《免疫比浊法检测免疫球蛋白》PPT教案模板课件

Thistemplateistheinternalstandardcoursewaretemplateoftheenterprise免疫比浊法检测免疫球蛋白Thistemplateistheinternal免疫浊度法是可溶性抗原、抗体在液相中免疫浊度法是可溶性抗原、抗体在液相中特异结合，产生一定大小的复合物，形成特异结合，产生一定大小的复合物，形成光的折射或吸收，光的折射或吸收，测定这种折射或吸收后测定这种折射或吸收后的透射光或散射光的透射光或散射光作为计算单位。作为计算单位。实验原理免疫浊度法是可溶性抗原、抗体在液相中特异结合，产生免免疫疫比比浊浊法法分分类类当一束光当一束光线通过溶线通过溶液受到光液受到光散射和光散射和光吸收两个吸收两个因素的影因素的影响而使光响而使光的强度减的强度减弱弱透射比浊法透射比浊法透射比浊法透射比浊法:在光源的光路方向（在光源的光路方向（在光源的光路方向（在光源的光路方向（0 0 0 00 0 0 0）测量透射光强度和被检测测量透射光强度和被检测测量透射光强度和被检测测量透射光强度和被检测溶液微粒浓度关系的方法。溶液微粒浓度关系的方法。溶液微粒浓度关系的方法。溶液微粒浓度关系的方法。散射比浊法散射比浊法散射比浊法散射比浊法:在光源的光路方向（在光源的光路方向（在光源的光路方向（在光源的光路方向（5 5 5 50-0-0-0-969696960 0 0 0）角的方向上测量透射光强度角的方向上测量透射光强度角的方向上测量透射光强度角的方向上测量透射光强度和被检测溶液中微粒浓度关和被检测溶液中微粒浓度关和被检测溶液中微粒浓度关和被检测溶液中微粒浓度关系的方法。系的方法。系的方法。系的方法。免疫比浊法分类当一束光透射比浊法:散射比浊法:透射比浊法和散射比浊法透射比浊法和散射比浊法光路光路检测器检测器A检测器检测器BICI0II 透射比浊法透射比浊法 散射比浊散射比浊法法透射比浊法和散射比浊法光路检测器A检测器（一）（一）基本原理基本原理v 是个极其简单的方法。在抗原过量情况下，与待测是个极其简单的方法。在抗原过量情况下，与待测样品中相应的样品中相应的IgIg发生抗原发生抗原-抗体反应，形成可溶性复合抗体反应，形成可溶性复合物，使反应介质的浊度发生改变。物，使反应介质的浊度发生改变。v 测量方法利用分光光度计测量被吸收的量。读数以测量方法利用分光光度计测量被吸收的量。读数以吸收单位（吸收单位（A A）或）或ODOD值表示，值表示，A A值反映了入射光和透射光值反映了入射光和透射光的比率。待测物中的比率。待测物中IgIg含量可通过标准曲线计算得出。含量可通过标准曲线计算得出。v 待测样品中的抗原含量与吸光度呈正比，而与透射待测样品中的抗原含量与吸光度呈正比，而与透射光呈反比。光呈反比。v 反应在反应在PEGPEG的作用下，加速复合物的形成。的作用下，加速复合物的形成。免疫透射比浊法免疫透射比浊法（一）基本原理免疫透射比浊法透射比浊法测定原理光光 源源诱诱导导剂剂透射比浊法测定原理光源诱导剂样品光电计滤光片光源透射比浊法测定原理样品光电计滤光片光源透射比浊法测定原理透射比浊法的缺陷：(1)溶液中存在的抗原抗体复合物分子应足够大，分子太小则阻挡不了光线的通过。(2)溶液中的抗原抗体复合物的数量要足够多。如果数量太小，溶液浊度变化太小，对光通量影响不大。(3)透射比浊是依据透射光减弱的原理来定量的，因此只能测定抗原抗体反应的第二阶段，检测仍需抗原抗体温育反应时间，检测时间较长。