骨科结核感染T细胞斑点检测(SPOT)课件

结核感染细胞斑点检测技术（）及其临床应用检验科细菌室结核感染细胞斑点检测技术（）及其临床应用检验科细菌室肺外结核病占全部结核病的肺外结核病占全部结核病的死亡人数占全部结核病死亡数死亡人数占全部结核病死亡数上升趋势上升趋势结核病你真正了解吗？肺外结核病占全部结核病的结核病你真正了解吗？2新疆结核病疫情我区仍然是全国结核病高发省区之一，每年报告肺结核发病人数近万例。根据年结核病流行病学调查结果，我区活动性肺结核患病率、涂阳肺结核患病率、菌阳肺结核患病率分别为全国平均水平的倍、倍和倍。关于印发新疆维吾尔自治区结核病防治关于印发新疆维吾尔自治区结核病防治规划（年）的通知规划（年）的通知新疆结核病疫情我区仍然是全国结核病高发省区之一，每年报告肺结3潜伏结核感染管理指南潜伏结核感染管理指南()定义()机体对结核分枝杆菌抗原刺激产生的持久性的免疫反应，临床上没有任何活动性结核的征象.高风险人群感染者、实体器官移植者、接受抑制剂指治疗的患者和免疫介导的炎症性疾病（和其他自身免疫病）、透析患者、血液系统恶性肿瘤患者，包括者指南高危患者考虑和任何阳性结果应该被认为的证据潜伏结核感染管理指南()定义()机体对结核分枝杆菌抗原刺激4使用抗治疗前的抗结核治疗使用抗治疗前的抗结核治疗(北京胸科医北京胸科医院）院）仅仅结果阳性，无其它结核表现，可预防性抗结核治疗个月。化疗方案：三联方案：异烟肼：日 利福平 日 乙胺丁醇 日 两联方案：异烟肼：日 利福平 日 用药前查肝、肾功能、血、尿常规，用药后、，以后每复查一次。疗程个月。抗结核治疗后开始抗治疗。使用抗治疗前的抗结核治疗(北京胸科医院）仅仅结果阳性，无其它5结核病诊断技术结核病诊断技术分子分子生物学生物学介入诊断介入诊断影像学影像学结核病结核病诊断诊断细菌学细菌学病理学病理学免疫学免疫学结核病诊断技术分子介入诊断影像学结核病诊断细菌学病理学免疫学6.结核抗原、抗体诊断简便、快速，可以作为结核病的辅助诊断方法之一，但诊断价值有限。年正式公告禁止.（）试验传统的结核感染检测方法易受接种史和非结核分枝杆菌干扰，特异性低免疫低下患者中，诊断敏感性低需要天等待时间免疫学检测手段.结核抗原、抗体诊断简便、快速，可以作为结核病的辅助诊断7列入美国、英国等欧美多个国家结核诊疗指南；美国推荐：列入美国、英国等欧美多个国家结核诊疗指南；美国推荐：接种人群结核感染检测首选；国内专家指南接种人群结核感染检测首选；国内专家指南批准的使用范围：检测血液样本中效应细胞产生批准的使用范围：检测血液样本中效应细胞产生的能力，的能力，用于诊断结核杆菌感染。用于诊断结核杆菌感染。适应症：结核感染的诊断和活动性结核病的辅助诊断适应症：结核感染的诊断和活动性结核病的辅助诊断(酶联免疫斑点法酶联免疫斑点法酶联免疫斑点法酶联免疫斑点法)(酶联免疫斑点法)81.特异性好，不受卡介苗（BCG）接种与环境分枝杆菌影响；2.灵敏度高，几乎不受个体免疫功能低下影响；3.快速，24h报告结果；4.对肺外结核的诊断尤其有帮助；5.降低医疗事故风险，减少带药诊断的医患纠纷风险。方法学优点T-SPOT.TB诊断性能1.特异性好，不受卡介苗（BCG）接种与环境分枝杆菌影响；9临床性能指标 特异性特异性只针对结核分枝杆菌复合群敏感，与绝大多数环境分枝杆只针对结核分枝杆菌复合群敏感，与绝大多数环境分枝杆菌菌和卡介苗（）无交叉反应。和卡介苗（）无交叉反应。美国数据：特异性美国数据：特异性()国内临床数据：特异性国内临床数据：特异性()灵敏度灵敏度基本不受免疫力低下受抑制影响，在肺结核基本不受免疫力低下受抑制影响，在肺结核 与肺外结核患与肺外结核患者中均有很高的检出率。者中均有很高的检出率。