蛋白质与非蛋白含氮化合物检验课件

22 七月 2024蛋白质与非蛋白含氮化蛋白质与非蛋白含氮化合物检验合物检验蛋白质是机体生命活动的物质基础，许多蛋白质是机体生命活动的物质基础，许多疾病均可引发蛋白质代谢紊乱，导致血浆疾病均可引发蛋白质代谢紊乱，导致血浆蛋白质的种类与含量变化，对其进行监测蛋白质的种类与含量变化，对其进行监测分析可用于诊断疾病和监测病情分析可用于诊断疾病和监测病情。第一节第一节 蛋白质与非蛋白含氮化合物蛋白质与非蛋白含氮化合物 人体中蛋白质种类约有十万种之多，大人体中蛋白质种类约有十万种之多，大部分是细胞或器官的结构蛋白，少部分是部分是细胞或器官的结构蛋白，少部分是存在于细胞内外液的可溶性蛋白质。存在于细胞内外液的可溶性蛋白质。可溶性蛋白质的功能非常广泛，在许多可溶性蛋白质的功能非常广泛，在许多疾病状态下体液蛋白质可出现异常。疾病状态下体液蛋白质可出现异常。血液的基本组成血液的基本组成及有关概念及有关概念血液血液 液态的血浆液态的血浆有形的血细胞有形的血细胞 红细胞红细胞白细胞白细胞血小板血小板一、血浆蛋白质一、血浆蛋白质概念概念全血：由液态的血浆和有形的血细胞组成。全血：由液态的血浆和有形的血细胞组成。血浆：全血中的液体成分，是含有多种溶质血浆：全血中的液体成分，是含有多种溶质 的黄色水溶液。约占全血的黄色水溶液。约占全血 容积的容积的50%50%60%60%血清：血液凝固，血块收缩后析出的淡血清：血液凝固，血块收缩后析出的淡 黄色清液。黄色清液。（二）血浆（二）血浆 1 1血浆的组成血浆的组成2 2血浆中的白蛋白、球蛋白、纤维蛋白、血浆中的白蛋白、球蛋白、纤维蛋白、无机盐的作用无机盐的作用血浆蛋白（白蛋白、球蛋白、纤维蛋白原）：血浆蛋白（白蛋白、球蛋白、纤维蛋白原）：白蛋白：主要形成血浆胶体渗透压。白蛋白：主要形成血浆胶体渗透压。球蛋白：主要参与机体免疫。球蛋白：主要参与机体免疫。纤维蛋白：主要参与凝血。纤维蛋白：主要参与凝血。小分子晶体物质（无机盐、葡萄糖、氨基酸等）小分子晶体物质（无机盐、葡萄糖、氨基酸等）无无机机盐盐：主主要要形形成成血血浆浆晶晶体体渗渗透透压压及及维维持持体体液液酸酸碱碱平衡。平衡。葡萄糖、氨基酸等：葡萄糖、氨基酸等：供能、营养。供能、营养。血浆蛋白质是血浆固体成分中含量最多、血浆蛋白质是血浆固体成分中含量最多、组成复杂、功能广泛的一类化合物。组成复杂、功能广泛的一类化合物。血浆蛋白质功能血浆蛋白质功能1.直接在血液中发挥作用直接在血液中发挥作用在血浆中运载弱水溶性物质在血浆中运载弱水溶性物质维持血浆胶体渗透压维持血浆胶体渗透压组成血液组成血液pH缓冲系统缓冲系统参与凝血与纤维蛋白溶解参与凝血与纤维蛋白溶解2.需要时进入组织发挥作用需要时进入组织发挥作用对组织蛋白起修补作用对组织蛋白起修补作用血浆固有酶在血浆发挥作用血浆固有酶在血浆发挥作用组成体液免疫防御系统组成体液免疫防御系统抑制组织蛋白酶抑制组织蛋白酶参与代谢调控作用的激素参与代谢调控作用的激素（二）血浆蛋白质的分类二）血浆蛋白质的分类1 1功能分类法功能分类法复杂复杂 运输载体运输载体凝血与纤溶蛋白凝血与纤溶蛋白免疫球蛋白和补体蛋白免疫球蛋白和补体蛋白蛋白酶抑制物蛋白酶抑制物蛋白类激素蛋白类激素血酶类血酶类2.2.电泳分类法电泳分类法 醋酸纤维素薄膜电泳一般可将血清蛋白质分为醋酸纤维素薄膜电泳一般可将血清蛋白质分为白蛋白、白蛋白、1 1、2 2、球蛋白球蛋白5 5条主要区带。条主要区带。