《食用菌制种技术》PPT课件

食用菌菌种的生产食用菌菌种的生产 1 食用菌的栽培一般包含几个步骤：首先是制作食用菌的栽培一般包含几个步骤：首先是制作食用菌的栽培一般包含几个步骤：首先是制作食用菌的栽培一般包含几个步骤：首先是制作菌种，即通过孢子或菇体组织分离出菌丝体，并加菌种，即通过孢子或菇体组织分离出菌丝体，并加菌种，即通过孢子或菇体组织分离出菌丝体，并加菌种，即通过孢子或菇体组织分离出菌丝体，并加以扩大繁殖形成生产菌种；其次是将制好的菌种接以扩大繁殖形成生产菌种；其次是将制好的菌种接以扩大繁殖形成生产菌种；其次是将制好的菌种接以扩大繁殖形成生产菌种；其次是将制好的菌种接于培养基质，生产出食用菌子实体。于培养基质，生产出食用菌子实体。于培养基质，生产出食用菌子实体。于培养基质，生产出食用菌子实体。孢子孢子孢子孢子菇体组织菇体组织菇体组织菇体组织菌丝体菌丝体菌丝体菌丝体菌菌 种种培养基质培养基质培养基质培养基质子实子实子实子实体体体体萌发萌发萌发萌发分离分离分离分离2 一一一一 、菌种的制作、菌种的制作、菌种的制作、菌种的制作 食用菌菌种有特定的制作程序，只有掌握了食用菌菌种有特定的制作程序，只有掌握了制种技制种技术，才能生，才能生产出出优良菌种，使食用菌栽培良菌种，使食用菌栽培获得成功。得成功。1 1、菌种类型及制种程序、菌种类型及制种程序 （1 1 1 1）菌种类型）菌种类型）菌种类型）菌种类型 使用目的的不同使用目的的不同使用目的的不同使用目的的不同 保藏用菌种保藏用菌种保藏用菌种保藏用菌种 实验实验用菌种用菌种用菌种用菌种 生生生生产产用菌种用菌种用菌种用菌种 3 一一一一 、菌种的制作、菌种的制作、菌种的制作、菌种的制作 1 1 1 1、菌种类型及制种程序、菌种类型及制种程序、菌种类型及制种程序、菌种类型及制种程序 （1 1 1 1）菌种类型）菌种类型）菌种类型）菌种类型 物理性状物理性状物理性状物理性状 固化菌种固化菌种固化菌种固化菌种 固体菌种固体菌种固体菌种固体菌种 液体菌种液体菌种液体菌种液体菌种 外外外外观观形形形形态态 颗颗粒状菌种粒状菌种粒状菌种粒状菌种 片状菌种片状菌种片状菌种片状菌种 砖砖状菌种状菌种状菌种状菌种 培养培养培养培养容器容器容器容器 袋装菌种袋装菌种袋装菌种袋装菌种 瓶装菌瓶装菌瓶装菌瓶装菌种种种种 4 一一 、菌种的制作、菌种的制作 1 1 1 1、菌种类型及制种程序、菌种类型及制种程序、菌种类型及制种程序、菌种类型及制种程序 （1 1 1 1）菌种类型）菌种类型）菌种类型）菌种类型 培养基的主料培养基的主料培养基的主料培养基的主料 粪粪草菌种草菌种草菌种草菌种 谷粒菌种谷粒菌种谷粒菌种谷粒菌种 木木木木块块菌种菌种菌种菌种 木屑菌种木屑菌种木屑菌种木屑菌种 5 一一一一 、菌种的制作、菌种的制作、菌种的制作、菌种的制作 1 1 1 1、菌种类型及制种程序、菌种类型及制种程序、菌种类型及制种程序、菌种类型及制种程序 （1 1 1 1）菌种类型）菌种类型）菌种类型）菌种类型 菌种按生菌种按生菌种按生菌种按生产产程序程序程序程序 一一一一级级种种种种 (母种）母种）母种）母种）二二二二级级种种种种（原种）（原种）（原种）（原种）三三三三级级种种种种(栽培种栽培种栽培种栽培种）6 一一 、菌种的制作、菌种的制作 1 1 1 1、菌种类型及制种程序、菌种类型及制种程序、菌种类型及制种程序、菌种类型及制种程序 （1 1 1 1）菌种类型）菌种类型）菌种类型）菌种类型 一级种一级种一级种一级种 一级种又称母种、试管种。一级种又称母种、试管种。将将经孢子分离法或子分离法或组织分离法得到的分离法得到的纯培养物，移培养物，移接到接到试管斜面培养基上培养而得到的管斜面培养基上培养而得到的纯种。种。采用分离法采用分离法获得的母种数量有限，一般可将菌得的母种数量有限，一般可将菌丝再次再次转接到新的斜面培养基上接到新的斜面培养基上进行行转管繁殖，能得到更多的母管繁殖，能得到更多的母种，称种，称为再生母种再生母种，即可用于生，即可用于生产，也适用于，也适用于纯种的保藏种的保藏。一支一支长满菌菌丝体的体的试管母种可分移成管母种可分移成10多支新多支新试管。管。试管种若不管种若不马上使用，可置于上使用，可置于4的冰箱中保存。的冰箱中保存。7 一一 、菌种的制作、菌种的制作 1 1 1 1、菌种类型及制种程序、菌种类型及制种程序、菌种类型及制种程序、菌种类型及制种程序 （1 1 1 1）菌种类型）菌种类型）菌种类型）菌种类型 二二二二级级种种种种 二二级种又称种又称原种原种，这是由母种是由母种转接到装有麦粒等固体培接到装有麦粒等固体培养基养基质的的专有菌种瓶中有菌种瓶中经过培养后形成。原种可采用培养后形成。原种可采用750mL菌种瓶或菌种瓶或500mL罐罐头瓶作瓶作为培养容器。一般一支母种可培养容器。一般一支母种可扩大大繁殖繁殖6-8瓶原种。瓶原种。若原种直接用于生若原种直接用于生产，则成本太高，因此，原种成本太高，因此，原种还必必须进一步一步扩大繁殖成三大繁殖成三级种，使菌种数量增多，才能用于种，使菌种数量增多，才能用于栽培。由于原种的培养基栽培。由于原种的培养基质接近栽培所用的基接近栽培所用的基质，因此原，因此原种也可用于小种也可用于小规模的栽培。模的栽培。8 一一 、菌种的制作、菌种的制作 1 1 1 1、菌种类型及制种程序、菌种类型及制种程序、菌种类型及制种程序、菌种类型及制种程序 （1 1 1 1）菌种类型）菌种类型）菌种类型）菌种类型 三三三三级级种种种种 三级种又称栽培种，它是由二级种进一步扩大繁殖三级种又称栽培种，它是由二级种进一步扩大繁殖而得。而得。栽培种的培养基栽培种的培养基质与二与二级种相似，更接近于栽培基种相似，更接近于栽培基质。三三级种数量多、成本低。种数量多、成本低。栽培种一般采用固体培养基，用聚乙栽培种一般采用固体培养基，用聚乙烯塑料袋或玻璃塑料袋或玻璃瓶作培养容器。