瘦肉精残留及其检测技术课件

瘦肉精残留及其瘦肉精残留及其检测技技术研究平台研究平台国家重点学科基础兽医学，排名第一国家重点学科基础兽医学，排名第一国家兽药残留基准实验室，国内仅四家国家兽药残留基准实验室，国内仅四家国家兽药安全评价中心国家兽药安全评价中心国家兽药安全评价（环境评估）实验室国家兽药安全评价（环境评估）实验室农业部兽药安全监督检验测试中心（北京）农业部兽药安全监督检验测试中心（北京）中国农业大学中国农业大学“211工程工程”农产品安全研究中心农产品安全研究中心“985工程工程”农产品加工与食品安全创新平台农产品加工与食品安全创新平台农业部兽药残留和违禁添加物检测重点实验室农业部兽药残留和违禁添加物检测重点实验室动物源性食品安全检测技术北京市重点实验室动物源性食品安全检测技术北京市重点实验室北京维德维康生物技术有限公司北京维德维康生物技术有限公司研究方向研究方向细菌耐药性产生与扩散及风险评估细菌耐药性产生与扩散及风险评估兽药残留检测技术（包括快速检测产品研发）兽药残留检测技术（包括快速检测产品研发）兽医毒理学（包括环境生态毒理学）兽医毒理学（包括环境生态毒理学）药物动力学及新兽药创制药物动力学及新兽药创制 研究队伍研究队伍现现有有工工作作人人员员32名名，其其中中具具有有高高级级技技术术职职称称的的15人人，具具有有博博士士学学位位的的11人人。国国家家973项项目目首首席席科科学学家家1名名，教教育育部部长长江江学学者者1名名，新新世世纪纪人人才才2名名。在在读读硕硕士士、博博士士近近70名名。专专业业涉涉及及兽兽医医学学、兽兽医医药药理理学学与与毒毒理理学学、兽兽医医微微生生物物学学、药药物物学学、分分析析化化学学、免免疫疫化化学学、标标准准化化等等多多个个领领域域，组组成了一支多学科的科研教学队伍。成了一支多学科的科研教学队伍。主要研究成果主要研究成果近近五五年年先先后后承承担担国国家家科科技技支支撑撑计计划划项项目目、973项项目目、行行业业公公益益项项目目、国国家家杰杰出出青青年年基基金金项项目目、国国家家自自然然科科学学基基金金重重点点项项目目等等40余余项项，总总经经费费超超过过1亿亿元元。在在国国内内外外重重要要学学术术刊刊物物上上发发表表论论文文300余余篇篇，其其中中收收录录172篇篇；制制定定国国家家和和行行业业兽兽药药残残留留检检测测方方法法标标准准70项项：研研发发出出具具有有自自主主知知识识产产权权药药物物残残留留检检测测试试剂剂盒盒和和试试纸纸条条产产品品60余余种种，其其中中20种种获获得得农农业业部部批批准准备备案案文文号号；获获得得国国家家发发明明专专利利33项项。研研究究成成果果获获得得国国家家科科学学技技术术进进步步二二等等奖奖1项项，北北京京市市科科学学技技术术一一等等奖奖1项项和和北北京京市市科科学学技技术术二二等等奖奖2项项。已已培培养养博博士士研研究究生生65名名，硕硕士士研研究究生生近近200名。名。主要内容主要内容一、畜牧水产养殖业及动物性产品简况一、畜牧水产养殖业及动物性产品简况二、动物源食品安全现状二、动物源食品安全现状三、瘦肉精主要种类三、瘦肉精主要种类四、国内外瘦肉精残留限量标准四、国内外瘦肉精残留限量标准五、残留检测技术五、残留检测技术六、瘦肉精检测方法标准六、瘦肉精检测方法标准中国是养殖业大国，其中：中国是养殖业大国，其中：猪，猪，66686.4 万头万头奶牛，奶牛，1420.1 万头万头禽，禽，110 亿羽亿羽羊，羊，28087.9 万只万只一、畜牧水产养殖业及动物源性产品简况一、畜牧水产养殖业及动物源性产品简况数据来源：中国统计年鉴（数据来源：中国统计年鉴（2011）中国又是动物源性产品生产和消费大国，其中：中国又是动物源性产品生产和消费大国，其中：肉类，肉类，7925.8 万吨，人均达万吨，人均达59；蛋类，；蛋类，2762.7 万吨，人均达万吨，人均达21；奶类，；奶类，3748 万吨，人均达万吨，人均达28；水产品，水产品，5373 万吨，人均达万吨，人均达40。数据来源：中国统计年鉴（数据来源：中国统计年鉴（2011）二、动物源食品安全现状二、动物源食品安全现状l全全球球经经济济一一体体化化和和食食品品贸贸易易国国际际化化使使食食品品安安全全成成为为一一个个世世界界性性的的挑挑战战和和全全球球重重要要的的公公共共卫生问题。