正常血清蛋白电泳图谱增示意图及其扫描曲线正常血清蛋白电泳图谱增示意图及其扫描曲线 血清蛋白电泳的正常组分血清蛋白电泳的正常组分二、血清总蛋白及主要组分正常与异常电泳二、血清总蛋白及主要组分正常与异常电泳 人血浆总蛋白人血浆总蛋白(total protein(total protein，TP)TP)浓度为浓度为606080g/L80g/L临床实验室采用的标本多为血清临床实验室采用的标本多为血清测定血清测定血清TPTP的首选方法：双缩脲法的首选方法：双缩脲法样品采集时，患者应置仰卧位，直立时升高。样品采集时，患者应置仰卧位，直立时升高。静脉采血时止血带压迫静脉时间超过静脉采血时止血带压迫静脉时间超过3min3min，TPTP也可上升也可上升10%10%。剧烈运动后立即采血剧烈运动后立即采血TPTP最多可升高最多可升高12%12%。（二）异常电泳图谱的临床意义（二）异常电泳图谱的临床意义1.1.异常血清蛋白电泳图谱分型异常血清蛋白电泳图谱分型 2.2.典型异常血清蛋白电泳图谱典型异常血清蛋白电泳图谱3 3 浆细胞病与浆细胞病与M M蛋白蛋白 异常血清蛋白质电泳图谱的分型及其特征异常血清蛋白质电泳图谱的分型及其特征图谱类型图谱类型TPAlb12 低蛋白血症型低蛋白血症型NNN肾病型肾病型NN肝硬化型肝硬化型NNN-（融合）（融合）弥漫性肝损害型弥漫性肝损害型N慢性炎症型慢性炎症型急性时相反应型急性时相反应型NNNM蛋白血症型蛋白血症型在在-区区 带带 中中 出出 现现 M 蛋蛋 白白 区带区带高高2()-球蛋白血症型球蛋白血症型 妊娠型妊娠型N N蛋白质缺陷型蛋白质缺陷型个个 别别 区区 带带 出出 现现 特特 征征 性性 缺缺 乏乏2典型异常血清蛋白电泳图谱典型异常血清蛋白电泳图谱 A 正常人正常人 B肾病综合征肾病综合征 C 肝硬化肝硬化(-桥桥)D 肝硬化肝硬化(不典型不典型-桥桥)E 多发性骨髓瘤多发性骨髓瘤IgA型型 F 多发性骨髓瘤多发性骨髓瘤IgG型型血浆蛋白质的性质功能及其与电泳区带的关系血浆蛋白质的性质功能及其与电泳区带的关系电泳区带电泳区带蛋白质种类蛋白质种类成人参考值成人参考值（g/L）半寿期半寿期（d）分子量分子量（kD）等电点等电点含糖量含糖量(%)功能功能前清蛋白前清蛋白前清蛋白前清蛋白0.20.41.9554.70.5营养、运载营养、运载清蛋白清蛋白清蛋白清蛋白3552151966.245.80维持胶压、运载和营维持胶压、运载和营养等养等1-球蛋白球蛋白1-抗胰蛋白酶抗胰蛋白酶0.92.04524.812蛋白酶抑制剂蛋白酶抑制剂1-酸性糖蛋白酸性糖蛋白0.51.25402.7445免疫应答修饰剂免疫应答修饰剂甲胎蛋白甲胎蛋白310569胎儿期蛋白胎儿期蛋白高密度脂蛋白高密度脂蛋白1.73.25200胆固醇逆转运胆固醇逆转运2-球蛋白球蛋白结合珠蛋白结合珠蛋白0.32.02854004.112结合血红蛋白结合血红蛋白2-巨球蛋白巨球蛋白1.33.057205.48蛋白酶抑制剂蛋白酶抑制剂铜蓝蛋白铜蓝蛋白0.10.44.51324.4铁氧化酶铁氧化酶-球蛋白球蛋白转铁蛋白转铁蛋白2.03.6779.65.76运铁到胞内运铁到胞内低密度脂蛋白低密度脂蛋白0.61.55300运胆固醇到组织运胆固醇到组织C30.91.81852补体成分补体成分C40.10.42067补体成分补体成分2-微球蛋白微球蛋白0.0010.00211.8纤维蛋白原纤维蛋白原2.04.02.53405.53凝血因子凝血因子-球蛋白球蛋白IgG7.0162414415067.33免疫球蛋白免疫球蛋白IgA0.74.061608免疫球蛋白免疫球蛋白IgM0.42.3597012免疫球蛋白免疫球蛋白C-反应蛋白反应蛋白51156.20炎症介质炎症介质（一）前白蛋白（一）前白蛋白 （prealbuminprealbumin，PAPA）分子量分子量55kD55kD由肝脏细胞合成的四亚基蛋白质由肝脏细胞合成的四亚基蛋白质电泳时迁移在电泳时迁移在AlbAlb之前之前半寿期半寿期2.5d2.5d与视黄醇结合蛋白组成复合体与视黄醇结合蛋白组成复合体作为组织修补材料和运载蛋白作为组织修补材料和运载蛋白2.2.