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第二节第二节骨髓细胞学检查骨髓细胞学检查1行业学习第二节1行业学习一一 血血 细细 胞胞 生生 成成 发发 育育 规规 律律 正正 常常 形形 态态 学学 特特 征征2行业学习一血细胞生成2行业学习3行业学习3行业学习造血干细胞的分化及增殖示意图造血干细胞的分化及增殖示意图4行业学习造血干细胞的分化及增殖示意图4行业正常骨髓涂片正常骨髓涂片5行业学习正常骨髓涂片5行业学习原粒细胞原粒细胞(myeloblast)6行业学习原粒细胞(myeloblast)6行业学习早幼粒细胞早幼粒细胞(promyeloblast)7行业学习早幼粒细胞(promyeloblast)7行业学习中幼粒及晚幼粒细胞(lategranulocyteprecursorslategranulocyteprecursors)8行业学习中幼粒及晚幼粒细胞(lategranulocytepre嗜酸粒细胞(eosinophil)9行业学习嗜酸粒细胞(eosinophil)9行业学习嗜碱粒细胞嗜碱粒细胞(basophilprecursors)10行业学习嗜碱粒细胞(basophilprecursors)10行业二二.骨髓细胞形态学检查的方法和内容骨髓细胞形态学检查的方法和内容 低倍镜检查低倍镜检查 确定骨髓标本取材和涂片满意?确定骨髓标本取材和涂片满意?11行业学习二.骨髓细胞形态学检查的方法和内容11行业学习观察骨髓增生度 12行业学习12行业学习观察巨核细胞观察巨核细胞数量:低倍镜 成熟程度:油镜 产血小板功能 形态4.4.异常细胞异常细胞异常组织细胞 转移癌细胞 Gaucher细胞 Niemann-Pick细胞13行业学习观察巨核细胞13行业学习骨骨髓髓增增生生程程度度分分级级 有核细胞:成熟红细胞 有核细胞/H 常见原因增生极度活跃1:0.5-21:1100leukemia增生明显活跃1:5-121:1050100leukemia,增贫增生活跃1:16-321:202050正常,各种贫血增生减低1:35-701:50510CAA增生明显减低1:100-3001:2005AAA14行业学习骨髓增生程度分(二)油浸镜检查(二)油浸镜检查15行业学习(二)油浸镜检查15行业学习油镜下检查油镜下检查1.有核细胞计数、分类 G:E24:1 巨核细胞计数、分类 观察细胞形态:异常细胞,寄生虫 16行业学习16行业学习各系细胞及各发育阶段比例比例比例各发育阶段比例各发育阶段比例粒系粒系5060原、早、中原、早、中1/5,余余1/5红系红系20原红原红1%,早红早红5%淋巴系淋巴系20以成熟淋巴细胞为主以成熟淋巴细胞为主单核单核4%成熟单核细胞为主成熟单核细胞为主浆细胞浆细胞2%成熟阶段为主成熟阶段为主巨核细胞巨核细胞17行业学习各系细胞及各发育阶段比例比各系列细胞比例改变临床意义粒红比例粒红比例粒系粒系红系红系淋系淋系单核细胞系统单核细胞系统浆细胞系统浆细胞系统巨核细胞系统巨核细胞系统18行业学习各系列细胞比例改变临床意义粒红比例18行业学习BloodSmear白细胞分类计数 成熟红细胞形态有无异常 略估血小板形态与数量 注意有无寄生虫疟原虫填充报告单19行业学习BloodSmear白细胞分类计数成20行业学习20行业学习三三.血细胞的细胞化学染色血细胞的细胞化学染色 细胞化学染色是以细胞细胞形态学形态学为基础,根据化学反应化学反应的原理应用骨髓涂片进行固定,化学反应显色,复染等程序染色光光学显微镜学显微镜下观察 21行业学习三.