，在在金金属属片片上上放放一一小小金金属属圈圈(内内径径约约1.5cm1.5cm，高高约约0.8cm)0.8cm)，对对准准石石棉棉板板上上的的圆圆孔孔，圈圈内内放放入入预预先先研研细细成成粉粉末末的的中中药药制制剂剂一一薄薄层层，圈圈上上覆覆盖盖载载玻玻片片，在在石石棉棉板板下下圆圆孔孔处处用用酒酒精精灯灯缓缓缓缓加加热热，至至粉粉末末开开始始变变焦焦，去去火火待待冷冷，载载玻玻片片上上有有升升华华物物凝凝集集。将将载载玻玻片片反反转转后后，置置显显微微镜镜下下观观察结晶形状、色泽，或取升华物加试液观察反应。察结晶形状、色泽，或取升华物加试液观察反应。实例实例 牛黄解毒丸微量升华鉴别牛黄解毒丸微量升华鉴别 取取本本品品进进行行微微量量升升华华，先先得得白白色色升升华华物物后后（冰冰片片），继继得得黄黄色色升升华华物物（大大黄黄中中蒽蒽醌醌）。将将升升华华物物分分别别置置显显微微镜镜下下观观察察：白白色色升升华华物物呈呈不不定定形形的的无无色色片片状状结结晶晶，加加新新制制的的1 1香香草草醛醛硫硫酸酸溶溶液液，渐渐显显紫紫红红色色，黄黄色色升升华华物物呈呈黄黄色色针针状状结结晶晶或或羽羽状状结结晶晶，遇遇碱碱显显红红色色，遇遇酸变为黄色。酸变为黄色。（三）升华法17 （四）荧光法四）荧光法 有有些些中中药药材材中中含含有有能能产产生生荧荧光光的的化化学学成成分分，在在可可见见光光、紫紫外外光光照照射射下下能能发发出出荧荧光光，或或经经试试剂剂处处理理后后发发出出荧荧光光。含含有有这这类类药药材材的的中中药药制制剂剂可可用用荧荧光光法法进进行行鉴鉴别别。通通常常的的操操作作方方法法是是取取制制剂剂的的提提取取液液点点在在滤滤纸纸上上或或试试纸纸上上，置置紫紫外外光光灯灯下下(365nm)(365nm)观观察察，有有时时则则是加一定的试剂后再进行观察。是加一定的试剂后再进行观察。实例实例l l 元胡止痛片的荧光鉴别元胡止痛片的荧光鉴别 取取本本品品适适量量，去去糖糖衣衣，研研细细，取取粉粉末末1g1g，加加0.25mol0.25molL L硫硫酸酸液液10ml10ml振振摇摇片片刻刻，滤滤过过，取取滤滤液液数数滴滴，点点于于滤滤纸纸上上，阴阴干干后后置置紫紫外光灯外光灯(365nm)(365nm)下观察，显亮黄色荧光。下观察，显亮黄色荧光。（四）荧光法18 1.可见可见紫外分光光度法紫外分光光度法 不同的药材所含的成分不同，在一定不同的药材所含的成分不同，在一定条件下吸收光谱的特征可用于鉴别药材。条件下吸收光谱的特征可用于鉴别药材。利用这一特点，可见利用这一特点，可见-紫外分光光度法也紫外分光光度法也可用于中药制剂的鉴别。可用于中药制剂的鉴别。2.2.红外光谱法红外光谱法（五）光谱法五）光谱法 1.可见紫外分光光度法（五）光谱法19 （六）色谱法六）色谱法 中中药药制制剂剂可可用用色色谱谱法法鉴鉴定定，包包括括薄薄层层色色谱谱法法、纸纸色色谱谱法法、气气相相色色谱谱法法和和高高效液相色谱法。效液相色谱法。1.1.薄层色谱法薄层色谱法 使使用用本本法法鉴鉴定定中中药药制制剂剂，通通常常是是在在同同一一块块薄薄层层板板上上点点入入样样品品和和适适宜宜的的对对照照物物 采采用用同同一一条条件件依依法法层层析析展展开开，经经显显色色或或用用其其他他方方法法检检出出色色谱谱斑斑点点后后，将将样样品与对照物所得的色谱图进行对比，作出鉴定。品与对照物所得的色谱图进行对比，作出鉴定。（1 1）样品应作适当的预处理）样品应作适当的预处理 对样品进行初步的分离精制。对样品进行初步的分离精制。常常用用的的预预处处理理方方法法有有：升升华华法法，蒸蒸馏馏法法，溶溶剂剂提提取取法法，小小型型层层析析柱柱的的柱柱色色谱法、离子交换法等。谱法、离子交换法等。（2 2）展展开开剂剂的的选选择择 选选用用能能突突出出主主要要斑斑点点，便便于于分分析析比比较较的的展展开开剂剂，如如果鉴别的对象相同，应首先试用已有的、较成熟的展开剂。果鉴别的对象相同，应首先试用已有的、较成熟的展开剂。