检测检测 目前多采用免疫透射比浊法目前多采用免疫透射比浊法3.3.临床意义临床意义（一）前白蛋白（一）前白蛋白 （prealbuminprealbumin，PAPA）作为营养不良的指标作为营养不良的指标作为肝功能不全的指标作为肝功能不全的指标负性急性时相反应蛋白负性急性时相反应蛋白PA:200PA:200400mg/L 400mg/L 正常正常PA:100PA:100150mg/L 150mg/L 轻度缺乏轻度缺乏PA:50PA:50100mg/L 100mg/L 中度缺乏中度缺乏PAPA50mg/L 50mg/L 严重缺乏严重缺乏视黄醇结合蛋白视黄醇结合蛋白 (retinol-binding protein，RBP)肝脏合成，肝脏合成，21kD，半寿期，半寿期12h携带视黄醇从肝脏转运到各种靶组织。携带视黄醇从肝脏转运到各种靶组织。与与PA以以1:1比例结合，避免比例结合，避免RBP从肾小球滤过。从肾小球滤过。在靶细胞，在靶细胞，TTR-RBP降解后，视黄醇被摄入细胞。降解后，视黄醇被摄入细胞。RBP被肾小球滤出，肾近端小管细胞吸收并降解被肾小球滤出，肾近端小管细胞吸收并降解。【临床意义】【临床意义】血浆血浆RBP增高见于肾小球损伤增高见于肾小球损伤 血浆血浆RBP下降见于：下降见于：急性时相反应、肝脏疾病和蛋白质营养不良急性时相反应、肝脏疾病和蛋白质营养不良 尿液尿液RBP排泄量增加可反映肾小管功能损害排泄量增加可反映肾小管功能损害（三）白蛋白（三）白蛋白 （albuminalbumin，AlbAlb）血浆中含量最多的蛋白质血浆中含量最多的蛋白质585585个氨基酸残基组成个氨基酸残基组成分子量分子量66.2kD66.2kD含含1717个二硫键，是个二硫键，是不含糖不含糖的血浆蛋白质的血浆蛋白质肝实质细胞合成，每天合成肝实质细胞合成，每天合成11-14.7g11-14.7g。半寿期半寿期18-20 d18-20 d最重要血浆营养蛋白最重要血浆营养蛋白,最重要血浆载体蛋白最重要血浆载体蛋白维持血浆胶体渗透压：血浆渗透压的维持血浆胶体渗透压：血浆渗透压的75%75%80%80%由由AlbAlb维持维持血浆中主要的载体蛋白，具有结合各种配体分子的能力血浆中主要的载体蛋白，具有结合各种配体分子的能力缓冲酸碱维持酸碱平衡作用缓冲酸碱维持酸碱平衡作用高度溶于水，能运载许多疏水分子高度溶于水，能运载许多疏水分子 生理生理pHpH中为负离子，每分子带中为负离子，每分子带200200个负电荷个负电荷 运输胆红素运输胆红素.长链脂肪酸长链脂肪酸.胆汁酸盐胆汁酸盐.前列腺素前列腺素.类固醇激类固醇激素素,无机离子无机离子(如如Ca2+Ca2+、Cu2+Cu2+、Ni2+).Ni2+).药物药物(如阿司匹林、青如阿司匹林、青霉素霉素)结合型激素和药物无活性，结合型激素和药物无活性，ALBALB含量或含量或pHpH变化时其活性变化变化时其活性变化【检测方法】【检测方法】包括电泳法、免疫化学法和染料结合法。包括电泳法、免疫化学法和染料结合法。