美国数据：灵敏度美国数据：灵敏度()国内临床数据：灵敏度国内临床数据：灵敏度()临床性能指标特异性10实验效果图阴性阴性结果果阳性阳性结果果空白空白对照照抗原抗原AESAT-6抗原抗原BCFP10阳性阳性对照照（PHA）小时报告结果阴性结果：抗原或抗原斑点数均小于阳性结果：抗原或抗原斑点数任意一个大于等于，实验效果图阴性结果阳性结果空白对照阴性结果：抗原或抗原斑点数11实验结果解释实验结果解释阴性结果意义提示患者体内不存在针对结核杆菌特异的效应细胞。排除结核感染排除结核病帮助临床鉴别诊断阳性结果意义提示患者体内存在针对结核杆菌特异的效应细胞，患者存在结核感染。但是否是活动性结核病，需结合临床症状和其它检测指标综合判断。结核感染结合临床综合判断怀疑实验结果解释阴性结果意义12检测结果判读检测结果判读检测结果判读13名疑似患者中，名分作肺部疾病组，名分作肺外疾病组（包括中枢神经系统、外周淋巴结、胸膜、骨骼、生殖泌尿系统等）在肺疾病组和肺外疾病组中的灵敏度分别为和，特异性分别为和。冯云,张文宏等.,（）临床数据名疑似患者中，名分作肺部疾病组，名分作肺外疾病组（包括中枢神14等在例疑诊肺外结核的患者中研究显示，.在诊断淋巴结核和骨结核的敏感性为，在诊断急性肺外结核(结核性脑膜炎和粟粒性肺结核)的敏感性为。,.,（）临床数据等在例疑诊肺外结核的患者中研究显示，.在诊断淋巴结核15骨结核的辅助诊断和鉴别诊断如脊柱结核与强直性脊柱炎、化脓性脊柱炎、腰椎间盘突出、脊柱肿瘤、退行性脊柱骨关节病等的鉴别诊断结核感染筛查大剂量激素使用抗、生物制剂使用前后不明原因发热患者的结核排筛骨科适应范围在骨科的应用骨结核的辅助诊断和鉴别诊断骨科适应范围在骨科的应用16贾红彦,张宗德等，北京胸科医院，,干扰素释放试验在骨关节结核病诊断中的干扰素释放试验在骨关节结核病诊断中的应用价值研究应用价值研究骨科临床应用（一）贾红彦,张宗德等，北京胸科医院，,干扰素释放试验17特点特点结核结核()非结核非结核()合并其他部位结核合并其他部位结核 肺结核（）肾脏结核（）病灶位置病灶位置 脊柱()()髋关节()()膝关节()()肘关节()()手关节（）（）踝关节()骶髂关节（）肩关节（）肋骨（）股骨（）（）确诊骨关节结核病确诊骨关节结核病非活动性非活动性结核病结核病例数分类细菌培养确诊疑似结核病确诊病例（培养阳性者）、疑似结核病（组织活检或发现干酪性肉芽肿并且抗结核治疗有效）和非活动性结核病患者（确诊为其他疾病、未抗结核治疗而病情好转）.,.,特点结核()非结核()合并其他部位结核肺结核18.,.,将名骨关节结核病患者根据其病程，即住院前出现症状的时间，将研究对象分为四组：月、月、月、月，试验在上述四组中的敏感度无统计学差异。试验在确诊名怀疑骨关节结核病患者中的诊断准确性类型（类型（)细菌培养细菌培养确诊（）确诊（）疑似结核疑似结核病（）病（）脊柱结核脊柱结核（）（）四肢关节四肢关节结核（）结核（）敏感度.,.,试验在确诊名怀疑骨关节结核病患者中的19.,.,试验的敏感度远高于痰涂片抗酸染色、结核分枝杆菌培养和实时荧光定量（）。可作为骨关节结核病诊断的重要辅助工具。试验和其他诊断方法在名怀疑骨关节结核病患者诊断中的准确性比较方法方法敏感度敏感度()特异度特异度()痰涂片抗酸染色()()结核分枝杆菌培养()()实时荧光定量()()试验()*().,.,试验的敏感度远高于痰涂片抗酸染色、结20讨论讨论骨关节结核病的诊断仍然是一个难以解决的问题骨关节结核病的诊断仍然是一个难以解决的问题 在炎症部位进行组织和滑膜活检是最快捷的诊断方法，在炎症部位进行组织和滑膜活检是最快捷的诊断方法，但该方法有创伤性但该方法有创伤性 