家兔人工膝关节置换感染模型的建立课件

家兔人工膝关节置换感染模型的建立课件1家兔人工膝关节置换感染模型的建立家兔人工膝关节置换感染模型的建立中国人民解放军总医院骨科中国人民解放军总医院骨科郝立波郝立波 邢庆昌邢庆昌 张小斌张小斌 王岩王岩 王继芳王继芳家兔人工膝关节置换感染模型的建立中国人民解放军总医院骨科郝立2 人工关节感染病例数相对较少，临床上人工关节感染病例数相对较少，临床上只能进行回顾性分析研究，难以进行科只能进行回顾性分析研究，难以进行科学的随机、双盲、对照、前瞻性研究，学的随机、双盲、对照、前瞻性研究，因此建立科学理想的动物模型对这一并因此建立科学理想的动物模型对这一并发症的诊断治疗研究具有很高价值发症的诊断治疗研究具有很高价值 必必 要要 性性 人工关节感染病例数相对较少，临床上只能进行回顾性分析研3假体设计假体设计假体体部厚度假体体部厚度假体体部厚度假体体部厚度4mm4mm，前后直径，前后直径，前后直径，前后直径14mm14mm，横径横径横径横径16mm16mm表面左右各有一凹槽，以与股骨髁相对应表面左右各有一凹槽，以与股骨髁相对应表面左右各有一凹槽，以与股骨髁相对应表面左右各有一凹槽，以与股骨髁相对应假体柄为三棱锥形，底边长假体柄为三棱锥形，底边长假体柄为三棱锥形，底边长假体柄为三棱锥形，底边长4mm4mm，柄长，柄长，柄长，柄长12mm12mm假体设计假体体部厚度4mm，前后直径14mm，横径16mm4 家兔膝关节置换手术家兔膝关节置换手术 家兔膝关节置换手术5菌株的选择菌株的选择光镜观察光镜观察1000产生物被膜能力鉴定产生物被膜能力鉴定表皮葡萄球菌表皮葡萄球菌表皮葡萄球菌表皮葡萄球菌ATCC35984菌株的选择光镜观察1000产生物被膜能力鉴定表皮葡萄球菌A6动物分组及细菌接种 A组：无菌生理盐水组：无菌生理盐水 B组：组：2104CFU/ml C组：组：2106CFU/ml D组：组：2108CFU/ml术后术后术后术后7 7天，向术侧膝关节内注入菌液天，向术侧膝关节内注入菌液天，向术侧膝关节内注入菌液天，向术侧膝关节内注入菌液0.5ml0.5ml动物分组及细菌接种 A组：无菌生理盐水术后7天，向术侧膝7炎症程度炎症程度关节穿刺液细菌计数关节穿刺液细菌计数假体表面生物被膜内细菌活菌计数假体表面生物被膜内细菌活菌计数膝关节组织内细菌计数膝关节组织内细菌计数影像学检测影像学检测病理切片观察病理切片观察感染评定指标感染评定指标炎症程度感染评定指标8感染评定结果注：与注：与A组比较组比较 p0.05，p0.01，p0.001；与与B组比较组比较 p0.05，p0.01；与与C组比较组比较 p0.05，p0.05。动物感染率及炎症程度动物感染率及炎症程度分分组接种接种细菌菌量量（CFUCFU）炎症程度炎症程度评分分（均数（均数SDSD）感染例感染例数数/总例数例数百分比百分比（%）A A组0 01.080.371.080.371/81/812.512.5B B组1101104 4CFUCFU1.560.491.560.495/85/862.562.5C C组1101106 6CFUCFU2.510.582.510.588/88/8100100D D组1101108 8CFUCFU2.820.312.820.318/88/8100100感染评定结果注：与A组比较 p0.05，p0.019各组模型动物不同部位的活菌计数各组模型动物不同部位的活菌计数分分组关关节液液细菌菌计数数（CFUCFU，n=8n=8）假体表面活菌假体表面活菌计数数(CFU(CFU，n=7)n=7)关关节组织内内细菌菌计数数(CFU(CFU，n=7)n=7)感染率感染率（%）A