卫生问题。l其其中中外外源源化化合合物物（兽兽药药、药药物物添添加加剂剂、违违禁禁药药物物等等）残残留留超超过过最最高高残残留留限限量量标标准准以以及及临临床使用不遵守休药期是影响动物源食品安全的最主要因素之一。床使用不遵守休药期是影响动物源食品安全的最主要因素之一。l尽尽管管世世界界各各国国采采取取了了一一系系列列政政策策和和监监控控措措施施，但但世世界界范范围围内内涉涉及及食食品品安安全全的的恶恶性性、突突发发事件时有发生，食品安全现状仍然令人担扰。事件时有发生，食品安全现状仍然令人担扰。l我国目前动物性食品抽检比例低，且大多数为出口食品。我国目前动物性食品抽检比例低，且大多数为出口食品。部分部分“瘦肉精瘦肉精”事件事件2012年年2月月-9月，辽宁曝光月，辽宁曝光8起瘦肉精事件，肉牛、猪检测出瘦肉精起瘦肉精事件，肉牛、猪检测出瘦肉精2012年年2月月，国国家家体体育育总总局局发发文文，称称猪猪牛牛羊羊肉肉可可能能含含兴兴奋奋剂剂，规规定定国国家家队队成成员员不不能能在在外外用用餐餐；2012年年7月女排比赛失利归咎于瘦肉精。月女排比赛失利归咎于瘦肉精。2011年年10月，山东利津月，山东利津“瘦肉精瘦肉精”羊事件羊事件2011年年3月，双汇月，双汇“瘦肉精瘦肉精”猪被央视曝光猪被央视曝光2010年年9月，深圳市民吃蛇肉中毒月，深圳市民吃蛇肉中毒2010年年4月，广州月，广州70余人余人“瘦肉精瘦肉精”中毒中毒2009年年4月，阜阳产雨润牌午餐肉检出瘦肉精，食用可能中毒月，阜阳产雨润牌午餐肉检出瘦肉精，食用可能中毒2009年年2月月19日，广州出现了日，广州出现了“瘦肉精瘦肉精”中毒事件，累计有中毒事件，累计有70人出现中毒情况。人出现中毒情况。2008年年11月，浙江嘉兴月，浙江嘉兴70余人吃红烧肉中毒余人吃红烧肉中毒2007年年3月，广东江门市一家月，广东江门市一家6口喝猪肺汤中毒口喝猪肺汤中毒2006年年9月，上海月，上海300余人中毒余人中毒2006年年3月，广东东莞月，广东东莞6人中毒，人中毒，1人死亡人死亡2005年年9月，上海月，上海6人人2004年年8月，上海月，上海22人人2003年年10月，杭州月，杭州22人人2003年年10月，辽宁辽阳发生月，辽宁辽阳发生39人人2003年年3月，广东佛山近百人中毒月，广东佛山近百人中毒 2002年年4月，广东湛江月，广东湛江35人中毒人中毒2001年年11月，广东河源近月，广东河源近500人中毒人中毒2001年年11月，北京出现首例月，北京出现首例14人中毒人中毒2001年年8月，广东信宜月，广东信宜530人人提示：目前发生的中毒事件都是由克伦特罗引起的。提示：目前发生的中毒事件都是由克伦特罗引起的。瘦肉精相关案件瘦肉精相关案件2011年年4月月至至今今，全全国国公公安安机机关关共共破破获获食食品品非非法法添添加加案案件件1200余余起起，抓抓获获犯犯罪罪嫌嫌疑疑人人2000余余名名。其其中，在中，在“瘦肉精瘦肉精”破案会战中，各地共侦破案件破案会战中，各地共侦破案件120起，抓获涉案人员起，抓获涉案人员980多名。多名。2011年年8月，河北昌黎，瘦肉精喂羊，养羊户被判刑月，河北昌黎，瘦肉精喂羊，养羊户被判刑5年。年。2011年年8月，河南获嘉，韩文斌等人非法经营瘦肉精，判处月，河南获嘉，韩文斌等人非法经营瘦肉精，判处1到到10年。年。2011年年7月，月，河南沁阳，王二团等人违规出具检疫证明，判处河南沁阳，王二团等人违规出具检疫证明，判处5-6年有期徒刑。年有期徒刑。2011年年7月，河南焦作，刘襄等人非法生产瘦肉精，判处月，河南焦作，刘襄等人非法生产瘦肉精，判处9年到死缓不等。年到死缓不等。2011年年6月，吉林伊通，刘春成等人非法销售瘦肉精，判处月，吉林伊通，刘春成等人非法销售瘦肉精，判处4-6年。年。2010年年3月，广州市刑拘月，广州市刑拘15人。人。2009年年5月，浙江嘉兴王云水投毒瘦肉精，判处月，浙江嘉兴王云水投毒瘦肉精，判处8年。年。2006年，江西年，江西12人因制售使用瘦肉精被刑拘。人因制售使用瘦肉精被刑拘。