卵巢癌新型标志物HE4的临床介绍

卵巢癌新型标志物 HE4临床介绍 15th, Sep, 2014 李超 Roche 内 容 卵巢癌背景介绍 HE4的临床意义解读 卵巢癌标志物临床应用（ ROMA） Roche Elecsys HE4 介绍 卵巢癌 概述 卵巢癌的全球发病率估计在 每年 20万左右 ，每年死亡例数预计可达 12万 。 卵巢癌高死亡率的主要原因是 不能早期诊断 ，大部分进展期的卵巢癌患者 最终死于该病；相反，如果早期得到诊治， 90高分化的患者最终可以存 活。 浆液性癌 占卵巢肿瘤的绝大部分，通常所说的卵巢癌就是指浆液性癌 。 page 3 2011 Roche 卵巢癌的 现状 一个难题：无成熟的早期诊断方法； 二个 70%：确诊时约 70%已属晚期；治疗后即使是已达到 临床完全缓解的病人仍有 70%最终将复发； 三个进展：手术病理分期、肿瘤细胞减灭术、紫杉醇 +卡 铂化疗方案 四个焦点：保留生育 /生理功能、早期的辅助治疗、晚期 的治疗、复发的诊断和治疗 卵巢癌 的现状 早期诊断 极有价值 卵巢癌在 女性生殖系统 恶性肿瘤中死亡率占 第一位。 70%卵巢癌 晚期（ III期和 IV期） page 5 2011 Roche 卵巢癌的 诊断策略 早期诊断 卵巢癌的早期诊断一直是卵巢癌研究中最 具挑战性的课题 肿瘤诊断的三大支柱 图像诊断 ： B超 CT、 MRI PET/CT 血液与体液检测 ：肿瘤标记物 细胞学与组织学诊断 卵巢癌诊断面临的 挑战 早期诊断及鉴别诊断 诊断常用的两种方法 ： 1 经阴道超声检测 (TVS) TVS 不能对肿块的良恶性做出准确的判断 TVS结果准确解释需要丰富的临床经验积累 2 CA125 (目前认为卵巢癌生物标志物的金标准 ) 假阳性和假阴性比例太高 临床对良恶性肿瘤的鉴别诊断存在困难 如何早期正确的 诊断 卵巢癌 现存诊断流程难以作出正确诊断 家族史 腹部 /盆腔检查 CA-125 经阴超声检查（ TVU） CT 胸片 胃肠功能评估 血常规 尿常规 生化检查 探 查 手 术 组织 病理 检查 良性 恶 性 TVU (经 阴道超声 检查 )：卵巢 肿块 形 态 学的基本 检查 盆腔肿块 /腹水、腹胀 早期症状表现不明显或 缺乏特异性， 例如出血 、盆腔或腹部疼痛，泌 尿系统症状 卵巢癌的生物标志物 CA 125 不完美的 “金标准” CA 125解读 敏感性低 ：只有 50%的 I期卵巢癌 和 80%的上皮性卵巢癌出现 CA125的升高 1 特异性低 ：妇科良性疾病和其他系统恶性疾病也可出现 CA125的升高 1,2 某些妇科恶性肿瘤患者完全不表达 CA125 CA125联合经阴超声检查是卵巢癌诊断的“ 金标准 ” 1 NIH Consensus Development Conference Statement. Gynecol Oncol. 1994, 55, S4-S14. 2 ACOG Practice Bulletin. Obstet Gynecol. 2007, 110, 201-213. CA125和 TVS联合检测 国际上正在进行两项超大规模的卵巢癌筛查研究 英国 13个中心联合进行的卵巢癌筛查研究（ UKCTOCS） 招募 200,000绝经后女性 三种筛查模式： ROCA与 TVS的复杂序列筛查模式 TVS单一筛查模式 对照组即不做任何筛查 结果 ： ROCA与 TVS的 复杂序列 筛查模式的可达到 35.1%的阳性预测值， 但 该研究尚未得出这种复杂序列筛查模式未能降低卵巢癌的死亡率，同时筛 查策略本身的复杂给研究的顺应性造成困难，且大大提高了成本。 page 10 2011 Roche CA125和 TVU联合检测 国际上正在进行两项超大规模的卵巢癌筛查研究 美国进行的前列腺癌、肺癌、结肠癌和卵巢癌筛查研究（ PLCO） N=39,105例 对普通妇女进行 CA125和 TVU联合筛查 2009年： CA125的阳性预测值（ PPV）为 3.7%，经阴道超声（ TVU）的 PPV 为 1.4%，两者同时进行筛查的 PPV是 23.5%， 60%的卵巢癌漏诊 2011年：高达 23.5%的阳性预测者中 误诊率是 33.2% 2011年 6月（ JAMA）：对普通人群的 CA125联合 TVS的筛查对生存率影响的 最终结果。