小白鼠缺氧耐受性试验

会计学1小白鼠缺氧耐受性试验小白鼠缺氧耐受性试验5.5.细胞内氧化代谢细胞内氧化代谢外呼吸外呼吸内呼吸内呼吸气体运输气体运输第2页/共30页乏氧性 血液性 循环性 组织性缺氧类型缺氧类型供氧 用氧 第3页/共30页实验目的实验目的l l复制乏氧性、血液性和组织性缺氧 动物模型，掌握缺氧的分类；l l观察不同类型缺氧时 呼吸、皮肤粘膜颜色的变化，了解 解救措施；l l了解成年、新生小鼠对缺氧耐受性的差异，并分析机制。第4页/共30页实验动物实验动物n n成年小白鼠（7只）n n新生小白鼠（1只）单独放置第5页/共30页实验器材和药品实验器材和药品 缺氧瓶+软胶塞，CO中毒瓶+解救瓶、烧杯 钠石灰，铁纱网，镊子，注射器，氧气，氧气，CO，5 亚硝酸钠亚硝酸钠,1 美兰美兰 0.1 氰化钾氰化钾,10 硫代硫酸钠硫代硫酸钠，生理盐水，生理盐水第6页/共30页实验步骤实验步骤l l乏氧性乏氧性缺氧缺氧l l一氧化碳中毒性一氧化碳中毒性缺氧缺氧l l亚硝酸钠中毒性亚硝酸钠中毒性缺氧缺氧l l氰化物中毒性氰化物中毒性缺氧缺氧l l动物尸检动物尸检第7页/共30页成年成年小白鼠小白鼠新生新生小白鼠小白鼠步骤1观察正常状态,一般指标(呼吸频率,口唇颜色)步骤2缺氧瓶+钠石灰+成年鼠+铁网包裹乳鼠观察指标呼吸频率(次/10秒,每隔3分钟观察)、口唇、皮肤颜色、存活时间、肝脏颜色1.1.乏氧性缺氧乏氧性缺氧呼吸频率观察小白鼠腹部的起伏腹部的起伏实验中尽量减少对小白鼠的刺激减少对小白鼠的刺激第8页/共30页2.CO中毒性缺氧中毒性缺氧小白鼠小白鼠A(A(中毒中毒)小白鼠小白鼠B(B(中毒解救中毒解救)步骤1观察正常状态，一般指标步骤2放入 中毒瓶中毒瓶放入 中毒解救瓶中毒解救瓶步骤3注入 3 ml CO注入 3 ml CO步骤4软瘫后立即输入O2观察指标呼吸频率(次/10秒,每隔3分钟观察)，口唇、皮肤颜色、存活时间、肝脏颜色第9页/共30页3.NaNO2中毒性缺氧中毒性缺氧小白鼠小白鼠A(中毒中毒)小白鼠小白鼠B(中毒解救中毒解救)步骤1分别用烧杯罩住，观察正常状态及一般指标步骤2背部皮下注射 0.3ml NaNO2背部皮下注射 0.3ml NaNO2步骤3腹腔注射 0.3ml 生理盐水生理盐水 腹腔注射 0.3ml 1美兰美兰 观察指标呼吸频率(次/10秒,每隔3分钟观察)口唇、皮肤颜色、存活时间、肝脏颜色防止美兰沾到身体、衣物及地面防止美兰沾到身体、衣物及地面 第10页/共30页4.4.氰化物氰化物氰化物氰化物中毒性缺氧中毒性缺氧中毒性缺氧中毒性缺氧小白鼠小白鼠A(中毒中毒)小白鼠小白鼠B(中毒解救中毒解救)步骤1分别用烧杯罩住，观察正常状态一般指标步骤2背部皮下注射0.3ml KCN背部皮下注射0.3ml KCN步骤3腹腔注射 0.4ml 生理盐水生理盐水腹腔注射0.4ml Na2S2O3观察指标呼吸频率(次/10秒,每隔3分钟观察)口唇、皮肤颜色、存活时间、肝脏颜色防止防止KCN沾到身体、衣物及地面沾到身体、衣物及地面第11页/共30页动物尸检动物尸检观察对象观察对象实验实验1、2、3、4中的小鼠中的小鼠观察指标观察指标1皮肤颜色皮肤颜色观察指标观察指标2肝脏颜色（剖腹）肝脏颜色（剖腹）血液颜色血液颜色第12页/共30页实验结果实验结果缺氧类型缺氧前缺氧后存活时间肝脏颜色R(次/10秒)皮肤口唇颜色3,6,9 乏氧性缺氧成幼CO中毒ABNaNO2中毒ABKCN中毒AB第13页/共30页三通管的使用三通管的使用第15页/共30页腹腔注射腹腔注射 n n鼠头朝下鼠头朝下n n针头倾斜针头倾斜4545度度n n不要太靠近中线不要太靠近中线n n针头尖向下针头尖向下n n避开肝脏和膀胱避开肝脏和膀胱图图2 小白鼠的腹腔注射小白鼠的腹腔注射 第16页/共30页皮下注射皮下注射 第17页/共30页实验结果实验结果缺氧类型缺氧前缺氧后存活时间肝脏颜色R(次/10秒)皮肤口唇颜色3,6,9 乏氧性缺氧成幼CO中毒ABNaNO2中毒ABKCN中毒AB第18页/共30页一、乏氧性缺氧一、乏氧性缺氧一、乏氧性缺氧一、乏氧性缺氧1.1.