体外受精和早期胚胎培养教案

3.2 体外受精和早期胚胎培养教案一、教学目标1.简述哺乳动物体外受精技术的主要操作步骤。2.简述哺乳动物胚胎的早期培养方法。3.认同体外受精在家畜快速繁殖中的重要意义。二、教学难点与重点1.教学重点（1）体外受精在家畜快速繁殖中的重要意义。（2）哺乳动物体外受精技术的主要操作步骤。2.教学难点（1）卵母细胞的采集和培养。（2）精子的采集和获能。三、教学过程在课堂活动中，首先提出问题：“你听说过试管牛、试管羊吗？你知道什么是试管动物技术吗？”从而引出试管动物技术的概念及体外受精在家畜快速繁殖中的重要意义，提出本节主题。接着，请学生回忆第一节课的内容，并思考讨论以下各题：（1）哺乳动物体内胚胎的形成需要经过哪些过程？（精子和卵子的发生受精胚胎的发育）（2）哺乳动物体外胚胎的发育需要完成哪些环节？（获得精子和卵子体外受精体外胚胎培养）。在学生讨论出结果的基础上，告诉学生，胚胎工程专家就是根据这几个环节来研究哺乳动物体外受精和胚胎早期培养方法的。今天请大家来扮演胚胎工程专家，共同模拟研究“试管牛”工厂化生产的技术流程。首先，请学生阅读教材；然后与学生一起制定研究“试管牛”工厂化生产的技术流程，并拟出以下关于技术流程的研究题目：(1)卵母细胞的采集和培养；(2)精子的米集和获能；(3)受精；(4)胚胎的早期培养；(5)画出“试管牛”工厂化生产的技术流程图解让学生自由组合成小组，选定研究题目，查阅有关资料(可根据教材或利用自己搜集的有关“试管牛”的资料)并结合导学案进行小组讨论，讨论10分钟,然后各小组的代表上台小组讲解各研究题目，并回答同学们的疑问。最后老师总结，完成知识网络构建。网络构建试管动物技术：通过人工操作使卵子和精子在条件下成熟和,并通过培养发育为早期胚胎后，再经移植产生后代的技术。方法一：用处理，使其超数排卵，从中Y 冲取精子（针对实验动物，家畜猪、羊等）卵母细胞的方法二：从屠宰母畜卵巢中采集方法三：借助内窥镜、等工具直接从母畜中吸取（针对大家畜或大型动物，如牛）体外受精卵母细胞的培养：在体外人工培养成熟精子的采集：方法有手握法和电刺激法等精子的：方法有培养法（通过获能培养液）、法（通过肝素或钙离子载体 A23187）获能溶液或专用的受精溶液受精：获能的精子培养成熟的卵子完成受精胚胎早期培养条件：受精卵在发育培养液中培养培养液成分：无机盐、有机盐、维生素、激素、氨基酸、核苷酸等答案：体外受精采集促性腺激素输卵管超声波探测仪腹腔镜活体卵巢假阴道法获能化学诱导血清重难点归纳一、卵母细胞采集的方法和操作的要领是什么？方法一：对实验动物小鼠、兔和小家畜猪、羊等卵母细胞采集时，可先用促性腺激素处理，使其排出更多的卵子，然后在适当的时间从输卵管冲取卵子，并使其直接与获能的精子在体外受精。方法二：从刚屠宰的雌性动物体内摘取卵巢，再从卵巢中采集卵母细胞。方法三：直接从活体动物的卵巢中采集卵母细胞，叫活体采卵。需借助超声波探测仪、内窥镜或腹腔镜，直接从活的动物卵巢中吸取卵母细胞。后两种方法适用于大家畜和大动物。注意：采集的卵母细胞需在体外培养成熟后才能与获能的精子受精。二、如何选择用于体外培养的卵母细胞？在选择卵母细胞时，无论用哪种方法采集到的卵母细胞，外围一般都应该有数层卵丘细胞所包围，形成一个叫卵丘复合体的结构（COC）。