通瓶作培养容器。通 常一瓶原种可繁殖常一瓶原种可繁殖30-50袋栽培种。袋栽培种。9 一一一一 、菌种的制作、菌种的制作、菌种的制作、菌种的制作 1 1、菌种类型及制种程序、菌种类型及制种程序 （2 2）制种程序）制种程序 菌种生产是菌种生产是指通过无菌操指通过无菌操作，大量培养作，大量培养繁殖菌种的过繁殖菌种的过程。程。10 一一一一 、菌种的制作、菌种的制作、菌种的制作、菌种的制作 2 2 2 2、菌种生产的主要设备、菌种生产的主要设备、菌种生产的主要设备、菌种生产的主要设备 （l l）配料）配料）配料）配料设备设备 切片机是将切片机是将木材切成木材切成规格格木片的木片的专用机用机械，是食用菌械，是食用菌培养基培养基质粉碎粉碎处理的理的预前工前工序序设备。切切切切 片片片片 机机机机 11 一一 、菌种的制作、菌种的制作 2 2 2 2、菌种生产的主要设备、菌种生产的主要设备、菌种生产的主要设备、菌种生产的主要设备 （l l）配料）配料）配料）配料设备设备 粉粉粉粉碎碎碎碎机机机机是是是是将将将将木木木木片片片片、秸秸秸秸秆秆等等等等原原原原料料料料粉粉粉粉碎碎碎碎成成成成一一一一定定定定粗粗粗粗细细度度度度碎碎碎碎屑屑屑屑的的的的专专用机械。用机械。用机械。用机械。粉粉 碎碎 机机12 一一一一 、菌种的制作、菌种的制作、菌种的制作、菌种的制作 2 2 2 2、菌种生产的主要设备、菌种生产的主要设备、菌种生产的主要设备、菌种生产的主要设备 （l l）配料）配料）配料）配料设备设备 搅拌机是将拌机是将培养料通培养料通过搅拌拌使其分布充分均使其分布充分均匀的匀的专业机械。机械。其配套其配套动力力为3KW，每次拌，每次拌料量料量为100KG湿湿重重。搅搅 拌拌 机机13 一一 、菌种的制作、菌种的制作 2 2 2 2、菌种生产的主要设备、菌种生产的主要设备、菌种生产的主要设备、菌种生产的主要设备 （l l）配料）配料）配料）配料设备设备 装袋机是将搅装袋机是将搅装袋机是将搅装袋机是将搅拌混合均匀后的培拌混合均匀后的培拌混合均匀后的培拌混合均匀后的培养料装入塑料薄膜养料装入塑料薄膜养料装入塑料薄膜养料装入塑料薄膜筒内的机械。筒内的机械。筒内的机械。筒内的机械。装装 袋袋 机机14 一一 、菌种的制作、菌种的制作 2 2 2 2、菌种生产的主要设备、菌种生产的主要设备、菌种生产的主要设备、菌种生产的主要设备 （l l）配料）配料）配料）配料设备设备 将培养料装将培养料装将培养料装将培养料装入料瓶的机械。入料瓶的机械。入料瓶的机械。入料瓶的机械。生生生生产产上采用的上采用的上采用的上采用的均匀螺旋均匀螺旋均匀螺旋均匀螺旋挤挤入入入入式装瓶机。式装瓶机。式装瓶机。式装瓶机。装装 瓶瓶 机机15 一一一一 、菌种的制作、菌种的制作、菌种的制作、菌种的制作 2 2 2 2、菌种生产的主要设备、菌种生产的主要设备、菌种生产的主要设备、菌种生产的主要设备 （2 2）灭灭菌菌菌菌设备设备 高压灭菌锅是密闭耐压的金属灭菌容器。其工作原理是在驱尽锅内空气的前提下，通过加热把密闭锅内的水蒸气压力升高，从而使蒸汽温度相应提高到100以上。压力在98KPa时，蒸汽温度可达121 。常见的高压灭菌锅有手提式、立式与卧式，也有自制的高压灭菌锅。手提式主要用于一级种制作，立式和卧式主要用于二级种、三级种和栽培瓶、袋的制作。16 一一一一 、菌种的制作、菌种的制作、菌种的制作、菌种的制作 2 2 2 2、菌种生产的主要设备、菌种生产的主要设备、菌种生产的主要设备、菌种生产的主要设备 （2 2）灭灭菌菌菌菌设备设备 手提式高压灭菌锅的手提式高压灭菌锅的手提式高压灭菌锅的手提式高压灭菌锅的容积小，适用于试管培养容积小，适用于试管培养容积小，适用于试管培养容积小，适用于试管培养基、三角瓶或平皿、无菌基、三角瓶或平皿、无菌基、三角瓶或平皿、无菌基、三角瓶或平皿、无菌水、少量菌种瓶及一些器水、少量菌种瓶及一些器水、少量菌种瓶及一些器水、少量菌种瓶及一些器皿的灭菌。皿的灭菌。皿的灭菌。皿的灭菌。手提式高压灭菌锅手提式高压灭菌锅手提式高压灭菌锅手提式高压灭菌锅17 一一一一 、菌种的制作、菌种的制作、菌种的制作、菌种的制作 2 2 2 2、菌种生产的主要设备、菌种生产的主要设备、菌种生产的主要设备、菌种生产的主要设备 （2 2）灭灭菌菌菌菌设备设备 立式高压灭立式高压灭立式高压灭立式高压灭菌锅容量大，可菌锅容量大，可菌锅容量大，可菌锅容量大，可用于菌种瓶、罐用于菌种瓶、罐用于菌种瓶、罐用于菌种瓶、罐头瓶及塑料袋装头瓶及塑料袋装头瓶及塑料袋装头瓶及塑料袋装培养基的灭菌。培养基的灭菌。培养基的灭菌。培养基的灭菌。立式高压灭菌锅立式高压灭菌锅立式高压灭菌锅立式高压灭菌锅18 一一一一 、菌种的制作、菌种的制作、菌种的制作、菌种的制作 2 2 2 2、菌种生产的主要设备、菌种生产的主要设备、菌种生产的主要设备、菌种生产的主要设备 （2 2）灭灭菌菌菌菌设备设备 卧式高压灭卧式高压灭卧式高压灭卧式高压灭菌锅容量大、盛菌锅容量大、盛菌锅容量大、盛菌锅容量大、盛物多，灭菌彻底，物多，灭菌彻底，物多，灭菌彻底，物多，灭菌彻底，效果好。效果好。效果好。效果好。卧式高压灭菌锅卧式高压灭菌锅卧式高压灭菌锅卧式高压灭菌锅19 一一一一 、菌种的制作、菌种的制作、菌种的制作、菌种的制作 2 2 2 2、菌种生产的主要设备、菌种生产的主要设备、菌种生产的主要设备、菌种生产的主要设备 （2 2）灭灭菌菌菌菌设备设备 常常常常压灭压灭菌灶是在菌灶是在菌灶是在菌灶是在自然自然自然自然压压力下力下力下力下产产生生生生100100蒸汽蒸汽蒸汽蒸汽进进行行行行灭灭菌菌菌菌的炉灶，如土蒸的炉灶，如土蒸的炉灶，如土蒸的炉灶，如土蒸锅锅。常常常常压压灶制作灶制作灶制作灶制作简单简单，造，造，造，造价低，很受菇价低，很受菇价低，很受菇价低，很受菇农欢农欢迎。迎。迎。迎。