血细胞的细胞化学染色21行业学习过氧化物酶染色(过氧化物酶染色(POX)苏丹黑染色(SB)氯化醋酸AS-D萘酚酯酶染色(AS-D)22行业学习过氧化物酶染色(POX)22行业学习Peroxidase(POX)急性粒细胞(+)和单核细胞(+/-)、急性淋巴细胞(-)Myeloblast(-)Promyelocyte/N(+)EosinophilstrongpositiveBasophil(-)Monocyte()Lymphocyte、erythroid、Megakaryocyte(-)鉴别鉴别:急粒、急单和急淋,特别是急粒、急单和急淋,特别是M3和和M5。23行业学习Peroxidase(POX)急性粒细胞(+)和单核细胞(+(二)苏丹黑B染色临床意义同临床意义同POX24行业学习(二)苏丹黑B染色临床意义同POX24行业学习(三)中性粒细胞碱性磷酸酶染色NAP正常值阳性率正常值阳性率1040,积分值,积分值408025行业学习(三)中性粒细胞碱性磷酸酶染色NAP正常值阳性率10临床意义慢粒慢粒和类白血病反应和类白血病反应急粒急粒、急单、急单和急淋和急淋AA和和PNH化脓性感染化脓性感染和病毒感染和病毒感染恶性组织细胞病恶性组织细胞病反应性组织细胞增生反应性组织细胞增生症症26行业学习临床意义慢粒和类白血病反应26行业学习(四)酸性磷酸酶染色ACP1。协助诊断。协助诊断HCL。HCL时时ACP呈阳性呈阳性且不被且不被L-酒石酸所抑制。酒石酸所抑制。2.协助诊断协助诊断T和和B淋巴细胞。淋巴细胞。T(+)B(-)3.Gaucher病病(+)、Niemann-Pick细胞细胞(-)27行业学习(四)酸性磷酸酶染色ACP1。协助诊断HCL。HCL时AC(五)氯化醋酸AS-D萘酚脂酶染色(AS-DNCE)急性粒细胞白血病(急性粒细胞白血病(+)急单和急淋(急单和急淋(-)28行业学习(五)氯化醋酸AS-D萘酚脂酶染色(AS-DNCE)急性(六)-醋酸萘酚酯酶染色-NAE主要存在于单核系细胞中主要存在于单核系细胞中29行业学习(六)-醋酸萘酚酯酶染色-NAE主要存在于单核临床意义急单,但被急单,但被NaF抑制抑制急粒急粒,不,不被被NaF抑制抑制30行业学习临床意义急单,但被NaF抑制30行业学习(七)糖原染色(PAS)31行业学习(七)糖原染色(PAS)31行业学习PAS染色反应正常细胞正常细胞白血病白血病红系红系()()(+)粒系粒系原粒()余()原粒()余()()或()或()淋系淋系()或()或()()()单核系单核系()()()()巨核系巨核系()()32行业学习PAS染色反应正常细胞临床意义LPD;病毒感染正常;病毒感染正常红白血病红白血病;MA正常正常急粒;急淋,颗粒状或块状;急单急粒;急淋,颗粒状或块状;急单,弥漫性,弥漫性成熟巨核成熟巨核33行业学习临床意义LPD;病毒感染正常33行业学习(八)铁染色1.细胞外铁细胞外铁2.细胞内铁细胞内铁意义:意义:1.缺铁性贫血缺铁性贫血:细胞外铁细胞外铁(-).2.非缺铁性贫血:胞外铁增多非缺铁性贫血:胞外铁增多3.铁粒幼细胞贫血:环状铁粒幼细胞铁粒幼细胞贫血:环状铁粒幼细胞15%以上以上34行业学习(八)铁染色1.细胞外铁34行业学习铁染色铁染色细胞外铁细胞内铁35行业学习铁染色35行业学习几种常见急性白血病的细胞化学染色结果几种常见急性白血病的细胞化学染色结果急淋急淋急粒急粒急单急单红白血病红白血病POX+-+视合并的白细胞类似而定SB+同上AS-DNCE+同上-NAE+同上-NAE+NaF不被NaF抑制能被NaF抑制同上NAP增加减少正常或增加同上PAS+,粗或+,弥漫或+,弥漫性+颗粒状性淡红色淡红色或细颗或块状粒状36行业学习几种常见急性白血病的细胞化学染色结果36行业学习四免疫分型一检测方法:一检测方法:1.免疫荧光法免疫荧光法2.