电泳法只能测其百分含量，乘电泳法只能测其百分含量，乘TP浓度得其浓度浓度得其浓度用于用于ALB定量不方便且精密度不如直接定量定量不方便且精密度不如直接定量 免疫化学法包括免疫比浊法和放射免疫法等免疫化学法包括免疫比浊法和放射免疫法等特异性好、灵敏度高，特异性好、灵敏度高，ALB易纯化、抗血清易制备，易纯化、抗血清易制备，适合尿液和脑脊液等低浓度适合尿液和脑脊液等低浓度ALB的测定的测定 血清血清ALB测定可采用染料结合法测定可采用染料结合法【参考区间】【参考区间】随年龄有所变化，随年龄有所变化，04天：天：2844 g/L 4天天14岁：岁：3854 g/L，此后下降，此后下降 成人：成人：3552 g/L，60岁岁 为为3246 g/L 走动者走动者 比卧床者平均高比卧床者平均高3 g/L【医学决定水平】：【医学决定水平】：35gL时正常时正常 2834gL为轻度缺乏为轻度缺乏 2127gL为中度缺乏为中度缺乏 21gL则严重缺乏则严重缺乏 低于低于28gL时，会出现组织水肿时，会出现组织水肿临床意义临床意义（1 1）血浆）血浆AlbAlb增高仅见于严重脱水时增高仅见于严重脱水时（2 2）低白蛋白血症）低白蛋白血症 1 1）AlbAlb合成降低：合成降低：2 2）AlbAlb丢失丢失 3 3）AlbAlb分解代谢增加分解代谢增加 4 4）AlbAlb的分布异常的分布异常 5 5）无白蛋白血症）无白蛋白血症(analbuminaemia)(analbuminaemia)（3 3）由）由AlbAlb含量估计其配体的存在形式和作用含量估计其配体的存在形式和作用（4 4）作为个体营养状态的评价指标）作为个体营养状态的评价指标（5 5）AlbAlb的遗传性变异的遗传性变异（四）（四）1 1-抗胰蛋白酶（抗胰蛋白酶（1 1-AT-AT或或AATAAT）394394个氨基酸残基组成个氨基酸残基组成分子量分子量51.8kD51.8kDpIpI为为4.84.8含糖含糖10%10%12%12%占占1 1区带蛋白区带蛋白90%90%主要由肝细胞合成，单核细胞、肺泡巨噬细胞主要由肝细胞合成，单核细胞、肺泡巨噬细胞和上皮细胞也能合成和上皮细胞也能合成蛋白酶的抑制剂蛋白酶的抑制剂 ATTATT基因的遗传表型基因的遗传表型 常染色体共显性遗传，有多种遗传表型常染色体共显性遗传，有多种遗传表型现已发现至少有现已发现至少有7575种基因变体种基因变体主要根据电泳迁移率分类主要根据电泳迁移率分类最多见的是最多见的是PiMM型型,占人群的占人群的90%以上，另外还有以上，另外还有两种蛋白两种蛋白:Z型和型和S型，型，【临床意义】【临床意义】AAT缺陷与肺气肿缺陷与肺气肿PiZZ型、型、PiSZ型个体常出现年青时肺气肿型个体常出现年青时肺气肿低血浆低血浆AAT还可出现在胎儿呼吸窘迫综合征还可出现在胎儿呼吸窘迫综合征AAT缺陷与肝病：缺陷与肝病：新生儿新生儿PiZZ型和型和PiSZ型与其胆汁淤积、肝硬型与其胆汁淤积、肝硬化和肝细胞癌的发生有关化和肝细胞癌的发生有关PiZZ表型的某些成人也会发生肝损害表型的某些成人也会发生肝损害AATAAT的检测的检测血清蛋白电泳血清蛋白电泳单向扩散试验单向扩散试验免疫散浊比浊免疫散浊比浊免疫透射比浊法。免疫透射比浊法。对对于于AATAAT降降低低者者可可进进一一步步采采用用等等电电聚聚焦焦电电泳泳或或分分子生物学方法进行子生物学方法进行AATAAT表型分析。表型分析。