真核生物蛋白质合成课件

二、真核生物蛋白质合成二、真核生物蛋白质合成 真真核核生生物物蛋蛋白白质质合合成成过过程程类类似似于于原原核核细细胞胞的的蛋蛋白白质质生生物物合合成成过过程程，最最大大的的区区别别在在于于翻翻译译起起始始复复合合物物形形成成，以以及及各各阶阶段段所所使使用用的的蛋蛋白白质质因因子子的的种种类类和和数数量量的不同。的不同。1-二、真核生物蛋白质合成 真核生物蛋白质合成过（一）真核生物蛋白质的合成起始（一）真核生物蛋白质的合成起始umRNA：单顺反子、：单顺反子、m7Gppp和和poly(A)u核糖体：核糖体：40S小亚基小亚基+60S大亚基大亚基=80Su“活化活化”的起始的起始tRNA：Met-tRNAiMetu翻译起始因子（翻译起始因子（Initiation factor,IF）：种类多：种类多u其他：其他：GTP、Mg2+1、所需主要成分：、所需主要成分：2-（一）真核生物蛋白质的合成起始mRNA：单顺反子、m7Gp真核生物中主要翻译起始因子的种类和功能真核生物中主要翻译起始因子的种类和功能eIF,eukaryotic initiation factor3-真核生物中主要翻译起始因子的种类和功能eIF,eukaryn核糖体大、小亚基分离；核糖体大、小亚基分离；n起始起始Met-tRNAiMet与小亚基结合；与小亚基结合；nmRNA与核糖体小亚基结合；与核糖体小亚基结合；n小小亚亚基基沿沿mRNA链链向向3的的方方向向扫扫描描，定定位起始密码子位起始密码子AUG；n核糖体大亚基结合。核糖体大亚基结合。2、真核生物翻译起始复合物形成过程、真核生物翻译起始复合物形成过程4-核糖体大、小亚基分离；2、真核生物翻译起始复合物形成过程4-I.40S核糖体小亚基与起始因子eIF-3相结合，使得核糖体大小亚基分离；eIF-1进入A位；（1）5-40S核糖体小亚基与起始因子eIF-3相结合，使得核糖体大小II.在 eIF-5-GTP和 eIF-2-GTP的 帮 助 下，起 始 Met-tRNAiMet与40S小亚基相结合，形成43S前起始复合物；（2）6-在eIF-5-GTP和eIF-2-GTP的帮助下，起始MetIII.eIF-4F结合在mRNA的5-UTR；其中eIF-4E与“帽子”结构结合，eIF-4G可与eIF-4E及PBP结合，eIF-4A有解旋酶活性；（4）mRNA闭环翻译模型 PAB，polyA binding protein7-eIF-4F结合在mRNA的5-UTR；其中eIF-4E与IV.eIF-4B与eIF-4F结合，激活eIF-4A解旋酶活性，去除5-UT二级结构；43S前起始复合物与mRNA结合；（5）（6）8-eIF-4B与eIF-4F结合，激活eIF-4A解旋酶活性，V.43S前起始复合物沿mRNA向3端扫描移动并识别起始密码子AUG；（7）（8）AUG9-43S前起始复合物沿mRNA向3端扫描移动并识别起始密码子VI.eIF2水解ATP，使eIF3和它自己离开复合物；大小亚基结合；（8）（9）（10）10-eIF2水解ATP，使eIF3和它自己离开复合物；大小亚基VII.eIF5B水解ATP，释放其他起始因子，形成80S翻译起始复合体。（12）（11）（10）11-eIF5B水解ATP，释放其他起始因子，形成80S翻译起始复3、真、原核生物翻译起始的区别、真、原核生物翻译起始的区别 原原核核生生物物：30S小小亚亚基基首首先先与与mRNA模模板板相相结结合合，再再与与fMet-tRNAfMet结结合合，最最后后与与50S大大亚亚基基结结合合，形成形成70S起始复合物。