免疫酶染法免疫酶染法识别不同系列细胞识别不同系列细胞37行业学习四免疫分型一检测方法:37行业学习(二)细胞免疫分型的临床应用识别不同系列细胞识别不同系列细胞识别不同淋巴细胞识别不同淋巴细胞检测检测T细胞亚群细胞亚群识别不同分化阶段细胞识别不同分化阶段细胞识别不同功能状态细胞识别不同功能状态细胞对不同系列和分化阶段细胞进行分离研究对不同系列和分化阶段细胞进行分离研究白血病细胞免疫表型研究白血病细胞免疫表型研究白血病微小残留病的检测白血病微小残留病的检测急性白血病免疫表型特点急性白血病免疫表型特点38行业学习(二)细胞免疫分型的临床应用识别不同系列细胞38行业B淋巴细胞:淋巴细胞:cCD22,cCD79,CD10,CD19T淋巴细胞:淋巴细胞:CD2,Ccd3,CD4,CD7,CD8髓系:髓系:MPO,cCD13,CD14,CD15,CD33,CD6539行业学习B淋巴细胞:cCD22,cCD79,CD10,CD1939(三)急性白血病的免疫分型1.ALL1.ALL与与与与AMLAML细胞免疫表型的特点:细胞免疫表型的特点:细胞免疫表型的特点:细胞免疫表型的特点:CD19CD19CD7CD7CD33CD33CD13CD13HLA-HLA-DRDRTDTTDTB-ALLB-ALL+-+/-+/-T-ALLT-ALL-+-/+-/+AMLAML-/+-/+-40行业学习(三)急性白血病的免疫分型1.ALL与AML细胞免疫表型的特2.ALL的免疫表型的免疫表型B系列:早期系列:早期BCD19+CD10-普通普通BCD19+CD10+前前BCD19+胞质胞质u链链+T系列:系列:B细胞型细胞型CD19+胞膜胞膜Ig+前前T型型CD7+CD2-T细胞型细胞型CD7+CD2+41行业学习2.ALL的免疫表型41行业学习3.AMLM0:CD33,34,13M1:CD33,34,13M2:CD34,33,13,15M3:CD33,13(HLA-DR阴性阴性)M4:CD13,14,15,33,34M5:CD13,14,15,33M6:CD33,血型糖蛋白血型糖蛋白M7:CD33,41,42,6142行业学习3.AML42行业学习细胞遗传学异常克隆的概念异常克隆的概念M2:t(8;21)M3:t(15;17),t(11;17)CML:t(9;22)43行业学习细胞遗传学异常克隆的概念43行业学习常见血液病的血液学特征常见血液病的血液学特征1 1、AnemiaAnemiaIrondeficiencyanemia(IDA)Irondeficiencyanemia(IDA)Hemolyticanemia(HA)Hemolyticanemia(HA)PosthemorrhagicanemiaPosthemorrhagicanemiaMegaloblasticanemia(MA)Megaloblasticanemia(MA)AplasticanemiaAplasticanemia2 2、LeukemiaLeukemiaAcuteleukemiaAcuteleukemia:ALLALL、AMLAMLChronicleukemiaChronicleukemia:CMLCML、CLLCLL44行业学习常见血液病的血液学特征1、Anemia44行业学习常见血液病的血液学特征常见血液病的血液学特征3 3、Myelodysplasticsyndrome(MDS)Myelodysplasticsyndrome(MDS)4 4、Multiplemyeloma(MM)Multiplemyeloma(MM)5 5、IdiopathicthrombocytopenicIdiopathicthrombocytopenicpurpura(ITP)purpura(ITP)45行业学习常见血液病的血液学特征3、Myelodysplastics
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