2004年年9月，浙江衢州姜土寿生产、销售瘦肉精判处月，浙江衢州姜土寿生产、销售瘦肉精判处1年半。年半。三、瘦肉精主要种类三、瘦肉精主要种类主主要要包包括括克克伦伦特特罗罗、沙沙丁丁胺胺醇醇、莱莱克克多多巴巴胺胺等等，因因其其具具有有肾肾上上腺腺素素样样作作用用，可可缓缓解解、消消除除或或预预防防支支气气管管哮哮喘喘。除除莱莱克克多多巴巴胺胺外外，克克伦伦特特罗罗、沙沙丁丁胺胺醇醇、特特布布他他林林等等-受受体体激激动动剂剂在在人人医医临床上作为平喘的处方药广泛使用。临床上作为平喘的处方药广泛使用。11种受体激动剂的结构式种受体激动剂的结构式在在生生猪猪和和反反刍刍动动物物饲饲养养过过程程中中如如果果给给予予一一定定量量的的-受受体体激激动动剂剂，能能够够改改变变营营养养的的代代谢谢途途径径，促促进进动动物物肌肌肉肉、特特别别是是骨骨胳胳肌肌蛋蛋白白质质的的合合成成，加加速速脂脂肪肪的的分分解解与与转转化化，可可使使饲饲料料转转化化率率，生生长速率，胴体瘦肉率明显增加，所以在畜牧养殖业上该类化合物被统称为长速率，胴体瘦肉率明显增加，所以在畜牧养殖业上该类化合物被统称为“瘦肉精瘦肉精”。肉肉色色鲜鲜红红，脂脂肪肪层层极极薄薄，往往往往是是皮皮贴贴着着瘦瘦肉肉，瘦瘦肉肉丰丰满满，后后臀臀肌肌肉肉饱饱满满突突出出，但但肥肥肉肉和和瘦瘦肉明显分离，组织疏松。肉明显分离，组织疏松。健健康康正正常常猪猪肉肉肉肉色色淡淡红红，肉肉质质弹弹性性好好，组组织织紧紧密密，肥肥瘦瘦交交替替，肉肉皮皮与与瘦瘦肉肉之之间间脂脂肪肪（膘膘）厚约厚约1.5。该该类类药药物物毒毒副副作作用用较较大大，人人使使用用后后可可能能出出现现肌肌肉肉振振颤颤、心心慌慌、战战栗栗、头头疼疼、恶恶心心、呕呕吐吐等等不不良良反反应应症症状状，特特别别是是对对高高血血压压、心心脏脏病病、甲甲亢亢和和前前列列腺腺肥肥大大等等疾疾病病患患者者危危害害更更大大，严严重重的的可可导致死亡。这类药物如果用于食品动物，易在动物组织，尤其是内脏中残留。导致死亡。这类药物如果用于食品动物，易在动物组织，尤其是内脏中残留。该该类类药药物物主主要要在在肝肝脏脏、肺肺脏脏等等组组织织蓄蓄积积，据据报报道道，犊犊牛牛肝肝脏脏中中克克伦伦特特罗罗残残留留量量可可达达到到5000。我我国国百百姓姓自自古古以以来来就就有有喜喜爱爱食食用用内内脏脏的的习习惯惯，所所以以我我国国禁禁止止包包括括莱莱克克多多巴巴胺胺在在内内的的所所有有-受受体激动剂用于食品动物。体激动剂用于食品动物。猪以猪以20莱克多巴胺添加浓度饲喂后残留消除情况莱克多巴胺添加浓度饲喂后残留消除情况强志懿，中国农业大学硕士论文强志懿，中国农业大学硕士论文注注：给给药药饲饲喂喂7天天，数数据据来来源源于于美美国国礼来公司礼来公司注：给药注：给药30天，数据来源于天，数据来源于,127(2011)3273321987年欧盟、美国就宣布禁止使用克伦特罗作为兽用饲料添加剂。年欧盟、美国就宣布禁止使用克伦特罗作为兽用饲料添加剂。莱莱克克多多巴巴胺胺在在美美国国、加加拿拿大大、墨墨西西哥哥等等20余余个个美美洲洲和和亚亚太太国国家家批批准准用用于于猪猪和和反反刍刍动动物物，组组织织残留限量要求在残留限量要求在30-150 之间。欧盟则禁止使用莱克多巴胺。之间。欧盟则禁止使用莱克多巴胺。四、国内外瘦肉精残留限量标准四、国内外瘦肉精残留限量标准（一）国外残留限量标准（一）国外残留限量标准国家国家药物药物靶动物靶动物残留限量（残留限量（）欧盟克伦特罗牛肌肉：0.1；肝脏：0.5；肾脏：0.5；牛奶：0.05马肌肉：0.1；肝脏：0.5；肾脏：0.5美国莱克多巴胺牛肝脏：90；肌肉：30猪肝脏：150；肌肉：50（一）国外残留限量标准（一）国外残留限量标准国家国家药物药物靶动物靶动物残留限量（残留限量（）日本克伦特罗牛肝脏：0.6；肌肉：0.2猪肝脏：不得检出；肌肉：不得检出日本莱克多巴胺牛肝脏：40；肌肉：10猪肝脏：40；肌肉：10注：其他受体激动剂未见限量标准注：其他受体激动剂未见限量标准 5,35 ()a 69 67,.10 (),40 ,90 ,.2012年年7月月5日，第日，第35届年会上届年会上69票赞成，票赞成，67票反对，通过了莱克多巴胺在组织中的最大残留限量。