如如无无现现有有展展开开剂剂，可可先先以以无无水水乙乙醇醇-苯苯（1414）展展开开，如如主主要要物物质质的的RfRf在在0.80.8以以上上，改改用用苯苯-氯氯仿仿（1313），如如主主要要物物质质的的RfRf在在0.30.3以以下下，改改用用丙丙酮酮-甲甲醇（醇（1111）。）。（六）色谱法20 （3 3）对照品的选择）对照品的选择 中国药典中国药典(一部一部)作薄层鉴别用的对作薄层鉴别用的对照物有对照品和对照药材两种。照物有对照品和对照药材两种。TLC TLC用作中药制剂鉴别的另一类对照物是阴阳对照溶液。用作中药制剂鉴别的另一类对照物是阴阳对照溶液。（4 4）薄层色谱的扫描定性鉴别）薄层色谱的扫描定性鉴别 TLC TLC展开后，斑点的检展开后，斑点的检识方法，有通用性的，如在紫外光灯下观察出现的荧光，或识方法，有通用性的，如在紫外光灯下观察出现的荧光，或用碘蒸气、稀硫酸、磷钼酸显色等，这类方法专属性不强。用碘蒸气、稀硫酸、磷钼酸显色等，这类方法专属性不强。另一类是专属性较好的显色剂，例如碘化铋钾试液，茚三酮另一类是专属性较好的显色剂，例如碘化铋钾试液，茚三酮试液和三氯化铝试液等，一般可依次说明斑点归属。试液和三氯化铝试液等，一般可依次说明斑点归属。还还可可用用薄薄层层扫扫描描仪仪将将薄薄层层板板上上的的斑斑点点转转换换绘绘制制成成峰峰形形色色谱谱图图，这这种种色色谱谱图图以以斑斑点点展展开开后后移移动动的的距距离离为为横横坐坐标标，斑斑点点对对光光辐辐射射的的吸吸收收强强度度或或发发射射荧荧光光的的强强度度为为纵纵坐坐标标的的峰峰形形曲曲线线图图谱。谱。（3）对照品的选择 中国药典(一部)作薄层21 应用实例应用实例 1.1.大黄及含大黄的成药大黄及含大黄的成药 1 1）供试液制备）供试液制备 取各样品适量，加甲醇取各样品适量，加甲醇20ml20ml浸渍浸渍1h1h，过滤，取滤液，过滤，取滤液5ml5ml，蒸干，加水，蒸干，加水10ml10ml使溶解，再加使溶解，再加HCl 1mlHCl 1ml，水浴加热，水浴加热30min30min，立即冷却，乙醚提，立即冷却，乙醚提取两次，取两次，20ml/20ml/次，合并乙醚液，蒸干，残渣加氯仿溶解成次，合并乙醚液，蒸干，残渣加氯仿溶解成1ml1ml。2 2）对照液制备）对照液制备 取大黄对照药材取大黄对照药材0.1g0.1g按按供试液制备供试液制备作为对照药材溶液；作为对照药材溶液；另取芦荟大黄素，大黄酸，大黄素，大黄素甲醚，大另取芦荟大黄素，大黄酸，大黄素，大黄素甲醚，大黄酚对照品，加甲醇制成黄酚对照品，加甲醇制成1mg/ml1mg/ml的溶液，作为对照品溶液。的溶液，作为对照品溶液。3 3）薄层板）薄层板 硅胶硅胶H H加加0.30.3CMC-NaCMC-Na溶液的自制板；厚度：溶液的自制板；厚度：300um300um 4 4）点样）点样 分别点样分别点样4uL4uL。5 5）展开剂）展开剂 石油醚石油醚(30(3060)-60)-甲酸乙酯甲酸乙酯-甲酸甲酸(1551)(1551)放置后的上层放置后的上层溶液。溶液。应用实例22 6 6）展开方式）展开方式 上行展开；展距：上行展开；展距：7cm7cm。7 7）显色）显色 置紫外光灯置紫外光灯(365nm)(365nm)下检视。下检视。8 8）色谱识别）色谱识别 紫外光灯紫外光灯(365nm)(365nm)下，供试品色谱中，在与下，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的五个橙黄色荧光主斑点对照药材色谱相应的位置上，显相同的五个橙黄色荧光主斑点 9 9）备注）备注 在部分成药样品的色谱中，除大黄的五个蒽醌在部分成药样品的色谱中，除大黄的五个蒽醌成分的斑点外，尚有其它荧光斑点，为处方中的其它成分。成分的斑点外，尚有其它荧光斑点，为处方中的其它成分。6）展开方式 上行展开；展距：7cm。