这种结构对于卵母细胞在体外条件下的成熟是十分重要的。在对家畜体外受精的操作中，一般把未成熟的卵母细胞分成 A、B、C、D 四级。对 A 级卵母细胞要求是有 3层以上的卵丘细胞包围，卵母细胞的细胞质均匀；B 级是少于 3 层卵丘细胞，但卵母细胞质要均匀；C 级为没有卵丘细胞包围的卵母细胞，又称裸卵，培养效果很差；D 级是退化或死亡的卵母细胞，应淘汰。A、B 两类卵母细胞培养效果较好。三、采集精子的方法有几种？各有什么具体要求？主要分为假阴道法、手握法和电刺激法。假阴道法是用特制的假阴道，满足雄性动物交配时对压力、温度和润滑度的要求。同时要配备有与供精动物相适应的台畜，训练动物爬跨台畜，借假阴道收集精液。手握法是通过徒手或戴乳胶手套的手，直接把握雄性动物阴茎，施以适当压力和刺激即可引起射精，并可收集富含精子部分的精液。电刺激法是采用特制的电极伸入动物的直肠直接刺激位于腰荐部的射精中枢引起射精，此方法只适用于野生或某些经济动物。此外，对于啮齿类的实验动物可在处死后从附睾尾收集精液。四、以牛为例，从屠宰场收集卵巢中的卵母细胞进行体外受精的应用效果如何？目前，从屠宰场废弃的卵巢中，每个卵巢平均可采集 10 枚左右可用卵母细胞，经体外培养成熟和受精后约可获 4 枚可用的胚胎，经过移植给受体母牛，最终可得到 12 头犊牛。牛的体外受精胚胎的工厂化生产已在一些发达国家开展。课后检测1下列关于促进雌性动物大量排卵的叙述中，正确的是（）A.给未成年的雌性动物注射大量的相关激素，使其排卵B.给性成熟的雌性动物注射大量的相关激素，使其超数排卵C.给未成年的雌性动物注射一定的相关激素，使其排卵D.给性成熟的雌性动物注射一定的相关激素，使其超数排卵2采集的卵母细胞，都要在体外经人工培养成熟后，才能与获能的精子受精，以下原因不正确的是（）A.卵子从输卵管中冲出也要经历类似精子获能的过程B.动物排出的卵子成熟程度不同C.体外人工培养至减数第二次分裂中期时，才算成熟D.冲出的卵子还需要培养一段时间由小变大3.下列各组物质组成不.全部属于哺乳动物胚胎的培养液成分的是（）A.氨基酸、核苷酸、无机盐、激素 B.有机盐、维生素、氨基酸、生长素C.核苷酸、维生素、血清、无机盐 D.血清、激素、维生素、有机盐4.卵母细胞培养到下列哪个时期时，就可以与获能精子进行体外受精了()D.囊胚期A.MIB.MilC.5.在体外受精前，要对精子进行A.纯化处理 B.获能处理6.体外受精的场所是A.在水溶液中C.在获能溶液或专用的受精溶液中7.下列有关受精作用的叙述错.误.的一项是A.桑椹期C.电刺激B.在盐溶液中D.在酒精溶液中D.()超声波处理(BC受精卵中全部遗传物质来自父母双方的各占一半受精时，精子和卵细胞双方的细胞核相互融合受精卵中染色体数与本物种体细胞染色体数相同受精卵中染色体来自父母双方的各占一半D8发展试管动物技术具有重要意义，下列关于这方面叙述错误的 ABC试管动物技术可解决动物生育率低的问题试管动物技术可以更多、更有效地利用动物卵细胞试管动物技术可以通过普通家畜繁育良种家畜试管动物技术不能实现家畜的快速繁殖D9(多选)精子体外获能的方法有A.法10化学法B.电刺激法C.培养法(D.)冷藏A.多选)用化学诱导法使精子获能，采用化学药物是一定浓度的(氯化钠溶液 B.肝素 C.钙离子溶液 D.钙离子载体