起始复合物。真真核核生生物物：40S小小亚亚基基首首先先与与Met-tRNAiMet相相结结合合，再再与与模模板板mRNA结结合合，最最后后与与60S大大亚亚基基结结合合生生成成80S起始复合物。起始复合物。12-3、真、原核生物翻译起始的区别 原核生物：30S小亚基首先与（二）肽链的延伸（二）肽链的延伸 真真核核生生物物肽肽链链合合成成的的延延长长过过程程与与原原核核基基本本相相似似，都都包包含含进进位位、转转位位和和移移位位等等三三个个步步骤骤。整整个个延延伸伸过过程程除除延延伸伸因因子子种种类类不不同同外外，真真核核细细胞胞核核糖糖体体没有没有E位位，转位时空载，转位时空载tRNA直接从直接从P位脱落。位脱落。真核生物延伸因子真核生物延伸因子：EF-1和和EF-2原核生物延伸因子：原核生物延伸因子：EF-T(EF-Tu,EF-Ts)、EF-GEF-1：含含，和和等等3个亚基，个亚基，和和(EF-1A)的功能与的功能与EF-Tu相似，相似，(EF-1B)的功能与的功能与EF-Ts相似。相似。EF-2：功能与原核生物功能与原核生物EF-G相似相似13-（二）肽链的延伸 真核生物肽链合成的延长过程与（三）肽链的终止（三）肽链的终止真核生物释放因子真核生物释放因子：eRF原核生物释放因子原核生物释放因子：RF1、RF2、RF3eRF：一一方方面面可可识识别别UAA、UGA和和UAG等等所所有有终终止止密码子，另一方面可催化延伸复合物解体。密码子，另一方面可催化延伸复合物解体。真真核核生生物物肽肽链链合合成成的的终终止止过过程程除除释释放放因因子子不不同同外，其他与原核基本一致。外，其他与原核基本一致。14-（三）肽链的终止真核生物释放因子：eRF原核生物释放因子：RAP40S 5mRNAFree tRNAPolypeptideReleasefactorRibosomalSubunitseRFGTPANIMATION15-AP40S 5Free PolypeptideRele电镜下的观察到的多肽合成过程电镜下的观察到的多肽合成过程在多肽合成过程中，当第一个核糖体离开起始密码子后，空出的起始密码子的位置时，第二个核糖体的小亚基就会结合上来，并装配成完整的起始复合物，开始蛋白质的合成。同样，第三个核糖体、第四个核糖体、依次结合到mRNA上 16-电镜下的观察到的多肽合成过程在多肽合成过程中，当第一个核糖体多聚核糖体多聚核糖体（polyribosomes）-使蛋白质合成高速、使蛋白质合成高速、高效进行。高效进行。在多肽合成过程中，同一条mRNA分子能够同多个核糖体结合，同时合成若干条多肽链，结合在同一条mRNA上的核糖体就称为多聚核糖体。17-多聚核糖体（polyribosomes）-使蛋白质合成三、蛋白质合成的干扰与抑制三、蛋白质合成的干扰与抑制(p140-142)Interference&Inhibition of Protein Biosynthesis蛋白质生物合成是很多天然蛋白质生物合成是很多天然抗生素抗生素的作用靶点。它们的作用靶点。它们就是通过阻断真核、原核生物蛋白质翻译体系某组分就是通过阻断真核、原核生物蛋白质翻译体系某组分功能，干扰和抑制蛋白质生物合成过程而起作用的。功能，干扰和抑制蛋白质生物合成过程而起作用的。可针对蛋白质生物合成必需的关键组分作为研究新抗可针对蛋白质生物合成必需的关键组分作为研究新抗菌药物的作用靶点。同时尽量利用真核、原核生物蛋菌药物的作用靶点。同时尽量利用真核、原核生物蛋白质合成体系的任何差异，以设计、筛选仅对病原微白质合成体系的任何差异，以设计、筛选仅对病原微生物特效而不损害人体的药物。