23 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 样品：样品：1 1芦荟大黄素；芦荟大黄素；2 2大黄酸；大黄酸；3 3大黄素；大黄素；4 4大黄素甲醚；大黄素甲醚；5 5大黄酚；大黄酚；6 6大黄大黄(掌叶大黄掌叶大黄)对照药材；对照药材；7 7大黄大黄(唐古特大黄唐古特大黄)对照药材；对照药材；8 8大黄流浸膏；大黄流浸膏；9 9小儿化毒散；小儿化毒散；10 10槟榔四消丸；槟榔四消丸；11 11木香槟榔丸；木香槟榔丸；12 12枳实导滞丸；枳实导滞丸；13 13牛黄上清丸；牛黄上清丸；14 14清宁丸；清宁丸；15 15一捻金；一捻金；16 16牛黄解毒片；牛黄解毒片；17 17牛黄解毒丸牛黄解毒丸加氢氧化钠试液课件24 2.黄连、黄柏及含黄连、黄柏的成药黄连、黄柏及含黄连、黄柏的成药 1 1）供试液制备）供试液制备 取各品种药粉适量，加甲醇取各品种药粉适量，加甲醇5ml5ml，置水浴回流，置水浴回流15min15min，过滤，过滤滤液浓缩至滤液浓缩至1ml1ml。2 2）对照液制备）对照液制备 取盐酸香槟酒小檗碱，硫酸黄连碱，硫酸表小檗碱，非取盐酸香槟酒小檗碱，硫酸黄连碱，硫酸表小檗碱，非 洲防己碱，药根碱，盐酸巴马汀对照品，加甲醇制成每洲防己碱，药根碱，盐酸巴马汀对照品，加甲醇制成每0.5mg/ml0.5mg/ml的溶液，作为的溶液，作为 对照品溶液。对照品溶液。3 3）薄层板）薄层板 硅胶硅胶G G自制板；厚度：自制板；厚度：500um 500um 4 4）点样）点样 分别点样分别点样1-2ul1-2ul 5 5）展开剂）展开剂 苯苯-醋酸乙酯醋酸乙酯-甲醇甲醇-异丙醇异丙醇-浓氨试液浓氨试液 (631.51.50.5)(631.51.50.5)另槽中加入与展开剂等体积浓氨试液另槽中加入与展开剂等体积浓氨试液 2.黄连、黄柏及含黄连、黄柏的成药25 6 6）展开方式）展开方式 展开箱预平衡展开箱预平衡1515分钟；上行展开；展距：分钟；上行展开；展距：8cm8cm 7 7）显色）显色 置紫外光灯置紫外光灯(365nm)(365nm)下检视。下检视。8 8）色谱识别）色谱识别 中国药典黄连项下收载有味连，雅连，中国药典黄连项下收载有味连，雅连，云连三种，总体分析黄连可见云连三种，总体分析黄连可见4 45 5个主要的黄色荧光斑点，自个主要的黄色荧光斑点，自下而上，分别为下而上，分别为l.l.非洲防己碱非洲防己碱+药根碱药根碱(量少量少)；2.2.巴马汀；巴马汀；3.3.小檗碱；小檗碱；4.4.表小檗碱表小檗碱(云连不含，雅连含量低云连不含，雅连含量低)；5.5.黄连碱黄连碱(味味连含量高连含量高)。黄柏主要检出巴马汀及小檗碱，可与黄连区别。黄柏主要检出巴马汀及小檗碱，可与黄连区别。6）展开方式 展开箱预平衡15分钟；上行26 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 样品：样品：1.1.黄连黄连(味连味连)；2.2.黄连；黄连；3.3.黄连黄连(雅连雅连)；4.4.黄连黄连(云连云连)；5.5.黄连黄连(野连野连)；6.6.黄连黄连(日本黄连日本黄连)；7.7.小儿化毒散；小儿化毒散；8.8.万应锭；万应锭；9.9.大补阴丸；大补阴丸；10.10.木香槟榔丸；木香槟榔丸；11.11.香连丸；香连丸；12.12.黄柏；黄柏；13.13.非洲防己碱；非洲防己碱；14.14.药根碱；药根碱；15.15.巴马汀；巴马汀；16.16.小檗碱；小檗碱；17.17.表小檗碱；表小檗碱；18.18.黄连碱。黄连碱。1 2 3 4 27 2.2.纸色谱法纸色谱法 3.3.气相色谱法气相色谱法 气相色谱法的分离效能高，检测器种类多而且灵敏度高，是气相色谱法的分离效能高，检测器种类多而且灵敏度高，是 混合物鉴别的有效方法。该法目前主要是用于含挥发油和挥混合物鉴别的有效方法。该法目前主要是用于含挥发油和挥 发性成分的制剂分析。发性成分的制剂分析。4.4.