经过长达 6年的筛查试验以及 12年的随访， CA125联合 TVS对美 国普通妇女的卵巢癌筛查研究增加了不必要的手术，增加了经济成本，但 未能降低卵巢癌的死亡率 page 11 2011 Roche 内 容 卵巢癌背景介绍 HE4的临床意义解读 卵巢癌标志物临床应用（ ROMA） Roche Elecsys HE4 介绍 卵巢癌新型标志物 HE4生物学特点 乳清酸性蛋白家族 (WAP家族 ) 由 2个乳清酸性蛋白域（ WAP）和一个 4-二硫中心 (WFDC2)组成 乳清酸性蛋白基因编码的 13KDa的分泌性糖蛋白 N-端糖基化： 20 - 25 kDa （ CA 125分子量 200 kDa !) 蛋白酶抑制剂家族 相应的底物和 HE4的生物学功能未知 可能是抗菌、抗炎因子 1 Bouchard D et al. Lancet Oncol 2006; 7, 167 74. 2 Hellstrm I et al. Cancer Res. 2003, 63, 3695 3700. HE4 生物学特点 生理情况下，在以下组织表达 生殖系统 上呼吸系统 乳腺上皮 肾脏远曲小管 结肠粘膜 胰腺 恶性肿瘤，在卵巢癌、子宫内膜癌、肺癌（腺癌）和间皮瘤表达升高 肿瘤的早期和晚期阶段，表达均升高 1 Bouchard D et al. Lancet Oncol 2006; 7, 167 74. 2 Hellstrm I et al. Cancer Res. 2003, 63, 3695 3700. HE4的临床研究结果 在良性疾病的浓度水平 妊娠妇女 HE4 140 pmol/L HE4 的临床研究结果 HE4 水平与年龄相关 健康女性不同年龄的 HE4水平 0 20 40 60 80 100 120 7 0 A ge ( y e a r s ) H E 4 ( pm ol / L) 9 5 t h p e r c e n t i l e M e d i a n HE4的临床研究结果 健康女性 HE4 水平 140 pmol/L 超过 98% 表观健康女性 HE4的水平 1 5 0 0 . 0 H E4 r a n g e i n p m o l / L % P r e m e n o p a u s a l P o s t m e n o p a u s a l HE4的临床意义 改善盆腔肿块诊断的敏感性 来源于不同文献盆腔肿块良性 VS.卵巢癌 (所有分期 ) 的敏感性比较 特异性 = 95 % (绝经前和绝经后 ) 敏感性 % Huhtinen et al, 2008 1 Moore et al, 2008 2 1 Huhtinen, K. et al. J. Cancer, 2009, 100, 1315- 1319. 2 Moore, R.G. et al. Gynecologic Oncology, 2009, 112, 40-46. 敏感性 % HE4 HE4的临床意义 反映卵巢癌化疗的效果 HE4水平的变化与病程发展的关系 病情进展 (PD)、稳定 (SD)与缓解 (包括完全缓解和部分缓解， CR+PR）之间， HE4浓度变化率差别具有显著性 (chi square值为 26.6， P但 -31.25% 2 2 1 5 -31.25% 0 2 15 17 合计 8 4 16 28 HE4的临床意义 反映卵巢癌手术的效果 -120.00% -100.00% -80.00% -60.00% -40.00% -20.00% 0.00% 20.00% 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 EOC patients with sugerical therapy HE4 concentrate change rate 25例卵巢癌患者术后 HE4水平的变化 卢仁泉等 . 中国癌症杂志 2010年第 20卷第 9期 手术治疗的 25例 EOC,手术后病情基本缓解 血清的 HE4水平出现阴转： 21例，符合率为 84%(21/25)， HE4水平降低 -20%左右： 3例 * HE4呈现升高： 1例，随访中 HE4的临床意义 随访病例报告 绝经后卵巢癌患者 1例治疗后 HE4和 CA125水平的随访结果： 第 6个月 HE4开始升高， 112 pmol/L 第 8个月 HE4水平达 168.3 pmol/L， 第 8.5个月迅速升高至 993 pmol/L，临床症状明显恶化，进行联合化疗 第 10个月临床症状有所改善， HE4水平下降 CA125也呈相应变化，但变化幅度不及 HE4明显 卢仁泉等 . 