（五）（五）1 1-酸性糖蛋白（酸性糖蛋白（AAGAAG）181181个氨基酸残基组成个氨基酸残基组成分子量约分子量约40kD40kD属血浆中含糖量最高（达属血浆中含糖量最高（达45%45%）、酸性最强的糖）、酸性最强的糖蛋白蛋白pIpI为为2.72.74.04.0典型的急性时相反应蛋白典型的急性时相反应蛋白主要在肝脏产生主要在肝脏产生,某些肿瘤组织也可产生某些肿瘤组织也可产生可以结合许多药物和激素可以结合许多药物和激素2 2临床意义临床意义目前主要作为急性时相反应指标：在风湿病、恶性肿目前主要作为急性时相反应指标：在风湿病、恶性肿瘤及心肌梗死等炎症或组织坏死时瘤及心肌梗死等炎症或组织坏死时 48h后浓度迅速增后浓度迅速增高高35天时出现高峰，天时出现高峰，一般增加一般增加3 34 4倍。倍。AAGAAG增高是活增高是活动性溃疡性结肠炎最可靠的指标之一。动性溃疡性结肠炎最可靠的指标之一。nAAGAAG增高：糖皮质激素增加，包括内源性的库欣综合增高：糖皮质激素增加，包括内源性的库欣综合征和外源性强的松、地塞米松等药物治疗时，可引征和外源性强的松、地塞米松等药物治疗时，可引起起AAGAAG升高。升高。nAAGAAG降低：营养不良、严重肝损害、肾病综合征以及降低：营养不良、严重肝损害、肾病综合征以及胃肠道疾病致蛋白严重丢失等情况下胃肠道疾病致蛋白严重丢失等情况下AAGAAG降低。此外降低。此外雌激素可使雌激素可使AAGAAG降低。降低。3 31 1-酸性糖蛋白的检测酸性糖蛋白的检测 n过过氯氯酸酸和和磷磷钨钨酸酸分分级级沉沉淀淀AAGAAG后后，测测定定蛋蛋白白质质或或含含糖量再计算之。糖量再计算之。n免疫扩散免疫扩散n免疫比浊法免疫比浊法（五）结合珠蛋白（五）结合珠蛋白 （haptoglobinhaptoglobin，HpHp）一种急性时相蛋白和转运蛋白一种急性时相蛋白和转运蛋白在电泳中位于在电泳中位于2 2区带区带1 1性质与遗传表型性质与遗传表型2 2功能功能 运输血管内游离的血红蛋白运输血管内游离的血红蛋白(Hb)(Hb)到网到网状内皮细胞降解，状内皮细胞降解，每分子每分子Hp结合两分子结合两分子Hb,防止防止HbHb从肾脏丢失而为机体有效地保留铁从肾脏丢失而为机体有效地保留铁,并能避免并能避免HbHb对肾脏的损伤。对肾脏的损伤。Hp-Hb复合物不可逆，不能被重新被利复合物不可逆，不能被重新被利用，溶血后其含量急剧降低，血浆用，溶血后其含量急剧降低，血浆Hp浓度浓度多在一周内由再生而恢复。多在一周内由再生而恢复。3 3临床意义临床意义 nHpHp浓度下降见于：浓度下降见于：溶血性疾病如溶血性贫血、输血反应、疟疾。溶血性疾病如溶血性贫血、输血反应、疟疾。HpHp参考值范围较宽，须连续观察以监测溶血是否处参考值范围较宽，须连续观察以监测溶血是否处于进行状态。于进行状态。对于溶血性疾病合适的组合检测项目包括血浆对于溶血性疾病合适的组合检测项目包括血浆HpHp、LDLD和游离和游离HbHb。血管外溶血不会使。血管外溶血不会使HpHp发生变化。发生变化。严重肝病患者，其严重肝病患者，其HpHp合成减少。合成减少。nHpHp浓度升高见于：浓度升高见于：属急性时相反应蛋白，当烧伤和肾病综合征情况属急性时相反应蛋白，当烧伤和肾病综合征情况下，血下，血HpHp常明显升高。常明显升高。4 4HpHp的检测的检测 n放射免疫扩散法放射免疫扩散法n免疫比浊法免疫比浊法定量检测定量检测HpHp亚型亚型n聚丙烯酰胺凝胶电泳聚丙烯酰胺凝胶电泳n等电聚焦电泳等电聚焦电泳（六）（六）2 2-巨球蛋白巨球蛋白（2 2-macroglobulin-macroglobulin，2 2-MG-MG或或AMGAMG）n血浆中分子量最大的糖蛋白，约为血浆中分子量最大的糖蛋白，约为720kD720kD，含糖量约，含糖量约8%8%。