票反对，通过了莱克多巴胺在组织中的最大残留限量。牛肉和猪肉，牛肉和猪肉，10，牛肝和猪肝，牛肝和猪肝，40，牛肾和猪肾，牛肾和猪肾，90。欧盟、中国、俄罗斯、印度等仍然坚持反对。欧盟、中国、俄罗斯、印度等仍然坚持反对。农业部农业部176号公告颁布号公告颁布5类类40种禁止在饲料和动物饮用水中使用的药物品种。种禁止在饲料和动物饮用水中使用的药物品种。农业部农业部193号公告颁布了号公告颁布了21种食品动物禁用的兽药及其它化合物清单。种食品动物禁用的兽药及其它化合物清单。农业部农业部1519号公告颁布了号公告颁布了11种禁止在饲料和动物饮水中使用的物质。种禁止在饲料和动物饮水中使用的物质。农农业业部部235号号公公告告中中颁颁布布了了109种种兽兽药药的的限限量量标标准准，涉涉及及马马、牛牛、羊羊、猪猪、禽禽、蜜蜜蜂蜂、鱼鱼、虾虾等动物。样品有组织（肌肉、肝脏、肾脏、脂肪等）、牛奶、蜂蜜等。等动物。样品有组织（肌肉、肝脏、肾脏、脂肪等）、牛奶、蜂蜜等。（二）我国残留限量标准（二）我国残留限量标准农业部、卫生部和国家药品监督管理局联合出台了禁止在饲料和动物饮用水中使用的药品目录农业部、卫生部和国家药品监督管理局联合出台了禁止在饲料和动物饮用水中使用的药品目录（农业部公告（农业部公告176176号）号）一、肾上腺素受体激动剂一、肾上腺素受体激动剂 盐酸克仑特罗、沙丁胺醇、硫酸沙丁胺醇、莱克多巴胺、盐酸多巴胺、西马特罗、硫酸特布他林盐酸克仑特罗、沙丁胺醇、硫酸沙丁胺醇、莱克多巴胺、盐酸多巴胺、西马特罗、硫酸特布他林二、性激素二、性激素 乙乙烯烯雌雌醇醇、雌雌二二醇醇、戊戊酸酸雌雌二二醇醇、苯苯甲甲酸酸雌雌二二醇醇、氯氯烯烯雌雌醚醚快快诺诺醇醇、炔炔诺诺醚醚、醋醋酸酸氯氯地地孕孕酮酮、左左快诺孕酮、快诺酮、绒毛膜促性腺激素（绒促性素）、促卵泡生长激素快诺孕酮、快诺酮、绒毛膜促性腺激素（绒促性素）、促卵泡生长激素三、蛋白同化激素三、蛋白同化激素 碘化酪蛋白、苯丙酸诺龙及苯丙酸诺龙注射液碘化酪蛋白、苯丙酸诺龙及苯丙酸诺龙注射液四、精神药品四、精神药品盐盐酸酸氯氯丙丙嗪嗪、盐盐酸酸异异丙丙嗪嗪、安安定定（地地西西泮泮）、苯苯巴巴比比妥妥、苯苯巴巴比比妥妥钠钠、巴巴比比妥妥、异异戊戊巴巴比比妥妥、异异戊戊巴巴比比妥妥钠钠、利利血血平平、艾艾司司唑唑仑仑、甲甲丙丙氨氨脂脂、咪咪达达唑唑仑仑、硝硝西西洋洋、奥奥沙沙西西洋洋、匹匹莫莫林林、三三唑唑仑仑、唑吡旦、其他国家管制的精神药品。唑吡旦、其他国家管制的精神药品。五、各种抗生素滤渣五、各种抗生素滤渣 农业部农业部193号公告号公告食品动物禁用的兽药及其它化合物清单食品动物禁用的兽药及其它化合物清单序号序号兽药及其它化合物名称兽药及其它化合物名称禁止用途禁止用途禁用动物禁用动物1-兴奋剂类：克仑特罗、沙丁胺醇、西马特罗及其盐、酯及制剂所有用途所有食品动物2性激素类：己烯雌酚及其盐、酯及制剂所有用途所有食品动物3具有雌激素样作用的物质：玉米赤霉醇、去甲雄三烯醇酮、醋酸甲孕酮及制剂所有用途所有食品动物4氯霉素、及其盐、酯（包括：琥珀氯霉素）及其制剂所有用途所有食品动物5氨苯砜及制剂所有用途所有食品动物6硝基呋喃类：呋喃唑酮、呋喃它酮、呋喃苯烯酸钠及制剂所有用途所有食品动物7硝基化合物：硝基酚钠、硝呋烯腙及制剂所有用途所有食品动物8催眠、镇静类：安眠酮及制剂所有用途所有食品动物9林丹（丙体六六六）杀虫剂所有食品动物10毒杀芬（氯化烯）杀虫剂、清塘剂所有食品动物序号序号兽药及其它化合物名称兽药及其它化合物名称禁止用途禁止用途禁用动物禁用动物11呋喃丹（克百威）杀虫剂所有食品动物12杀虫脒（克死螨）杀虫剂所有食品动物13双甲脒杀虫剂水生食品动物14酒石酸锑钾杀虫剂所有食品动物15锥虫胂胺杀虫剂所有食品动物16孔雀石绿抗菌剂、杀虫剂所有食品动物17五氯酚酸钠杀螺剂所有食品动物18各种汞制剂包括：氯化亚汞（甘汞）、硝酸亚汞、醋酸汞、吡啶基醋酸汞杀虫剂所有食品动物19性激素类：甲基睾丸酮、丙酸睾酮、苯丙酸诺龙、苯甲酸雌二醇及其盐、酯及制剂促生长所有食品动物20催眠、镇静类：氯丙嗪、地西泮、及其盐、酯及制剂促生长所有食品动物21硝基咪唑类：甲硝唑、地美硝唑及其盐、酯及制剂促生长所有食品动物农业部农业部1519号公告号公告禁止在饲料和动物饮水中使用的物质禁止在饲料和动物饮水中使用的物质 1.