常压灭菌灶常压灭菌灶20 一一一一 、菌种的制作、菌种的制作、菌种的制作、菌种的制作 2 2 2 2、菌种生产的主要设备、菌种生产的主要设备、菌种生产的主要设备、菌种生产的主要设备 （3 3）接种）接种）接种）接种设备设备 无菌室是食用菌生无菌室是食用菌生无菌室是食用菌生无菌室是食用菌生产产中无菌操作的中无菌操作的中无菌操作的中无菌操作的环环境。无境。无境。无境。无菌室要求菌室要求菌室要求菌室要求严严密、清密、清密、清密、清洁洁。无菌室一般有内外两无菌室一般有内外两无菌室一般有内外两无菌室一般有内外两间间，外，外，外，外间较间较小，作小，作小，作小，作为缓为缓冲冲冲冲间间。缓缓冲冲冲冲间间可放置工作服、拖鞋、口罩、消毒用可放置工作服、拖鞋、口罩、消毒用可放置工作服、拖鞋、口罩、消毒用可放置工作服、拖鞋、口罩、消毒用药药品等。无菌室品等。无菌室品等。无菌室品等。无菌室门应门应采用推拉采用推拉采用推拉采用推拉门门，内外两，内外两，内外两，内外两间间的的的的门应门应呈呈呈呈对对角角角角线线安装，以提高隔离安装，以提高隔离安装，以提高隔离安装，以提高隔离缓缓冲效果。必冲效果。必冲效果。必冲效果。必 要要要要时时可安可安可安可安装一个双装一个双装一个双装一个双层层小型玻璃推拉窗，以便于内外物品小型玻璃推拉窗，以便于内外物品小型玻璃推拉窗，以便于内外物品小型玻璃推拉窗，以便于内外物品传递传递，减少减少减少减少进进出无菌室的次数。出无菌室的次数。出无菌室的次数。出无菌室的次数。21 一一一一 、菌种的制作、菌种的制作、菌种的制作、菌种的制作 2 2 2 2、菌种生产的主要设备、菌种生产的主要设备、菌种生产的主要设备、菌种生产的主要设备 （3 3）接种）接种）接种）接种设备设备 为为了在使用之后能排湿、通了在使用之后能排湿、通了在使用之后能排湿、通了在使用之后能排湿、通风风，应应在室内在室内在室内在室内顶顶部部部部设设置小型排置小型排置小型排置小型排风风扇，在室内的扇，在室内的扇，在室内的扇，在室内的侧侧面底部面底部面底部面底部设设置玻置玻置玻置玻 璃璃璃璃纤维过纤维过滤进滤进气口。气口。气口。气口。无菌室无菌室无菌室无菌室(包括包括包括包括缓缓冲冲冲冲间间)除照明用光源外，除照明用光源外，除照明用光源外，除照明用光源外，还应还应安安安安装紫外装紫外装紫外装紫外线杀线杀菌灯，吊装在接种操作台的正上菌灯，吊装在接种操作台的正上菌灯，吊装在接种操作台的正上菌灯，吊装在接种操作台的正上 方。方。方。方。22 一一一一 、菌种的制作、菌种的制作、菌种的制作、菌种的制作 2 2 2 2、菌种生产的主要设备、菌种生产的主要设备、菌种生产的主要设备、菌种生产的主要设备 （3 3）接种）接种）接种）接种设备设备 超超净工作台：工作台：是一种局部是一种局部层流流(平行或垂直流平行或垂直流)装置，它能在局部装置，它能在局部造成高造成高洁净度的工作空度的工作空间；使小；使小房房间内的空气内的空气经预过滤器和高效器和高效过滤器除器除尘、洁净后，以垂直或后，以垂直或水平水平层流状流状态通通过操作区，因此，操作区，因此，可使操作区保持既无可使操作区保持既无尘又无菌的又无菌的环境。境。超净工作台超净工作台23 一一一一 、菌种的制作、菌种的制作、菌种的制作、菌种的制作 2 2 2 2、菌种生产的主要设备、菌种生产的主要设备、菌种生产的主要设备、菌种生产的主要设备 （3 3）接种）接种）接种）接种设备设备 接接种种箱箱：是是用用木木材材与与玻玻璃璃制制成成密密闭箱箱。有有单人人式式或或双双人人对接接式式。接接种种箱箱前前后后斜斜面面为玻玻璃璃窗窗，便便于于操操作作时观察察，可可开开启启，以以便便取取放放物物品品。玻玻璃璃窗窗下下的的木木板板有有一一对椭圆形形开开孔孔，操操作作孔孔装装有有白白布布袖袖套套，一一端端固固定定在在圆孔孔上上，另另一一端端套套口口用用松松紧带箍箍住住操操作作者者的的手手腕腕，以以防防杂菌菌进入入。箱箱内内可可安安装装20W日日光光灯和灯和30W紫外紫外线灯管。灯管。24 一一 、菌种的制作、菌种的制作 2 2 2 2、菌种生产的主要设备、菌种生产的主要设备、菌种生产的主要设备、菌种生产的主要设备 （3 3）接种）接种）接种）接种设备设备 A A、接种、接种、接种、接种针针B B、接种、接种、接种、接种钩钩C C、接种、接种、接种、接种环环D D、接种、接种、接种、接种铲铲E E、接种、接种、接种、接种锄锄F F、接种耙、接种耙、接种耙、接种耙GG、接种刀、接种刀、接种刀、接种刀H H、接种、接种、接种、接种勺勺勺勺I I、接种、接种、接种、接种镊镊25 一一一一 、菌种的制作、菌种的制作、菌种的制作、菌种的制作 2 2 2 2、菌种生产的主要设备、菌种生产的主要设备、菌种生产的主要设备、菌种生产的主要设备 （4 4）培养）培养）培养）培养设备设备 在在在在 制制制制 作作作作 一一一一级级种种种种和和和和少少少少量量量量二二二二级级种种种种时时，可可可可采采采采用用用用电电热热恒恒恒恒温温温温箱箱箱箱或或或或隔隔隔隔水水水水式式式式电电热热恒恒恒恒温温温温箱箱箱箱，目目目目的的的的是是是是控控控控制制制制温温温温度度度度，适温培养适温培养适温培养适温培养 恒恒 温温 箱箱26 一一一一 、菌种的制作、菌种的制作、菌种的制作、菌种的制作 2 2 2 2、菌种生产的主要设备、菌种生产的主要设备、菌种生产的主要设备、菌种生产的主要设备 （4 4）培养）培养）培养）培养设备设备 培养室：培养室：是是专门用于培养菌种的用于培养菌种的场所。各所。各级菌种在接种菌种在接种完完毕之后，即移人培养室。冬季培养室之后，即移人培养室。冬季培养室应有有专用加温用加温设备。无无论采用何种方法加温，都要注意培养室内空气的相采用何种方法加温，都要注意培养室内空气的相对湿湿度，一般度，一般维持在持在6570，否，否则菌瓶失水菌瓶失水过多。菌种培多。