试剂配制方法详解课件

试剂配制方法试剂配制方法刘国辉试剂(reagent):一定量的（一种或多种）试药溶解在水或其他有机溶剂内供化学反应、分析化验、教学实验、研究试验等的溶液。生化试剂（Biochemicalreagent）：是指有关生命科学研究的生物材料或有机化合物，包括临床诊断、医学研究用的试剂。化学试剂纯度分类优级纯(GR：Guaranteedreagent)，又称一级品或保证试剂，99.8%，这种试剂纯度最高，杂质含量最低，适合于重要精密的分析工作和科学研究工作，使用绿色绿色瓶签。分析纯(AR)，又称二级试剂，纯度很高,99.7%，略次于优级纯，适合于重要分析及一般研究工作，使用红色红色瓶签。化学纯(CP)，又称三级试剂，99.5%，纯度与分析纯相差较大，适用于工矿、学校一般分析工作。使用蓝色蓝色(深蓝色深蓝色)标签。实验试剂(LR：Laboratoryreagent)，又称四级试剂。化学试剂纯度分类高纯试剂：纯度远高于优级纯的试剂叫做高纯试剂(99.99%)。高纯试剂的杂质含量要比优级试剂低2个、3个、4个或更多个数量级。因此，高纯试剂特别适用于一些痕量分析，而通常的优级纯试剂就达不到这种精密分析的要求。目前，除对少数产品制定国家标准外(如高纯硼酸、高纯冰乙酸、高纯氢氟酸等)，大部分高纯试剂的质量标准还很不统一，在名称上有高纯、特纯ExtraPure)、超纯、光谱纯等不同叫法。试剂配制一般步骤1、计算、计算2、称量、称量3、溶解、溶解4、移液、移液选择选择计算计算称量称量溶解溶解冷却冷却移液移液选择称量选择称量仪器及其仪器及其规格、容规格、容量瓶规格量瓶规格计算出溶计算出溶质的质量质的质量或者浓溶或者浓溶液的体积液的体积4、移液、移液5、定容、定容6、装瓶、装瓶洗涤洗涤移液移液振荡振荡定容定容摇匀摇匀装瓶装瓶计算质量浓度质量浓度:表示一定质量的溶液里溶质和溶剂的相对量。体积浓度体积浓度:表示一定量体积溶液中所含溶质的量。质量浓度质量浓度的值不因温度变化而变化体积浓度体积浓度的值随温度的变化而相应变化。质量浓度体积浓度溶液的浓度质量分数质量摩尔浓度ppm浓度等物质的量浓度体积比浓度当量浓度克/升浓度等质量浓度单位体积混合物中某组分的质量称为该组单位体积混合物中某组分的质量称为该组分的质量浓度。分的质量浓度。符号符号表示，单位为表示，单位为kg/m3。组分Gi的质量浓度定义式为式中Gi混合物中组分i的质量，kg；V混合物的体积，m3（L）。质量浓度VS密度质量浓度质量浓度就是溶液单位体积含溶质的质量，单位为克/升或者克/毫升。溶液密度溶液密度就是溶液单位体积溶液的质量，单位为克/升或者克/毫升。密度大于水的溶液，如硫酸溶液、氢氧化钠溶液，质量浓度越大，溶液密度越大。密度小于水的溶液，如氨水溶液、酒精溶液，质量浓度越大，溶液密度越小。质量分数质量分数 质量（重量）百分比浓度质量（重量）百分比浓度100克溶液（溶剂+溶质）中含有溶质的克数。一般不做特殊说明的百分浓度，就是指质量百分浓度，试剂厂生产的酸碱液体，常用此法。将一瓶80g溶质质量分数为10%的NaCl溶液平均分为2等份，每份溶液中溶质的质量分数为_；若将其中的一份溶液中溶质的质量分数减小一半，应加水_g，若将另一份溶液中溶质的质量分数增大一倍，应加入NaCl_g。解析：根据溶液的均一性可知，无论将溶液怎么来分，只要条件不改变，其溶质的质量分数就不会发生变化。