高效液相色谱法高效液相色谱法 主要是利用化合物在特定的色谱柱上，在一定条件下的保留主要是利用化合物在特定的色谱柱上，在一定条件下的保留 值，将某一样品与其对照品在同一条件下，进行保留时间的值，将某一样品与其对照品在同一条件下，进行保留时间的 直接比较作为鉴别依据。对于复杂未知成分，也可以加入对直接比较作为鉴别依据。对于复杂未知成分，也可以加入对 照品，观察被测峰是否增高，以初步作定性结论。对于复杂照品，观察被测峰是否增高，以初步作定性结论。对于复杂 组分尚可采用联机技术，如本法与质谱联用，先分离后再作组分尚可采用联机技术，如本法与质谱联用，先分离后再作 定性鉴别。定性鉴别。2.纸色谱法28第二节第二节 中药制剂杂质检查中药制剂杂质检查中制药制剂检查包括的主要内容：中制药制剂检查包括的主要内容：u制剂通则检查制剂通则检查u一般杂质检查一般杂质检查u特殊杂质检查特殊杂质检查u微生物限度检查微生物限度检查第二节 中药制剂杂质检查中制药制剂检查包括的主要内容：制剂29一、杂质的来源：一、杂质的来源：中药制剂中存在的杂质，来源于三个方面：中药制剂中存在的杂质，来源于三个方面：u由中药材原料中带入；由中药材原料中带入；u在生产制备过程中引入；在生产制备过程中引入；u贮存过程中受外界条件的影响而使中药制贮存过程中受外界条件的影响而使中药制剂剂 的理化性质改变而产生。的理化性质改变而产生。一、杂质的来源：中药制剂中存在的杂质，来源于三个方面：由中药30一般杂质：一般杂质：指在自然界中分布较广泛，在指在自然界中分布较广泛，在多种药材的采集、收购、加工以及制剂的多种药材的采集、收购、加工以及制剂的生产或贮存过程中容易引入的杂质。生产或贮存过程中容易引入的杂质。特殊杂质：特殊杂质：指在该制剂的生产和贮存过程指在该制剂的生产和贮存过程中，根据其来源、生产工艺及药品的性质中，根据其来源、生产工艺及药品的性质有可能引入的杂质。有可能引入的杂质。杂质的分类：杂质的分类：一般杂质：指在自然界中分布较广泛，在多种药材的采集、收购、加31二、杂质的限量检查二、杂质的限量检查 杂质限量：杂质限量：药物中所含杂质的最大允许量，通常药物中所含杂质的最大允许量，通常用百分之几或百万分之几来表示。用百分之几或百万分之几来表示。限量检查：限量检查：规定一定限度，要求所检样品中某组规定一定限度，要求所检样品中某组分含量不超过此限度。分含量不超过此限度。二、杂质的限量检查 杂质限量：32 三、杂质限量计算方法三、杂质限量计算方法 三、杂质限量计算方法33例：重金属限量计算：例：重金属限量计算：取供试品取供试品1.0g1.0g与标准铅溶液与标准铅溶液2.0ml2.0ml制成制成的对照液比较，计算重金属限量。的对照液比较，计算重金属限量。例：重金属限量计算：34第三节第三节 一般杂质检查方法一般杂质检查方法 一、重金属检查法：一、重金属检查法：（一）基本原理（一）基本原理1 1、在弱酸性条件下：、在弱酸性条件下：CHCH3 3CSNHCSNH2 2+H+H2 2OCHOCH3 3CONHCONH2 2+H+H2 2S S Pb Pb2+2+H+H2 2SPbS+2HSPbS+2H+2 2、在碱性条件下：、在碱性条件下：Pb Pb2+2+S+S2-2-PbSPbS第三节 一般杂质检查方法 一、重金属检查法：35（二）检查方法（二）检查方法 中国药典中国药典20052005版规定重金属检查方法有四种。版规定重金属检查方法有四种。第一法第一法 适用于供试品不经有机破坏，在酸性溶液中显色的重金属限量适用于供试品不经有机破坏，在酸性溶液中显色的重金属限量检查检查 取两支纳氏比色管取两支纳氏比色管甲管甲管乙管乙管标准铅溶液标准铅溶液+醋酸盐缓醋酸盐缓冲液（冲液（pH3.5pH3.5）2ml+2ml+水水或各药品项下规定的或各药品项下规定的溶剂稀释成溶剂稀释成25ml 25ml 供试品溶供试品溶液液25ml25ml硫代乙酰胺试液各硫代乙酰胺试液各2ml 2ml 摇匀摇匀 放置放置2min 2min 同置白纸上同置白纸上,自上向下透视自上向下透视 乙管中显出的颜色不得比甲管更深乙管中显出的颜色不得比甲管更深（二）检查方法第一法 甲管乙管标准铅溶液+醋酸盐缓冲液（pH36第二法第二法 适于供试品需灼烧破坏，取炽灼残渣项下遗留的残渣，经处理适于供试品需灼烧破坏，取炽灼残渣项下遗留的残渣，经处理后在酸性溶液中显色的重金属限检查。