土壤中分解尿素的细菌的分离和计数

+ 选 择 培 养 基 当 样 品 的 稀 释 度 足 够 高 时 ， 培 养 基 表 面 生 长 的 一 个 菌 落 ， 来 源 于 样 品 稀 释 液 中 的 一 个 活 菌 ， 通 过 统 计 平 板 上 的 菌 落 数 ， 就 能 推 测 出 样 品 中 大 约 含 有 多 少 活 菌 。 设 置 对 照 的 方 法 ：空 白 对 照 ： 不 给 对 照 组 任 何 处 理 因 素 。条 件 对 照 ： 给 对 照 组 施 以 部 分 实 验 因 素 ， 但 不 是 所 要 研 究 的 处 理 因 素 。自 身 对 照 ： 对 照 组 和 实 验 组 都 在 同 一 研 究 对 象 上 进 行 。相 互 对 照 ： 不 单 设 对 照 组 ， 而 是 几 个 实 验 组 相 互 对 照 。 A同 学 的 结 果 与 其 他 同 学 不 同 ， 可 能的 解 释 有 两 种 。 一 是 由 于 土 样 不 同 ；二 是 由 于 培 养 基 污 染 或 操 作 失 误 。 从 肥 沃 、 湿 润 的 土 壤 中 取 样 。 先 铲 去 表 层土 3cm左 右 ， 再 取 样 ， 将 样 品 装 入 事 先 准 备 好 的信 封 中 。 取 土 样 用 的 小 铁 铲 和 盛 土 样 的 的 信 封 在 使 用前 都 要 灭 菌 。制 备 以 尿 素 为 唯 一 氮 源 的 选 择 培 养 基 。 为什么分离不同的微生物要采用不同的稀释度？测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量，选用的稀释范围相同吗？ 实 验 时 要对 培 养 皿 作好 标 记 。 注明 培 养 基 类型 、 培 养 时间 、 稀 释 度 、培 养 物 等 。 六 、 例 题 解 析 例 1 对 细 菌 群 体 生 长 规 律 测 定 的 正 确 的 表 述 是A 在 液 体 培 养 基 上 进 行 B 至 少 接 种 一 种 细 菌 C 接 种 一 个 细 菌 D 及 时 补 充 消 耗 的 营 养 物 质 解 析 ： 细 菌 群 体 生 长 规 律 的 测 定 是 人 们 在 一 定 条 件 下 进 行 的 。这 些 条 件 是 ： 一 种 细 菌 、 恒 定 容 积 的 培 养 基 ， 液 体 培 养 基 、 定时 测 定 细 菌 总 数 。 在 这 些 条 件 下 ， 才 能 测 定 出 细 菌 的 生 长 规 律 。测 定 时 只 能 用 一 种 细 菌 的 子 细 胞 群 体 的 变 化 规 律 表 达 微 生 物 的生 长 ； 恒 定 容 积 是 给 微 生 物 提 供 一 定 的 生 存 环 境 ； 液 体 培 养 基才 能 通 过 样 品 推 测 细 菌 总 数 。 若 接 种 多 种 细 菌 ， 则 会 发 生 种 间斗 争 而 不 能 测 定 一 种 微 生 物 的 生 长 规 律 。 在 接 种 时 ， 要 保 证 一定 的 接 种 量 。 答 案 ： A 例 2 在 微 生 物 群 体 生 长 规 律 的 测 定 中 ， 种 内斗 争 最 显 著 最 激 烈 的 时 期 是 A 调 整 期 B 对 数 期 C 稳 定 期 D 衰 亡 期 解 析 ： 种 内 斗 争 是 一 种 生 态 因 素 。 种 内 斗 争 反 应 了 种 内 生 物对 生 存 空 间 和 生 活 资 源 的 争 夺 。 在 生 活 空 间 充 裕 ， 营 养 充 足 的 时候 ， 种 内 斗 争 的 程 度 是 比 较 低 的 。 