痰涂片抗酸染色的敏感度为，原因在于骨关节结核病痰涂片抗酸染色的敏感度为，原因在于骨关节结核病患者所检测的样本中细菌载量低患者所检测的样本中细菌载量低 结核分枝杆菌培养的敏感度仅为，且该试验耗时较长，结核分枝杆菌培养的敏感度仅为，且该试验耗时较长，大约需要周时间才能得到结果大约需要周时间才能得到结果 实时荧光定量检测的敏感度为，在病原学确诊的患者实时荧光定量检测的敏感度为，在病原学确诊的患者中可达，造成该试验敏感度低的原因除标本的细菌载中可达，造成该试验敏感度低的原因除标本的细菌载量低外，还有可能因为病灶部位细菌分布不均导致检量低外，还有可能因为病灶部位细菌分布不均导致检测标本中无结核分枝杆菌存在测标本中无结核分枝杆菌存在试验敏感度（）显著高于痰涂片抗酸染色（）、结核分试验敏感度（）显著高于痰涂片抗酸染色（）、结核分枝杆菌培养（）和实时荧光定量（）枝杆菌培养（）和实时荧光定量（）.,.,讨论.,.,21酶联免疫斑点法酶联免疫斑点法()()检测在骨结核中的诊断价值检测在骨结核中的诊断价值骨科临床应用（二）,.,酶联免疫斑点法()检测在骨结核中的诊断价值骨科临床应用（二）22.,.,l结核性骨关节炎患者检测结果l检测诊断骨结核(包括确诊与临床诊断)的敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值分别为（），（），（），和（）。患者例数患者例数()确诊结核()临床诊断结核()确诊临床诊断结核()检测阳性例数()()()()检测阴性例数()()()()l年月至年月，本研究共纳入台湾一所三级保健医院例疑诊骨结核的患者（例排除结核）.,.,结核性骨关节炎患者检测结果患者例23.,.,敏感性的差异可能由于不同部位结核所致的免疫反应程度不同。检测可辅助诊断骨结核，阴性结果可排除脊柱结核变量变量脊柱结核脊柱结核关节结核关节结核确诊结核()临床诊断结核()确诊临床诊断结核()确诊结核()临床诊断结核()确诊临床诊断结核()检测阳性例数()()()()()()()检测阴性例数()()()()()()()l检测对不同部位结核性骨关节炎的诊断效能检测对不同部位结核性骨关节炎的诊断效能.,.,变量脊柱结核关节结核确诊结核临床24对疑似肺外结核患者进行对疑似肺外结核患者进行 检测。检测。针对不同感染部位的针对不同感染部位的 检测灵敏性如下表所示：检测灵敏性如下表所示：骨科临床应用（三）.(),作者认为：“这些结果表明，不管免疫状态如何和培养阳性与否，检测有助于排除像淋巴结结核和骨关节结核一类的慢性结核病。其中例为脊柱结核对疑似肺外结核患者进行检测。骨科临床应用（三）.25酶联免疫斑点试验酶联免疫斑点试验()()在非典型脊柱结核感染诊在非典型脊柱结核感染诊断中的应用评价断中的应用评价骨科临床应用（四）广州中医药大学第一附属医院骨科袁凯,;():非典型性脊柱结核病情隐蔽，病变缓慢，早期临床症状、影像学诊断不明显，实验室检查成为诊断非典型性脊柱结核必不可少的方法酶联免疫斑点试验()在非典型脊柱结核感染诊断中的应用评价骨科26患者例数患者例数()灵敏度、特异度、阳性预测值和阴性预测值(）、和()病灶抗酸杆菌涂片、和纳入例患者，确诊结核()临床诊断结核()排除结核()患者例数()灵敏度、特异度、阳性预测值和阴性预测值(）、和27在脊柱结核病感染的发展早期，临床症状未能完全表现出来，除了有明显的骨破坏和椎间隙的变窄，平片的诊断作用非常有限的。在非典型脊柱结核感染椎体炎症期（未有明显骨破坏和椎旁脓肿形成），的诊断价值受到很大限制。名疑难病例能为非典型性脊柱结核感染患者提供有效的辅助诊断：能为非典型性脊柱结核感染患者提供有效的辅助诊断：结核病结核病接触史接触史合并肺合并肺结核结核结核中结核中毒症状毒症状和和术前或术前或术中病术中病灶活检灶活检穿刺穿刺无无无阴性考虑脊柱肿瘤可能性大阳性结核改变l病理学检查结果与试验结果有着较好的一致性（）。