n由肝细胞、单核细胞和星形细胞合成由肝细胞、单核细胞和星形细胞合成n半寿期约半寿期约5d5dn包括补体包括补体C3C3和和C4C4在内的一组血浆蛋白的主要成员，为在内的一组血浆蛋白的主要成员，为硫酯键血浆蛋白家族。硫酯键血浆蛋白家族。n主要特性是能与多种离子和分子结合，特别是能与蛋主要特性是能与多种离子和分子结合，特别是能与蛋白水解酶结合而抑制酶的活性白水解酶结合而抑制酶的活性n是主要的蛋白酶抑制剂，可选择地保护某些蛋白酶活是主要的蛋白酶抑制剂，可选择地保护某些蛋白酶活性性1 1性质性质2 2临床意义临床意义不属于急性时相反应蛋白。不属于急性时相反应蛋白。低清蛋白血症，尤其是肾病综合征时，低清蛋白血症，尤其是肾病综合征时，2 2-MGMG含量可显著增高含量可显著增高2-MG2-MG水平降低见于：严重的急性胰腺炎水平降低见于：严重的急性胰腺炎和进展型前列腺癌治疗前和进展型前列腺癌治疗前免疫比浊法免疫比浊法3 32 2-MG-MG的检测方法的检测方法（七）铜蓝蛋白（七）铜蓝蛋白（ceruloplasminceruloplasmin，CpCp）含铜的含铜的2 2球蛋白，肝实质性细胞合成球蛋白，肝实质性细胞合成由由10461046个氨基酸残基组成个氨基酸残基组成含糖约含糖约8%-9.5%8%-9.5%每分子结合每分子结合6 68 8个铜原子，由于含铜而呈蓝色个铜原子，由于含铜而呈蓝色95%95%的血清铜存在于的血清铜存在于CpCp中，其余中，其余5%5%呈可扩散状态呈可扩散状态血循环中的血循环中的CpCp可认为是铜的无毒性代谢库可认为是铜的无毒性代谢库具有抑制膜脂质氧化作用具有抑制膜脂质氧化作用1 1性质性质（七）铜蓝蛋白（七）铜蓝蛋白（ceruloplasminceruloplasmin，CpCp）血浆铜的转运血浆铜的转运具具有有铁铁氧氧化化酶酶作作用用，将将FeFe2+2+氧氧化化为为FeFe3+3+，调调节节铁的运输、利用和氧化还原反应铁的运输、利用和氧化还原反应抗抗氧氧化化作作用用，抑抑制制膜膜脂脂质质被被金金属属离离子子的的过过氧氧化化作用作用2 2功能功能CpCp浓度减少有关的疾病：包括浓度减少有关的疾病：包括WilsonWilson病、营养病、营养性铜缺乏和性铜缺乏和MenkesMenkes病（遗传性铜吸收不良）。病（遗传性铜吸收不良）。属于急性时相反应蛋白：在妊娠、感染、创伤属于急性时相反应蛋白：在妊娠、感染、创伤和肿瘤时血浆浓度增加。但在营养不良、严重和肿瘤时血浆浓度增加。但在营养不良、严重肝病及肾病综合征时往往下降。肝病及肾病综合征时往往下降。3 3临床意义临床意义 一种常染色体隐性遗传病一种常染色体隐性遗传病因血浆因血浆CpCp减少，血浆游离铜增加，铜沉积在肝可减少，血浆游离铜增加，铜沉积在肝可引起肝硬化，沉积在脑基底节的豆状核导致豆状引起肝硬化，沉积在脑基底节的豆状核导致豆状核变性，该病又称为肝豆状核变性核变性，该病又称为肝豆状核变性该病的原因不全是该病的原因不全是CpCp减少减少大部分患者可有肝功损害并伴神经系统症状大部分患者可有肝功损害并伴神经系统症状不及时治疗，此病是进行性和致命的，宜及时诊不及时治疗，此病是进行性和致命的，宜及时诊断断可用驱铜的方法进行治疗可用驱铜的方法进行治疗WilsonWilson病诊断标准：病诊断标准：CpCp下降，血清总铜浓度降低、下降，血清总铜浓度降低、游离铜增加和尿铜排泄增加游离铜增加和尿铜排泄增加作为作为WilsonWilson病的辅助诊断指标病的辅助诊断指标n放射免疫扩散法放射免疫扩散法n散射免疫比浊法散射免疫比浊法n透射免疫比浊法透射免疫比浊法 