菌种培养架可用木制，也可用养架可用木制，也可用钢材或材或铝合金材料制成，合金材料制成，宽度，有度，有4-6层，层间距距0.4-1m.培养室内培养室内还需温、湿度需温、湿度计，用于培，用于培养室温度、湿度的养室温度、湿度的测量。量。27 一一 、菌种的制作、菌种的制作 2 2 2 2、菌种生产的主要设备、菌种生产的主要设备、菌种生产的主要设备、菌种生产的主要设备 （5 5）菌种保藏）菌种保藏）菌种保藏）菌种保藏设备设备 多多数数菌菌种种要要在在低低温温、干干燥燥、隔隔绝空空气气等等环境境中中保保藏藏。常常用用的的主主要要设备是是电冰冰箱箱、干干燥燥器器、真真空空抽抽气气机机等等。高高温温型型菌菌类的的菌菌种种需需继代代保保藏藏，由由于于要要越越过寒寒冷冷的的冬冬季季，常常用用电热恒温箱恒温箱.电电 冰冰 箱箱28 一一一一 、菌种的制作、菌种的制作、菌种的制作、菌种的制作 3 3 3 3、制种用品及材料制种用品及材料制种用品及材料制种用品及材料 (1)(1)药品药品药品药品 基物药品基物药品基物药品基物药品 制作母种时常制作母种时常制作母种时常制作母种时常用的药品有用的药品有用的药品有用的药品有琼脂、葡萄糖、蔗糖、脂、葡萄糖、蔗糖、磷酸二磷酸二氢钾、硫酸、硫酸镁、蛋白蛋白胨、麦芽汁、酵、麦芽汁、酵母膏和母膏和维生素生素B1等。等。原种和栽培种原种和栽培种原种和栽培种原种和栽培种常用药品有常用药品有常用药品有常用药品有 石膏粉、碳酸石膏粉、碳酸钙、过磷酸磷酸钙、蔗糖、蔗糖、红糖、糖、尿素、硫酸尿素、硫酸铵等。等。29 一一一一 、菌种的制作、菌种的制作、菌种的制作、菌种的制作 3 3 3 3、制种用品及材料制种用品及材料制种用品及材料制种用品及材料 (1)(1)药品药品药品药品 消毒及杀菌药品消毒及杀菌药品消毒及杀菌药品消毒及杀菌药品 5 5甲甲甲甲醛醛5 5石碳酸石碳酸石碳酸石碳酸高高高高锰锰酸酸酸酸钾钾7575酒精酒精酒精酒精2 25 5漂白粉漂白粉漂白粉漂白粉升汞升汞升汞升汞1 12 2煤酚皂溶液煤酚皂溶液煤酚皂溶液煤酚皂溶液(又称来又称来又称来又称来苏尔苏尔)新新新新洁洁而而而而灭灭30 一一一一 、菌种的制作、菌种的制作、菌种的制作、菌种的制作 3 3 3 3、制种用品及材料制种用品及材料制种用品及材料制种用品及材料 (2)(2)配料用具配料用具配料用具配料用具 常见的配常见的配常见的配常见的配料用具有料用具有料用具有料用具有 搅拌机搅拌机搅拌机搅拌机天平天平天平天平杆秤杆秤杆秤杆秤水泥地水泥地水泥地水泥地水桶水桶水桶水桶铁铲、铝锅、铁铲、铝锅、铁铲、铝锅、铁铲、铝锅、铁锅、搪瓷铁锅、搪瓷铁锅、搪瓷铁锅、搪瓷杯、大烧杯、杯、大烧杯、杯、大烧杯、杯、大烧杯、筐、木箱、筐、木箱、筐、木箱、筐、木箱、塑料箱塑料箱塑料箱塑料箱脸盆脸盆脸盆脸盆废油桶废油桶废油桶废油桶31 一一一一 、菌种的制作、菌种的制作、菌种的制作、菌种的制作 3 3 3 3、制种用品及材料制种用品及材料制种用品及材料制种用品及材料 (3)(3)分装及检测用具分装及检测用具分装及检测用具分装及检测用具 分装分装分装分装用具用具用具用具有有有有 铁架台铁架台铁架台铁架台 漏斗漏斗漏斗漏斗 试管筐试管筐试管筐试管筐 菌种袋菌种袋菌种袋菌种袋(17cmX 33cm(17cmX 33cm、14cmX 28cm14cmX 28cm等的聚乙烯等的聚乙烯等的聚乙烯等的聚乙烯或聚丙烯插角、平底袋或聚丙烯插角、平底袋或聚丙烯插角、平底袋或聚丙烯插角、平底袋)试管试管试管试管 (18mmXl80mm18mmXl80mm、20mmX200mm20mmX200mm)量杯量杯量杯量杯 (100(100(100(100、250250250250、500mL)500mL)500mL)500mL)菌种瓶菌种瓶菌种瓶菌种瓶 (750mL(750mL、500mL500mL盐水瓶或罐头瓶盐水瓶或罐头瓶盐水瓶或罐头瓶盐水瓶或罐头瓶)培养皿培养皿培养皿培养皿 (d(d(d(d9cm)9cm)9cm)9cm)三角瓶三角瓶三角瓶三角瓶250mL 250mL 250mL 250mL 32 一一一一 、菌种的制作、菌种的制作、菌种的制作、菌种的制作 3 3 3 3、制种用品及材料制种用品及材料制种用品及材料制种用品及材料 (3)(3)分装及检测用具分装及检测用具分装及检测用具分装及检测用具 检测用检测用检测用检测用具有具有具有具有 生物显微镜生物显微镜生物显微镜生物显微镜 温度计温度计温度计温度计 干湿球温度计干湿球温度计干湿球温度计干湿球温度计 pHpHpHpH试纸试纸试纸试纸 卡尺卡尺卡尺卡尺 33 一一一一 、菌种的制作、菌种的制作、菌种的制作、菌种的制作 3 3 3 3、制种用品及材料制种用品及材料制种用品及材料制种用品及材料 (4)(4)分离及其用具分离及其用具分离及其用具分离及其用具 常用分常用分常用分常用分离用具离用具离用具离用具 钟罩钟罩钟罩钟罩 棉花棉花棉花棉花 纱布纱布纱布纱布 记录本、标签纸、笔记录本、标签纸、笔记录本、标签纸、笔记录本、标签纸、笔 尖头镊子尖头镊子尖头镊子尖头镊子 酒精灯酒精灯酒精灯酒精灯 广口瓶广口瓶广口瓶广口瓶 手术剪手术剪手术剪手术剪 95959595酒精酒精酒精酒精 其他用具及材料有：其他用具及材料有：其他用具及材料有：其他用具及材料有：纱纱布、工作衣、托布、工作衣、托布、工作衣、托布、工作衣、托鞋、口罩、无菌水、鞋、口罩、无菌水、鞋、口罩、无菌水、鞋、口罩、无菌水、颈颈圈、圈、圈、圈、绳线绳线、回形、回形、回形、回形针针、钉书钉书机等。机等。机等。机等。34 一一一一 、菌种的制作、菌种的制作、菌种的制作、菌种的制作 4 4 4 4、菌种培养基的制备、菌种培养基的制备、菌种培养基的制备、菌种培养基的制备 （1 1 1 1）培养基）培养基）培养基）培养基(料料料料)的配制原则的配制原则的配制原则的配制原则 选选选选择择择择适适适适宜宜宜宜的的的的营营营营养养养养物物物物质质质质 食用菌所需的食用菌所需的食用菌所需的食用菌所需的营营养物养物养物养物质质，碳源、氮源和，碳源、氮源和，碳源、氮源和，碳源、氮源和矿质矿质元素元素元素元素等，等，等，等，对对每一种每一种每一种每一种营营养物养物养物养物质质的种的种的种的种类类和数量要求又有所不同。