而当增加溶剂的质量时却能使溶质的质量分数变小，加 入溶质之后肯定能使溶液中溶质的质量分数增大。在加水稀释的过程中溶质的质量是守恒的，由此稍作思考可知，所加水的质量应和对应溶液的质量一样多（40）的时候，即可使原来 10%的NaCl溶液的溶质质量分数减小一半（即5）；在采用加入溶质的方法使溶液浓缩的时候，所加入的溶质质量可利用列方程的方法求得，但要注意，这部分溶质加入后，不仅溶质的质量增加了，同样也使溶液的质量增大了。若设加入的溶质质量为x，则由题意可得（x4010）（40 x）20解得，x5。答案：10%；40；5。若溶质是固体：称取溶质的克数称取溶质的克=需配置溶液的总重量需配置溶液的浓度如何配制10（W/W）氢氧化钠溶液？解析：其实就是 100g 溶液中含 10g 氢氧化钠。水在室温的比重接近1，所以试剂配制时，只需量取90mL水溶解。若溶质是液体：应量取溶质的体积需用溶剂的克=需配制溶液的总重量-（应取溶质的体积溶质的比重）欲配制5%硫酸溶液（比重1.03）200mL，需量取98%浓硫酸（比重1.84）多少体积？总重量：1.03*200=206g水：=206-5.6*1.84=190g质量摩尔浓度（质量摩尔浓度（bB）1kg溶剂中所含溶质的摩尔数。质量摩尔浓度常用来研究难挥发的非电解质稀溶液的性质，如：蒸气压下降、沸点上升、凝固点下降和渗透压。优点是其量值不受温度的影响，缺点是使用不方便。单位：molkg市售过氧化氢（俗称双氧水）含量为30%，密度为1.11kgL-1。计算该溶液的质量摩尔浓度。ppm（partpermillion）浓度指溶质质量占全部溶液质量的百万分比ppm浓度即百万分比浓度（106）。即1ppm=1106有些溶液极稀，用百分比浓度表示既不方便，又容易发生错误。例如，某溶液的浓度是0.0005%，改用ppm表示就是5ppm。ppm浓度常用与微量分析、环境化学中。波美度(Be)指把波美比重计浸入所测溶液中，得到的度数。波美比重计有两种：重表，用于测量比水重的液体；轻表，用于测量比水轻的液体。当测得波美度后，从相应化学手册的对照表中可以方便地查出溶液的质量百分比浓度。波美度数值较大，读数方便，所以在生产上常用波美度表示溶液的浓度。体积浓度体积百分浓度体积比浓度体积摩尔浓度当量浓度克/升浓度体积百分浓度体积百分浓度 简写：%（V/V）100ml溶液中所含溶质的体积（mL）数，一般用来表示溶质为液体的溶液，如各种浓度的酒精、甲醇溶液。75乙醇的配制？乙醇的体积百分浓度是商业上表示酒类浓度的方法。白酒、黄酒、葡萄酒等酒类的“度”（以标示），就是指酒精的体积百分比浓度。例如：60%(V/V)的酒写成60。体积百分比浓度属非法定单位，将被法定计量单位体积分数（）代替。物质B的体积分数B是物质B的体积跟混合物的体积比。例如，把60mL酒精溶于水，配成100mL酒精溶液，该溶液的体积分数是0.60或60102。将4gNaOH固体溶于适量水，再稀释至500mL后所得到的溶液中NaOH的物质的量浓度是？（NaOH分子量为40）配制100mL1.0MNaCl溶液，思考：需要氯化钠固体多少克？（NaCl分子量为58.5）1.C（NaOH）=n/V=m/MV=4/40/0.5=0.2 mol/L 2.mNaClnMCV0.11.058.55.9(g)体积比浓度体积比浓度 指用溶质与溶剂的体积比表示的浓度。