钠石灰有何作用？2.2.成鼠、幼鼠哪个存活时间长？为什么？3.3.小白鼠呼吸频率有何变化？为什么？4.4.小白鼠是否出现发绀？什么叫发绀?实验分析实验分析 第19页/共30页1.1.钠石灰钠石灰=CaO+NaOH,=CaO+NaOH,吸收吸收COCO2 2,消除消除COCO2 2对实验的影响对实验的影响2.成鼠、幼鼠哪个存活时间长？为什么？幼鼠新陈代谢低，耗氧量少，相对成鼠需氧量少；幼鼠呼吸中枢发育不完善，对缺氧不敏感；幼鼠Hb含量高，相对不易缺氧；幼鼠主要靠糖酵解供能，成鼠主要以有氧呼吸供能，故幼鼠需氧少。第20页/共30页3.呼吸频率变化 先加快，后减慢，最后死亡PaO2呼吸中枢(+)，呼吸深快 化学感受器(+)颈动脉体 主动脉体 呼吸中枢(-),呼吸减慢PaO24.4.乏氧性缺氧时，乏氧性缺氧时，毛细血管毛细血管中中氧合氧合HbHb减少，脱氧减少，脱氧HbHb浓度浓度增多增多超过超过5g/dL5g/dL以上，可使以上，可使皮肤与粘膜呈青紫色，称皮肤与粘膜呈青紫色，称发绀。发绀。第21页/共30页二、二、CO中毒性缺氧中毒性缺氧 1.1.COCO中毒性缺氧属于哪种类型的缺中毒性缺氧属于哪种类型的缺氧氧?2.2.什么叫血液性缺氧什么叫血液性缺氧?3.3.COCO中毒性缺氧的发生机制是什么中毒性缺氧的发生机制是什么?4.4.樱桃红色是哪种物质的颜色樱桃红色是哪种物质的颜色?第22页/共30页 失去携氧能力 COHb HbCO (樱桃红色)与1个血红素结合，其余对氧亲和力 CO中毒机制中毒机制 抑制RBC糖酵解，2,3-DPG 氧离曲线左移,亲和力,释氧 亲和力高 第23页/共30页三、三、NaNO2中毒性缺氧中毒性缺氧 1.1.属于哪种类型的缺氧?2.2.发生机制是什么?3.3.注射美兰的小白鼠是否存活，为什么?4.咖啡色是哪种物质的颜色?第24页/共30页不能 携氧 其余Fe2+-O2亲和力 Hb-FeHb-Fe3+3+-OH OH 氧化剂 硝酸盐亚硝酸盐肠道 细菌(棕褐色棕褐色)高铁血红蛋白血症 Hb-FeHb-Fe2+2+氧离曲线左移,释氧 还原剂 第25页/共30页四、四、KCN中毒性缺氧中毒性缺氧 1.属于哪种类型的缺氧？2.发生机制是什么?3.注射Na2S2O3的小白鼠是否存活？为什么？4.玫瑰红色是怎样产生的?第26页/共30页 KCNKCN与与氧化型细胞色素酶氧化型细胞色素酶的三价铁结合为的三价铁结合为氰化高氰化高铁细胞色素氧化酶铁细胞色素氧化酶，使之，使之不能还原不能还原成还原型细胞成还原型细胞色素氧化酶，呼吸链中断，组织细胞不能利用氧。色素氧化酶，呼吸链中断，组织细胞不能利用氧。cytaa3Fe3+cytaa3Fe3+-CNCN-+氧化型 氰化高铁细胞色素氧化酶 cytaa3Fe2+还原型 第27页/共30页3、存活 机制：Na2S2O3与KCN生成 无毒的硫氰酸钠，随尿液排出体外；4、小白鼠皮肤粘膜、肝脏呈玫瑰红色。因为组织利用氧障碍 毛细血管中的HbO2 含量增加,皮肤粘膜 呈玫瑰红色。第28页/共30页实验结论实验结论n n低张性缺氧时呼吸频率先 后 ；其他类型缺氧时呼吸频率持续；n n新生小白鼠的耐缺氧能力强于成年小白鼠；n n美兰对NaNO2中毒有解救作用；n nNa2S2O3对KCN中毒有解救作用；第29页/共30页感谢您的观看！感谢您的观看！第30页/共30页