后在酸性溶液中显色的重金属限检查。取炽灼残渣项取炽灼残渣项下遗留的残渣下遗留的残渣 移置纳氏移置纳氏比色管中比色管中 蒸干至氧化蒸干至氧化氮蒸汽除尽氮蒸汽除尽 加硝酸加硝酸0.5ml0.5ml放放冷冷 加水加水15ml 15ml 置水浴置水浴上蒸干上蒸干 滴加氨试液至对滴加氨试液至对酚酞指示液显中性酚酞指示液显中性 加醋酸盐缓冲液加醋酸盐缓冲液（pH3.5pH3.5）2ml 2ml 加盐酸加盐酸2ml2ml微热微热溶解溶解 加水稀释加水稀释成成25ml 25ml 另取配制供试另取配制供试品溶液的试剂品溶液的试剂 置瓷皿中蒸干置瓷皿中蒸干 加醋酸盐缓冲液加醋酸盐缓冲液（pH3.5pH3.5）2ml 2ml 加水加水15ml 15ml 移置纳氏移置纳氏比色管中比色管中 微热微热溶解溶解 加标准铅加标准铅溶液一定量溶液一定量 用水稀释用水稀释成成25ml 25ml 以上两管溶液，以上两管溶液，照上述第一法检查照上述第一法检查 第二法 适于供试品需灼烧破坏，取炽灼残渣项下遗留的残37第三法第三法 适用于检查能溶于碱而不溶于稀酸（或在稀酸中即生成沉淀）适用于检查能溶于碱而不溶于稀酸（或在稀酸中即生成沉淀）的药品中的重金属检查。的药品中的重金属检查。置纳氏比色管中硫化钠试液置纳氏比色管中硫化钠试液5 5滴，摇匀滴，摇匀 甲管甲管乙管乙管标准铅溶液适量标准铅溶液适量氢氧化钠试液氢氧化钠试液5ml5ml水水20ml20ml硫化钠试硫化钠试液液5 5滴，摇匀滴，摇匀 供试品适量供试品适量氢氧化钠氢氧化钠试液试液5ml5ml水水20ml20ml溶解溶解 乙管中显出的颜色不得比甲管更深乙管中显出的颜色不得比甲管更深第三法 适用于检查能溶于碱而不溶于稀酸（或在稀酸中即38第四法第四法 适用于有色溶液或重金属限量低的品种。适用于有色溶液或重金属限量低的品种。用微孔滤膜过滤，用微孔滤膜过滤，使重金属硫化物深沉使重金属硫化物深沉富集成色斑后与一定富集成色斑后与一定量标准铅溶液获得的量标准铅溶液获得的色斑进行比较检查色斑进行比较检查 第四法 适用于有色溶液或重金属限量低的品种。39二、砷盐检查法二、砷盐检查法 砷盐检查法系指用于药品中微量砷（以砷盐检查法系指用于药品中微量砷（以AsAs计计算）限量检查的方法。算）限量检查的方法。（一）古蔡法（一）古蔡法 1.1.基本原理：基本原理：AsO AsO3 33-3-+3Zn+9H+3Zn+9H+AsHAsH3 3+3Zn+3Zn2+2+3H+3H2 2O O 二、砷盐检查法 砷盐检查法系指用于药品中微量砷（以A40 产生的砷化氢与溴化汞试纸作用产生的砷化氢与溴化汞试纸作用:AsH AsH3 3+2HgBr+2HgBr2 22HBr+AsH(HgBr)2HBr+AsH(HgBr)2 2 (黄色黄色)AsH AsH3 3+3 HgBr+3 HgBr2 23HBr 3+As(HgBr)3HBr 3+As(HgBr)3 3 (棕色棕色)五价五价砷在酸性溶液中也能被金属锌砷在酸性溶液中也能被金属锌还还原原为砷化氢，但生成砷化氢为砷化氢，但生成砷化氢比三价砷慢比三价砷慢。产生的砷化氢与溴化汞试纸作用:五价砷在酸性溶液中412.2.检查方法：检查方法：A A为为100ml100ml标准磨口锥形瓶标准磨口锥形瓶B B为中空的标准磨口塞为中空的标准磨口塞 C C为导气管为导气管,全长约全长约180mm180mmD D为具孔的有机玻璃旋塞为具孔的有机玻璃旋塞 E E为中央具有圆孔的有机玻璃旋塞盖为中央具有圆孔的有机玻璃旋塞盖古蔡法装置古蔡法装置 顶端平面上放一片溴化汞试纸顶端平面上放一片溴化汞试纸 盖上旋塞盖上旋塞E E并旋紧并旋紧 样品溶液样品溶液中装入醋酸铅棉花中装入醋酸铅棉花60mg60mg（装管高度为（装管高度为606080mm80mm）2.