中华检验杂志， 2009，第 32卷，第 12期 0 200 400 600 800 1000 1200 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 随访测定时间（月） HE4 CA125 内 容 卵巢癌背景介绍 HE4的临床意义解读 卵巢癌标志物临床应用（ ROMA） Roche Elecsys HE4 介绍 卵巢癌血清学标志物 HE4和 CA125相互补充 多数卵巢癌 HE4和 CA125水平同时升高 HE4和 CA 125来源于不同的组织 - 某些卵巢癌， CA125显著升高 - 某些卵巢癌， HE4显著升高 0 500 1000 1500 2000 2500 3000 3500 4000 4500 5000 5500 6000 6500 7000 7500 8000 8500 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 0 100 200 300 400 500 600 700 800 900 1000 1100 1200 1300 1400 1500 1600 1700 1800 1900 2000 2100 2200 2300 HE 4 E I A ( p M ) A r c h i t e c t CA 1 2 5 I I ( U/ m L ) PDS SR S PD M on th s from In i ti al Draw CA1 2 5 (U/ m L) H E4 (p M ) 0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 70 75 80 85 90 95 100 105 0 . 0 0 . 4 0 . 8 1 . 2 1 . 6 2 . 0 2 . 4 2 . 8 3 . 2 3 . 6 4 . 0 4 . 4 4 . 8 5 . 2 5 . 6 0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 70 75 80 85 90 95 100 105 H E 4 E I A ( p M ) A r c h i t e c t C A 1 2 5 I I ( U / m L ) PDSS M on th s from In i ti al Draw CA 1 2 5 (U/ m L) H E4 (p M ) 24 卵巢癌肿瘤标志物联合检测 HE4和 CA125的联合检测 (1) HE4 + CA 125联合应用可减少生物标志物阴性卵巢癌的漏诊 CA125联合 HE4可以减少 30-50%生物标志物阴性卵巢癌的漏诊 1 改善卵巢癌诊断和治疗监测的敏感性 2 1 Moore RG et al. Gynecologic Oncology 2008, 111, 402 408 2 Allard WJ et al. Clinical Laboratory International 2009, 3, 20-21 HE4和 CA125的联合检测 (2) 发现尚处于早期阶段的卵巢癌 HE4: 分期较早卵巢癌的早期诊断 CA125: 对晚期卵巢癌有较好的临床意义 HE4和 CA125的联合检测 (3) 更好的鉴别诊断子宫内膜异位症 Graph acc. Tab. 2 of Huhtinen et al.: Br. J Cancer, 2009, 100(8) HE4: 子 宫 内膜异位症几乎不升高 HE4: 卵巢癌 显 著升高 CA125: 子 宫 内膜异位症 轻 微升高 CA125: 卵巢癌 显 著升高 HE4和 CA125的联合检测 (4) 改善女性盆腔肿块卵巢癌的风险评估 ROMA Moore RG et al. Gynecologic Oncology 2008, 111, 402 408 通过 ROMA指数可将患者分成低风险和高风险人群 HE4和 CA125的联合应用可以判断绝经期前后女性盆腔肿块的良恶性程度 使用 ROMA指数可以更好地进行 风险分级 ROMA指数可以将 94%的上皮卵巢癌进行正确分类 卵巢癌风险评估 ROMA指数 ROMA计算公式 ROMA (恶性风险计算方法） 公式和得分 绝经 前 : PI = -12,0 + 2,38*LNHE4 +0,0626*LNCA125 绝经 后 : PI = -8,09 + 1,04*LNHE4 + 0,732*LNCA125 ROMA (%) = Exp(PI) x 100 1 + Exp(PI) 绝经前的公式， HE4权重更大 , CA125 在绝经前良性疾病升高更常见 ROMA 指数 罗氏的参考值 前瞻性研究，共入组 384例患者 通过 ROMA指数将人群分成低风险组和高风险组，从而预测卵巢癌的可能性 Elecsys HE4和 Elecsys CA 125 II联合应用的 cut-off值的特异性设置为 75% ： 绝经期前的女性 