4.Cp4.Cp的检测的检测 （八）转铁蛋白（八）转铁蛋白（transferrin，TRF）n分子量约分子量约79.6kD79.6kDn为单链糖蛋白，含糖量约为单链糖蛋白，含糖量约6%6%n电泳位置在电泳位置在区带区带n等电点等电点5.55.55.95.9n主要由肝细胞合成主要由肝细胞合成n半寿期为半寿期为10.5d10.5dn能可逆地结合多价阳离子，每分子能可逆地结合多价阳离子，每分子TRFTRF可结合可结合2 2个个FeFe3+3+n血浆中血浆中TRFTRF的浓度受食物铁供应的影响的浓度受食物铁供应的影响n 1 1性质性质从小肠进入血液的从小肠进入血液的Fe2+被被Cp氧化为氧化为Fe3+，再被再被TRF的载体蛋白结合。的载体蛋白结合。每种细胞表面都有每种细胞表面都有TRF受体，对受体，对TRF-Fe3+复合物比对复合物比对TRF的载体蛋白亲和力高得多的载体蛋白亲和力高得多TRF-Fe3+将大部分将大部分Fe3+运输到骨髓合成运输到骨髓合成Hb小部分则运输到各组织细胞，形成铁蛋白小部分则运输到各组织细胞，形成铁蛋白及合成肌红蛋白、细胞色素等及合成肌红蛋白、细胞色素等2 2临床意义临床意义n贫血的鉴别诊断和铁缺乏的治疗监测：贫血的鉴别诊断和铁缺乏的治疗监测：缺铁性低血色素贫血时，缺铁性低血色素贫血时，TRF代偿性合成增加；代偿性合成增加；血浆铁低，结合到血浆铁低，结合到TRF的铁少，铁饱和度下降的铁少，铁饱和度下降（正常参考值为（正常参考值为3038）再生障碍性贫血，血浆再生障碍性贫血，血浆TRF正常或低下正常或低下红细胞对铁的利用障碍，使铁饱和度增高红细胞对铁的利用障碍，使铁饱和度增高3 3检测检测多采用免疫比浊测定法多采用免疫比浊测定法总铁结合力总铁结合力(total iron binding capacity,TIBC)血浆蛋白质对铁的结合容量血浆蛋白质对铁的结合容量(主要是主要是TRF对铁结对铁结合容量合容量)，单位与血清铁相同。，单位与血清铁相同。铁饱和度（）血清铁铁饱和度（）血清铁/TIBC两者尤其是后者对贫血诊断和鉴别诊断更好两者尤其是后者对贫血诊断和鉴别诊断更好（十）（十）微球蛋白（微球蛋白（2 microglobulin,2 M,BMG 位于位于 2区带，单链多肽区带，单链多肽 存在于各种有核细胞表面，仅11.8kD是HLA的轻链或链，可从细胞表面尤其是淋巴细胞和肿瘤细胞表面脱落到血浆中从肾小球滤过，再被肾近端小管重吸收和分解【临床意义】【临床意义】血浆血浆BMG增高：增高：见于肾衰竭、炎症、肿瘤见于肾衰竭、炎症、肿瘤尤其是与尤其是与B淋巴细胞相关的肿瘤淋巴细胞相关的肿瘤 尿液尿液BMG排泄量增加：排泄量增加：可反映肾小管功能损害可反映肾小管功能损害 由肝细胞合成的典型急性时相反应蛋白由肝细胞合成的典型急性时相反应蛋白由由5 5个相同亚基非共价结合成盘形多聚体个相同亚基非共价结合成盘形多聚体分子量为分子量为115kD115kD电泳分布在电泳分布在区带，有时可延伸到区带，有时可延伸到 区带区带在钙离子存在下，结合多种细菌、真菌及原虫等体内的多在钙离子存在下，结合多种细菌、真菌及原虫等体内的多糖物质以及磷酸胆碱，卵磷脂和核酸糖物质以及磷酸胆碱，卵磷脂和核酸在钙离子缺乏情况下，结合多聚阳离子在钙离子缺乏情况下，结合多聚阳离子与抗体相似，可引发对入侵微生物对细胞的免疫调理作用与抗体相似，可引发对入侵微生物对细胞的免疫调理作用和吞噬作用和吞噬作用可识别、结合从损伤组织中释放的毒性物质，然后解毒或可识别、结合从损伤组织中释放的毒性物质，然后解毒或从血中清除从血中清除本身在发生调理作用后被分解本身在发生调理作用后被分解（九）（九）C-C-反应蛋白反应蛋白(C-reactive