和数量要求又有所不同。和数量要求又有所不同。和数量要求又有所不同。从母种，原种到栽培种各个从母种，原种到栽培种各个从母种，原种到栽培种各个从母种，原种到栽培种各个阶阶段的目的和要求不同，所段的目的和要求不同，所段的目的和要求不同，所段的目的和要求不同，所选选用的培养基用的培养基用的培养基用的培养基营营养成分也养成分也养成分也养成分也应应有不同。有不同。有不同。有不同。母种母种母种母种的初生菌的初生菌的初生菌的初生菌丝丝比比比比较较嫩弱，分解养分能力差，因此要求嫩弱，分解养分能力差，因此要求嫩弱，分解养分能力差，因此要求嫩弱，分解养分能力差，因此要求营营养丰富、完全，氮源和养丰富、完全，氮源和养丰富、完全，氮源和养丰富、完全，氮源和维维生素的比例要高，需生素的比例要高，需生素的比例要高，需生素的比例要高，需选选用容易被菌用容易被菌用容易被菌用容易被菌丝丝吸收利用的物吸收利用的物吸收利用的物吸收利用的物质质，如葡萄糖、蔗糖、，如葡萄糖、蔗糖、，如葡萄糖、蔗糖、，如葡萄糖、蔗糖、马铃马铃薯、玉米粉、麦薯、玉米粉、麦薯、玉米粉、麦薯、玉米粉、麦芽汁、酵母膏、蛋白芽汁、酵母膏、蛋白芽汁、酵母膏、蛋白芽汁、酵母膏、蛋白胨胨、无机、无机、无机、无机盐类盐类和生和生和生和生长长素等素等素等素等为为原料。原料。原料。原料。原种、栽培种原种、栽培种原种、栽培种原种、栽培种所需培养基数量所需培养基数量所需培养基数量所需培养基数量较较多，而且菌多，而且菌多，而且菌多，而且菌丝丝分解物分解物分解物分解物质质能力能力能力能力强强，可利用大量，可利用大量，可利用大量，可利用大量农农作物秸作物秸作物秸作物秸秆秆、粪粪草，草，草，草，锯锯木屑、棉木屑、棉木屑、棉木屑、棉籽壳、麸皮和米糠等原料作籽壳、麸皮和米糠等原料作籽壳、麸皮和米糠等原料作籽壳、麸皮和米糠等原料作为为培养基。培养基。培养基。培养基。35 一一 、菌种的制作、菌种的制作 4 4、菌种培养基的制备、菌种培养基的制备 （1 1）培养基）培养基(料料)的配制原则的配制原则 注注意意各各种种营营养养成成分分的的比比例例 培养基培养基(料料)中各种中各种营养物养物质的比例是影响菌的比例是影响菌丝生生长的重要因素。的重要因素。营养物养物质比例适当，菌比例适当，菌丝生生长发育就好，否育就好，否则就差。就差。应根据不同培养根据不同培养对象的需要，配以适当比例。象的需要，配以适当比例。菌菌丝生生长要求培养基要求培养基(料料)有一定的碳氮比，一般有一定的碳氮比，一般碳氮比碳氮比(C：N)以以20:1为好。好。如培养基如培养基(料料)中碳源供中碳源供应不足不足时，容易引起，容易引起菌菌丝的的过早衰老和自溶，如氮源早衰老和自溶，如氮源过多或多或过少少时，会引起菌会引起菌丝的的过于旺盛生于旺盛生长或生或生长缓慢，慢，对菌菌丝生生长造成不良影响。造成不良影响。36 一一一一 、菌种的制作、菌种的制作、菌种的制作、菌种的制作 4 4 4 4、菌种培养基的制备、菌种培养基的制备、菌种培养基的制备、菌种培养基的制备 （1 1 1 1）培养基）培养基）培养基）培养基(料料料料)的配制原则的配制原则的配制原则的配制原则 调调调调节节节节适适适适宜宜宜宜的的的的酸酸酸酸碱碱碱碱度度度度(pH(pH(pH(pH)培养基培养基培养基培养基(料料料料)需要保持菌需要保持菌需要保持菌需要保持菌丝丝生生生生长发长发育所需要育所需要育所需要育所需要的酸碱度，因此配制培养基的酸碱度，因此配制培养基的酸碱度，因此配制培养基的酸碱度，因此配制培养基(料料料料)时时，要用，要用，要用，要用氢氢氧化氧化氧化氧化钠钠、石灰或、石灰或、石灰或、石灰或过过磷酸磷酸磷酸磷酸钙钙等等等等调节调节pHpH值值。各种食用菌所需要的各种食用菌所需要的各种食用菌所需要的各种食用菌所需要的pHpH值值不同，培养不同，培养不同，培养不同，培养基基基基(料料料料)的酸碱度也的酸碱度也的酸碱度也的酸碱度也应应不同。不同。不同。不同。如猴如猴如猴如猴头头菌菌菌菌丝丝喜喜喜喜欢欢酸性酸性酸性酸性环环境，需境，需境，需境，需调节调节pHpH值为值为4 45;5;又如草菇菌又如草菇菌又如草菇菌又如草菇菌丝丝喜碱性喜碱性喜碱性喜碱性环环境，需将境，需将境，需将境，需将pHpH值调为值调为7 75 58 8。37 一一一一 、菌种的制作、菌种的制作、菌种的制作、菌种的制作 4 4 4 4、菌种培养基的制备、菌种培养基的制备、菌种培养基的制备、菌种培养基的制备 （1 1 1 1）培养基）培养基）培养基）培养基(料料料料)的配制原则的配制原则的配制原则的配制原则 选选择择经经济济实实用用的的原原料料 制制做做培培养养基基(料料)的的原原料料，有有些些价价格格比比较贵、成本高，可用一些价格低廉的代用原料。成本高，可用一些价格低廉的代用原料。可用一些可用一些农副副产品代替化学品代替化学药品，常用的有品，常用的有马铃薯、麦芽，玉米面、麦麸等。薯、麦芽，玉米面、麦麸等。在食用菌制种中，原种和栽培种因原料用在食用菌制种中，原种和栽培种因原料用量量较大，大，选择合适的代用原料，其合适的代用原料，其经济意意义就更大。就更大。过去多用麦粒和玉米，去多用麦粒和玉米，现在可用在可用锯木屑和木屑和棉籽壳等来代替。但是棉籽壳等来代替。但是选用代用料用代用料时，必，必须就地取材，来源丰富、价格便宜的原就地取材，来源丰富、价格便宜的原则，而，而且原料没有毒性。且原料没有毒性。