鸡传染性法氏囊与大肠杆菌混合感染的诊治

吉 林 农 业 科 技 学 院学 士 学 位 论 文论 文 题 目：鸡传染性法氏囊与大肠杆菌混合感染的诊治年 级 专 业： 09动植物检疫 学 生 姓 名： 李忠玲 学 号： 0908611019 指 导 教 师： 薛会明 评 阅 教 师： 完 成 日 期： 2013年6月9日 吉林农业科技学院鸡传染性法氏囊与大肠杆菌混合感染的诊治鸡传染性法氏囊与大肠杆菌混合感染的诊治学 生: 李忠玲专 业: 动植物检疫指导教师: 薛会明摘 要吉林市周边一肉鸡养殖场饲养的28日龄肉鸡2000羽，突然发病，表现为高度虚弱、颤抖、水样腹泻，剖检可见法氏囊出现水肿，腺胃与肌胃交接处有出血带，肾脏肿大，有尿酸盐沉积。经过实验室诊断，采取琼脂扩散方法诊断为鸡传染性法氏囊病，同时进行细菌分离鉴定，分离到致病性大肠杆菌，最终确诊为鸡传染性法氏囊与大肠杆菌混合感染。经过高免卵黄抗体特异治疗，同时大肠杆菌药敏试验后采用高敏的丁胺卡那霉素配合氟苯尼考等综合治疗，最终控制疫情。关键词：法氏囊大肠杆菌混合感染；诊断；药敏试验 - I -鸡传染性法氏囊与大肠杆菌混合感染的诊治The diagnosis of chicken infentious bursal and escherichia coli mixed infectionName: Zhongling LiMajor: Animal and Plant QuarantineTutor: Huiming XueAbstract Tere is a a broiler farm 28 days old chicken 2000 feather,in jilin city , sudden onset,showed a high degree of weakness, tremor, watery diarrhea, necropsy the bursal edema, proventriculus and gizzard junctional bleeding, renal enlargement, uric acid salt deposition. After the laboratory diagnosis, take the agar diffusion method for the diagnosis of chicken infectious bursal disease, and isolation and identification of bacteria, isolation of pathogenic Escherichia coli, final diagnosis of chicken infectious bursal disease virus mixed infection with E. coli. After the yolk antibody therapy, while Escherichia coli after drug sensitivity tests using Gao Min amikacin with florfenicol integrated treatment programs, and ultimately control the epidemic.Key Words：Bursal and Escherichia coli mixed infection；Diagnosis；Drug sensitivity test目 录摘 要IAbstractII正 文1前 言11临床症状22病理变化23实验室诊断23.1病毒分离鉴定23.1.1病原体分离23.1.2琼扩试验33.1.3结果判定33.2 大肠杆菌的分离与鉴定33.3动物感染试验34治疗44.1特异治疗44.2对症治疗44.2.1抗病毒治疗44.2.2抗菌治疗44.2.3中药治疗45预防45.1法氏囊病的免疫程序55.2大肠杆菌的预防5参 考 文 献6致 谢7鸡传染性法氏囊与大肠杆菌混合感染的诊治正 文前 言鸡传染性法氏囊病是由法氏囊病毒引起的雏鸡的急性高度接触性传染病。 