protein(C-reactive protein，CRP)CRP)1 1性质性质第一个被认识的急性时相反应蛋白，是急性时第一个被认识的急性时相反应蛋白，是急性时相反应的一个极灵敏指标，以健康人群相反应的一个极灵敏指标，以健康人群CRPCRP的的95%95%参考上限判断患者有无明显的感染性炎症参考上限判断患者有无明显的感染性炎症血浆中血浆中CRPCRP浓度在急性心肌梗死、创伤、感染、浓度在急性心肌梗死、创伤、感染、炎症、外科手术、肿瘤浸润等发病时迅速增高，炎症、外科手术、肿瘤浸润等发病时迅速增高，心肌梗死后心肌梗死后6-12h6-12h即升高，可达正常值即升高，可达正常值20002000倍。倍。5mg/L作为明显的炎症信号作为明显的炎症信号15mg/L为慢性低程度的炎症或急性时相反为慢性低程度的炎症或急性时相反应始应始2 2临床意义临床意义CRPCRP是非特异性指标，主要用于结合临床监是非特异性指标，主要用于结合临床监测疾病：测疾病：筛查微生物感染筛查微生物感染 评估炎症性疾病的活动度和疗效监控评估炎症性疾病的活动度和疗效监控 识别系统性红斑狼疮、白血病和外科识别系统性红斑狼疮、白血病和外科手术后等并发的感染手术后等并发的感染 新生儿败血症和脑膜炎新生儿败血症和脑膜炎 监测肾移植后的排斥反应等监测肾移植后的排斥反应等做为心血管疾病的独立危险因子做为心血管疾病的独立危险因子 为血浆为血浆CRP低浓度增高，须用更灵敏测定方低浓度增高，须用更灵敏测定方法法 大多健康成年人大多健康成年人1mg/L作为心血管疾病危险因子的标记：作为心血管疾病危险因子的标记：3.0mg/L 为高度危险性。为高度危险性。血清血清CRPCRP水平与冠心病的发生、发展及预后水平与冠心病的发生、发展及预后有直接联系。有直接联系。CRPCRP浓度的上升，可使急性心肌梗塞浓度的上升，可使急性心肌梗塞()后患者或不稳定性心绞痛后患者或不稳定性心绞痛()患者发患者发生心血管意外的短期危险性增加。生心血管意外的短期危险性增加。血浆血浆CRPCRP浓度个体间变化极大，感染过程、浓度个体间变化极大，感染过程、炎症性疾病也会引起血浆炎症性疾病也会引起血浆CRPCRP升高升高 散射免疫比浊法散射免疫比浊法 透射免疫比浊法透射免疫比浊法 酶免疫分析法酶免疫分析法 荧光免疫分析法荧光免疫分析法3 3检测检测四、急性时相反应（四、急性时相反应（APRAPR，acute phase acute phase reactionreaction）与急性时相反应蛋白（）与急性时相反应蛋白（APPAPP）急性时相反应：机体在发生急性炎症（如感急性时相反应：机体在发生急性炎症（如感染性炎症、自身免疫性炎症等）和组织损染性炎症、自身免疫性炎症等）和组织损伤（如创伤、手术、心肌梗死、恶性肿瘤伤（如创伤、手术、心肌梗死、恶性肿瘤等）时出现的非特异性的血浆蛋白质浓度等）时出现的非特异性的血浆蛋白质浓度变化。变化。急性时相反应是机体对炎症的一般反应，急性时相反应是机体对炎症的一般反应，常伴有体温和白细胞升高，它不是对某一常伴有体温和白细胞升高，它不是对某一疾病的特异性反应。疾病的特异性反应。AATAATAAGAAGCpCpCRPCRPHpHp1-1-抗糜蛋白酶抗糜蛋白酶血红素结合蛋白血红素结合蛋白C3C3C4C4纤维蛋白原纤维蛋白原显著升高显著升高或升高或升高降低降低nPAPAnAlbAlbnTRFTRF急性负相时相反应蛋白急性负相时相反应蛋白THE END