苯乙醇胺A（A）：-肾上腺素受体激动剂。2.班布特罗（）：-肾上腺素受体激动剂。3.盐酸齐帕特罗（）：-肾上腺素受体激动剂。4.盐酸氯丙那林（）：药典2010版二部P783。-肾上腺素受体激动剂。5.马布特罗（）：-肾上腺素受体激动剂。6.西布特罗（）：-肾上腺素受体激动剂。7.溴布特罗（）：-肾上腺素受体激动剂。8.酒石酸阿福特罗（）：长效型-肾上腺素受体激动剂。9.富马酸福莫特罗（）：长效型-肾上腺素受体激动剂。10.盐酸可乐定（）：药典2010版二部P645。抗高血压药。11.盐酸赛庚啶（）：药典2010版二部P803。抗组胺药。瘦肉精发展新情况1、老药新对象、老药新对象克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇用于牛羊兔禽等。克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇用于牛羊兔禽等。2、新药老对象、新药老对象苯乙醇胺苯乙醇胺A用于猪；在国家残留监控中，检测猪肉、猪肝用于猪；在国家残留监控中，检测猪肉、猪肝9种激动剂，猪尿检测种激动剂，猪尿检测3种。种。3、非饲料添加使用、非饲料添加使用（1）添于垫料，经皮肤吸收；）添于垫料，经皮肤吸收；（2）屠宰前使用，注水增重。）屠宰前使用，注水增重。五、残留检测技术五、残留检测技术残留分析一般程序残留分析一般程序 先先用用快快速速检检测测产产品品（试试剂剂盒盒或或试试纸纸条条）进进行行筛筛查查，可可疑疑阳阳性性样样品品再再用用仪仪器器分分析析方方法法尤尤其其是是色色质联用检测方法加以确证。美国、欧盟和日本等发达国家均按此程序进行。质联用检测方法加以确证。美国、欧盟和日本等发达国家均按此程序进行。各种测定方法的灵敏度范围各种测定方法的灵敏度范围各种测定方法的灵敏度范围各种测定方法的灵敏度范围10-1210-910-610-3紫外紫外/可见分光光度法可见分光光度法放射免疫测定法放射免疫测定法/酶免疫测定法酶免疫测定法色质联用分析色质联用分析放射受体分析放射受体分析气相色谱气相色谱(ECD/NPD)气相色谱气相色谱(FID)高效液相色谱高效液相色谱(FLD/UVD)时间分辨免疫时间分辨免疫/化学发光免疫化学发光免疫荧光分光光度法荧光分光光度法微生物测定法微生物测定法比色法比色法10-15（一）色谱分析技术（一）色谱分析技术气相色谱法（）气相色谱法（）高效液相色谱法（）高效液相色谱法（）超高效液相色谱法（）超高效液相色谱法（）气谱气谱-质谱法（）质谱法（）气谱气谱-串联质谱法（）串联质谱法（）液谱液谱-质谱法（）质谱法（）液谱液谱-串联质谱法（）串联质谱法（）其他新技术，如飞行时间质谱等其他新技术，如飞行时间质谱等兽药残留实验技术规范，农牧发兽药残留实验技术规范，农牧发20031号号瘦肉精仪器检测方法（、等）检测限为瘦肉精仪器检测方法（、等）检测限为0.5-2。精确度高精确度高假阳性率低假阳性率低较高的灵敏度较高的灵敏度重现性好重现性好效率较高效率较高准确度高准确度高优点优点需要专业操作人员需要专业操作人员仪器难以普及仪器难以普及成本高成本高操作繁琐操作繁琐缺点缺点酶联免疫吸附测定法酶联免疫吸附测定法化学发光免疫测定法化学发光免疫测定法荧光偏振免疫测定法荧光偏振免疫测定法量子点标记荧光测定法量子点标记荧光测定法时间分辨荧光免疫测定法时间分辨荧光免疫测定法胶体金免疫测定法胶体金免疫测定法放射免疫测定法放射免疫测定法微生物抑制测定法微生物抑制测定法生物传感器生物传感器生物芯片生物芯片（二）快速检测技术（二）快速检测技术1、酶联免疫吸附测定法、酶联免疫吸附测定法基本原理基本原理在在测测定定时时，把把受受检检标标本本（测测定定其其中中的的抗抗体体或或抗抗原原）和和酶酶标标抗抗原原或或抗抗体体与与固固相相载载体体表表面面的的抗抗原原或或抗抗体体起起反反应应，结结合合在在固固相相载载体体上上的的酶酶量量与与标标本本中中受受检检物物质质的的量量有有一一定定的的比比例例，加加入入酶酶反反应应的的底底物物后后，底底物物被被酶酶催催化化变变为为有有色色产产物物，产产物物的的量量与与标标本本中中受受检检物物质质的的量量直直接接相相关关，根根据据颜颜色色反反应应的深浅进行定性或定量分析。