在脊柱结核病感染的发展早期，临床症状未能完全表现出来，除28结核感染筛查结核感染筛查 抗抗治疗前筛查指南治疗前筛查指南多个国家指南建议在抗治疗开始前，应采用方法进行结核感染筛查卡介苗（）接种人群结核感染检测首选美国推荐瑞士关于抗治疗前筛查结核潜伏感染的指南中建议要求所有接受抗治疗患者在治疗前都应该进行结核病检测和潜伏感染的筛查筛查应该基于既往史，摄片和干扰素释放实验（方法）结核感染筛查多个国家指南建议在抗治疗开始前，应采用方法进行29依那西普治依那西普治疗类风湿关湿关节炎和炎和强强直性脊柱炎的直性脊柱炎的专家建家建议生物制剂使用前，应排除活动性结核病(包括肺结核和肺外结核)及结核潜伏感染者。核)及结核潜伏感染者。英夫利西英夫利西单抗治抗治疗类风湿关湿关节炎炎和和强强直性脊柱炎的参考意直性脊柱炎的参考意见可用的辅助诊断方法可考虑用结核抗原特异性释放试验()。其中以敏感性()和特异性()最高，而为和。对阳性者，高度怀疑结核感染的可能，应予抗结核治疗。”三、结核感染筛查三、结核感染筛查 用药前筛查相关指南用药前筛查相关指南依那西普治疗类风湿关节炎和强直性脊柱炎的专家建议生30(,):发热时间持续周；体温多次；经周完整的病史询问、体格检查和常规实验室检查后仍不能确诊北京协和医院感染内科年至年收治的例不明原因发热患者的病因分析显示，感染性疾病一直是最主要的病因，占例()，其中结核病占()侍效春,刘晓清等.,（）三、结核感染筛查三、结核感染筛查 不明原因发热筛查不明原因发热筛查(,):发热时间持续周；体温多次；经周31检测结果的临床意义解读阴性结果：阴性检测结果代表目前机体没有特异抗原致敏的淋巴细胞，即受检者目前未感染。临床诊断上首选排除结核病的诊断，尤其是在结核病高发地区、免疫功能正常人群及无可靠依据诊断结核病时，在可能的诊断排序上，结核病应列在其他疾病之后。中华结核和呼吸杂志年月第卷第期高孟秋检测结果的临床意义解读阴性结果：中华结核和呼吸杂志年月第卷第32二阳性结果：临床诊断中常见的五种阳性的情况：结核中毒症状核中毒症状既往既往结核病史核病史 抗抗结核治核治疗史史无病灶无病灶 稳定病灶定病灶活活动病灶病灶临床床诊断断干干预措施措施无无无无结核潜伏感染随访高危人群 预防治疗有无无无结核感染诊断性治疗无有有有陈旧结核病随访观察有有有有结核复发？随访观察诊断性抗痨有无有活动性结核抗结核治疗 二阳性结果：临床诊断中常见的五种阳性的情况：结核中33医嘱：结核感染细胞检测医嘱：结核感染细胞检测 标本要求标本要求.无需空腹，标本常温保存（不可冰浴、冰冻），.每周一至周五，当天之后抽血，点之前送检.静脉血：肝素（绿头管）抗凝管,以上，立即颠倒数次，充分混匀。.浆膜腔积液（胸水、腹水、心包积液）：无菌注射器取以上，每加肝素（）抗凝并立即轻柔颠倒混匀l输血放化疗服用免疫抑制剂做的受试者建议周后进行检测l运输过程中防止颠簸，避免样本溶血影响结果l免疫力低下的受试者适当提高采血量医嘱：结核感染细胞检测.无需空腹，标本常温保存（不可冰浴、34总结是目前领先的结核检测手段。对“菌阴”结核辅助诊断、肺外结核鉴别诊断、用药（免疫抑制剂、生物制剂）前、后结核筛查具有重要意义。与卡介苗、绝大多数环境分支杆菌无交叉。适用人群广泛，基本不受患者免疫水平及治疗的影响；可检测血液、胸腹水和心包积液、关节腔积液等多种标本，丰富诊断思路。敏感度高（）、特异性高（）、检测速度快（小时出结果），优于传统检查手段。可为临床提供可靠、快速的诊断依据。总结是目前领先的结核检测手段。对“菌阴”结核辅助诊断、肺外结35感谢大家！感谢大家！