检查方法：A为100ml标准磨口锥形瓶B为中空的标准磨42(2)(2)标准砷斑的制备标准砷斑的制备 精密量取标准砷溶液精密量取标准砷溶液2ml2ml，置，置A A瓶中，加盐酸瓶中，加盐酸5ml5ml与水与水2ml2ml，再加碘，再加碘化钾试液化钾试液5ml5ml与酸性氯化亚锡试液与酸性氯化亚锡试液5 5滴，在室温放置滴，在室温放置1010分钟后，加锌粒分钟后，加锌粒2g2g，立即将照上法装妥的导气管，立即将照上法装妥的导气管C C密密塞于塞于A A瓶上，并将瓶上，并将A A瓶置瓶置25254040水水浴中反应浴中反应4545分钟，取出溴化汞试纸，分钟，取出溴化汞试纸，即得。即得。(2)标准砷斑的制备 43(3)(3)检查法检查法 取按各药品项下规定方法制成的供试取按各药品项下规定方法制成的供试品溶液，置品溶液，置A A瓶中，照标准砷斑的制备，自瓶中，照标准砷斑的制备，自“再加碘化钾试液再加碘化钾试液5ml”5ml”起，依法操作。将起，依法操作。将生成的砷斑与标准砷斑比较，不得更深。生成的砷斑与标准砷斑比较，不得更深。(3)检查法 44（二）二乙基二硫代氨基甲酸银法（二）二乙基二硫代氨基甲酸银法（Ag-DDCAg-DDC法）法）1.1.基本原理：基本原理：二乙基二硫代氨基甲酸银二乙基二硫代氨基甲酸银 二乙基二硫代氨基甲酸二乙基二硫代氨基甲酸（简称（简称Ag-DDCAg-DDC）（简称（简称HDDCHDDC）（二）二乙基二硫代氨基甲酸银法（Ag-DDC法）1.452.2.检查方法：检查方法：（1 1）仪器装置）仪器装置 A A为为100ml100ml标准磨口锥形瓶；标准磨口锥形瓶；B B为中空的标准磨口塞，为中空的标准磨口塞，C C上连导气管上连导气管;D;D为平底玻璃管为平底玻璃管 测试时，于导气管测试时，于导气管C C中装入醋酸铅棉花中装入醋酸铅棉花60mg60mg（装管高（装管高度为度为60-80mm60-80mm）；并于）；并于D D管中精密加入二乙基二硫代氨基甲管中精密加入二乙基二硫代氨基甲酸银试液酸银试液5ml5ml。（2 2）标准砷对照液的制备）标准砷对照液的制备 精密量取标准砷溶液精密量取标准砷溶液5ml5ml（3 3）检查法）检查法 将所得溶液与标准砷对照液同置白色背景将所得溶液与标准砷对照液同置白色背景上，从上，从D D管上方向下观察、比较，所得溶液的颜色不得比管上方向下观察、比较，所得溶液的颜色不得比标准砷对照液更深。标准砷对照液更深。2.检查方法：463.3.注意事项：注意事项：（1 1）有机碱液的选择）有机碱液的选择 该法需要加入一定量该法需要加入一定量的有机碱以中和反应中的二乙基二硫代氨基甲酸。的有机碱以中和反应中的二乙基二硫代氨基甲酸。（2 2）反应的温度和时间）反应的温度和时间 本法在本法在25254040水水浴中反应浴中反应4545分钟为宜。在此温度下，有部分氯仿分钟为宜。在此温度下，有部分氯仿挥发损失，故在比色前应添加氯仿至挥发损失，故在比色前应添加氯仿至5.00ml5.00ml，摇，摇匀后再进行比色测定。匀后再进行比色测定。3.注意事项：47三、干燥失重测定法三、干燥失重测定法1 1、药品的干燥失重：、药品的干燥失重：系指药品在规定的条件下，经干燥后所减系指药品在规定的条件下，经干燥后所减失的重量，主要是指水分、结晶水，但也包括失的重量，主要是指水分、结晶水，但也包括其他挥发性的物质如乙醇等。其他挥发性的物质如乙醇等。2 2、水分分为、水分分为必要的水分：即结晶水或组成水分；必要的水分：即结晶水或组成水分；不必要的水分不必要的水分:即附着水分或吸留的水分。即附着水分或吸留的水分。三、干燥失重测定法1、药品的干燥失重：483 3、检查方法、检查方法常用干燥失重测定法常用干燥失重测定法3、检查方法常用干燥失重测定法494 4、注意事项、注意事项（1 1）供试品的颗粒大小）供试品的颗粒大小 一般将颗粒控制在一般将颗粒控制在2mm2mm以以 下，若供试品为较大结晶，为了避免在研磨过程下，若供试品为较大结晶，为了避免在研磨过程 中水分等损失，应先迅速捣碎成中水分等损失，应先迅速捣碎成2mm2mm以下的小粒。