的深浅进行定性或定量分析。1、加入待测物；、加入待测物；2、加入抗体；、加入抗体；3、加入酶标二体；、加入酶标二体；4、加入底物；、加入底物；5、加入终止液、加入终止液目目前前最最常常用用方方法法为为间间接接竞竞争争法法，其其他他还还用用直直接接法法、夹夹心心法等。法等。优点优点 灵敏度高，特异性强，可进行定性和定量测定灵敏度高，特异性强，可进行定性和定量测定检测方便、快捷，一般检测方便、快捷，一般1-2个小时就能出结果个小时就能出结果对操作者和实验室条件要求不高对操作者和实验室条件要求不高可以用于大量样本的快速筛选可以用于大量样本的快速筛选目目前前市市场场上上兽兽药药等等残残留留检检测测试试剂剂盒盒品品种种有有数数十十个个，克克伦伦特特罗罗、莱莱克克多多巴巴胺胺、沙沙丁丁胺胺醇醇等等试试剂剂盒盒产品非常成熟。产品非常成熟。96孔酶标版孔酶标版样品稀释液样品稀释液标准溶液标准溶液底物溶液底物溶液终止液终止液酶标二抗工作液酶标二抗工作液浓缩洗涤液浓缩洗涤液抗体工作液抗体工作液瘦肉精检测试剂盒瘦肉精检测试剂盒药物药物样品样品检测限（）检测限（）检测时间检测时间克伦特罗尿液、组织、血清、饲料0.1、0.1、0.2、501-2h莱克多巴胺尿液、组织、血清、饲料0.1、0.5、0.3、501-2h沙丁胺醇尿液、组织、血清、饲料0.2、0.5、0.2、21-2h方法名称方法名称灵敏度级别灵敏度级别本底干扰本底干扰单个样品检测时间单个样品检测时间酶联免疫吸附10-8-10-10一般1h左右化学发光免疫10-12-10-15小1h左右荧光偏振免疫10-8-10-10小5-10量子点标记免疫10-9-10-10一般0.5h左右时间分辨免疫10-15-10-19几乎为零1h左右试剂盒方法比较试剂盒方法比较2、胶体金免疫测定法、胶体金免疫测定法试纸条结构试纸条结构采采用用竞竞争争法法，样样品品滴滴入入后后，在在层层析析作作用用下下经经胶胶体体金金标标记记抗抗体体的的结结合合垫垫，再再流流经经包包被被抗抗原原和和二二抗抗的的T线线和和C线线，若若样样品品中中含含有有药药物物，药药物物与与金金标标抗抗体体结结合合后后不不再再与与抗抗原原反反应应，T线线不不显显色色；若若不不含含药药物物，则金标抗体与抗原反应，则金标抗体与抗原反应，T线显色；无论有无药物，二抗与金标抗体均反应，即线显色；无论有无药物，二抗与金标抗体均反应，即C线显色。线显色。优点优点灵敏度高，特异性强灵敏度高，特异性强检测方便、快捷，一般检测方便、快捷，一般3-5分钟就能出结果分钟就能出结果几乎不需要任何仪器设备几乎不需要任何仪器设备可用于大量样本的快速筛选，适用于现场检测可用于大量样本的快速筛选，适用于现场检测检测卡组成检测卡组成试纸条的一般检测步骤试纸条的一般检测步骤1、样品前处理、样品前处理对尿液、血清等样品，只需进行简单稀释即可；对尿液、血清等样品，只需进行简单稀释即可；对猪肉等组织样品，通过提取或加热处理后，进行稀释；对猪肉等组织样品，通过提取或加热处理后，进行稀释；2、取出检测卡，平放到桌面上，用一次性吸管吸取样品处理液，在加样孔中加入、取出检测卡，平放到桌面上，用一次性吸管吸取样品处理液，在加样孔中加入3-4滴；滴；3、5 后观察结果；后观察结果；4、结果判定。、结果判定。阴阴性性：C线线显显色色，T线线有有颜颜色色，无无论论颜颜色色深深浅浅均均判为阴性。判为阴性。阳性：阳性：C线显色，线显色，T线无颜色，判为阳性。线无颜色，判为阳性。无无效效：C线线不不显显色色，无无论论T线线是是否否有有无无，该该试试纸纸条均判为无效。条均判为无效。结果判定结果判定瘦肉精检测卡瘦肉精检测卡药物药物样品样品检测限（）检测限（）检测时间检测时间克伦特罗尿液、血清、肌肉、饲料2、3、5、1005莱克多巴胺尿液、血清、肌肉、饲料3、3、8、1005沙丁胺醇尿液、血清、肌肉、饲料5、5、10、10053、多残留检测胶体金层析技术、多残留检测胶体金层析技术在在传传统统胶胶体体金金层层析析技技术术的的基基础础上上，在在硝硝酸酸纤纤维维素素膜膜上上包包被被多多条条检检测测线线，实实现现“一一条条多多检检”。