光通量是每单位时间到达、离开或通过曲面光通量是每单位时间到达、离开或通过曲面的的光能数量光能数量透射比浊法的缺陷：(1)溶液中存在的抗原抗体复合物分子应足原理原理散射比浊法散射比浊法在入射光的在入射光的一定角度一定角度检测粒子发出的散检测粒子发出的散射光，射光，散射光的强度与散射光的强度与ICIC的含量呈正比的含量呈正比。原理散射比浊法在入射光的一定角度检测粒子发出的散射光，散射散射比浊法测定原理增增增增 加加加加 散散散散 透透透透 率率率率 :660nm :660nm 测测 定定定定 散散散散 射射射射 光光光光聚集聚集形成形成诱导剂诱导剂散射比浊法测定原理增加散透率:660n散射光测定散射光测定检测器(LED)光电计样品100%0%时间散射光强度散射光测定检测器(LED)光电计样品100%0%时间散 速率散射比浊法速率散射比浊法 （一）（一）基本原理基本原理 是测定抗原抗体结合反应的动态过程。是测定抗原抗体结合反应的动态过程。所谓速率，是在所谓速率，是在单位时间内单位时间内抗原抗体结合形成抗原抗体结合形成 复合物的速度。将各单位时间内形成复合物的复合物的速度。将各单位时间内形成复合物的 速率及测定的散射信号连接在一起，即是动态速率及测定的散射信号连接在一起，即是动态 的速率比浊分析。的速率比浊分析。当仪器测定到某一时当仪器测定到某一时 间内形成速率下降时，间内形成速率下降时，即出现即出现速率峰速率峰，该峰，该峰 值的高低，即代表所值的高低，即代表所 测抗原的量。测抗原的量。速率散射比浊法是测定抗原抗体结合反应的动态过程。CONCENTRATIONRATE在速率峰基础上完成的标准曲线在速率峰基础上完成的标准曲线CONCENTRATIONRATE在速率峰基础上完成的标准曲方法评价：方法评价：敏感度高敏感度高 快速快速(不必达平衡）不必达平衡）抗原抗体结合的动态测定，理论上测定不抗原抗体结合的动态测定，理论上测定不受本底散射信号的影响受本底散射信号的影响 可检测微量样品可检测微量样品方法评价：原理原理2.2.终点散射比浊法终点散射比浊法让抗原抗体作用一定时间，使其反应让抗原抗体作用一定时间，使其反应达到平衡达到平衡后，后，测定其测定其ICIC形成的量。形成的量。ICIC的浊度不再受时间的影响的浊度不再受时间的影响，但反应但反应ICIC聚合产生絮状沉淀之前，进行浊度测定。聚合产生絮状沉淀之前，进行浊度测定。原理2.终点散射比浊法让抗原抗体作用一定时间，使其反应达到散射比浊法散射比浊法的缺陷的缺陷(1)(1)因为是一次性测定光吸收值，没有考虑每一因为是一次性测定光吸收值，没有考虑每一个待测样本的吸收和散射效果，可测定结果不个待测样本的吸收和散射效果，可测定结果不准确准确(2)(2)测定的仍是抗原抗体反应的第二阶段，不测定的仍是抗原抗体反应的第二阶段，不适合快速检测。适合快速检测。(3)(3)终点法存在反应本底终点法存在反应本底，测定样本的含量越低，测定样本的含量越低本底比例越大，故在微量测定时，本底的干扰本底比例越大，故在微量测定时，本底的干扰是影响准确测定的重要因素。是影响准确测定的重要因素。散射比浊法的缺陷(1)因为是一次性测定光吸收值，没有考虑每一影响免疫比浊测定的因素1 1、抗原抗体比例、抗原抗体比例2 2、抗体的质量、抗体的质量 抗体的特异性、效价、亲和力抗体的特异性、效价、亲和力3 3、反应的溶液、反应的溶液4 4、增浊剂的使用、增浊剂的使用影响免疫比浊测定的因素1、抗原抗体比例1 1、透射比浊操作简便，适用于普通的自动生化分析仪、透射比浊操作简便，适用于普通的自动生化分析仪和普通的分光光度计，几乎所有的实验室均能开展。