以下的小粒。（2 2）供试品用量）供试品用量 除另有规定外，一般取供试品约除另有规定外，一般取供试品约1g1g。（3 3）铺设的厚度）铺设的厚度 应将供试品平铺在扁形称量瓶中，应将供试品平铺在扁形称量瓶中，厚度不可超过厚度不可超过5mm5mm，如为疏松物质，厚度不可超，如为疏松物质，厚度不可超 过过10 mm10 mm。（4 4）瓶盖的放置）瓶盖的放置 将称量瓶放入烘箱或干燥器中将称量瓶放入烘箱或干燥器中 时，应将瓶盖取下，置称量瓶旁或将瓶盖半开进时，应将瓶盖取下，置称量瓶旁或将瓶盖半开进 行干燥。取出时须将瓶盖盖好。在每次干燥后应行干燥。取出时须将瓶盖盖好。在每次干燥后应 先置干燥器内放冷至室温，然后称定重量。先置干燥器内放冷至室温，然后称定重量。4、注意事项50（5 5）如供试品未达到规定的干燥温度即融化）如供试品未达到规定的干燥温度即融化 时，应先将供试品置较低的温度下干燥时，应先将供试品置较低的温度下干燥 至大部分水分除去后，再按规定条件干至大部分水分除去后，再按规定条件干 燥。燥。（6 6）减压时需注意压力变化，如真空度较高）减压时需注意压力变化，如真空度较高 时，干燥器易爆炸！初次使用新干燥器时，干燥器易爆炸！初次使用新干燥器 时，宜用较厚的布包在外部，以防玻璃时，宜用较厚的布包在外部，以防玻璃 飞溅而引起伤害。飞溅而引起伤害。（7 7）恒重系指供试品连续）恒重系指供试品连续2 2次干燥后的重量次干燥后的重量 差异在差异在0.3mg0.3mg以下，干燥至恒重的第以下，干燥至恒重的第2 2次次 及以后各次的称重均应在规定条件下继及以后各次的称重均应在规定条件下继 续干燥续干燥1h1h后进行。后进行。加氢氧化钠试液课件51四、水分测定法四、水分测定法 水分测定法是指采用规定的方法对不同性质的水分测定法是指采用规定的方法对不同性质的中药材及其制剂进行水分含量测定。中药材及其制剂进行水分含量测定。干燥失重测定法除测定水分外尚含有挥发成分，干燥失重测定法除测定水分外尚含有挥发成分，而水分测定仅仅是测定供试品中的水分。而水分测定仅仅是测定供试品中的水分。因此，它们之间测定方法、测定条件和要求并不因此，它们之间测定方法、测定条件和要求并不尽相同。尽相同。四、水分测定法 水分测定法是指采用规定的方法对不同性质52（一）测定方法（一）测定方法烘干法烘干法 l本法适用于不含或含少量挥发性成分的药品本法适用于不含或含少量挥发性成分的药品 l测定方法：取供试品测定方法：取供试品2 25g5g平铺于干燥至恒重的扁形平铺于干燥至恒重的扁形称量瓶中，厚度不超过称量瓶中，厚度不超过5mm5mm，疏松样品不超过，疏松样品不超过10mm10mm，精，精密称定，打开瓶盖在密称定，打开瓶盖在100100105105干燥干燥5 5小时，将瓶盖盖小时，将瓶盖盖好，移置干燥器中，冷却好，移置干燥器中，冷却3030分钟，精密称定重量，再分钟，精密称定重量，再在上述温度干燥在上述温度干燥1 1小时，冷却，称重，至连续两次称重小时，冷却，称重，至连续两次称重的差异不超过的差异不超过5mg5mg为止。根据减失的重量，计算供试品为止。根据减失的重量，计算供试品中含水量（中含水量（%）。）。（一）测定方法烘干法 53 甲苯法甲苯法 l适用于含挥发性成分的药品适用于含挥发性成分的药品l测定方法：取供试品适量精密称定，置测定方法：取供试品适量精密称定，置A A瓶中，加甲瓶中，加甲苯约苯约200ml200ml，自冷凝管顶端加入甲苯，至充满，自冷凝管顶端加入甲苯，至充满B B管的狭管的狭细部分。将细部分。将A A瓶置电热套中或用其它适宜方法缓缓加热，瓶置电热套中或用其它适宜方法缓缓加热，待甲苯开始沸腾时，调节温度，使每秒钟馏出待甲苯开始沸腾时，调节温度，使每秒钟馏出2 2滴。馏滴。馏出液甲苯和水分进入水分测定管中，水的相对密度大出液甲苯和水分进入水分测定管中，水的相对密度大于甲苯，沉于底部，甲苯流回于甲苯，沉于底部，甲苯流回A A瓶中。