如1：1盐酸，即表示1体积量的盐酸和1体积量的水混合的溶液。体积比浓度只在对浓度要求不太精确时使用。市售过氧化氢（俗称双氧水）含量为30%，密度为1.11kgL-1。计算该溶液的物质的量浓度。物质的量浓度（体积摩尔浓度）概念：单位体积溶液中所含溶质B的物质的量，符号为CB。表达式：常用单位mol/L或或mol L-1或或M.N：溶质溶质B的物质的量，单位为的物质的量，单位为mol；V：溶液的体积，单位为溶液的体积，单位为L物质的量（n）、质量（m）、摩尔质量（M）之间的关系为：摩尔质量（M）单位物质的量的物质所具有的质量,称为摩尔质量(molarmass),当物质的质量以克为单位时,摩尔质量的单位为g/mol,在数值上等于该物质的相对原子质量或相对分子质量。对于某一纯净物来说，它的摩尔质量是固定不变的，而物质的质量则随着物质的物质的量不同而发生变化。物质的量浓度误差分析若m偏小则c偏低，若m偏大则c偏高；若V偏小则c偏高，若V偏大则c偏低。物质的量浓度与质量分数的换算溶质质量分数为w%，密度为 g/mL的某溶液中，其溶质的物质的量浓度的表达式:c=溶液中溶质的物质的量浓度c,溶液的密度g/mL，其质量分数的表达式：W%=质量分数为质量分数为36.5%的盐酸，密度的盐酸，密度1.19g/cm3，求其物质的量浓度。求其物质的量浓度。误差分析试分析下列操作会引起所配制溶液的物质的量浓度偏高还是偏低？称取NaOH时动作过慢溶解NaOH后未等溶液冷却就转移至容量瓶中烧杯未用蒸馏水洗涤转移溶液时有液体溅出容量瓶未干燥，事先有少量蒸馏水当量浓度（N）体积当量浓度是原来国际通用的浓度之一，是根据当量定律来的。如盐酸浓度为0.1N，表示1L溶液中含有0.1当量的盐酸关于N与M的关系，即当量浓度与摩尔浓度关系，对不同的物质是不相同的。如硫酸：一般写作 1MH2SO 4=2N H2SO4，写作 M（12H2SO4）=0.1000 molL，如高锰酸钾：1 M KMhO4=5N KMnO 4,一般写作 M（1 5KMnO4）=0.1000 molL。某物质跟其它物质起化学反应时,该物质每转移一个电子所需的质量叫做该物质的当量。克/升浓度用1L溶液里所含溶质的克数来表示的溶液浓度，叫做克/升浓度。在1L氯化钠溶液中含有氯化钠150g，氯化钠溶液的克/升浓度就是150g/L。克/升浓度常用于电镀工业中配制电镀液。药典的规定：百分比用“”符号表示，系指重量的比例；溶液的百分比,除另有规定外,系指溶液100ml中含有溶质若干克；乙醇的百分比,系指在20时容量的比例。此外，据需要可采用下列符号：(g/g)表示溶液100g中含有溶质若干克；(ml/ml)表示溶液100ml中含有溶质若干毫升；(ml/g)表示溶液100g中含有溶质若干毫升；(g/ml)表示溶液100ml中含有溶质若干克。溶液的配置溶质+水浓溶液加水稀释浓溶液加稀溶液混合溶质加稀溶液稀溶液蒸发得到相应的浓溶液稀释定律稀释前后溶质的物质的量守恒稀释前后溶质的质量守恒哪种浓度的酒精消毒效果最好？70%酒精杀菌力最强，它能使蛋白质脱水和变性，在35分钟内杀死细菌。因此，它用于消毒和防腐，适用于皮肤和器械、塑料制品等的消毒。高浓度的酒精（95100%）能引起菌体表层蛋白质凝固，形成保护层，使酒精分子不易透入，因此杀菌能力反而弱。