38 一一一一 、菌种的制作、菌种的制作、菌种的制作、菌种的制作 4 4、菌种培养基的制备、菌种培养基的制备 （2 2）培养基的类型培养基的类型 培培养养基基的的类类型型 营养来源营养来源 物理状态物理状态 表面形式表面形式 用途用途 天然培养基天然培养基 合成培养基合成培养基半合成培养基半合成培养基固体培养基固体培养基液体培养基液体培养基 半固体培养半固体培养基基 斜面培养基斜面培养基 平面培养基平面培养基 高层培养基高层培养基 母种培养基母种培养基 原种培养基原种培养基 栽培种培养基栽培种培养基栽培种培养基栽培种培养基 39 一一一一 、菌种的制作、菌种的制作、菌种的制作、菌种的制作 4 4 4 4、菌种培养基的制备、菌种培养基的制备、菌种培养基的制备、菌种培养基的制备 （2 2 2 2）培养基的类型培养基的类型培养基的类型培养基的类型 营养来源营养来源营养来源营养来源 天然培养基天然培养基天然培养基天然培养基 天然的有机物天然的有机物质配制而配制而成。如成。如农副副产品麦麸，米品麦麸，米糠，豆糠，豆饼及及许多多农作物秸作物秸秆等，也有等，也有动植物浸出液，植物浸出液，如牛肉膏、麦芽汁、豆芽如牛肉膏、麦芽汁、豆芽汁及汁及马铃薯汁等。薯汁等。培养基的优点培养基的优点是是营养丰养丰富、富、经济方便，但它的化方便，但它的化学成分不能定量，每批成学成分不能定量，每批成分也不分也不稳定，不宜用作精定，不宜用作精确的确的实验。常用的天然培。常用的天然培养基有养基有马铃薯培养基、麦薯培养基、麦芽汁培养基等。芽汁培养基等。40 一一一一 、菌种的制作、菌种的制作、菌种的制作、菌种的制作 4 4 4 4、菌种培养基的制备、菌种培养基的制备、菌种培养基的制备、菌种培养基的制备 （2 2 2 2）培养基的类型培养基的类型培养基的类型培养基的类型 营养来源营养来源营养来源营养来源 合成培养基合成培养基合成培养基合成培养基 用已知成分用已知成分用已知成分用已知成分的化学的化学的化学的化学药药品配品配品配品配制而成制而成制而成制而成。培养基的优点培养基的优点培养基的优点培养基的优点：是各种：是各种：是各种：是各种成分成分成分成分简单简单而清楚，容易而清楚，容易而清楚，容易而清楚，容易控制，适于控制，适于控制，适于控制，适于进进行某些定行某些定行某些定行某些定性、定量性、定量性、定量性、定量测测定。定。定。定。常用的合成培常用的合成培养基有（高氏一养基有（高氏一号培养基）、察号培养基）、察氏培养基等氏培养基等。41 一一一一 、菌种的制作、菌种的制作、菌种的制作、菌种的制作 4 4 4 4、菌种培养基的制备、菌种培养基的制备、菌种培养基的制备、菌种培养基的制备 （2 2 2 2）培养基的类型培养基的类型培养基的类型培养基的类型 营养来源营养来源营养来源营养来源 半合成培养基半合成培养基半合成培养基半合成培养基 在天然培养基中适当添在天然培养基中适当添加一些无机加一些无机盐类，或者，或者在合成培养基中添加少在合成培养基中添加少数天然有机物数天然有机物质配制而配制而成。成。培养基的优点：培养基的优点：培养基的优点：培养基的优点：是是是是营营养全面丰富、宜养全面丰富、宜养全面丰富、宜养全面丰富、宜于控制。常用的有于控制。常用的有于控制。常用的有于控制。常用的有综综合合合合马铃马铃薯培养基等。薯培养基等。薯培养基等。薯培养基等。42 一一一一 、菌种的制作、菌种的制作、菌种的制作、菌种的制作 4 4 4 4、菌种培养基的制备、菌种培养基的制备、菌种培养基的制备、菌种培养基的制备 （2 2 2 2）培养基的类型培养基的类型培养基的类型培养基的类型 物理状态物理状态物理状态物理状态 液体培养基液体培养基液体培养基液体培养基 培养基呈培养基呈液体状液体状态。它含有食用它含有食用菌菌菌菌丝生生长发育所需要育所需要的各种的各种营养养物物质。食用菌食用菌孢子或菌子或菌丝在在这种种培养基培养基中能中能够更好地接更好地接触和吸收养料，因而菌触和吸收养料，因而菌丝体生体生长迅速而粗壮，同迅速而粗壮，同时这种液体菌种便于接种工种液体菌种便于接种工作的机械化、自作的机械化、自动化，有化，有利于提高生利于提高生产效率。效率。缺点缺点是要是要发酵酵设备，成本，成本较高，也高，也较复复杂。液体培养。液体培养基常用来基常用来观察菌种察菌种的培养特征以及的培养特征以及检查菌种的菌种的污染情况。染情况。43 一一一一 、菌种的制作、菌种的制作、菌种的制作、菌种的制作 4 4 4 4、菌种培养基的制备、菌种培养基的制备、菌种培养基的制备、菌种培养基的制备 （2 2 2 2）培养基的类型培养基的类型培养基的类型培养基的类型 物理状态物理状态物理状态物理状态 固体培养基固体培养基固体培养基固体培养基 在液体培养在液体培养基中加入凝固基中加入凝固剂即成即成为固体固体培养基。常用培养基。常用的凝固的凝固剂是是琼脂。脂。根据季根据季节和用途的不和用途的不同，凝固同，凝固剂的添加量一的添加量一般在般在1 18 82 2之之间。固体培养基可制成固体培养基可制成试管管斜面，也可制成平皿平斜面，也可制成平皿平面（平板），面（平板），试管斜面管斜面用来培养和保存菌种，用来培养和保存菌种，平皿平面可用来分离和平皿平面可用来分离和纯化菌种。化菌种。除了加凝固除了加凝固剂的的固体培养基外，天然固体培养基外，天然的固体基的固体基质做成的培做成的培养基也称固体培养基。养基也称固体培养基。在菌种制作中，用麦在菌种制作中，用麦粒、玉米粒、木屑、粒、玉米粒、木屑、棉籽壳、甘蔗渣等棉籽壳、甘蔗渣等农副副产品制成的培养基品制成的培养基也属固体培养基。也属固体培养基。44 一一一一 、菌种的制作、菌种的制作、菌种的制作、菌种的制作 4 4 4 4、菌种培养基的制备、菌种培养基的制备、菌种培养基的制备、菌种培养基的制备 （2 2 2 2）培养基的类型培养基的类型培养基的类型培养基的类型 物理状态物理状态物理状态物理状态 半固体培养基半固体培养基半固体培养基半固体培养基 在在在在10001000毫升液体培养基中，将加入的琼毫升液体培养基中，将加入的琼毫升液体培养基中，将加入的琼毫升液体培养基中，将加入的琼脂量减少为脂量减少为脂量减少为脂量减少为8 81010克，即成为半固体培养基。