检检测测更更加快捷、方便。加快捷、方便。克伦特罗-莱克多巴胺、喹诺酮类-庆大霉素、磺胺类-喹诺酮类、三聚氰胺-庆大霉素-四环素类T1T2T3C快速筛查原则“在在快快速速筛筛查查技技术术研研究究中中，国国内内外外的的一一个个基基本本原原则则是是绝绝不不能能有有假假阴阴性性，但但允允许许有有假假阳阳性性，也也就就是是说，快速筛查为阴性的样品，肯定不含瘦肉精，而筛查为阳性的样品，可以有误判。说，快速筛查为阴性的样品，肯定不含瘦肉精，而筛查为阳性的样品，可以有误判。”河南农科院张改平院士接受中央电视台采访时谈到河南农科院张改平院士接受中央电视台采访时谈到2001年至今，先后颁布了年至今，先后颁布了39项瘦肉精残留检测方法国家标准、行业标准以及地方标准。项瘦肉精残留检测方法国家标准、行业标准以及地方标准。主主要要为为液液相相色色谱谱-质质谱谱法法、气气相相色色谱谱-质质谱谱法法、气气相相色色谱谱法法、高高效效液液相相色色谱谱法法、酶酶联联免免疫疫吸吸附附法、胶体金免疫层析法等。法、胶体金免疫层析法等。六、残留检测方法标准六、残留检测方法标准 5009.192-2003 动物性食品中克伦特罗残留量的测定动物性食品中克伦特罗残留量的测定 21313-2007 动物源性食品中动物源性食品中-受体激动剂残留检测方法受体激动剂残留检测方法 液相色谱液相色谱-质谱质谱/质谱法质谱法 22147-2008 饲料中沙丁胺醇、莱克多巴胺和盐酸克仑特罗的测定饲料中沙丁胺醇、莱克多巴胺和盐酸克仑特罗的测定 液相色谱质谱联用法液相色谱质谱联用法 22286-2008 动物源性食品中多种动物源性食品中多种-受体激动剂残留量的测定受体激动剂残留量的测定 液相色谱串联质谱法液相色谱串联质谱法 农业部农业部1025号公告号公告-18-2008 动物源性食品中动物源性食品中-受体激动剂残留检测受体激动剂残留检测 液相色谱液相色谱-串联质谱法串联质谱法 农业部农业部1025号公告号公告-16-2008 动物尿液中盐酸克伦特罗残留检测动物尿液中盐酸克伦特罗残留检测 气相色谱气相色谱-质谱法质谱法 农业部农业部1025号公告号公告-11-2008 猪尿中猪尿中-受体激动剂多残留检测受体激动剂多残留检测 液相色谱液相色谱-串联质谱法串联质谱法 438-2001 饲料中盐酸克仑特罗的测定饲料中盐酸克仑特罗的测定农业部农业部958号公告号公告-8-2007 牛可食性组织中克仑特罗残留检测方法牛可食性组织中克仑特罗残留检测方法 气相色谱气相色谱-质谱法质谱法 农业部农业部1063号公告号公告-7-2008 饲料中饲料中8种种-受体激动剂的检测受体激动剂的检测 气相色谱气相色谱-质谱法质谱法 农业部农业部1063号公告号公告-6-2008 饲料中饲料中13种种-受体激动剂的检测受体激动剂的检测 液相色谱液相色谱-串联质谱法串联质谱法 农业部农业部1063号公告号公告-3-2008 动物尿液中动物尿液中11种种-受体激动剂的检测受体激动剂的检测 液相色谱液相色谱-串联质谱法串联质谱法 农业部农业部1031号公告号公告-3-2008 猪肝和猪尿中猪肝和猪尿中-受体激动剂残留检测受体激动剂残留检测 气相色谱气相色谱-质谱法质谱法 468-2006 动物组织中盐酸克伦特罗的测定动物组织中盐酸克伦特罗的测定 气相色谱气相色谱-质谱法质谱法 421-2003 动物尿液中盐酸克伦特罗（瘦肉精）残留的检测气相色谱动物尿液中盐酸克伦特罗（瘦肉精）残留的检测气相色谱/质谱（）方法质谱（）方法 933-2005 尿液中盐酸克仑特罗的测定尿液中盐酸克仑特罗的测定 胶体金免疫层析法胶体金免疫层析法 1460-2007 饲料中盐酸克仑特罗的测定饲料中盐酸克仑特罗的测定 酶联免疫吸附法酶联免疫吸附法 33 454-2003 动物血清中盐酸克伦特罗残留的检测方法动物血清中盐酸克伦特罗残留的检测方法 33 455-2003 动物毛发中盐酸克伦特罗残留的检测方法动物毛发中盐酸克伦特罗残留的检测方法 33 623-2006 动动物物尿尿液液中中特特布布他他林林、克克伦伦特特罗罗、沙沙丁丁胺胺醇醇和和莱莱克克多多巴巴胺胺残残留留量量的的测测定定 气气相相色色谱谱-质谱法质谱法 