ROMA 指数 11.4% = 上皮性卵巢癌的高风险组 ROMA 指数 11.4% = 上皮性卵巢癌的低风险组 绝经期后的女性 ROMA 指数 29.9% =上皮性卵巢癌的高风险组 ROMA 指数 29.9% =上皮性卵巢癌的低风险组 HE457(11):1534-1544 page 32 2011 Roche 卵巢癌标志物临床应用小结 两个标志物联合应用拥有最佳的敏感性和特异性，减少生物 标志物阴性卵巢癌的漏诊 发现尚处于早期阶段的卵巢癌 更好的鉴别诊断子宫内膜异位症改善 ROMA指数 改善女性盆腔肿块卵巢癌的风险评估 监测治疗及判断是否复发转移预后评估 CA 125与 HE4联合应用可实现卵巢癌的早期诊断，改善患者预后 HE4联合 CA125 内 容 卵巢癌背景介绍 HE4的临床意义解读 卵巢癌标志物临床应用（ ROMA） Roche Elecsys HE4 介绍 page 34 2011 Roche Elecsys HE4 性能更优异 检测范围全程的准确性 所需样本量低 适用于血清和血浆样本 一管血可同时检测 HE4和 CA 125两个指标 用于卵巢癌的风险评估和监测，同样适用于某些良性疾病 卵巢癌肿瘤标志物 HE4和 CA125检测的厂家 HE4 CA 125 Roche (Elecsys, cobas e) Abbott (Architect) Beckman (Access) Siemens (Immulite, Centaur, Vista) Diasorin (Liaison) B.R.A.H.M.S (Kryptor) Becton Dickinson (TriPath) planned CanAg（ ELISA） 贝克曼和西门子均没有 HE4 罗氏所有免疫平台均可以同 时提供 CA125和 HE4的检测 不同试剂及厂家的参数比较 项目 Elecsys HE4 Roche ELISA HE4 CanAg Architect HE4 Abbott 检测方法 ECLIA EIA 2步法 CMIA 规格 100 test 96 test 100 test 溯源性 Fujirebio HE4 EIA Internal standard Fujirebio HE4 EIA 样本量 10 L 25 L 100 L 检测时间 18 min 3 h 29 min 定标 2点 6点 6点 检测范围 15-1500 pmol/L 15 - 900 pmol/L 20-1500 pmol/L Cut-off 值 140 pmol/L 150 pmol/L 绝经前 70 pmol/L 绝经后 140 pmol/L 检测下限 15 pmol/L 15 pmol/L 20 pmol/L 总 CV 5% 15% 10% Hook效应 40,000 pmol/L 300,000 pmol/L 94,000 pmol/L 上机稳定性 28d 28 d 30 d 罗氏 HE4 样本用量少，检测速度快，检测范围宽和精密度高 HE4方法学评估 Roche Elecsys vs. Fujirebio ELISA (参考方法 ) 两种方法有很好的相关性 P/B regression y = 1.018x + 5.523 r = 0.9783 = 0.8080 n = 1502 样本 Fujirebio HE4 ELISA 检测上限为 900 pmol/L Ro che El ecsys HE 4 p mol/L Fujirebio HE4 EIA pmol/L HE4方法学评估 Fujirebio EIA vs. Abbott Architect Ab bott Ar chitect p mol/L Fujirebio HE4 EIA pmol/L P/B regression y = 1.087x - 2.137 r = 0.9643 = 0.8030 n = 694 Abbott HE4与 Fujirebio的相关性 比罗氏差 尽管双方使用相同抗体， Abbott的 结果比 Fujirebio高 10% Fujirebio HE4 ELISA has 900 pmol/L as upper measuring range HE4联合 CA125改善卵巢癌的管理 卵巢癌 鉴别诊断 ROMA指数风险评估 卵巢癌的治疗监测 复发和转移 卵巢癌 预后评估 卵巢癌 早期诊断 提高标志物灵敏度 Thank you for your attention Roche Diagnostics Ltd. 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