生物特效而不损害人体的药物。18-三、蛋白质合成的干扰与抑制(p140-142)Interf几种常见蛋白质合成抑制剂的结构式几种常见蛋白质合成抑制剂的结构式19-几种常见蛋白质合成抑制剂的结构式19-抗生素抗生素作用点作用点作用原理作用原理应用应用四环素族（金霉素四环素族（金霉素 新霉素、土霉素）新霉素、土霉素）链霉素、卡那霉素、链霉素、卡那霉素、新霉素新霉素氯霉素、林可霉素氯霉素、林可霉素红霉素红霉素梭链孢酸梭链孢酸 放线菌酮放线菌酮嘌呤霉素嘌呤霉素原核核糖体原核核糖体小亚基小亚基原核核糖体原核核糖体小亚基小亚基原核核糖体原核核糖体大亚基大亚基原核核糖体原核核糖体大亚基大亚基原核核糖体原核核糖体大亚基大亚基真核核糖体真核核糖体大亚基大亚基真核、原核真核、原核核糖体核糖体抑制氨基酰抑制氨基酰-tRNA与小亚基结合与小亚基结合改变构象引起读码错误、抑制改变构象引起读码错误、抑制起始起始抑制转肽酶、阻断延长抑制转肽酶、阻断延长抑制转肽酶、妨碍转位抑制转肽酶、妨碍转位与与EFG-GTP结合，抑制肽链延结合，抑制肽链延长长抑制转肽酶、阻断延长抑制转肽酶、阻断延长氨基酰氨基酰-tRNA类似物，进位后引类似物，进位后引起未成熟肽链脱落起未成熟肽链脱落抗菌药抗菌药抗菌药抗菌药抗菌药抗菌药抗菌药抗菌药抗菌药抗菌药医学研医学研究究抗肿瘤抗肿瘤药药抗生素抑制蛋白质生物合成的原理抗生素抑制蛋白质生物合成的原理 20-抗生素作用点作用原理应用四环素族（金霉素 新霉素、土霉素）原四环素族四环素族氯霉素氯霉素链霉素和卡那霉素链霉素和卡那霉素嘌呤霉素嘌呤霉素放线菌酮放线菌酮21-四环素族氯霉素链霉素和卡那霉素嘌呤霉素放线菌酮21-嘌呤霉素嘌呤霉素作用示意图作用示意图22-嘌呤霉素作用示意图22-四、四、蛋白质前体的加工与折叠蛋白质前体的加工与折叠1、N端端fMet或或Met的切除的切除 无无论论原原核核生生物物还还是是真真核核生生物物，N端端的的甲甲硫硫氨氨酸酸往往往往在在多多肽肽链链合合成成完完毕毕前前就就被被切切除除，此此过过程程是是由由氨肽酶（氨肽酶（amino peptidase）水解来完成的。）水解来完成的。2、二硫键的形成、二硫键的形成 mRNA中没有胱氨酸密码子，而不少蛋白质都中没有胱氨酸密码子，而不少蛋白质都含有二硫键。蛋白质合成后往往通过两个半胱氨酸含有二硫键。蛋白质合成后往往通过两个半胱氨酸的氧化作用生成胱氨酸。的氧化作用生成胱氨酸。（一）蛋白质前体的加工（一）蛋白质前体的加工23-四、蛋白质前体的加工与折叠1、N端fMet或Met的切除 二硫键的形成二硫键的形成24-二硫键的形成24-3、特定氨基酸的修饰、特定氨基酸的修饰 氨基酸侧链的修饰氨基酸侧链的修饰作用包括作用包括磷酸化磷酸化（如核糖（如核糖体蛋白质）、体蛋白质）、糖基化糖基化（如各种糖蛋白）、（如各种糖蛋白）、甲基化甲基化（如组蛋白、肌肉蛋白质）、（如组蛋白、肌肉蛋白质）、乙基化乙基化（如组蛋白）（如组蛋白）、羟基化羟基化（如胶原蛋白）和（如胶原蛋白）和羧基化羧基化等等。等等。发生在小牛组蛋白发生在小牛组蛋白H3前前35个氨基酸残基中的个氨基酸残基中的4种化学修饰种化学修饰25-3、特定氨基酸的修饰 氨基酸侧链的修饰作用包括蛋白质的磷酸化蛋白质的磷酸化 26-蛋白质的磷酸化 26-4、切除新生肽链中非功能片段、切除新生肽链中非功能片段 将多聚蛋白切开，成为几个成熟蛋白；将多聚蛋白切开，成为几个成熟蛋白；新生肽链新生肽链N和和C端多余部分的切除；端多余部分的切除；切除中间部分，余下的部分由二硫键链接；切除中间部分，余下的部分由二硫键链接；蛋白质的内含肽的剪接蛋白质的内含肽的剪接27-4、切除新生肽链中非功能片段 将多聚蛋白切开，成为几个成熟新生蛋白质经蛋白酶切割后变成有功能的成熟蛋白质。