体外循环中康斯特保护液肺动脉灌注的肺保护作用

体外循环中康斯特保护液肺动脉灌注的肺保护作用 目的 采用体外循环下肺动脉灌注动物模型观察康斯特保护液（HTK液）对体外循环所致肺损伤的保护作用。方法 20只大耳白兔，体重2.53Kg，随机分为对照组（体外循环组）；实验组（体外循环HTK液肺动脉灌注组）。于麻醉后、复跳60min、90min时抽取血样检测髓过氧化物酶(MPO)、丙二醛(MDA)和细胞因子白介素6 (IL-6)、白介素8 (IL-8)浓度。实验结束后取肺组织作干湿比检测并作光镜和电镜检查。结果 实验组MPO、MDA和IL-6在复跳60min、90min时浓度均低于对照组，其中90min时差异显著（P体外循环 HTK液 肺动脉灌注Abstract: OBJECTIVETo observe the protective effect of HTK solution on lung injury after extracorporeal circulation (ECC).METHODS20 rabbits were randomly divided into two groups: control group (ECC group) and protective group (ECC+HTK group). Plasma myeloperoxidase (MPO), malondialdehyde (MDA) and cytokine of interleukin-6 (IL-6), interleukin-8 (IL-8) in left atrium blood were measured after anesthesia, 60 min and 90 min after aorta declamped. Lung biopsies were also performed after operation. Light microscope and transmission electron microscopy were used to cast lung injury of the two groups. RESULTSThe plasma levels of MPO and MDA in protective group was lower than that in control group at 60 min and 90 min after aorta declamped, and the difference was significant (P0.05). The lung wet-to-dry ratio of control group was higher than that of protective group and the ratios were significantly different between groups(PKey words：Extracorporeal circulation; HTK solution; Pulmonary artery perfusion体外循环(extracorporeal circulation，ECC)导致的肺损伤是心脏直视术后最常见的并发症。如何减少ECC 导致肺损伤仍是心脏外科亟待解决的问题。在术中经肺动脉灌注肺保护液被认为是较好的保护方法1-4。动物实验研究5-6均证实康斯特保护液（HTK）溶液能在缺血期间有效保护移植肺组织。 本实验通过建立动物模型并经肺动脉灌注HTK液的方法检验该方法的疗效。1材料与方法1.1实验材料20只大耳白兔，体重2.53.0 kg，完全随机双盲分为两组，每组10只。对照组常规建立ECC后阻断主动脉，心脏停跳，开放主动脉后心脏复跳；实验组ECC期间经肺动脉灌注HTK液(20 ml/kg)。1.2实验仪器Stocket D型体外循环机，PM-6000插件式多参数监护仪，江湾I型微型人工呼吸机，HX10555型恒温循环器，小动物膜肺Becton ，Dickinson静脉留置针， NOVA Stat Profice M血气分析仪。1.3实验方法实验兔经耳缘静脉推注苯巴比妥钠2025 mg/kg诱导麻醉后，固定于手术台上。气管切开后插管，人工呼吸机容量控制模式辅助呼吸，吸入氧浓度92，潮气量2225 ml/kg，呼吸频率40 次/min。监测股动脉压、心电图并建立静脉通路。胸骨正中开胸，剪开并悬吊心包，显露心脏。肝素700 mg/kg抗凝。经右侧颈动脉插入动脉插管，经右房插入静脉引流管，经左房插入左房引流管后，建立体外循环。阻断主动脉，经主动脉根部灌注冷停搏液，心脏停跳后，阻断肺动脉近端，经肺动脉灌注HTK液(20ml/kg)（德国科勒公司），灌注压25 cmH2O，灌注温度1523，灌注液经左房引流管吸走并弃之。主动脉阻断60 min后开放，心脏复跳并维持血液动力学稳定，90 min后撤除体外循环机并立即用高钾溶液处死实验兔。1.4检测指标1.4.1血浆白介素-6(IL-6)和白介素-8(IL-8)（放免试剂盒由解放军总医院生化实验中心提供）、 血浆丙二醛(MDA)、血浆髓过氧化物酶(MPO)（试剂盒由南京建成生物制品有限公司提供）。于ECC前、主动脉开放60 min和90 min分别从股动脉和左房抽取血样。1.4.2组织干湿比测定ECC结束后处死实验兔后取右下肺组织行干湿比测定。1.4.3光镜和电镜检查ECC结束后处死实验兔后取右下肺组织行HE染色和透视电镜检查。1.5统计方法应用SPSS 11.0统计软件对所得生化指标和细胞因子数据进行重复性方差分析，对干湿比数据应用独立t检验分析。结果用均数标准差(s)表示，P2结果2.1检测结果2.1.1IL-6和IL-8在ECC过程中不同时间点的变化主动脉开放60 min时，对照组IL-6和IL-8浓度高于实验组，但没有显著性差异(P0.05)；在主动脉开放90 min时，对照组IL-6浓度升高具有显著性意义(P2.1.2MPO在ECC过程中不同时间点的变化对照组MPO活性在主动脉开放60 min时虽高于实验组，但没有显著性差异(P0.05)； 在90 min时，具有显著性差异(P2.1.3MDA在ECC过程中不同时间点的变化主动脉开放60 min和90 min时，对照组MDA活性高于实验组，具有显著性差异(P2.2肺组织干湿比的比较实验组较对照组比较具有非常显著差异(P2.3肺组织光镜形态学比较可见对照组肺泡毛细血管充血、出血，肺泡及间质水肿，有中性粒细胞炎性细胞浸润。肺泡腔容积减小较为明显(图6)。实验组肺组织改变明显轻于对照组，肺组织渗出不明显，无明显肺泡水肿和中性粒细胞聚集(图7)。2.4肺组织电镜形态学比较对照组可见肺泡腔内出现红细胞、中性粒细胞等炎性细胞浸润，肺泡II型上皮细胞线粒体肿胀，空泡变性，气血屏障加宽(图8)。实验组肺泡II型上皮细胞结构完整，线粒体及板层小体结构正常(图9)。