不和普通的分光光度计，几乎所有的实验室均能开展。不足的是灵敏度和精密度均不够理想，所需的抗血清量大，足的是灵敏度和精密度均不够理想，所需的抗血清量大，检测的周期较长。检测的周期较长。2 2、散射比浊的优点是灵敏度、精密度均较高，检测快、散射比浊的优点是灵敏度、精密度均较高，检测快速。其缺点是需特定的分析仪器，试剂价格高。速。其缺点是需特定的分析仪器，试剂价格高。透射比浊法和散射比浊法优缺点比较透射比浊法和散射比浊法优缺点比较1、透射比浊操作简便，适用于普通的自动生化分析仪和普通的分光免疫浊度法测定中应注意的问题免疫浊度法测定中应注意的问题1 1、伪浊度的影响、伪浊度的影响 伪浊度形成原因很复杂，主要伪浊度形成原因很复杂，主要是抗血清含有非特异性的交叉反应性杂抗体成分；增浊是抗血清含有非特异性的交叉反应性杂抗体成分；增浊剂浓度和反应时间掌握不当；样品本身的浊度处理不当；剂浓度和反应时间掌握不当；样品本身的浊度处理不当；试剂的污染和变质；器材尤其是比色杯等不够清洁等因试剂的污染和变质；器材尤其是比色杯等不够清洁等因素。素。2 2、非特异性散射光的影响、非特异性散射光的影响 免疫浊度法经常受内源性光散射的干扰，免疫浊度法经常受内源性光散射的干扰，为避免这些非特异性光散射的影响，应用透射比浊法时为避免这些非特异性光散射的影响，应用透射比浊法时需保证抗体组分在需保证抗体组分在3 3以下，散射比浊法需保证在以下，散射比浊法需保证在 0.50.5以下。以下。免疫浊度法测定中应注意的问题1、伪浊度的影响本实验中应用聚乙二醇的生理特性本实验中应用聚乙二醇的生理特性 聚乙二醇是聚乙二醇是中性、无毒中性、无毒且具有独特理化性质和良好的且具有独特理化性质和良好的生物相溶性的高分子聚合物，生物相溶性的高分子聚合物，聚乙二醇即聚乙二醇即PEGPEG具有高度具有高度的亲水性的亲水性，在水溶液中有较大的水动力学体积，并且，在水溶液中有较大的水动力学体积，并且没有免疫原性没有免疫原性。当藕联到药物分子或药物表面时，可。当藕联到药物分子或药物表面时，可以将其优良性质赋予修饰后的药物分子，以将其优良性质赋予修饰后的药物分子，改变它们在改变它们在水溶液中的生物分配行为和溶解性水溶液中的生物分配行为和溶解性，在其修饰的药物，在其修饰的药物周围产生空间屏障，减少药物的酶解，避免在肾脏的周围产生空间屏障，减少药物的酶解，避免在肾脏的代谢中很快消除，并使药物能被免疫系统的细胞识别代谢中很快消除，并使药物能被免疫系统的细胞识别。本实验中应用聚乙二醇的生理特性1.1.免疫球蛋白试剂免疫球蛋白试剂A,M,GA,M,G2.2.免疫球蛋白试剂免疫球蛋白试剂A,M,GA,M,G校准品，蒸馏水校准品，蒸馏水3.3.微量加样枪微量加样枪4.4.分光光度仪分光光度仪材料1.免疫球蛋白试剂A,M,GIg浓度（g/L）=Ig校准浓度（g/L）样本管吸光度校准管浓度结果计算方法Ig浓度（g/L）=Ig校准浓度（g/L）Thistemplateistheinternalstandardcoursewaretemplateoftheenterprise课程结束ThistemplateistheinternalSWOTSWOT分析模板分析模板SWOT分析模板SWOT分析是市场营销管理中经常使用的功能强大的分析工具，最早是由美国旧金山大学的管理学教授在80年代初提出来的：S代表strength(优势)，W代表weakness(弱势)，O代表opportunity(机会)，T代表threat(威胁)。