新生蛋白质经蛋白酶切割后变成有功能的成熟蛋白质。左左：新生蛋白质在去掉：新生蛋白质在去掉N端一部分残基后变成有功能的蛋白质；端一部分残基后变成有功能的蛋白质；右右：某些病毒（反转录病毒）可合成无活性的多聚蛋白质，经蛋白：某些病毒（反转录病毒）可合成无活性的多聚蛋白质，经蛋白酶切割后成为有功能成熟蛋白。酶切割后成为有功能成熟蛋白。28-新生蛋白质经蛋白酶切割后变成有功能的成熟蛋白质。28-前胰岛素原蛋白翻译后成熟过程示意图前胰岛素原蛋白翻译后成熟过程示意图29-前胰岛素原蛋白翻译后成熟过程示意图29-蜂毒蛋白只有经蛋白酶水解切除蜂毒蛋白只有经蛋白酶水解切除N-端的端的22个氨基酸以后才有个氨基酸以后才有生物活性。生物活性。30-蜂毒蛋白只有经蛋白酶水解切除N-端的22个氨基酸以后才有生物蛋白质剪接图解蛋白质剪接图解31-蛋白质剪接图解31-5、亚基的聚合、亚基的聚合 许多蛋白质是由二个以上亚基构成的，这就需许多蛋白质是由二个以上亚基构成的，这就需这些多肽链通过非共价键聚合成多聚体才能表现生这些多肽链通过非共价键聚合成多聚体才能表现生物活性。物活性。6、辅基结合、辅基结合uCytochrome C只只有有与与血血红红素素（heme）相相结结合合才才有有功能。功能。uAcetyl-CoA羧化酶常与羧化酶常与Biotin分子相结合。分子相结合。u例例如如：成成人人血血红红蛋蛋白白由由两两条条链链，两两条条链链及及四四分分子子血血红素所组成。红素所组成。32-5、亚基的聚合 许多蛋白质是由二个以上亚基构成（二）蛋白质的折叠（二）蛋白质的折叠体内蛋白质折叠与肽链合成同步进行。体内蛋白质折叠与肽链合成同步进行。蛋白质的折叠是当前生命科学领域的研究前沿之一。蛋白质的折叠是当前生命科学领域的研究前沿之一。33-（二）蛋白质的折叠体内蛋白质折叠与肽链合成同步进行。蛋白质的需要助折叠蛋白（需要助折叠蛋白（folding helper）的参与：）的参与：A、折叠酶、折叠酶蛋白质二硫键异构酶（蛋白质二硫键异构酶（protein disulfide isomerase，PDI)：B、分子伴侣（、分子伴侣（Molecular chaperone）定定义义：细细胞胞内内帮帮助助新新生生肽肽链链正正确确组组装装为为成成熟熟蛋蛋白白质质，而而本本身身却不是最终功能蛋白质分子的组成成分的分子。却不是最终功能蛋白质分子的组成成分的分子。肽基脯氨酸顺反异构酶（肽基脯氨酸顺反异构酶（peptidyl prolyl cis-trans isomerase，PPI)可以识别和水解非正确配对的二硫键，使它们在正确的可以识别和水解非正确配对的二硫键，使它们在正确的半胱氨酸残基位置上重新形成二硫键；半胱氨酸残基位置上重新形成二硫键；催化加速肽基脯氨酸的顺反异构化，在蛋白质的折叠催化加速肽基脯氨酸的顺反异构化，在蛋白质的折叠/解解折叠中起重要作用。它也可能参与蛋白质复合物的组装折叠中起重要作用。它也可能参与蛋白质复合物的组装/解组解组装、蛋白质运输及调节蛋白质活性。装、蛋白质运输及调节蛋白质活性。34-需要助折叠蛋白（folding helper）的参与：A、折分类：分类：伴伴 侣侣 素素 家家 族族（chaperonin,Cpn）应激蛋白家族应激蛋白家族(Stress family)热休克蛋白热休克蛋白 70 家族家族（Hsp70）heat shock protein family热休克蛋白热休克蛋白 90 家族（家族（Hsp90）功能：功能：可阻止多肽的错误折叠。