2、称量、称量电子天平药匙称量纸试剂电子天平的使用校准水平泡称量试剂的天平应保持清洁、干燥，避免潮湿及腐蚀性气体的侵蚀。在进行称量操作时，被称取的试剂应置于称量纸上或其它器皿内，不可在盘中直接称量。NaOH固体能否直接放在称量纸上称量呢？易潮解或具有腐蚀性的药品必须放在玻璃器皿（如：烧杯）中称量，且动作要迅速。化学试剂有效期化学试剂有效期一般，化学性质稳定的物质，保存有效期就越长，保存条件也简单。化学试剂的有效性，首先要根据化学试剂本身的物理化学性质作出基本判断，再对化学试剂的保存状况进行表观观察，然后根据具体需要来作出能否使用的结论。化学试剂有效期无机化合物，只要妥善保管，包装完好无损，可以长期使用。但是，那些容易氧化、容易潮解的物质，在避光、荫凉、干燥的条件下，只能短时间（15年）内保存，具体要看包装和储存条件是否合乎规定。有机小分子量化合物一般挥发性较强，包装的密闭性要好，可以长时间保存。但容易氧化、受热分解、容易聚合、光敏性物质等，在避光、荫凉、干燥的条件下，只能短时间（15年）内保存，具体要看包装和储存条件是否合乎规定。有机高分子，尤其是油脂、多糖、蛋白、酶、多肽等生命材料，极易受到微生物、温度、光照的影响，而失去活性，或变质腐败，故此，要冷藏（冻）保存，而且时间也较短。基准物质、标准物质和高纯物质，原则上要严格按照保存规定来保存，确保包装完好无损，避免受到化学环境的影响，而且保存时间不宜过长。一般情况下，基准物质必须在有效期内使用。3、溶解、溶解相关仪器：研钵玻璃棒搅拌器烧杯加热：水浴加热直接加热溶剂注意在容器上盖表面皿，以防止液体蒸发。溶剂水无水乙醇PBSBSA有机溶剂无机溶剂溶剂的选择溶解能力、挥发速度、安全性、经济性、来源性和贮存稳定性等。一种好的溶剂必须要有良好的溶解性能，这可由溶解度参数和氢键指数判断。有机溶剂有机溶剂即是包含碳原子的有机化合物。溶剂通常拥有比较低的沸点、容易挥发或是可以由蒸馏来去除，从而留下被溶物。有机溶剂是能溶解一些不溶于水的物质（如油脂、蜡、树脂、橡胶、染料等）的一类有机化合物。特点是在常温常压下呈液态，具有较大的挥发性，在溶解过程中，溶质与溶剂的性质均无改变。有机溶剂多数是容易燃烧的，当溶剂蒸气在空气中达到一定浓度时，会发生爆炸，必须注意溶剂的安全性。大部分有机溶剂都有一定的毒性个人防护水蒸馏水（DistilledWater）实验室最常用的一种纯水，虽设备便宜，但极其耗能和费水且速度慢，应用会逐渐减少。蒸馏水能去除自来水内大部分的污染物，但挥发性的杂质无法去除，如二氧化碳、氨、二氧化硅以及一些有机物。新鲜的蒸馏水是无菌的，但储存后细菌易繁殖；此外，储存的容器也很讲究，若是非惰性的物质，离子和容器的塑形物质会析出造成二次污染。去离子水（DeionizedWater）应用离子交换树脂去除水中的阴离子和阳离子，把水里的阴阳离子都除掉的水，但水中仍然存在可溶性的有机物，可以污染离子交换柱从而降低其功效，去离子水存放后也容易引起细菌的繁殖。双蒸水：ddH2O（Distillation-DistillationH2O）,经过2次蒸馏而得的水。水反渗水（ReverseosmosisWater）：其生成的原理是水分子在压力的作用下，通过反渗透膜成为纯水，水中的杂质被反渗透膜截留排出。反渗水克服了蒸馏水和去离子水的许多缺点，利用反渗透技术可以有效的去除水中的溶解盐、胶体，细菌、病毒、细菌内毒素和大部分有机物等杂质，但不同厂家生产的反渗透膜对反渗水的质量影响很大。