特征是法氏囊肾脏肿大苍白、有尿酸盐沉积、腿肌和胸肌出血、肌胃和腺胃交界处条状出血。导致鸡免疫力下降或免疫抑制，常继发其他疾病。大肠杆菌病是由大肠杆菌引起的一种非接触性疾病，常引起鸡气囊炎、关节滑膜炎、脐炎等不同病变。两者混合感染不仅影响鸡的生长发育，更导致鸡的发病率死亡率升高，给养殖业造成巨大的经济损失。传染性法氏囊病自然感染仅见于鸡，主要发生于2-15周龄的鸡，以3-6周龄最易感，本病发病突然，1-2 d传遍全群，5-7 d死亡达到高峰，以后开始下降。法氏囊病变明显，发病特点是发病突然，感染率高，尖峰死亡曲线，迅速恢复，死亡率差异大，3%-60%不等。部分病鸡的病程可拖延2-3周，但耐过鸡往往发育不良，生长缓慢1。暑期参加学校组织的顶岗实习，来到了九江朝鸡场，遇到了鸡传染性法氏囊与大肠杆菌混合感染的病例，其中一栋的2000只4周龄的雏鸡，突然发病，表现为高度虚弱、颤抖、水样腹泻，经过剖检及实验室诊断，确诊为传染性法氏囊与大肠杆菌混合感染。发病856只，经治疗死亡78只，治愈率为 91.8%，具体发病情况及诊断治疗如下：1临床症状据养殖场技术员介绍，发病鸡早期有自啄肛门现象，发病前饮水增加，很快排白色粘稠如蛋清稀便或水样下痢有的带石灰样的蛋清样物，腹泻物中常含有尿酸盐，之后饮水量急剧下降，病鸡表现为精神沉郁，饮食欲减退，逐渐消瘦，畏寒、颈部躯干震颤，扎堆，羽毛逆立无光泽，蓬松脱水，步态不稳，行走摇晃，肛门周围羽毛被稀粪玷污，个别眼睑封闭，外观肿大，关节肿大，关节中积黄色或灰白色粘液，滑膜肿大增厚，有的病鸡生前或死后见肛门周围有血样分泌物，病鸡脱水明显，常因极度衰竭而死亡2。2病理变化大部分鸡呈现严重脱水，共剖检15只病死鸡，剖检现腿部和胸部有点状出血11/15；心包积液，心包膜浑浊增厚，内有纤维素性渗出物与心肌相粘连；肝脏有不同程度肿大、出血、被纤维性薄膜所包裹8/15。腺胃与肌胃交界处有出血斑或条状出血带5/15；肠道内黏液增加，盲肠扁桃肿大出血；脾脏轻度肿大，表面有弥漫性灰白的小点坏死灶；肾脏肿大呈苍白色，有尿酸盐沉积或输尿管有多量尿酸盐，并出现花斑肾7/15；大部分病鸡法氏囊明显肿大出血，个别的比正常鸡的法氏囊肿大2倍以上，重者囊内有血块，整个法氏囊呈葡萄状7/15，病程较长的法氏萎缩，囊内有干酪样坏死物34/15。3实验室诊断3.1病毒分离鉴定3.1.1病原体分离取病鸡法氏囊或脾脏研磨，用生理盐水做5-10倍稀释，离心沉淀，取上清液加入适量双抗作用1- 2 h再用其上清液经绒尿膜接种10-12 d鸡胚。发现鸡胚在3-5 d死亡，胚胎水肿出血4，说明有病毒感染。采取鸡胚中病毒液用PBS104 倍稀释后以0.2 mL/胚接种于10日龄SPF鸡胚的绒毛尿囊膜中，然后置37 恒温箱中培养，弃去24 h内的死胚，其余的继续培养至120 h后转入4 冷冻过夜，次日收集绒毛尿囊膜并观察膜的病变情况，如此进行反复传代至第3代，收集绒毛尿囊膜毒液5。3.1.2琼扩试验将制备的两个琼脂平板分为A、B两组。在琼脂板上按7孔1组的梅花形打孔。中间1孔，周围6孔，孔径约3 mm，孔距2-5 mm。将两个平皿孔径中的琼脂用8号针头斜向上面从右侧边缘插入，轻轻向左侧方向将琼脂挑出。用酒精灯轻烤平皿底部，至琼脂刚刚要融化为止，封闭孔的底部，以防侧漏。用微量移液器或带有6-7号针头0.25 mL注射器吸取，将待测病毒液滴入A组中间孔，标准阳性血清分别加入外围的孔中，法氏囊病毒液滴入B组中间孔，标准阳性血清分别加入外围的孔中。每孔均以加满不溢出为度，每加1 个样品应更换1 个滴头。加样完毕后静止5-10 min，然后将A、B组平皿轻轻倒置放入湿盒内，37 温箱中作用。分别在24、48 和72 h观察并记录结果6。3.1.3结果判定将琼脂平板侧与强光下观察，B组法氏囊病毒与已知阳性血清形成一个清晰的白色沉淀圈，被检病毒与已知血清同样形成清晰致密的沉淀圈，且两圈孔径大小一致。3.2 大肠杆菌的分离与鉴定将病鸡肝脏病料接种于伊红美蓝琼脂、麦康凯琼脂和营养肉汤培养基上，经培养，在伊红美蓝琼脂上出现特征性黑色，并闪有金属光泽；在麦康凯琼脂培养基上出现亮色菌落，并向培养基内凹陷生长，在肉汤培养基上浑浊，染色镜检，可见革兰氏阴性杆菌，取肉汤培养物接种于细菌生化微量鉴定管中做生化实验。