染色体实验室质量控制

染色体实验室质量控制 一、室内质控：主要是培养基，常用试剂的 室内质控。 二、室间质控：定期与开展染色体检查的实 验室合作，对同一血液标本进行实验对比， 对 实验中的不足之处进行改进。 一、室内质控 1、外周血培养基质控程序 目的：新购买的培养基需要做预实验以检 测培养基的质量，避免因试剂的质量而影 响实验结果。 操作程序： 1）取新购买的培养基，接种新鲜的外周血标本， 每个标本接种两瓶培养基，每瓶培养基中接种 . .。 2）将接种好的培养基放入 ， 培养箱中，培养。 3）培养结束前小时，加秋水仙素处理。 4） 收获细胞。 5）将收获的细胞沉淀配成细胞悬液进行滴片， 滴好的片放入烘箱中， 烘烤。 6）胰酶消化，吉姆萨染色。 7）将玻片烘干后镜检观察。 注意事项： 接种过程中注意无菌操作，以免细菌污染 导致实验结果异常，影响对培养基质量的 判断。 2、秋水仙素质控程序 目的：新购买的秋水仙素需要做预实 验以检测秋水仙素的质量，避免因试 剂的质量而影响实验结果。 操作程序： 1）取培养基，接种新鲜的外周血标本， 每个标本接种两瓶培养基，每瓶培养基 中接种 . . 2）将接种好的培养基放入 ， 培养箱中，培养。 3）培养结束前小时，加新购买的秋水 仙素处理。 4）收获细胞。 5）将收获的细胞沉淀配成细胞悬液进行 滴片，滴好的片放入烘箱中， 烘 烤。 6）胰酶消化，吉姆萨染色。 7）将玻片烘干后镜检观察。 注意事项： 秋水仙素处理时要注意加入秋水仙素的 量和作用时间。 3、固定液质控程序 目的：新购买的甲醇和乙酸需要做预实验 以检测试剂的质量，避免因试剂的质量而 影响实验结果。 操作程序：在收获细胞的实验过程中使用 新的固定液，制片后分析固定液的效果。 1）按甲醇：乙酸 =3:1比例配置固定液。 2）预固定：加入 1.5ml固定液，固定 5min。 3）第一次固定：加入 8ml固定液，固定 30min。 4)第二次固定：加入 8ml固定液，固定 30min。 5)配置细胞悬液滴片， 80 烘烤 3h。 6)胰酶消化，吉姆萨染色。 7)将玻片烘干后镜检观察。 8)镜下观察细胞核型较多，染色体形态规则， 分布均匀，条带清晰，则固定液效果良好， 可以进行正常实验。 4、 胰酶质控程序 目的：新配置的胰酶需要做预实验以检测 胰酶的质量，避免因试剂的质量而影响实 验结果。 操作程序： 1）配置胰酶工作液（工作液浓度： 42ml生 理盐水 +8ml0.25%胰酶储存液） 2）配置吉姆萨染液（储存液用蒸馏水 1： 10稀释） 3）将烘烤好的玻片用胰酶消化，吉姆萨染 色。 4）将玻片烘干后镜下观察 5）镜下观察染色体形态规则，条带清晰， 则胰酶效果良好，可以进行正常实验。 吉姆萨染液质控程序 目的：新配置的吉姆萨染液需要做预实验 以检测吉姆萨染液的效果，避免因试剂的 质量而影响实验结果。 操作程序： 1）配置吉姆萨工作液 :将吉姆萨染液储存液 用蒸馏水 1： 10稀释。 2）将经胰酶消化的玻片放入染缸中染色， 一般染色 3-5分钟。 3）自来水冲洗干净后放入烤箱中烘干。 4）镜下观察：细胞着色均匀，染色体的条 带清晰，则染液的效果良好，可以进行正 常实验。 4、室内质控的失控处理 在试剂的质控中，若发现试剂的使用效果 不好，应重新配制，如果使用的是成品， 应立即联系厂家更换产品，严重的要考虑 更换厂家。 对每一批新到的、新配制的试剂，都必须 先做预实验，检测效果可以后才可以使用。 二、室间质控 为了检测本科室实验方法的准确性，可重 复性，实验室必须定期与其它实验室进行 室间质控。 操作程序： 1、随即选取本实验室的几份新鲜血液标本 送检其它实验室，进行细胞培养，制片， G 显带分析。 2、本实验室同样对这几份标本进行细胞培 养，制片， G显带分析。 3、对每一份标本分析两个实验室的结果， 从细胞的形态，染色体的形态，条带等各 方面进行分析。 4、通过室间质控定期检验本实验室的准确 性。 三、常见差错处理 1、染色体检测的血液标本，都需肝素钠抗 凝，如用其它抗凝剂抗凝，需通知相关人 员予以重新采集标本，并在 标本接收和 报告单发放记录本 及 不合格标本登记 本 上记录存档； 2、凡是待测定的血液标本有凝血的情况， 应通知相关人员予以重新采集标本，并在 标本接收和报告单发放记录本 及 不 合格标本登记本 上记录存档； 3、凡是待测定的血液标本有血渗出的情况， 应通知相关人员予以重新采集标本，并在 标本接收和报告单发放记录本 及 不 合格标本登记本 上记录存档； 4、染色体标本需严格无菌操作，采用经高 温高压消毒的容器盛装，如标本送检不规 范，应通知相关人予以重新采集标本，并 在 标本接收和报告单发放记录本 及 不合格标本登记本 上记录存档； 5、经查对标本的病人姓名、年龄、性别、 住院号、床号、及检验号等不相符者，应 通知相关人员予以重新采集标本，并在 标本接收和报告单发放记录本 及 不 合格标本登记本 上记录存档。 6、有的标本片，分裂相很多，但染色体 “瘦小”，是不是培养液营养不良引起？ 淋巴细胞一定要在良好的营养环境中才能 生长增殖，分裂相多，说明了淋巴细胞生 长旺盛，染色体“瘦小”，是因为在制片 过程中，染色体的蛋白结构发生异固缩造 成的，起因可考虑为以下几个原因： 秋水仙素浓度是否过高，或处理时间是 否过长？ 加固定液的速度不要过快，有时瞬间的 固定，会使蛋白结构产生固缩现象。 固定液中的甲醇、冰醋酸是否有质量上 的改变。 可以适当加大固定液中的冰醋酸的比例， 如甲醇 冰醋酸 =3 1.5 7、为什么外周血培养过程中有时会出现凝 血现象？ 在实验过程中下列原因可能会导致培养后 的血液出现凝血现象： 培养液中的 PHA含量过高。 培养液中的肝素使用量不足或效价下 降。 接种后，没有立即将外周血与培养液 充分摇匀。 8、为什么外周血培养有时会出现溶血情况？ 在实验过程中下列原因可能会导致培养后 的外周血溶血： 、细菌污染。 、 PHA和肝素过量。 、外周血样品不新鲜。 9、为什么有个别样品出现不明原因的无分 裂相的现象？ 由于有个别病人可能服用过抑制白细胞分 裂增殖的药品（如白血病病人），这类病 人的样品往往经培养后，白细胞仍受到药 物抑制而不进行分裂增殖，因此标本片很 难找到分裂相，建议停药一个月以上再作 染色体检查。