可阻止多肽的错误折叠。和和部部分分折折叠叠或或没没有有折折叠叠的的蛋蛋白白质质分分子子结结合合，稳稳定定其其构构象象，免免遭遭其其它它酶酶的的水水解解或或促促进进蛋蛋白白质质折折叠叠成成正正确确的的空间结构。空间结构。35-分类：伴侣素家族（chaperonin,Cpn）第三节第三节 蛋白质的运转机制蛋白质的运转机制（Mechanism of Protein translocation）36-第三节 蛋白质的运转机制（Mechanism of Prot 细细胞胞各各部部分分都都有有特特定定的的蛋蛋白白质质组组分分，因因此此合合成成的的蛋蛋白白质质必必须须准准确确无无误误地地定定向向运运送送才才能能保保证证生生命命活活动的正常进行。动的正常进行。37-细胞各部分都有特定的蛋白质组分，因此合成的蛋 蛋蛋白白质质的的合合成成和和运运转转是是同同时时发发生生的的，则则属属于于翻翻译译运运转转同同步步机机制制；若若蛋蛋白白质质从从核核糖糖体体上上释释放放后后才才发发生运转，则属于生运转，则属于翻译后运转机制翻译后运转机制。38-蛋白质的合成和运转是同时发生的，则属于翻译运蛋白性质 运转机制 主要类型 分泌 蛋白质在结合核糖体上合成，并以翻译-运转同步机制运输免疫球蛋白、卵蛋白、水解酶、激素等细胞器发育 蛋白质在游离核糖体上合成，以翻译后运转机制运输 细胞核、叶绿体、线粒体、乙醛酸循环体、过氧化物酶体等细胞器中的蛋白质 膜的形成 两种机制兼有 质膜、内质网、类囊体中的蛋白质 几类主要蛋白质的运转几类主要蛋白质的运转39-蛋白性质 运转机制 主要类型 蛋白质在结合核糖体上合成，并以40-40-一、翻译一、翻译-运转同步运转同步（co-translational translocation）（一）信号肽假说（一）信号肽假说 认认为为编编码码分分泌泌蛋蛋白白的的mRNA在在翻翻译译时时首首先先合合成成的的是是N-末末端端带带有有疏疏水水氨氨基基酸酸残残基基的的信信号号肽肽，它它被被内内质质网网膜膜上上的的受受体体识识别别并并与与之之相相结结合合。信信号号肽肽经经由由膜膜中中蛋蛋白白质质形形成成的的孔孔道道到到达达内内质质网网内内腔腔，随随即即被被位位于于腔腔表表面面的的信信号号肽肽酶酶水水解解，由由于于它它的的引引导导，新新生生的的多多肽肽就就能能够够通通过过内内质质网网膜膜进进入入腔腔内内，最最终终被被分分泌泌到到胞胞外外。翻翻译译结结束束后后，核核糖糖体体亚亚基基解解聚聚、孔孔道道消消失失，内内质质网网膜膜又又恢恢复复原原先的脂双层结构。先的脂双层结构。41-一、翻译-运转同步（co-translational tra信号序列特点：信号序列特点：（1）一般带有）一般带有10-15个个疏水氨基酸疏水氨基酸；（2）在在靠靠近近该该序序列列N-端端常常常常有有1个个或或数数个个带带正正电电荷荷的的氨氨基酸基酸；（3）在在其其C-末末端端靠靠近近蛋蛋白白酶酶切切割割位位点点处处常常常常带带有有数数个个极极性性氨氨基基酸酸，离离切切割割位位点点最最近近的的那那个个氨氨基基酸酸往往往往带带有有很短的侧链（丙氨酸或甘氨酸）。很短的侧链（丙氨酸或甘氨酸）。信号肽：信号肽：指新合成多肽链中用于指导蛋白质跨膜转移的指新合成多肽链中用于指导蛋白质跨膜转移的N-末末端氨基酸序列（端氨基酸序列（13-36个氨基酸残基）。个氨基酸残基）。