33 624-2006 动动物物组组织织中中特特布布他他林林、克克伦伦特特罗罗、沙沙丁丁胺胺醇醇和和莱莱克克多多巴巴胺胺残残留留量量的的测测定定 气气相相色色谱谱-质谱法质谱法 34 818-2008 饲料中盐酸克伦特罗的测定饲料中盐酸克伦特罗的测定-胶体金免疫层析法胶体金免疫层析法 34 823-2008 动物组织中盐酸克伦特罗的残留测定动物组织中盐酸克伦特罗的残留测定酶联免疫吸附法酶联免疫吸附法 34 824-2008 动物组织中盐酸克伦特罗的残留测定动物组织中盐酸克伦特罗的残留测定胶体金免疫层析法胶体金免疫层析法 1116-2002 进出口饲料中克伦特罗、沙丁胺醇残留量的检验方法进出口饲料中克伦特罗、沙丁胺醇残留量的检验方法 液相色谱法液相色谱法 1924-2011 进进出出口口动动物物源源食食品品中中克克伦伦特特罗罗、莱莱克克多多巴巴胺胺、沙沙丁丁胺胺醇醇和和特特布布他他林林残残留留量量的的测测定定 液相色谱液相色谱-质谱质谱/质谱法质谱法 1030-2006 饲料中沙丁胺醇的测定饲料中沙丁胺醇的测定 气相色谱气相色谱-质谱法质谱法 20189-2006 饲料中莱克多巴胺的测定饲料中莱克多巴胺的测定 高效液相色谱法高效液相色谱法33 539-2005 饲料中莱克多巴胺的测定饲料中莱克多巴胺的测定 农业部农业部958号公告号公告-3-2007 动物源食品中莱克多巴胺残留量的测定动物源食品中莱克多巴胺残留量的测定 高效液相色谱法高效液相色谱法-质谱法质谱法 34 828-2008 尿液中莱克多巴胺的残留测定尿液中莱克多巴胺的残留测定气相色谱质谱法气相色谱质谱法 34 820-2008 饲料中莱克多巴胺的测定饲料中莱克多巴胺的测定-气相色谱质谱法气相色谱质谱法 农业部农业部958号公告号公告-4-2007 动物组织及动物尿液中莱克多巴胺残留检测方法动物组织及动物尿液中莱克多巴胺残留检测方法 气相色谱气相色谱-质谱法质谱法 34 827-2008 尿液中莱克多巴胺的残留测定尿液中莱克多巴胺的残留测定酶联免疫吸附法酶联免疫吸附法 34 826-2008 动物组织中莱克多巴胺的残留测定动物组织中莱克多巴胺的残留测定气相色谱质谱法气相色谱质谱法 34 825-2008 动物组织中莱克多巴胺的残留测定动物组织中莱克多巴胺的残留测定酶联免疫吸附法酶联免疫吸附法 农业部农业部1025号公告号公告-6-2008 动物性食品中莱克多巴胺残留检测动物性食品中莱克多巴胺残留检测 酶联免疫吸附法酶联免疫吸附法 34 819-2008 饲料中莱克多巴胺的测定饲料中莱克多巴胺的测定-酶联免疫吸附法酶联免疫吸附法34 1377-2011 尿液中莱克多巴胺的残留测定尿液中莱克多巴胺的残留测定胶体金免疫层析谱法胶体金免疫层析谱法瘦肉精监控的发展趋势1.食食品品安安全全问问题题仍仍然然是是全全球球关关注注的的热热点点，加加强强监监控控势势在在必必行行，对对食食品品中中有有害害物物进进行行检检测测是是把把好好食食品品安全的最后一道关口；安全的最后一道关口；2.仪仪器器本本身身成成本本高高，操操作作繁繁琐琐，需需要要专专业业人人员员，缺缺少少检检测测方方法法标标准准，检检测测样样本本和和数数量量难难于于满满足足食食品品安全监控的需求；安全监控的需求；3.发发达达国国家家食食品品安安全全监监控控均均采采取取快快速速筛筛选选加加仪仪器器确确证证的的模模式式，试试剂剂盒盒和和检检测测卡卡得得到到等等官官方方机机构构的的认认可；可；4.试试剂剂盒盒和和检检测测卡卡灵灵敏敏度度高高，使使用用简简单单，容容易易上上手手，不不需需要要大大型型的的仪仪器器设设备备，尤尤其其适适合合基基层层检检测测单单位，养殖场、屠宰场和食品加工生产出口企业大批量筛查使用；位，养殖场、屠宰场和食品加工生产出口企业大批量筛查使用；5.国国家家、省省市市、地地县县检检测测部部门门（农农业业、质质检检、工工商商、卫卫生生等等）自自上上而而下下开开展展食食品品安安全全监监控控计计划划，每每年投入大量的检测费用；年投入大量的检测费用；6.国民对食品安全的重视可能促进灵敏度更高、耗时更短的快检产品出现。国民对食品安全的重视可能促进灵敏度更高、耗时更短的快检产品出现。谢谢 谢！谢！谢谢