抗中性粒细胞胞浆抗体-课件

ANCA抗中性粒细胞胞浆抗体抗中性粒细胞胞浆抗体antineutrophil cytoplasmic antibodiesANCA抗中性粒细胞胞浆抗体1ANCA的发现的发现n1982 Davies 寡免疫复合物型节段坏寡免疫复合物型节段坏死性新月体死性新月体肾小球肾炎肾小球肾炎()病人病人中首次发现中首次发现ANCA。n1985 Vander Woude 研究表明研究表明ANCA对对Wegener肉芽肿高度敏感，是疾病肉芽肿高度敏感，是疾病活动的指标。活动的指标。ANCA的发现1982 Davies 寡免疫复合物型节段2What is ANCA?n是以中性粒细胞和单核细胞胞浆成分为是以中性粒细胞和单核细胞胞浆成分为靶抗原的自身抗体，主要为靶抗原的自身抗体，主要为IgG型。型。nANCA如同抗核抗体谱一样，如同抗核抗体谱一样，是一类自身是一类自身抗体的总称抗体的总称，其作用的抗原成分是中性，其作用的抗原成分是中性粒细胞中的髓样颗粒蛋白。粒细胞中的髓样颗粒蛋白。What is ANCA?是以中性粒细胞和单核细胞胞浆成分为3ANCA的测定的测定q间接免疫荧光法间接免疫荧光法(IIF)最常用最常用 胞浆型胞浆型 c-ANCA 核周型核周型 p-ANCA 排除排除ANA的可能的可能 不典型不典型 a-ANCAq酶联免疫吸附法酶联免疫吸附法(ELISA)ANCA的测定间接免疫荧光法(IIF)最常用4细胞质呈弥漫性颗细胞质呈弥漫性颗粒样染色（不均匀）粒样染色（不均匀）环绕细胞核周围的细胞环绕细胞核周围的细胞质亮染质亮染细胞质呈弥漫性颗粒样染色（不均匀）环绕细胞核周围的细胞质亮染5 直接应用直接应用IIF法判断法判断ANCA时，时，p-ANCA和和ANA很难区分，两者并存时很难区分，两者并存时又可互相掩盖，在又可互相掩盖，在ANA滴度较高时则滴度较高时则鉴别更加困难，容易造成假阳性或假鉴别更加困难，容易造成假阳性或假阴性。阴性。直接应用IIF法判断ANCA时，p-ANCA和6 以乙醇固定的中性粒细胞为基质以乙醇固定的中性粒细胞为基质有时难以区分有时难以区分pANCA与抗核抗体，与抗核抗体，借助灵长类肝脏冰冻切片可以将二借助灵长类肝脏冰冻切片可以将二者相区别：若抗核抗体阳性则所有者相区别：若抗核抗体阳性则所有肝细胞核出现荧光，而肝细胞核出现荧光，而pANCA（以（以及及cANCA)阳性，仅在肝血窦的中性阳性，仅在肝血窦的中性粒细胞出现荧光。粒细胞出现荧光。以乙醇固定的中性粒细胞为基质有时难以区分p7特异性靶抗原特异性靶抗原nc-ANCA 丝氨酸蛋白酶丝氨酸蛋白酶3（PR3）np-ANCA 髓过氧化物酶（髓过氧化物酶（MPO）弹性蛋白酶（弹性蛋白酶（HEL)组织蛋白酶组织蛋白酶G（CG）溶菌酶（溶菌酶（LY）乳铁蛋白（乳铁蛋白（LF）通透性杀菌蛋白（通透性杀菌蛋白（BPI）特异性靶抗原c-ANCA 丝氨酸蛋白酶3（PR3）8PR3nPR3PR3是中性丝氨酸蛋白酶家族中的一是中性丝氨酸蛋白酶家族中的一员员,是由是由228个氨基酸组成的分子量为个氨基酸组成的分子量为27KDKD的蛋白酶。的蛋白酶。nPR3PR3可降解、消化血管壁成分如弹力可降解、消化血管壁成分如弹力蛋白及其它细胞外基质。蛋白及其它细胞外基质。PR3PR3是中性丝氨酸蛋白酶家族中的一员,是由228个氨基9MPOnMPOMPO是中性粒细胞内含量最为丰富的蛋是中性粒细胞内含量最为丰富的蛋白质白质,其分子量为其分子量为133至至155KDKD,由两由两条重链和两条轻链组成。条重链和两条轻链组成。nMPOMPO在中性粒细胞的氧爆炸或产生超氧在中性粒细胞的氧爆炸或产生超氧阴离子过程中起重要的催化作用。阴离子过程中起重要的催化作用。