纯水（RO水）：也称纯水。即通过反渗透膜过滤后的水，反渗透膜的孔径一般为10A到100A之间，所以它能够去除95%以上的离子态杂质。超纯水（Ultra-puregradewater）既将水中的导电介质几乎完全去除，又将水中不离解的胶体物质、气体及有机物均去除至很低程度的水。其标准是水电阻率为18.2M-cm。但超纯水在TOC、细菌、内毒素等指标方面并不相同，要根据实验的要求来确定，如细胞培养则对细菌和内毒素有要求，而HPLC则要求TOC低。超纯水是时下纯度最高的水，其次是双级反渗透水（双级RO水）、双蒸水（ddH2O）、纯水（RO水）、蒸馏水。评价水质的常用指标：1、电阻率（electricalresistivity）衡量实验室用水导电性能的指标，单位为M-cm，随着水内无机离子的减少电阻加大则数值逐渐变大。实验室超纯水的标准:电阻率为18.2M-cm。2、总有机碳（TotalOrganicCarbon，TOC）水中碳的的浓度，反映水中氧化的有机化合物的含量，单位为ppm 或 ppb。3、内毒素（Endotoxin）革兰氏阴性细菌的脂多糖细胞壁碎片，又称之为“热原”，单位cuf/mL。4 移液移液冷却冷却移液移液洗涤洗涤移液移液振荡振荡容量瓶的规格容量瓶的规格规规格格50 ml 100 ml200 ml250 ml500 ml1000 ml注注意意容量瓶上必须有三个标记：容量瓶上必须有三个标记：刻度线、体积、温度刻度线、体积、温度容量瓶的使用容量瓶的使用使使用用方方 法法选规格选规格查漏液查漏液洗涤洗涤存放存放去去 污污 后后用用 蒸蒸 馏馏水水 洗洗 净净 之之用用后后洗洗净净，瓶瓶 塞塞 与与 瓶瓶口口间间垫垫一一 纸纸 条条注注意意事事 项项V容量瓶容量瓶 V配制配制洗净后的容量瓶不能再润洗洗净后的容量瓶不能再润洗只只能能适适用用于于配配制制规规定定温温度度、规规定定体体积积的的物物质质的的量量浓浓度度溶溶液液，即即不不能能配配制制过过冷冷过过热热溶溶液液，不不能能作作试试剂剂瓶瓶盛盛装试剂，更不能作反应容器使用装试剂，更不能作反应容器使用搁放容量瓶时，瓶塞与瓶口间应垫一纸条搁放容量瓶时，瓶塞与瓶口间应垫一纸条小结：容量瓶的使用六忌小结：容量瓶的使用六忌 一忌用容量瓶进行溶解（一忌用容量瓶进行溶解（体积不准确体积不准确）二忌直接往容量瓶倒液（二忌直接往容量瓶倒液（洒到外面洒到外面）三忌加水超过刻度线（三忌加水超过刻度线（浓度偏低浓度偏低）四四忌忌读读数数仰仰视视或或俯俯视视（仰仰视视浓浓度度偏偏低低，俯俯视视浓浓度偏度偏高高）五忌不洗涤玻璃棒和烧杯（五忌不洗涤玻璃棒和烧杯（浓度偏低浓度偏低）六六忌忌标标准准液液存存放放于于容容量量瓶瓶（容容量量瓶瓶是是量量器器，不不是是容器）容器）俯视俯视或或仰视仰视刻度线对溶液浓度的影响刻度线对溶液浓度的影响俯俯视视刻刻度度线线，实实际际加加水水量量未未到到刻刻度度线线，使使溶溶液液的的体积偏小，体积偏小，物质的量物质的量浓度增大浓度增大；仰仰视视刻刻度度线线，实实际际加加水水量量超超过过刻刻度度线线，使使溶溶液液的的体积偏大体积偏大，物质的量，物质的量浓度减小浓度减小。5、定容定容容量瓶如果在定容时,因不小心使液面超过了容量瓶的刻度线,应该怎么办?