克，即成为半固体培养基。克，即成为半固体培养基。克，即成为半固体培养基。它主要用来培养一些特殊菌类。它主要用来培养一些特殊菌类。它主要用来培养一些特殊菌类。它主要用来培养一些特殊菌类。45 一一一一 、菌种的制作、菌种的制作、菌种的制作、菌种的制作 4 4 4 4、菌种培养基的制备、菌种培养基的制备、菌种培养基的制备、菌种培养基的制备 （2 2 2 2）培养基的类型培养基的类型培养基的类型培养基的类型 培养基的表面形状培养基的表面形状培养基的表面形状培养基的表面形状 斜面培养基斜面培养基斜面培养基斜面培养基 将将将将琼琼脂培养基脂培养基脂培养基脂培养基装入装入装入装入试试管管管管灭灭菌后，菌后，菌后，菌后，乘乘乘乘热热放置成斜面，放置成斜面，放置成斜面，放置成斜面，凝固后即成。它凝固后即成。它凝固后即成。它凝固后即成。它用于菌种用于菌种用于菌种用于菌种扩扩大大大大转转管及菌种的保藏。管及菌种的保藏。管及菌种的保藏。管及菌种的保藏。平面培养基平面培养基平面培养基平面培养基 高层培养基高层培养基高层培养基高层培养基 将将将将琼琼脂培养基装入三脂培养基装入三脂培养基装入三脂培养基装入三角瓶中角瓶中角瓶中角瓶中灭灭菌后，冷至菌后，冷至菌后，冷至菌后，冷至5050左右，乘左右，乘左右，乘左右，乘热热倒入倒入倒入倒入灭灭菌平皿菌平皿菌平皿菌平皿(或不倒入或不倒入或不倒入或不倒入平皿平皿平皿平皿)凝固后即成。它凝固后即成。它凝固后即成。它凝固后即成。它用于菌种分离和研究用于菌种分离和研究用于菌种分离和研究用于菌种分离和研究菌菌菌菌类类的某些特征。的某些特征。的某些特征。的某些特征。将将将将琼琼脂培养基装入脂培养基装入脂培养基装入脂培养基装入试试管内管内管内管内灭灭菌后，不菌后，不菌后，不菌后，不摆摆成斜成斜成斜成斜面，即成高面，即成高面，即成高面，即成高层层培养基。培养基。培养基。培养基。接入高接入高接入高接入高层层培养基的菌种，培养基的菌种，培养基的菌种，培养基的菌种，发发育的面育的面育的面育的面积虽积虽然小，但然小，但然小，但然小，但这这种培养基厚度大，种培养基厚度大，种培养基厚度大，种培养基厚度大，营营养丰富，存放养丰富，存放养丰富，存放养丰富，存放时间长时间长，也不易干燥开裂。常用也不易干燥开裂。常用也不易干燥开裂。常用也不易干燥开裂。常用于保存菌种。于保存菌种。于保存菌种。于保存菌种。46 一一一一 、菌种的制作、菌种的制作、菌种的制作、菌种的制作 4 4 4 4、菌种培养基的制备、菌种培养基的制备、菌种培养基的制备、菌种培养基的制备 （2 2 2 2）培养基的类型培养基的类型培养基的类型培养基的类型 培养基的用途培养基的用途培养基的用途培养基的用途 母种培养基母种培养基母种培养基母种培养基 也称一也称一级培养培养基。它是分离母种基。它是分离母种或或试管种管种扩大繁殖大繁殖用的培养基。因母用的培养基。因母种培养基装在种培养基装在试管管内，并内，并摆成斜面，成斜面，因此也叫斜面培养因此也叫斜面培养基基。原种培养基原种培养基原种培养基原种培养基 栽培种培养基栽培种培养基栽培种培养基栽培种培养基 也称二级培养基也称二级培养基通常装在罐头瓶通常装在罐头瓶或者或者750毫升容积的毫升容积的菌种瓶内，也可装菌种瓶内，也可装在在1000毫升容积的毫升容积的白色聚丙烯塑料瓶白色聚丙烯塑料瓶内内。也称三也称三级培养基，培养基，它是供食用菌栽培用的它是供食用菌栽培用的菌种培养基。通常装在菌种培养基。通常装在罐罐头瓶或瓶或750毫升容毫升容积的的菌种瓶内，也可装在菌种瓶内，也可装在17X 33厘米或厘米或l7X28厘厘米大小的聚丙米大小的聚丙烯塑料袋塑料袋内。内。47 一一一一 、菌种的制作、菌种的制作、菌种的制作、菌种的制作 5 5 5 5、菌种培养基的制备、菌种培养基的制备、菌种培养基的制备、菌种培养基的制备 母种（一级种）培养基的配制母种（一级种）培养基的配制母种（一级种）培养基的配制母种（一级种）培养基的配制种菇或种木的选择种菇或种木的选择种菇或种木的选择种菇或种木的选择和处理和处理和处理和处理孢子、组织、种木分孢子、组织、种木分孢子、组织、种木分孢子、组织、种木分离离离离马铃薯、琼脂、葡萄马铃薯、琼脂、葡萄马铃薯、琼脂、葡萄马铃薯、琼脂、葡萄糖等原料糖等原料糖等原料糖等原料装入试管的培装入试管的培装入试管的培装入试管的培养基养基养基养基排成斜面排成斜面排成斜面排成斜面的培养基的培养基的培养基的培养基母母母母 种种种种接种接种接种接种配制配制配制配制灭菌灭菌灭菌灭菌培养培养培养培养48 一一一一 、菌种的制作、菌种的制作、菌种的制作、菌种的制作 5 5 5 5、菌种培养基的制备、菌种培养基的制备、菌种培养基的制备、菌种培养基的制备 (1)(1)母种（一级种）培养基的配制母种（一级种）培养基的配制母种（一级种）培养基的配制母种（一级种）培养基的配制 母种培养基种类很多，常用的有以下几种：母种培养基种类很多，常用的有以下几种：母种培养基种类很多，常用的有以下几种：母种培养基种类很多，常用的有以下几种：马铃薯、葡萄糖、薯、葡萄糖、琼脂培养基脂培养基(PDA(PDA培养基培养基)马铃薯薯(去皮去皮)200克，葡萄糖克，葡萄糖20克，克，琼脂脂1820克，水克，水1000毫升。毫升。马铃薯、蔗糖、薯、蔗糖、琼脂培养基脂培养基(PSA(PSA培养基培养基)马铃薯薯(去皮去皮)200克，蔗糖克，蔗糖20克，克，琼脂脂1820克，水克，水1000毫升。毫升。蛋白蛋白胨、葡萄糖、葡萄糖、琼脂培养基脂培养基蛋白蛋白胨2克，葡萄糖克，葡萄糖20克，磷酸克，磷酸氢二二钾1克，磷酸二克，磷酸二氢钾05克，克，维生素生素B1005毫克，硫酸毫克，硫酸镁05克，克，琼脂脂18-20克，水克，水1000毫升。毫升。