MPOMPO是中性粒细胞内含量最为丰富的蛋白质,其分子量为110ANCA的致病作用的致病作用中性粒细胞被攻击中性粒细胞被攻击TNF,IL-1等等靶抗原转移到细胞膜表面靶抗原转移到细胞膜表面附着于血管内皮细胞表面附着于血管内皮细胞表面ANCA与之结合与之结合中性粒细胞脱颗粒、中性粒细胞脱颗粒、出现反应性氧分子、出现反应性氧分子、释放蛋白溶解酶释放蛋白溶解酶局部血管损伤，小血管炎症局部血管损伤，小血管炎症ANCA的致病作用中性粒细胞被攻击TNF,IL-1等靶抗原转11ANCA的临床意义的临床意义 ANCA相关小血管炎相关小血管炎n显微镜下多血管炎（显微镜下多血管炎（MPA）变应性肉芽肿血管炎（变应性肉芽肿血管炎（CSS）坏死性新月体肾炎坏死性新月体肾炎（NCGN）（MPA肾脏局限型）肾脏局限型）nWegener肉芽肿（肉芽肿（WG）ANCA的临床意义 ANCA相关小血12 ANCA不仅与原发性小血管炎相关不仅与原发性小血管炎相关,也可也可见于许多其它炎症性疾病见于许多其它炎症性疾病,例如炎症性肠病例如炎症性肠病,包包括溃疡性结肠炎和克隆氏病括溃疡性结肠炎和克隆氏病;自身免疫性肝胆自身免疫性肝胆疾病疾病,如原发性硬化性胆管炎如原发性硬化性胆管炎;类风湿性关节炎类风湿性关节炎;和某些肺部非感染性炎症性疾病和某些肺部非感染性炎症性疾病,如囊性纤维如囊性纤维化、肺间质纤维化等。化、肺间质纤维化等。但上述但上述ANCA相关的疾相关的疾病并不识别病并不识别PR3和和MPO,其特异性其特异性ANCA靶抗靶抗原为其它胞浆成分。原为其它胞浆成分。ANCA不仅与原发性小血管炎相关,也可见13与与ANCA抗体谱相关的疾病抗体谱相关的疾病疾病IIF荧光模型特异性靶抗原WGcANCA,pANCA(少见）PR3(85%)MPO(10%)MPAcANCA,pANCAPR3(45%)MPO(45%)NCGNpANCA,cANCA(少见）PR3(25%)MPO(65%)CSSpANCA,cANCA(少见）PR3(10%)MPO(60%)SLEpANCALF,HEL,MPO(少见）RApANCA,aANCALF,MPO(少见）UCpANCA,aANCALF,其他PBCpANCA,aANCALF,HEL,其他感染感染pANCA,aANCAPR3,MPO,BPI,其他与ANCA抗体谱相关的疾病疾病IIF荧光模型特异性靶抗原WG14c-ANCA在诊断活动性在诊断活动性WG时的敏感性时的敏感性为为81%90%,特异性为特异性为97%,多数多数WG患患者的者的ANCA特异性靶抗原为特异性靶抗原为PR3;多数多数MPA患者为患者为p-ANCA，靶抗原为，靶抗原为MPO，抗，抗MPO抗体与抗体与p-ANCA同时阳性同时阳性诊断诊断MPA的特异性可高达的特异性可高达99%。c-ANCA在诊断活动性WG时的敏感性为81%90%,特异15ANCA阳性的临床意义 单纯间接免疫荧光下单纯间接免疫荧光下 ANCA阳阳性，其诊断价值极为有限，故对怀性，其诊断价值极为有限，故对怀疑原发性小血管炎的患者，应进一疑原发性小血管炎的患者，应进一步检测步检测ANCA所作用的特异性抗原所作用的特异性抗原成分，尤其是成分，尤其是 PR3和和MPO。ANCA阳性的临床意义 单纯间接免疫荧光下16 北大第一医院肾内科对怀疑小血管炎北大第一医院肾内科对怀疑小血管炎的的5604名患者血清进行了名患者血清进行了ANCA的检测，的检测，IIF-ANCA检出率为检出率为5.3%，阳性检出最多，阳性检出最多在在7、8和和12月份。月份。85%的的IIF-ANCA阳性阳性患者确诊为患者确诊为ANCA相关小血管炎。抗相关小血管炎。抗MPO和抗和抗PR3阳性的比率约为阳性的比率约为7:1。平均发病年。平均发病年龄为龄为53.1岁。岁。ANCA相关疾病在我国并不少见相关疾病在我国并不少见 北大第一医院肾内科对怀疑小血管炎的5604名患17