苯并二氮杂卓类药物的分析

苯并二氮杂卓类药物的分苯并二氮杂卓类药物的分析析鉴别试验（掌握）2特殊杂质检查（熟悉）3含量测定（掌握）4一、苯并二氮杂卓类药物的结构与性质苯环与七元含氮杂环稠合而成的有机药物苯环与七元含氮杂环稠合而成的有机药物NN1234571,4-1,4-苯并二氮杂苯并二氮杂卓类卓类1.白白色色或或微微黄黄色色结结晶晶或或结结晶晶性性粉粉末末；不不溶溶或或极极微微溶溶于于水水，溶溶于于丙丙酮酮或或三三氯氯甲烷等有机溶剂甲烷等有机溶剂2.苯并二氮杂卓母核：弱碱性，苯并二氮杂卓母核：弱碱性，UV3.具具有有内内酰酰胺胺和和亚亚胺胺结结构构，遇遇酸酸、碱或受热易水解开环。碱或受热易水解开环。NNClH3CO1234567892和某些生物碱沉淀剂反和某些生物碱沉淀剂反应产生沉淀应产生沉淀可用非水溶液滴定法测可用非水溶液滴定法测定含量定含量地西泮地西泮奥沙西泮奥沙西泮劳拉西泮劳拉西泮(二二)典型药物典型药物氯硝西泮氯硝西泮氯氮卓氯氮卓三唑仑三唑仑1.1.沉淀反应沉淀反应 氯氮卓氯氮卓 橙红色沉淀橙红色沉淀 阿普唑仑阿普唑仑 盐酸氟西泮盐酸氟西泮 KBiI4 生成橙红色沉淀生成橙红色沉淀 氯硝西泮氯硝西泮 后者后者放置后，沉淀颜色变深放置后，沉淀颜色变深 阿普唑仑遇硅钨酸阿普唑仑遇硅钨酸 白色沉淀白色沉淀二、鉴别试验二、鉴别试验（一）、化学鉴别一）、化学鉴别2.2.硫酸硫酸-荧光反应荧光反应本类药物溶于硫酸后，在紫外光（365nm）下，显不同颜色的荧光 地西泮地西泮 黄绿色黄绿色 黄色黄色 +H+H2 2SOSO4 4 若若 +稀稀H H2 2SOSO4 4 氯氮卓氯氮卓 黄色黄色 紫色紫色示示例例10-27 地地西西泮泮的的硫硫酸酸-荧荧光光反反应应鉴鉴别别：取取地地西西泮泮约约10mg，加加硫硫酸酸3ml，振摇使溶解，在紫外光灯，振摇使溶解，在紫外光灯(365nm)下检视，显黄绿色荧光下检视，显黄绿色荧光1.1.芳伯胺的反应芳伯胺的反应(水解后，重氮化水解后，重氮化-偶合偶合)本类药物如本类药物如N1位上未取代者，与盐酸共热水解后，生位上未取代者，与盐酸共热水解后，生成芳伯胺，可发生重氮化成芳伯胺，可发生重氮化-偶合反应显色偶合反应显色地西泮无此反应地西泮无此反应C C1 1位氮原子位氮原子上有甲基取上有甲基取代，水解产代，水解产物没有芳伯物没有芳伯氨基氨基橙红色橙红色橙红色橙红色（二）、特征基团反应（二）、特征基团反应2.2.氯化物的鉴别反应氯化物的鉴别反应本本类类药药物物大大多多为为有有机机氯氯化化合合物物，用用氧氧瓶瓶燃燃烧烧法法破破坏坏，生生成成氯氯化化氢氢，以以5%氢氢氧氧化化钠钠溶溶液液吸吸收收，加加稀稀硝硝酸酸酸酸化化，并并缓缓煮沸缓缓煮沸2分钟，显氯化物反应。分钟，显氯化物反应。具有较大共轭体系，利用紫外最大吸收波长，以及最大吸收波长处的吸光度或吸光度比值进行鉴别红外吸收光谱用于大多数1,4-苯并二氮杂卓类药物的指纹鉴别(三三)吸收光谱特征吸收光谱特征(四四)色谱法色谱法结构与性质相似，不易区分鉴别。色谱法用于本类药物原料和制剂的专属鉴别三、特殊杂质检查氯氮卓主要有关物质4-氧化氧化-7-氯氯-5-苯苯基基-1,3-二氢二氢-2H-1,4-苯并二氮杂苯并二氮杂-2-酮酮3-氧化氧化-6-氯氯-2-(氯甲基氯甲基)-4-苯苯基喹唑啉基喹唑啉(2-氨基氨基-5-氯苯氯苯基基)苯甲酮苯甲酮TLC检查-BP、USPHPLC检查-ChP苯并二氮杂卓类药物在生产或储存过程中易引入苯并二氮杂卓类药物在生产或储存过程中易引入药物的中间体、副产物和分解产物等有关物质。药物的中间体、副产物和分解产物等有关物质。氯硝西泮主要有关物质(2-氨基氨基-5-硝基苯基硝基苯基)(2-氯苯基氯苯基)甲酮甲酮3-氨基氨基-4-(2-氯苯基氯苯基)-6-硝基喹啉硝基喹啉-2(1H)-酮酮四、含量测定四、含量测定本类药物多为弱碱性，非水溶液滴定法有大的共轭体系，UV法 HPLC-UVNNClH3CO12345678921,4-苯并二氮杂卓类非水溶液滴定法非水溶液滴定法 （掌握）（掌握）1.1.非水碱量法非水碱量法在在水水中中碱碱性性较较弱弱，不不能能顺顺利利地地进进行行中中和和滴滴定定。在在非非水水酸酸性性溶溶剂剂中中（如如HAcHAc中中），则则能能显显示示出出较较强强的的碱碱性性，滴滴定定突突跃跃增增大，可以顺利地进行中和滴定。大，可以顺利地进行中和滴定。药物碱性药物碱性非水酸性溶剂非水酸性溶剂pKb 810冰醋酸pKb 1012冰醋酸与醋酐的混合液pKb 12醋酐多采用高氯酸非水溶液滴定法多采用高氯酸非水溶液滴定法测定此类药测定此类药物及其盐类的原料药物及其盐类的原料药14YOURSITEHERE紫外分光光度法优点：简便易行，灵敏度高，10-710-4g/ml，准确度较高，0.5%1%。局限性：专属性较差ChP中，本类药物中多种药物的制剂用UV法测定含量，原料药仅奥沙西泮用UV法测定。对照品比较法吸收系数法为百分吸收系数，为百分吸收系数，L L为吸收池厚度为吸收池厚度 1.1.对照品比较法对照品比较法2.2.吸收系数法吸收系数法C CX X和和C CR R分别为供试分别为供试品溶液和对照品溶品溶液和对照品溶液的浓度，液的浓度，A AX X和和A AR R分别为供试品和对分别为供试品和对照品溶液的吸光度照品溶液的吸光度16YOURSITEHEREHPLC 优点：分离模式多样、适用范围广、选择和专属性强、检测手段多样、灵敏、重复性好、分析速度快等 能十分有效地分离苯并二氮杂卓类药物及其降解产物。本类药物分析大多采用反相高效液相色谱法，以不同配比的甲醇-水或甲醇（乙腈）-缓冲液等为流动相，进行测定。2016Thank You!结束语结束语谢谢大家聆听！谢谢大家聆听！19