待水分完全馏出，瓶中。待水分完全馏出，即测定管刻度部分的水量不再增加时，将冷凝管内部即测定管刻度部分的水量不再增加时，将冷凝管内部先用甲苯冲洗，再用饱蘸甲苯的长刷或其他适当方法，先用甲苯冲洗，再用饱蘸甲苯的长刷或其他适当方法，将管壁上附着的甲苯推下，继续蒸馏将管壁上附着的甲苯推下，继续蒸馏5 5分钟，放冷至室分钟，放冷至室温，拆卸装置，如有水粘附在温，拆卸装置，如有水粘附在B B管的管壁上，可用蘸甲管的管壁上，可用蘸甲苯的铜丝推下，放置，使水分与甲苯完全分离（可加苯的铜丝推下，放置，使水分与甲苯完全分离（可加显色剂）。检读水量，并计算供试品中含水量（显色剂）。检读水量，并计算供试品中含水量（%）。）。甲苯法水分测定装置甲苯法水分测定装置 甲苯法水分测定装置54（二）注意事项（二）注意事项 1.1.测定用的供试品，一般先破碎成直径不超过测定用的供试品，一般先破碎成直径不超过3mm3mm的的颗粒或碎片（破碎时不得使用高速粉碎机）。直径和长度颗粒或碎片（破碎时不得使用高速粉碎机）。直径和长度在在3mm3mm以下者可不破碎。如使用减压干燥法需先经二号筛。以下者可不破碎。如使用减压干燥法需先经二号筛。2.2.甲苯法中，为减少因甲苯与微量水混溶引起水分测甲苯法中，为减少因甲苯与微量水混溶引起水分测定结果偏低，在测定前，甲苯需先加少量水，充分振摇使定结果偏低，在测定前，甲苯需先加少量水，充分振摇使达饱和后放置，将水层分离弃去，经蒸馏后方可使用。达饱和后放置，将水层分离弃去，经蒸馏后方可使用。3.3.进行减压干燥时，减压操作宜逐渐进行，不可骤然进行减压干燥时，减压操作宜逐渐进行，不可骤然大幅度减压。大幅度减压。4.4.采用气相色谱法时需注意采用气相色谱法时需注意无水乙醇含水量约无水乙醇含水量约3%3%，标准溶液与供试品溶液的配制需用同一批号试剂。无水乙标准溶液与供试品溶液的配制需用同一批号试剂。无水乙醇中的含水量需要扣除。醇中的含水量需要扣除。含水量的计算采用外标法。含水量的计算采用外标法。（二）注意事项 1.测定用的供试品，一般先破碎成直径55五、炽灼残渣检查法五、炽灼残渣检查法 炽灼残渣（英国药典称为硫酸灰分）：炽灼残渣（英国药典称为硫酸灰分）：中药多由有机化合物组成，有机物经炽灼中药多由有机化合物组成，有机物经炽灼炭化，再加硫酸湿润炭化，再加硫酸湿润,加热使硫酸蒸气除尽后，加热使硫酸蒸气除尽后，于高温（于高温（700700800800）炽灼至完全灰化，使有）炽灼至完全灰化，使有机质破坏分解变为挥发性物质逸出，残留的非机质破坏分解变为挥发性物质逸出，残留的非挥发性无机杂质（多为金属的氧化物或无机盐挥发性无机杂质（多为金属的氧化物或无机盐类）成为硫酸盐。类）成为硫酸盐。五、炽灼残渣检查法 炽灼残渣（英国药典称为硫酸灰分）：56（一）检查方法（一）检查方法 取供试品取供试品1.01.02.02.0或各药品项下规定的重量，置已或各药品项下规定的重量，置已炽灼至恒重的坩埚中，精密称定，缓缓炽灼至完全炭化，炽灼至恒重的坩埚中，精密称定，缓缓炽灼至完全炭化，放冷至室温；除另有规定外，加硫酸放冷至室温；除另有规定外，加硫酸0.50.51ml1ml使湿润，使湿润，低温加热至硫酸蒸气除尽后，在低温加热至硫酸蒸气除尽后，在700700800800炽灼使完全炽灼使完全灰化，移置干燥器内，放冷至室温，精密称定后，再在灰化，移置干燥器内，放冷至室温，精密称定后，再在700700800800炽灼至恒重，即可。如需将残渣留作重金属炽灼至恒重，即可。如需将残渣留作重金属检查，则炽灼温度必须控制在检查，则炽灼温度必须控制在500500600600。（一）检查方法 57（二）注意事项（二）注意事项 1.1.取样量可根据炽灼残渣限量来决定，取样量过多，炭化及灰取样量可根据炽灼残渣限量来决定，取样量过多，炭化及灰化时间长，取样量少，炽灼残渣量少，称量误差大。化时间长，取样量少，炽灼残渣量少，称量误差大。2.2.加热时，必须小心地先用小火加热，以免供试品溅出坩埚外，