市场分析人员经常使用这一工具来扫描、分析整个行业和市场，获取相关的市场资讯，为高层提供决策依据，其中，S、W是内部因素，O、T是外部因素。它在制定公司发展战略和进行竞争对手分析中也经常被使用。SWOT的分析技巧类似于波士顿咨询（BCG）公司的增长/份额矩阵（TheGrowth/ShareMatrix），什么是什么是SWOT分析分析SWOT分析是市场营销管理中经常使用的功能强大的分析工具，最内部环境优势Strengths劣势Weakness机会Opportunities威胁ThreatsSWOT分析传统矩阵示意图分析传统矩阵示意图外部环境内部环境优势劣势机会威胁SWOT分析传统矩阵示意图外部环境SWOT行业分析适用范围行业分析适用范围业务单元及产品线分析竞争对手分析SWOT企业自身SBUSWOT分析SWO TSWO T企业自身SBUSWOT分析主要竞争对手SBUSWOT分析企业的内外部环境与行业平均水平进行比较当选择行业领域中只有少数竞争对手时，可以考虑做SWOT组图进行比较SWOT行业分析适用范围业务单元及产品线分析竞争对手分析SWSWOT分析步骤分析步骤分析环境因素分析环境因素构造构造SWOT矩阵矩阵 制定行动计划制定行动计划运用各种调查研究方法，分析出公司所处的各种环境因素，即外部环境因素和内部能力因素。将调查得出的各种因素根据轻重缓急或影响程度等排序方式，构造SWOT矩阵。在完成环境因素分析和SWOT矩阵的构造后，便可以制定出相应的行动计划。SWOT分析步骤分析环境因素构造SWOT矩阵制定行动计划运用SW优势与劣势分析（内部环境分析）优势与劣势分析（内部环境分析）提高公司提高公司盈利性盈利性产品线的宽度产品的质量产品价格产品的可靠性产品的适用性服务的及时性服务态度竞争优势可以指消费者眼中一个企业或它的产品有别于其竞争对手的任何优越的东西。需要注意的是一定要从消费者的角度出发，寻找与竞争者或行业平均水平比较，公司的产品与服务有什么优势/劣势；而不是从公司的角度出发，衡量企业的竞争优势。SW优势与劣势分析（内部环境分析）提高公司盈利性产品线的宽度通过一定努力，建立自身竞争优势引起竞争者注意，开始作出反应直接进攻企业优势所在，或采取更为有力的策略竞争优势受到削弱，寻找新的策略增强自身竞争优势根据根据SW分析，公司建立并维持自身的竞争优势分析，公司建立并维持自身的竞争优势企业在维持竞争优势过程中，必须深刻认识自身的资源和能力，采取适当的措施。因为一个企业一旦在某一方面具有了竞争优势，势必会吸引到竞争对手的注意。而影响企业竞争优势的持续时间，主要的是三个关键因素：（1）建立这种优势要多长时间?（2）能够获得的优势有多大？（3）竞争对手作出有力反应需要多长时间？如果企业分析清楚了这三个因素，就会明确自己在建立和维持竞争优势中的地位了。通过一定努力，建立自身竞争优势引起竞争者注意，开始作出反应直OT机会与威胁分析（外部环境分析）机会与威胁分析（外部环境分析）环境发展趋势分为两大类：环境发展趋势分为两大类：环境威胁环境威胁环境机会环境机会环境威胁指的是环境中一种不利的发展趋势所形成的挑战，如果不采取果断的战略行为，这种不利趋势将导致公司的竞争地位受到削弱。环境机会就是对公司行为富有吸引力的领域，在这一领域中，该公司将拥有竞争优势。