49 一一一一 、菌种的制作、菌种的制作、菌种的制作、菌种的制作 5 5 5 5、菌种培养基的制备、菌种培养基的制备、菌种培养基的制备、菌种培养基的制备 (2)母种（一级种）培养基的配制方法母种（一级种）培养基的配制方法工艺流程工艺流程计算计算 配方各配方各物用量物用量按比例称量各按比例称量各物质物质 配制配制 调调pH 分装试管分装试管 塞棉塞塞棉塞 灭菌及摆斜面灭菌及摆斜面 无菌检查无菌检查 50 一一一一 、菌种的制作、菌种的制作、菌种的制作、菌种的制作 5 5 5 5、菌种培养基的制备、菌种培养基的制备、菌种培养基的制备、菌种培养基的制备 (2)(2)母种（一级种）培养基的配制方法母种（一级种）培养基的配制方法母种（一级种）培养基的配制方法母种（一级种）培养基的配制方法 工工 艺艺 流流 程程51 一一一一 、菌种的制作、菌种的制作、菌种的制作、菌种的制作 5 5 5 5、菌种培养基的制备、菌种培养基的制备、菌种培养基的制备、菌种培养基的制备 (2)(2)母种（一级种）培养基的配制方法母种（一级种）培养基的配制方法母种（一级种）培养基的配制方法母种（一级种）培养基的配制方法 首先要选择合适的浸煮容器，一般选用铝首先要选择合适的浸煮容器，一般选用铝锅、搪瓷缸或玻璃烧杯等，而不能用铜，铁器皿，锅、搪瓷缸或玻璃烧杯等，而不能用铜，铁器皿，以免铜锈或铁锈混进培养基中。以免铜锈或铁锈混进培养基中。母种培养基的制作，按以下顺序操作母种培养基的制作，按以下顺序操作母种培养基的制作，按以下顺序操作母种培养基的制作，按以下顺序操作 计算计算先先选好培养基配方，按照培养基需要好培养基配方，按照培养基需要的数量的数量计算各种成分的用量，然后称量。算各种成分的用量，然后称量。52 一一一一 、菌种的制作、菌种的制作、菌种的制作、菌种的制作 5 5 5 5、菌种培养基的制备、菌种培养基的制备、菌种培养基的制备、菌种培养基的制备 (2)(2)母种（一级种）培养基的配制方法母种（一级种）培养基的配制方法母种（一级种）培养基的配制方法母种（一级种）培养基的配制方法 称量称量用架用架盘天平称取培养基各种成分的用量，天平称取培养基各种成分的用量，对一些不易称量的成分，需采用特殊方式称量，如牛肉膏比一些不易称量的成分，需采用特殊方式称量，如牛肉膏比较粘稠，可先称好一根玻棒和粘稠，可先称好一根玻棒和烧杯，再用玻棒取牛肉膏放杯，再用玻棒取牛肉膏放在在烧杯中一起称。微量元素与生杯中一起称。微量元素与生长因子等，需要量很少，因子等，需要量很少，难以称准，可先配成以称准，可先配成较浓的原液，再从中取出需要的量。的原液，再从中取出需要的量。配制配制配制配制为避免避免发生沉淀，加入的生沉淀，加入的顺序一般是先加序一般是先加缓冲化合物，溶解后加入主要元素，然后是微量元素，再加冲化合物，溶解后加入主要元素，然后是微量元素，再加入入维生素等。最好是每种成分溶解后，再加入第二种生素等。最好是每种成分溶解后，再加入第二种营养养成分。若各种成分均不成分。若各种成分均不发生沉淀，也可以一起加入。生沉淀，也可以一起加入。53 一一 、菌种的制作、菌种的制作 5 5 5 5、菌种培养基的制备、菌种培养基的制备、菌种培养基的制备、菌种培养基的制备 (2)(2)母种（一级种）培养基的配制方法母种（一级种）培养基的配制方法母种（一级种）培养基的配制方法母种（一级种）培养基的配制方法配制配制配制配制 若用若用马铃薯、玉米粉、苹果、米粉、木屑等原料薯、玉米粉、苹果、米粉、木屑等原料时，应先制取先制取这些原料的煮汁，然后再把煮汁与其它成分混些原料的煮汁，然后再把煮汁与其它成分混合合 以马铃薯葡糖琼脂培养基为例，说明其配制方法。以马铃薯葡糖琼脂培养基为例，说明其配制方法。以马铃薯葡糖琼脂培养基为例，说明其配制方法。以马铃薯葡糖琼脂培养基为例，说明其配制方法。把把选好的好的马铃薯洗薯洗净，去皮挖去芽眼，切成薄片，去皮挖去芽眼，切成薄片或或1厘米大小的方厘米大小的方块，称取，称取200克放在容器中，加水克放在容器中，加水1000毫升，加毫升，加热煮沸煮沸2030分分钟，至，至软而不而不烂的程度，的程度，用四用四层纱布布过滤；取其；取其滤液。液。54 一一一一 、菌种的制作、菌种的制作、菌种的制作、菌种的制作 5 5 5 5、菌种培养基的制备、菌种培养基的制备、菌种培养基的制备、菌种培养基的制备 (2)(2)母种（一级种）培养基的配制方法母种（一级种）培养基的配制方法母种（一级种）培养基的配制方法母种（一级种）培养基的配制方法配制配制配制配制 在在滤液中加入液中加入琼脂，小火加脂，小火加热，用玻璃棒不断，用玻璃棒不断搅拌，拌，以防溢出或焦底，至以防溢出或焦底，至琼脂全部溶化，再加入葡萄糖和其脂全部溶化，再加入葡萄糖和其它它营养物养物质使其溶化，最后加水至使其溶化，最后加水至1000毫升即成。毫升即成。调调pHpH 一般用一般用10盐酸酸(HCl)或或10氢氧化氧化钠(NaOH)调pH，用，用pH试纸进行行测试。调时要小心，要几滴要小心，要几滴几滴地加碱或加酸，几滴地加碱或加酸，调至所需要的至所需要的pH值。55 一一一一 、菌种的制作、菌种的制作、菌种的制作、菌种的制作 5 5 5 5、菌种培养基的制备、菌种培养基的制备、菌种培养基的制备、菌种培养基的制备 (2)(2)母种（一级种）培养基的配制方法母种（一级种）培养基的配制方法母种（一级种）培养基的配制方法母种（一级种）培养基的配制方法 分装分装培养基配制好后，趁培养基配制好后，趁热倒入大的玻璃倒入大的玻璃漏斗中，打开漏斗中，打开弹簧簧夹，按需要分装于，按需要分装于试管或三角管或三角瓶内。装入瓶内。装入试管的培养基量，以管的培养基量，以试管管总长的的1/41/5为好好(装入的培养基切勿沾附管口壁装入的培养基切勿沾附管口壁)。装入三。装入三角瓶培养基量，一般不要超角瓶培养基量，一般不要超过瓶容量的瓶容量的13每每装完一支装完一支试管或一个三角瓶随即关管或一个三角瓶随即关闭弹簧簧夹，并把并把试管放管放进小小铁丝筐内。筐内。56 一