42-信号序列特点：（1）一般带有10-15个疏水氨基酸；信号肽：信号肽序列信号肽序列43-信号肽序列43-（二）新生蛋白质通过同步转运途径进入内（二）新生蛋白质通过同步转运途径进入内质网内腔的机制质网内腔的机制SRP（信号识别蛋白）（信号识别蛋白）SRP的受体的受体-DP（停靠蛋白）（停靠蛋白）44-（二）新生蛋白质通过同步转运途径进入内质网内腔的机制SRP（新生蛋白质通过同步转运途径进入内质网内腔的新生蛋白质通过同步转运途径进入内质网内腔的主要过程主要过程45-新生蛋白质通过同步转运途径进入内质网内腔的45-二、翻译后运转（二、翻译后运转（post-translational translocation）(一一)转运到线粒体（转运到线粒体（mitochondria）(二二)转运到叶绿体（转运到叶绿体（chloroplast）(三三)转运到细胞核（转运到细胞核（nuclear）蛋白质的合成主要是在细胞质中，细胞器不能蛋白质的合成主要是在细胞质中，细胞器不能或很少合成蛋白质。因此，构成细胞器的各种蛋白或很少合成蛋白质。因此，构成细胞器的各种蛋白质在细胞质内游离核糖体上合成后，需要向不同细质在细胞质内游离核糖体上合成后，需要向不同细胞器进行运输。胞器进行运输。46-二、翻译后运转（post-translational tra（一）线粒体蛋白质跨膜运转（一）线粒体蛋白质跨膜运转1、运转到线粒体内腔、运转到线粒体内腔2、运转到线粒体内膜腔、运转到线粒体内膜腔 A.保留性机制保留性机制 B.非保留性机制非保留性机制类型：类型：47-（一）线粒体蛋白质跨膜运转1、运转到线粒体内腔2、运转到线粒（1）通通过过线线粒粒体体膜膜的的蛋蛋白白质质运运转转之之前前大大多多数数以以前前体体形形式式存存在在，由由成成熟熟蛋蛋白白质质和和位位于于N端端的的2080个个残基的残基的前导肽（前导肽（leader peptide）组成；组成；（2）蛋蛋白白质质跨跨线线粒粒体体膜膜运运转转时时，首首先先由由外外膜膜上上的的Tom受受 体体 复复 合合 蛋蛋 白白 识识 别别 与与 Hsp70或或 MSF(mitochondrial import stimulation factor)等等分分子子伴伴侣侣相相结结合合的的待待运运转转多多肽肽，通通过过Tom和和Tim组组成成的的膜膜通通道道进进入入线线粒粒体体内内腔腔；是是一一种种需需能能过过程。程。1、运转到线粒体内腔、运转到线粒体内腔48-（1）通过线粒体膜的蛋白质运转之前大多数以前体形式存在，由成蛋白质运转到线粒蛋白质运转到线粒体内腔的过程体内腔的过程49-蛋白质运转到线粒体内腔的过程49-2、运转到线粒体内膜腔、运转到线粒体内膜腔A.保留性机制（保留性机制（conservative sorting mechanism）细细胞胞色色素素c1采采用用这这种种机机制制。其其含含有有2个个信信号号序序列列：第第一一个个是是前前导导肽肽序序列列，引引导导蛋蛋白白质质进进入入线线粒粒体体内内腔腔；整整个个蛋蛋白白质质进进入入内内腔腔后后，第第一一个个信信号号序序列列被被切切除除，第第二二个个信信号号序序列列（含含有有连连续续的的不不带带电电荷荷的的氨氨基基酸酸）引引导它跨越内膜进入内膜腔导它跨越内膜进入内膜腔。50-2、运转到线粒体内膜腔A.保留性机制（conservatiB.非保留性机制（非保留性机制（non-conservative sorting mechanism）u细细胞胞色色素素b2进进入入内内膜膜腔腔时时这这个个信信号号序序列列阻阻止止它它的的转转运运，然然后后离离开开受受体体蛋蛋白白通通道道，并并锚锚定定在在内内膜膜中中；内内膜膜腔腔中中的的蛋蛋白白酶酶将将信信号号序序列列切切割割下下来来，把把蛋蛋白白质质释释放放到到内内膜膜腔内。