A组1.51.510108(8(S.A)S.A)8.58.510106 6(S.A)(S.A)2.452.4510106 6(S.A)(S.A)12.512.5B B组(5.582.13)(5.582.13)10106 6(2.481.83)(2.481.83)10103 3(2.050.98)(2.050.98)10104 462.562.5C C组(3.172.35)(3.172.35)10109 9(1.871.59)(1.871.59)10108 8(7.172.75)(7.172.75)10106 6100100D D组(6.593.74)(6.593.74)10109 9(2.122.83)(2.122.83)10107 7(5.023.23)(5.023.23)10106 6100100各组模型动物不同部位的活菌计数分组关节液细菌计数（CFU，10家兔膝关节置换假体感染模型的影像学观察左图左图X线片显示假体在位良好，固定牢靠；线片显示假体在位良好，固定牢靠；右图红色箭头为聚乙烯假体，蓝色箭头为脓液右图红色箭头为聚乙烯假体，蓝色箭头为脓液特制钡剂骨水泥假体的特制钡剂骨水泥假体的X线影像线影像 发生感染的膝关节发生感染的膝关节MRI影像影像 家兔膝关节置换假体感染模型的影像学观察左图X线片显示假体在位11假体表面CLSM观察假体表面有大量细菌 假体表面CLSM观察假体表面有大量细菌 12关节假体感染模型病理组织学观察 低倍（低倍（HEHE，1.251.25）高倍（高倍（HEHE，4040）低倍镜下，假体周围及髓腔广泛感染；低倍镜下，假体周围及髓腔广泛感染；高倍镜下，可见大量粒细胞和少量吞噬细胞）高倍镜下，可见大量粒细胞和少量吞噬细胞）关节假体感染模型病理组织学观察 低倍（H13本模型主要特点本模型主要特点接种的细菌是骨科内植物感染常见的表皮葡接种的细菌是骨科内植物感染常见的表皮葡萄球菌，菌种来源于国外著名实验室，纯度萄球菌，菌种来源于国外著名实验室，纯度高，形成生物被膜能力强，可在假体表面形高，形成生物被膜能力强，可在假体表面形成大量生物被膜成大量生物被膜关节置换材料：关节置换材料：UHMWPE/PMMA手术操作手术操作:按照人工膝关节置换手术步骤进行按照人工膝关节置换手术步骤进行术后关节腔内接种术后关节腔内接种1106CFU的表皮葡萄球菌的表皮葡萄球菌后即可引起感染后即可引起感染本模型主要特点接种的细菌是骨科内植物感染常见的表皮葡萄球菌，14存在的问题存在的问题真正模拟临床感染具有很大困难真正模拟临床感染具有很大困难临床关节置换术后假体感染细菌来源主要是临床关节置换术后假体感染细菌来源主要是术中污染，多数属于慢性、少量细菌感染术中污染，多数属于慢性、少量细菌感染本模型通过向假体周围注射接种大量细菌引本模型通过向假体周围注射接种大量细菌引起感染，感染进程属于亚急性或急性感染，起感染，感染进程属于亚急性或急性感染，与临床实际情况有所区别与临床实际情况有所区别进一步研究当中进一步研究当中存在的问题真正模拟临床感染具有很大困难15结结 论论 本模型较文献报道的关节假体感染模型更好本模型较文献报道的关节假体感染模型更好地模拟了临床情况，是一种较为成功的膝关地模拟了临床情况，是一种较为成功的膝关节置换假体感染模型，可以用来进行人工关节置换假体感染模型，可以用来进行人工关节假体感染的预防、诊断和治疗研究节假体感染的预防、诊断和治疗研究 结 论 本模型较文献报道的关节假体感染模16Thanks for you attention！Thanks for you attention！17