用于细胞生物学研究的技术

细 胞 生 物 学 研 究 方 法 生 命 科 学 导 论 -细 胞 学 基 础 教 师 : 曲鑫建 讲师联 系 方 式 : 13840966510电 子 信 箱 : 生 命 与 医 药 学 院 2014.06.21 用于细胞生物学研究的技术一、细胞融合二、单克隆抗体制备三、基因敲除技术四、动物克隆技术 1.定 义 在 自 然 或 人 工 条 件 下 ， 使 二 个 或 二 个 以 上 细 胞合 并 形 成 一 个 细 胞 的 过 程 。 2. 促融方法 生 物 学 方 法 ： 仙 台 病 毒 化 学 方 法 ： PEG(聚 乙 二 醇 ) 物 理 方 法 ： 电 脉 冲 打 孔 仪 3. 应用A.细 胞 核 和 细 胞 质 间 的 相 互 作 用 细 胞 周 期 相 关 因 子 的 发 现 B. 膜蛋白流动性C. 基因定位 基 因 敲 除 是 通 过 一 定 的 途 径 使 机 体 特 定 的 基 因 失活 或 缺 失 的 技 术 。 基 因 敲 除 主 要 是 应 用 DNA同 源 重组 原 理 ， 用 设 计 的 同 源 片 段 替 代 靶 基 因 片 段 ， 从而 达 到 基 因 敲 除 的 目 的 。除 同 源 重 组 外 ， 新 技 术 也 逐 渐 被 应 用 ， 成 功 的 有基 因 的 插 入 突 变 和 miRNA， 它 们 同 样 可 以 达 到 基 因敲 除 的 目 的 。三、基因敲除技术 例 ： 基 因 敲 除 鼠Mario Capecchi (Late 1980s) (University of Utah)embryonic stem cells in inner cell mass as target cells 1/104 cells undergo a process of homologous recombination. ：是指由一个细胞或个体以无性繁殖（asexual reproduction）或孤雌生殖而产生方式产生遗传物质完全相同的一群细胞或一群个体。广 义 狭 义胚胎分割细胞核移植胚胎细胞核移植体细胞核移植克 隆 技 术 核移植技术：所谓核移植技术就是利用显微操作技术将一个细胞的细胞核移植到另一个细胞中，或者将两个细胞的细胞核（或细胞质）进行交换，从而可能创造无性杂交生物新品种的一项技术。人类皮肤细胞核移植到家兔的卵母细胞里 （1）动物资源的种质保存包括地球上频危动物的挽救等。（2）生产移植器官，培育优良品种，与转基因技术相结合研制生物反应器生产基因药物。2. 动物克隆的应用 思 考 题1.克 隆 人 是 不 是 正 常 的 人 ？ 怎 样 看 待 克 隆 人 ？2.身 体 上 任 何 一 部 分 的 细 胞 是 否 都 可 以 用 来 克 隆 ？