腔内。u细细胞胞色色素素b2采采用用该该机机制制，其其第第二二个个信信号号序序列列是是“止止运入运入”序列。序列。51-B.非保留性机制（non-conservative sor细胞色素细胞色素c1和细胞色素和细胞色素b2转运到内膜腔的模型转运到内膜腔的模型52-细胞色素c1和细胞色素b2转运到内膜腔的模型52-（二）叶绿体蛋白质跨膜运转（二）叶绿体蛋白质跨膜运转 叶叶绿绿体体多多肽肽在在胞胞质质中中的的游游离离核核糖糖体体上上合合成成后后，脱脱离离核核糖糖体体并并折折叠叠成成具具有有三三级级结结构构的的蛋蛋白白质质分分子子，多多肽肽上上某某些些特特定定位位点点结结合合于于只只有有叶叶绿绿体体膜膜上上才才有有的的特特异异受受体体位位点点。叶叶绿绿体体定定位位信信号号一一般般有有两两个个部部分分，第第一一部部分分决决定定该该蛋蛋白白质质能能否否进进入入叶叶绿绿体体基基质质，第第二二部分决定该蛋白部分决定该蛋白能否进入类囊体能否进入类囊体。53-（二）叶绿体蛋白质跨膜运转 叶绿体多肽在胞质中叶绿体蛋白质跨叶绿体蛋白质跨膜运转膜运转54-叶绿体蛋白质跨膜运转54-（三）核定位蛋白的运转机制（三）核定位蛋白的运转机制55-（三）核定位蛋白的运转机制55-u核定位蛋白质是通过核膜上的核定位蛋白质是通过核膜上的核孔核孔进入细胞核；进入细胞核；u输输 入入 细细 胞胞 核核 的的 蛋蛋 白白 质质 都都 含含 核核 定定 位位 信信 号号 序序 列列（nuclear localization signal,NLS）。vNLS可以位于核蛋白的任何部位；一般都不被切除。可以位于核蛋白的任何部位；一般都不被切除。u核核定定位位蛋蛋白白质质转转运运涉涉及及到到多多种种蛋蛋白白质质和和辅辅助助因因子子，如如转转运运受受体体importin和和exportin（分分别别负负责责蛋蛋白白质质输输入和输出），以及入和输出），以及Ran（GTP 酶酶）等）等.u蛋白质输出细胞核的过程与输入细胞核相似蛋白质输出细胞核的过程与输入细胞核相似56-核定位蛋白质是通过核膜上的核孔进入细胞核；输入细胞核的蛋白质核定位蛋白跨细核定位蛋白跨细胞核膜运转过程胞核膜运转过程57-核定位蛋白跨细胞核膜运转过程57-三、蛋白质的降解三、蛋白质的降解 蛋白质降解是一个有序的过程。当细胞中存在有蛋白质降解是一个有序的过程。当细胞中存在有错误或半衰期很短的蛋白质时，蛋白质降解系统就会错误或半衰期很短的蛋白质时，蛋白质降解系统就会发生作用。发生作用。原核生物（大肠杆菌）：原核生物（大肠杆菌）：通通过过一一个个依依赖赖于于ATP的的蛋蛋白白酶酶（称称为为Lon）来来实实现现的的。每每切除一个肽键要消耗两分子切除一个肽键要消耗两分子ATP。真核生物：真核生物：降降解解依依赖赖于于一一个个只只有有76个个氨氨基基酸酸残残基基、其其序序列列高高度度保保守守的的泛泛素素蛋蛋白白（Ubiquitin）。细细胞胞内内即即将将被被降降解解的的蛋蛋白白首首先先在在ATP的的作作用用下下与与泛泛蛋蛋白白相相连连，并并将将该该复复合合体体运运送送到到特特定定的的蛋蛋白降解体系中直到完全降解。白降解体系中直到完全降解。58-三、蛋白质的降解 蛋白质降解是一个有序的过程。本章结束本章结束谢谢！谢谢！59-本章结束59-60-60-61-61-62-62-63-63-64-64-65-65-66-66-67-67-68-谢 谢！68-