OT机会与威胁分析（外部环境分析）环境发展趋势分为两大类：环OT机会与威胁分析方法一：机会与威胁分析方法一：PEST法法PESTPEST法法政治法律政治法律:经济经济社会文化社会文化技术技术垄断法律环境保护法税法对外贸易规定劳动法政府稳定性经济周期GNP趋势利率货币供给通货膨胀失业率可支配收入能源供给成本人口统比收入分配社会稳定生活方式的变化教育水平消费政府对研究的投入政府和行业对技术的重视新技术的发明和进展技术传播的速度折旧和报废速度OT机会与威胁分析方法一：PEST法PEST法政治法律:经OT机会与威胁分析方法一：波特五力模型机会与威胁分析方法一：波特五力模型竞争者竞争者供应商供应商客户客户替代者替代者新进新进入者入者进入本行业有哪些壁垒？它们阻碍新进入者的作用有多大？本企业怎样确定自己的地位（自己进入或者阻止对手进入）？购买者转而购买替代品的转移成本；公司可以采取什么措施来降低成本或增加附加值来降低消费者购买替代品的风险？供货商的品牌或价格特色；供货商的战略中本企业的地位；供货商之间的关系；从供货商之间转移的成本本企业的部件或原材料产品占买方成本的比例；各买方之间是否有联合的危险；本企业与买方是否具有战略合作关系行业内竞争者的均衡程度、增长速度、固定成本比例、本行业产品或服务的差异化程度、退出壁垒等，决定了一个行业内的竞争激烈程度OT机会与威胁分析方法一：波特五力模型竞争者供应商客户替代者构造构造SWOT矩阵矩阵在构造在构造SWOTSWOT过程中，将那些对公司发展有直接的、重要的、大量的、迫切的、过程中，将那些对公司发展有直接的、重要的、大量的、迫切的、久远的影响因素优先排列出来，而将那些间接的、次要的、少许的、不急的、久远的影响因素优先排列出来，而将那些间接的、次要的、少许的、不急的、短暂的影响因素排列在后面。短暂的影响因素排列在后面。案例：案例：19971997年香港邮政对特快专递业务单元做的年香港邮政对特快专递业务单元做的SWOTSWOT分析分析SWT特快专递服务推出较早技术支持较强（如电子追踪服务以邮局为服务终端，服务网络覆盖面广O特快专递”过去的形象不太好认知率不高可靠性与速度不及私营公司私营速递公司多以大公司为主要客户中小机构、个人的需求得不到满足，是个被忽视的市场香港近年经济不太景气，外部环境不利速递业竞争对手林立，正面冲突可能招致报复构造SWOT矩阵在构造SWOT过程中，将那些对公司发展有直接制订行动计划制订行动计划制定计划的基本思路是：发挥优势因素，克服弱点因素，利用机会因素，化制定计划的基本思路是：发挥优势因素，克服弱点因素，利用机会因素，化解威胁因素；考虑过去，立足当前，着眼未来。运用系统分析的综合分析方解威胁因素；考虑过去，立足当前，着眼未来。运用系统分析的综合分析方法，将排列与考虑的各种环境因素相互匹配起来加以组合，得出一系列公司法，将排列与考虑的各种环境因素相互匹配起来加以组合，得出一系列公司未来发展的可选择对策。未来发展的可选择对策。SWOTWT对策最小与最小对策，即考虑弱点因素和威胁因素，目的是努力使这些因素都趋于最小。悲观WO对策最小与最大对策，即着重考虑弱点因素和机会因素，目的是努力使弱点趋于最小，使机会趋于最大苦乐参半ST对策最小与最大对策，即着重考虑优势因素和威胁因素，目的是努力使优势因素趋于最大，是威胁因素趋于最小。苦乐参半SO对策最大与最大对策，即着重考虑优势因素和机会因素，目的在于努力使这两种因素都趋于最大。理想小大大小制订行动计划制定计划的基本思路是：发挥优势因素，克服弱点因素