当摇匀后,竖直容量瓶发现液面低于刻度线,要不要补加蒸馏水?为什么?6、混匀、混匀塞好瓶塞，用食指摁住瓶塞，用另一只手托住瓶底，把容量瓶反复倒转，使溶液混合均匀。6装瓶，贴标签调节pH值（根据需要）装瓶/分装标签分装a)水溶试剂：不同体积的商品及自用储液按以下相应耗材进行分装储存分装b)醇溶试剂：商品及自用均使用旋盖微量试剂管（0.5mL）进行长期保存，以减少醇溶剂挥发。c)试剂分装完成后，按要求贴好相应标签或写明标识，放入贴有外标签标识的包装盒/袋中统一放置于-20保存备用。注：针对水溶试剂，如放置至袋中，需先将分装管立置于-20，使分装试剂集中冻结于管底后方，使分装试剂集中冻结于管底后方可放入分装袋中，避免因倒放使分装试剂粘附于可放入分装袋中，避免因倒放使分装试剂粘附于管口或管壁，易造成污染或损失。管口或管壁，易造成污染或损失。储液试剂的标识（1）试剂管上的标识包括：自用试剂：试剂名称（名称较长的试剂可用缩写代替）、试剂浓度、配制日期等；商品试剂：根据商品标签内容进行明确标识。（2）试剂储存盒/袋上的标识包括：试剂全称及缩写、货号、批号、规格、试剂浓度、配制/分装日期（以此日期作为分装试剂的批号）、配制人、保存期限等；标识标签模板如下：送检送检配制完后，按照配制完后，按照细胞检测规程细胞检测规程的规定，填写的规定，填写送检单送检单并将抽样试剂放到试剂送检区进行检并将抽样试剂放到试剂送检区进行检测。测。送检量要求：对于50mL以上的试剂，直接抽取5mL的送检量送检；对于微量试剂，可将储液稀释为工作液后再抽取5mL的送检量送检。【要点深化要点深化】溶液的特点溶液的特点(1)溶液是均一、稳定的分散系。从一定物质的量溶液是均一、稳定的分散系。从一定物质的量浓度的溶液中取出一定体积的溶液，其密度、质浓度的溶液中取出一定体积的溶液，其密度、质量分数、物质的量浓度与原溶液相同。量分数、物质的量浓度与原溶液相同。(2)物质的量浓度相同，体积也相同的任何溶液，物质的量浓度相同，体积也相同的任何溶液，所含溶质的物质的量相等，但是溶质的质量、粒所含溶质的物质的量相等，但是溶质的质量、粒子数不一定相等。子数不一定相等。(3)溶液的体积不等于溶质的体积，也不等于溶剂溶液的体积不等于溶质的体积，也不等于溶剂的体积，也不等于溶质和溶剂体积之和。在计算的体积，也不等于溶质和溶剂体积之和。在计算溶液的体积时，必须通过溶液的体积时，必须通过 来计算。来计算。其他注意事项在配制强酸、强碱溶液或接触有毒性药物时，应严格按操作规程进行。如稀释硫酸时，应谨慎的将浓硫酸缓缓倾注水中，切不可把水倒入浓硫酸中。在配制药物溶液时，某种动物注入药液的最大容量决定所配药物溶液的浓度。如静脉注射药液容量过大，可影响其循环系统的正常功能。故静脉注射容量最好在体重的1/100以下；静脉外（皮下、肌肉及腹腔）注射容量最好在体重的1/40以下；因此，可根据动物的体重，选择所配药物溶液的适当浓度。在配制药物溶液时，应考虑到实验动物内环境的稳定性以及动物离体器官或组织在实验条件下的正常功能。应力求达到与血液及体液呈等渗与等张以及等pH值和离子平衡状态，应使用生理盐水配制（温血动物用0.9NaCl，冷血动物用0.6NaCl）。离体器官灌流液或营养液因用量大，应严格计算渗透压、pH值与各种离子浓度，有时还要考虑营养成分如葡萄糖的含量等，根据动物离体器官的不同而使用不同的生理溶液