随 着 微 生 物 个 体 数 目 的 增 加 ，每 个 个 体 的 生 存 空 间 越 来 越 少 ， 营 养 物 质 也 越 来 越 少 ， 每 个 个 体对 生 存 空 间 和 资 源 的 争 夺 也 越 来 越 激 烈 ， 种 内 斗 争 就 越 来 越 激 烈 。由 此 可 知 ， 在 稳 定 期 的 种 内 斗 争 最 激 烈 。 在 衰 亡 期 ， 微 生 物 的 数目 已 经 开 始 减 少 ， pH已 经 极 度 不 适 于 微 生 物 的 生 存 ， 次 级 代 谢 产物 积 累 到 很 高 的 程 度 ， 这 时 的 微 生 物 的 生 存 斗 争 主 要 是 与 无 机 环境 的 斗 争 。 答 案 ： C 1.对 细 菌 群 体 生 长 规 律 测 定 的 正 确 的 表 述 是 （ ） A.在 液 体 培 养 基 上 进 行 B.至 少 接 种 一 种 细 菌 C.接 种 一 个 细 菌 D.及 时 补 充 消 耗 的 营 养 物 质 2.使 用 选 择 培 养 基 的 目 的 是 （ ） A.培 养 细 菌 B.培 养 真 菌 C.使 需 要 的 微 生 物 大 量 繁 殖 D.表 现 某 微 生 物 的 特 定 性 状 与 其 他 微 生 物 加 以 区 别3.能 合 成 脲 酶 的 微 生 物 所 需 要 的 碳 源 和 氮 源 分 别 是( ) A.CO 2和 N2 B.葡 萄 糖 和 NH3 C.CO2和 尿 素 D.葡 萄 糖 和 尿 素 ACD 4.下 列 说 法 不 正 确 的 是 （ ） A.科 学 家 从 70 80度 热 泉 中 分 离 到 耐 高 温 的 TaqDNA聚合 酶 B.统 计 某 一 稀 释 度 的 5个 平 板 的 菌 落 数 依 次 为 M1、 M2、M3、 M4、 M5， 以 M3作 为 该 样 品 菌 落 数 的 估 计 值 C.设 置 对 照 实 验 的 主 要 目 的 是 排 除 实 验 组 中 非 测 试 因素 对 实 验 结 果 的 影 响 ， 提 高 实 验 结 果 的 可 信 度 D.同 其 他 生 物 环 境 相 比 ， 土 壤 中 的 微 生 物 数 量 最 大 ，种 类 最 多 。5.为 培 养 和 分 离 出 酵 母 菌 并 淘 汰 杂 菌 ， 常 在 培 养 基 中加 入 （ ） A.较 多 的 氮 源 物 质 B.较 多 的 碳 源 物 质 C.青 霉 素 类 药 物 D.高 浓 度 食 盐BC 例 3 （ 2005年 江 苏 ） 抗 生 素 作 为 治 疗 细 菌 感染 的 药 物 ， 其 高 效 性 和 巨 大 的 经 济 价 值 使 抗 生 素 工 业经 久 不 衰 。 其 中 青 霉 素 的 发 现 和 应 用 具 有 划 时 代 的 意义 。 青 霉 素 发 酵 产 生 青 霉 素 。 青 霉 菌 的 新 陈 代 谢 类 型是 ， 青 霉 素 是 青 霉 菌 的 代 谢 产 物 。 在 生 产 和 科 研 中 ， 常 选 用 处 于 期 的 青 霉 菌 作为 菌 种 或 研 究 材 料 ， 因 为 此 时 的 青 霉 菌 代 谢 旺 盛 ， 和 比 较 稳 定 。 对 青 霉 菌 菌 体 生 长 情 况 的 测 定 ： 取 一 定 体 积 的 发酵 液 ， 经 离 心 分 离 、 反 复 洗 涤后 ， ， 再 计 算 发 酵 罐中 菌 体 的 总 重 量 。异 养 需 氧 型 次 级对 数个 体 的 形 态 生 理 特 性称 菌 体 的 湿 重 （ 称 烘 干 后 的 重 量 ）