结果该菌能发酵葡萄糖、乳糖、甘露醇、麦芽糖，不发酵蔗糖、靛基质和甲基红实验阳性，V-P实验阴性，可判定为大肠杆菌病。3.3动物感染试验取病死鸡的法氏囊研磨，生理盐水稀释成悬液，经口服或滴鼻人工感染三周龄左右的易感鸡，2-3 d后出现症状，死后剖检法氏囊有特征性眼观病变7，可进一步证实取病料的鸡患IBD。4治疗4.1特异治疗全群注射卵黄抗体，注射剂量：高免卵黄液1.0 mL/只，治疗8-10 d后使用中等毒力的疫苗二倍量进行接种免疫。4.2对症治疗4.2.1抗病毒治疗在饮水中添加囊毒清8（清解和剂）0.5 mL/只饮用，1次/天，连用3-5 d。速效管囊散0.25g/kg体重，混于饲料或直接口服，连用3天。4.2.2抗菌治疗经药敏试验，选择敏感药物治疗大肠杆菌，按1L水中2ml丁胺卡那霉素和0.5g 20%水溶性氟苯尼考粉，同时配合多种维生素和电解质饮水4-5d9。4.2.3中药治疗金银花100 g，连翘、茵陈、党参各50 g地丁、黄柏、黄芪、甘草各30 g，艾草40 g，雄黄、黄连、黄药子、白药子、茯苓各20 g，共为细末，混匀，按6 %-8 %拌入鸡饲料中，任其自由采食，少数病重不能采食者，可水煎取汁灌服，5-10 ml /次；2次/天，连用3-5 d。5预防隔离和淘汰病鸡，加强饲养管理，搞好环境卫生，严格定期消毒，保持合适的温度，湿度通风。并在饮水中添加电解多维，VC和肾脏解读液，减轻肾脏负担，增强机体抵抗力。提供货源优质全价料，并长期添加黄芪多糖，提高法氏囊的免疫能力。5.1法氏囊病的免疫程序14日龄，法氏囊病中等毒力疫苗1羽份/只饮水首免；28日龄，鸡法氏囊病中等毒力疫苗2羽份/只饮水二免。5.2大肠杆菌的预防雏鸡在1-5日龄，饮用多维、5%葡萄糖及庆大霉素或恩诺沙星的凉开水。种鸡场搞好种蛋、孵化器及孵化全过程的清洁卫生及消毒工作。雏鸡舍保持适宜的温度、湿度，保持空气流畅，控制鸡群的饲养密度，定期消毒。参 考 文 献1李琼,李军. 鸡传染性法氏囊的的诊断与治疗J.兽医临床,2012,1：32.2米建华,牛术华.鸡传染性法氏囊与大肠杆菌混合感染的治疗J.畜牧兽医科技信息,2010,9：84.3汤仁山.鸡传染性法氏囊炎的诊治J.农技服务,2008,25(7):92,144.4胡小苗等.鸡传染性法氏囊病病毒的分离与鉴定J.安徽农业科学,2006,34(23):6 205-6206.5陆贵平，周建强，贺生中，周广生.传染性法氏囊病毒的分离与鉴定J,畜牧兽医,2003，2(22):7.6霍焱,曲恒益.鸡传染性法氏囊病的血清学诊断方法J.养殖技术顾问,2011.5：192.7蒋桂林.鸡传染性法氏囊病的防治综述J.陕西农业科学，2011,3：165-166,182.8王三立.肉杂鸡高发传染性法氏囊病的原因分析及防治对策J.养禽与禽病防治对策，2008，(7):21-22.9于信臣,张瑛.蛋雏鸡传染性法氏囊与大肠杆菌混合感染的诊治J.禽业导航,2011,11:50.致 谢时光如梭，四年的大学生活即将结束，依稀还记得刚来到大学时的兴奋，充满着激情，转眼就要离开这所教会我知识，教会我如何做人，让我成长，让我骄傲的母校，心怀留恋。回首这四年，我收获了同学之谊、师生之情，也有知识，经验的积累，以及人生观价值观的塑造。这些都离不开一直陪在我身边的我的优秀的老师以及同学们，在此，向关心过我，帮助过我，指导过我的老师及同学们致以最真挚的谢意。首先要感谢我的指导老师薛会明教授，他敏捷的思维，开阔的视野，广博的知识，以及深厚的专业造诣，谨慎细致的做事风格，幽默豁达的人生态度，这一切都令我折服，薛老师是我工作学习的好榜样。衷心感谢王海洋老师呢，尹柏双老师，吕舟老师，苗丽娟老师，在学习中对我的帮助，王海洋老师在工作上的踏实稳重，冷静谦和，让我佩服，尹柏双对待教学，科学的认真谨慎的态度令我折服。谢谢他们对我的指导及关怀。感谢我的同学们及室友们对我生活及学习上的关心照顾，在我情绪低落，生活盲目的时候热心的开导帮助。与她们交往的点滴瞬间我都将铭记在心。感谢我的家人，他们的支持和督促是我不断向前的动力。感谢我的所有朋友们，愿我的老师事业生活顺心，家人身体健康，同学们都能实现各自的愿望。7